全 文 ：砒石对哮喘小鼠血浆 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 的影响
黎东明 3 o谢佳星 o梁 标
k广东医学院 呼吸疾病研究所 o广东 湛江 xuwsstl
≈摘要  目的 }通过建立小鼠哮喘模型 o给予 w种剂量砒石治疗 o检测血浆 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 水平变化 o探讨砒石对
哮喘小鼠的治疗作用 ∀方法 }选用 wu只昆明种雄性小鼠 o随机分为正常对照组和实验组 o实验组建立哮喘模型 o予
地塞米松 !砒石治疗 o检测肺功能 !血浆 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 水平及 …„ƒ 中 • …≤ 计数 ∀结果 }砒石治疗组小鼠 τ呼rτ总 和
Π°¤¬降低k Π s1sxl o哮喘组 …„ƒ中白细胞总数较正常对照组显著升高k Π s1sstl ~经地塞米松和不同剂量砒石治
疗后白细胞总数显著下降k Π s1sstl ~哮喘组血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 较正常对照组显著升高k Π s1sstl o经地塞米松
和不同剂量砒石治疗后均显著下降 ~{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 下降与白细胞计数呈正相关性 ∀结论 }哮喘小鼠机体存在氧化应
激状态 o砒石能够减轻其气道阻塞 o降低气道高反应性 o纠正氧化r抗氧化失衡 ∀
≈关键词  支气管哮喘 ~氧化应激 ~砒石 ~{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxluu2tzx{2sv
≈收稿日期  ussx2sv2st
≈通讯作者  3 黎东明 oר¯ }kszx|luv{zwtv okszx|luu{s{zz o∞2
°¤¬¯ }¯¬½¨ º ¬¨ƒ ª§°¦1 §¨∏1¦±
砒石≈t k又名信石 !信砒 !砒霜 !人言l是一种主
要含三氧化二砷k„¶u’vl的矿物药 o在祖国传统医学
中用于治疗哮喘已有悠久的历史 o积累了丰富的经
验 o证实其疗效卓著 ∀近年来南京医科大学及广东
医学院呼吸疾病研究所从多个方面进行实验研究 o
证实了砷治疗哮喘的疗效 ∀本实验首次检测了哮喘
模型小鼠给予砒石治疗后血浆 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 的变化 ∀
1 材料与方法
111 材料 wu只清洁级昆明种小鼠 o体重kus ? vl
ªo全部为雄性 o购自广东医学院实验动物中心 ∀
∞÷ p {ss酶标仪k美国 …¬²2× ®¨公司l ~≥≤ p „多功
能超声雾化器k辽宁省鞍山市电子医疗仪器厂l ~新
航 ≠°uss型压力换能器k北京市新航机电设备厂l ~
 §¨¯¤¥生物信号采集系统软件k南京美易科技有限
公司l ~卵白蛋白kŠµ¤§¨ µlk美国 ≥¬ª°¤公司l o卵磷
脂k美国 ≥¬ª°¤公司l o{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ∞Œ„ Ž¬·k美国 ≤¤¼2
°¤±公司l ∀
112 方法
11211 分组 小鼠随机分为正常对照组ky只l和
实验组kvy只l ∀实验组小鼠建立哮喘模型 o随机分
为 }哮喘模型对照组ky只l o地塞米松对照组ky只l o
砒石 w种剂量治疗组k每剂量组 y只l ∀
11212 哮喘模型的建立方法 腹腔注射鸡卵白蛋
白抗原液 s1x °k含氢氧化铝凝胶 u °ª和卵白蛋白
tx Λªl致敏 o第 z otw天时各重复 t次 o第 ut天始以
t h卵蛋白雾化吸入来诱发小鼠哮喘发作 o每天 u
次 o连续 v §o正常对照组给予生理盐水腹腔注射和
雾化 ∀
砒石用量参考文献中人 !家兔的用药剂量 o依据
体重折算系数k小鼠和人之间为 s1tt o家兔和小鼠
之间为 s1vzl及体表面积折算系数k小鼠和家兔为
uz1{ o小鼠和人之间为 v{z1|l≈u  o并参照文献中剂量
进行换算≈v  ∀每次雾化前分别通过灌胃给予砒石 ow
种剂量分别为 }砒石 s1xzx o t1tx o u1v o w1y °ª#
®ªpt ∀
最后 t次引喘后 ts «测定呼吸功能 }用戊巴比
妥钠 zs °ª#®ªpt腹腔注射麻醉后 o用 z1x号钝针头
行气管插管 o后接直径 s1u ¦°的塑料管 o塑料管的
另一端接三通管 o三通管另外两端其中一端与外界
相通以保证通气 o另一端接新航 ≠°uss型压力换能
器 o换能器接计算机 ∀经  §¨¯¤¥生物信号采集系统
软件处理 o可得出每次呼吸总时间kτ总l !呼气相时
间kτ呼l !呼气最大压力k Π°¤¬l o进而求出呼气相时间
与呼吸总时间比值kτ呼rτ总l ∀
最后 t次引喘 tu ∗ t{ «后 o清醒动物眼动脉放
血 o杀死小鼠 o全血以 ∞⁄ׄ2‘¤抗凝 ov xss µ#°¬±pt
低温离心 ts °¬±o取上清置于液氮中备做 {2Œ¶²2
³µ²¶·¤±¨ 测定 ∀{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 的检测 }采用酶免疫分析
#{xzt#
第 vs卷第 uu期
ussx年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ uu
‘²√¨ °¥¨µoussx
法 ∀
支气管肺泡灌洗 }放血毕 o行支气管肺泡灌洗 x
次 o每次 s1y °o合并 x次肺泡灌洗液k…„ƒl ot xss
µ#°¬±pt低温离心 ts °¬±o取上清测定白细胞k • …≤l
数 ∀
113 统计学处理 各指标k计量资料l用 cξ ? σ表
示 o≥°≥≥tt1s统计软件行方差分析 o两两比较采用
≥‘Žkθl检验 ∀
2 结果
211 砒石对过敏性哮喘小鼠肺功能的影响 结果
显示 o哮喘组与正常对照组比较 oΠ°¤¬和 τ呼rτ总 显
著增高k Π  s1stl ∀砒石可以改善哮喘小鼠肺功
能 o砒石 s1xzx ot1tx ou1v ow1y °ª#®ªpt治疗组小鼠
Π°¤¬和 τ呼rτ总 降低 o与哮喘组比较 o差异有显著性
kΠ s1sx ∗ Π s1stl ~砒石各治疗组 Π°¤¬和 τ呼rτ总
相互比较 o差异无显著性k Ё s1sxl ~砒石各治疗组
Π°¤¬和 τ呼rτ总 与地塞米松组比较 o差异无显著性
k Ё s1sx o表 tl ∀
212 各组 …„ƒ 中白细胞总数及血浆中 {2Œ¶²2
³µ²¶·¤±¨ 活性的变化 哮喘组 …„ƒ中白细胞总数较
正常对照组显著升高k Π s1sstl ~经地塞米松和不
同剂量砒石治疗后白细胞总数显著下降 k Π 
s1sst) ,砒石大剂量组显著优于小剂量组 ( Π 
s1sst o表 tl ∀
表 t 砒石对过敏性哮喘小鼠肺功能的影响kcξ ? σ, ν € yl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
Π°¤¬r®°¤ τ呼rτ总r¶
正常对照组 s quzu ? s qswy s s qyyw ? s qsvu x
哮喘模型组 s qvzt ? s qsvt ztl s qz|| ? s qsxu yul
地塞米松组 s qu|| ? s qsvz yvl s qzsy ? s qsxt |wl
砒石 s qxzx s qu|{ ? s qswu |vl s qztv ? s qsus ywl
t qtx s quy| ? s qsw{ swl s qzt{ ? s qsxy xwl
u quv s qvsx ? s qsvvvl s qzt| ? s qsvu wwl
w qy s qvtw ? s qsvy {vl s qy|v ? s qswy vwl
注 }与正常对照组比较tl Π s qst oul Π s qsst ~与哮喘模型组比
较vl Π s qsx owl Π s qst
哮喘组血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 较正常对照组显著
升高k Π s1sstl o经地塞米松和不同剂量砒石治疗
后均显著下降k Π s1sst o表 ul ∀
对砒石治疗各剂量组 …„ƒ中白细胞总数与其
血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 活性进行的相关性分析 o相关系
数为 s1zsw o显示随着砒石治疗剂量的增加 o血浆中
{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 活性下降 o…„ƒ 中白细胞总数随之相
应下降 ∀
表 u 各组小鼠 …„ƒ中白细胞总数及血浆中
{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 水平kcξ ? σ, ν € yl
组别
剂量
r°ª#®ªpt
{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 活性
r³ª#°pt
…„ƒ中 • …≤计数
正常对照组 us q{ ? y qvu t q|u ? s1xx
哮喘模型组 yz qw ? tt qytl vs qu ? u1vutl
地塞米松组 v| qx ? tu qtul | qyy ? t1y|ul
砒石 s qxzx xu qw ? x qxsul tz1u ? u1txu ovl
t qtx wx qt ? tt q|ul tw qt ? u1xuu ovl
u quv wx qz ? | qutul tx qy| ? u1ytu ovl
w qy wv qv ? | quuul w quu ? s1{{ul
注 }与正常对照组比较tl Π  s qsst ~与哮喘模型组比较ul Π 
s qsst ~与砒石 w1y °ª#®ªpt组比较vl Π s qsst
3 讨论
Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶在机体多个系统产生重要的生物活
性 o其中在呼吸系统最为重要 o对呼吸系统的血管平
滑肌 !内皮细胞 !上皮细胞 !神经末梢都产生重要的
生物学作用 oŽ¤º¬®²√¤等≈w 深入研究了 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨
对气道的作用 o发现其能收缩人和豚鼠气道 o气管内
滴入 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 引起气道阻塞 o¤±¶¶¨±≈x 通过对
Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶在人和犬气道平滑肌的研究表明 oŒ¶²2
³µ²¶·¤±¨ ¶对人的大小气道均有强大的收缩作用 o其
中 {2¬¶²2°Š∞u oƒtΑoƒuΑ效应最强 ~Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶能加强
气道的非特异性高反应性 o实验证明阈下浓度的
Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶能放大去甲肾上腺素 o„×2ŒŒo血栓烷 „u
类似物k˜wyyt|l引起的气道反应≈y  ∀
²±·∏¶¦«¬等≈z 测量了 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 在健康者 !轻度
哮喘者 !中度哮喘者 !重度哮喘者呼出气体冷凝物中的
水平分别为ktx1{ ? t1yl okvv1z ? u1{lokv{1v ? v1zl o
kw{1| ? x1sl ³ª#°pt o证实哮喘患者氧化应激增强 o而
且 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶升高与哮喘的严重程度相关 ∀
近年来 o国外研究证实 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶能作为机
体氧化r抗氧化状态灵敏 !可靠及准确的指标 o其优
点有 }目前已建立精确测定 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 的方法≈{  ~
{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 在体内生成且结构稳定≈|  ~最为重要的
是 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 水平随着氧化应激的实验或临床状
态的改变而改变 o其水平与疾病严重程度相关≈ts  ∀
本实验中 o用小鼠成功复制了卵蛋白过敏性哮
喘模型 o检测哮喘模型小鼠及给予不同剂量砒石治
疗后小鼠肺功能 !血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 水平及 …„ƒ
中 • …≤计数 ∀结果显示砒石治疗组小鼠 τ呼rτ总 !
Π°¤¬与哮喘组比较降低k Π s1sxl o提示砒石对卵蛋
白致敏小鼠有平喘作用 o可以改善哮喘小鼠肺功能 ~
哮喘组 …„ƒ中白细胞总数较正常对照组显著升高
#|xzt#
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ussx年 tt月
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ uu
‘²√¨ °¥¨µoussx
( Π s1sstl o表明哮喘模型小鼠气道存在炎症反
应 o经糖皮质激素 !砒石治疗后白细胞总数显著下降
k Π s1sstl o且随着砒石剂量的增大 • …≤总数逐渐
降低 o差异有显著性k Π s1sx o s1sstl ~高剂量砒
石组kw1y °ª#®ªptl与正常对照组无显著性差异 ~表
明砒石能够抑制哮喘模型小鼠的气道炎症反应 o抑
制作用与地塞米松相仿 ∀诱喘小鼠血浆中 {2Œ¶²2
³µ²¶·¤±¨ 水平较正常对照组显著上升 o表明哮喘小鼠
体内存在氧化应激 o给予地塞米松及砒石治疗 o血浆
中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 水平显著下降 o显示地塞米松和砒石
能够减轻哮喘时的气道阻塞 o降低气道反应性 o对哮
喘有治疗作用 ∀
炎症在支气管哮喘的发生和发展中起关键作
用 o嗜酸粒细胞 !中性粒细胞等炎症细胞在支气管黏
膜上皮聚集 o释放多种细胞因子 o同时反应性氧化产
物k• ’≥l增多 ~由补体 !白三烯 !内毒素 !免疫复合物
等因子激活白细胞膜上 ‘„°⁄‹氧化酶 o启动呼吸爆
发 o可产生多种氧自由基导致氧化r抗氧化失衡 o氧
化应激反应对哮喘的发生 !发展起了重要作用≈tt  ∀
本实验中 o哮喘对照组小鼠血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 活性
升高 o表明其机体存在氧化应激反应 ∀予不同剂量
的砒石治疗后 o血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 活性下降 o大剂
量组下降明显 o表明砒石能够纠正哮喘小鼠机体的
氧化r抗氧化失衡 ∀而且血浆中 {2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ 活性随
…„ƒ中白细胞总数下降而相应下降 o也显示哮喘时
白细胞在机体氧化r抗氧化失衡的关键作用 ∀
如能对哮喘小鼠肺匀浆或者 …„ƒ 中的 {2Œ¶²2
³µ²¶·¤±¨ 水平进行检测 o将进一步深入了解砒石对哮
喘小鼠肺组织局部氧化r抗氧化状态的影响 o并探讨
砒石的治疗作用 ∀
≈参考文献 
≈t  江苏新医学院 q中药大辞典 q上海 }上海人民出版社 ot|zzqvvx|q
≈u  苗明三 q实验动物和动物实验技术 q北京 }中国中医药出版
社 ot||z qtwu q
≈v  纪晶云 q实用毒理学手册 q北京 }中国环境科学出版社 o
t||y1wv| q
≈w  Ž¤º¬®²√¤oŒ ° …¤µ±¨ ¶o× ×¤®¤¶¤®¬o ετ αλ. {2 ³¨¬°Šƒu¤o¤ ±²√¨ ¯
±²±¦¼¦¯²²¬¼ª¨ ±¤¶¨§2 µ¨¬√ §¨³µ²¶·¤ª¯¤±§¬±o¦²±¶·µ¬¦·¶¤¬µº¤¼¶ ιν ϖιτρο .
Αµ ϑ Ρεσπιρ Χριτ Χαρε Μεδ , t||y otxv }x|s q
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Πηαρµαχολ Εξπ Τηερousss ou|xkul }xsy q
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µ q Ευρϑ Πηαρµαχολ, t||| ovz{ }wz q
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≈|  •²¥¨µ·¶o ²µµ²º ⁄q  ¤¨¶∏µ¨°¨ ±·²©ƒu2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶¤¶¤±¬±2
§¨¬²©²¬¬§¤·¬√¨ ¶·µ¨¶¶ιν ϖιϖο . Φρεε Ραδιχ Βιολ Μεδ , usss ou{ }xsx q
≈ts  ‹¨¯° µ¨¶¶²± o…¤¶∏≥ qƒu2¬¶²³µ²¶·¤±¨ ¬¨¦µ¨·¬²±µ¤·¨¤±§§¬∏µ±¤¯ √¤µ¬2
¤·¬²± ¬± «∏°¤± ∏µ¬±¨ q Προσταγλανδινσ Λευκοτ Εσσεντ Φαττψ Αχιδσo
t||| oyt kvl }usv q
≈tt  ⁄º²µ¶®¬• o ∏µµ¤¼o•²¥¨µ·¶o ετ αλ. „¯ ¯¨ µª¨ ±2¬±§∏¦¨§¶¼±·«¨ 2
¶¬¶²© ƒkul2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ¶¬± ¤·²³¬¦¤¶·«°¤·¬¦¶q ∞√¬§¨±¦¨ ©²µ²¬¬§¤±·
¶·µ¨¶¶q Αµ ϑ Ρεσπιρ Χριτ Χαρε Μεδ ot||| otyskyl }t|wz q
Ρολε οφ αρσενολιτε ον {2ισοπροστανε οφ αστηµατιχ µιχε πλασµ
Œ ⁄²±ª2°¬±ªo ÷Œ∞ ¬¤2¬¬±ªoŒ„‘Š ¥¬¤²
( ∆επαρτµεντ οφ Ρεσπιρατορψ ∆ισεασε , Γυανγδονγ Μεδιχαλ Χολλεγε , Ζηανϕιανγ xuwsst , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ׫µ²∏ª«·«¨ ¶¨·¤¥¯¬¶«° ±¨·²© °²∏¶¨ . ²√¤¯¥∏°¬±2 ¶¨±¶¬·¬½¨ §¤¶·«°¤·¬¦°²§¨¯ ¤±§·«¨ ²¥¶¨µ√¤·¬²± ²©·«¨ {2Œ¶²2
³µ²¶·¤±¨ ²©³¯¤¶° o·² √¨¤¯∏¤·¨·«¨ ·«¨µ¤³¨ ∏·¬¦ ©¨©¨¦·¶²©¤µ¶¨±²¯¬·¨ ²± ¤¶·«°¤·¬¦°¬¦¨ q Μετηοδ : ƒ²µ·¼2·º² «¨ ¤¯·«¼ Ž∏±°¬±ª°¤¯¨°¬¦¨ º µ¨¨ µ¤±2
§²°¯ ¼ §¬√¬§¨§¬±·²¦²±·µ²¯ ªµ²∏³¤±§ ¬¨³¨µ¬¨±¦¨ ªµ²∏³¶o·«¨ ¤¯·¨µº µ¨¨ ·µ¨¤·¨§º¬·«§¨¬¤° ·¨«¤¶²±¨ o¤µ¶¨±²¯¬·¨ q∏±ª©∏±¦·¬²± º µ¨¨ ·¨¶·¨§o{2
¬¶²³µ²¶·¤±¨ ²©³¯¤¶° ¤±§ • …≤ ²© …„ƒ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§q Ρεσυλτ : ∏±ª©∏±¦·¬²±¬°³µ²√ §¨¤©·¨µ·µ¨¤·¬±ªº¬·«§¨¬¤° ·¨«¤¶²±¨ ²µ¤µ¶¨±²¯¬·¨ q׫¨
• …≤ ²©¤¶·«°¤·¬¦°¬¦¨ º µ¨¨ ¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ «¬ª«¨µ·«¤±·«²¶¨ ¬± ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³o¤±§§¨¦µ¨¤¶¨§¤©·¨µ·µ¨¤·¬±ªº¬·«§¨¬¤° ·¨«¤¶²±¨ ²µ¤µ¶¨±²¯¬·¨ ~{2
Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ²©³¯¤¶°¬± ¤¶·«°¤·¬¦°¬¦¨ º¤¶«¬ª«¨µ·«¤±·«¤·²©¦²±·µ²¯ ªµ²∏³o¤±§§¨¦µ¨¤¶¨§¤©·¨µ·µ¨¤·¬±ª º¬·« §¨¬¤° ·¨«¤¶²±¨ ²µ¤µ¶¨±²¯¬·¨ q
Χονχλυσιον : ׫¨ µ¨ ¬¶²¬¬§¤±·¶·µ¨¶¶¶·¤·∏¶¬± ¤¶·«°¤·¬¦°¬¦¨ q„µ¶¨±²¯¬·¨ ¦²∏¯§ ¬¯ª«·¨± ¤¬µº¤¼ ²¥¶·µ∏¦·¬²±oµ¨§∏¦¨ ¤¬µº¤¼ «¬ª«µ¨¶³²±¶¨ ¤±§µ¨2
§µ¨¶¶²¬¬§¤±·¶·µ¨¶¶¶·¤·∏¶¬± ¤¶·«°¤·¬¦°¬¦¨ q
[ Κεψ ωορδσ] ¤¶·«°¤~²¬¬§¤±·¶·µ¨¶¶~¤µ¶¨±²¯¬·¨ ~{2Œ¶²³µ²¶·¤±¨ ≈责任编辑 方文贤 
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第 vs卷第 uu期
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