全 文 ：◇ 基础研究 ◇
中国临床药理学与治疗学
中国药理学会主办
ＣＮ　３４－１２０６／Ｒ，ＩＳＳＮ　１００９－２５０１
ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｃｊｃｐｔ．ｃｏｍ
２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）：１２２４－１２３２
２０１２－１０－１６收稿　２０１３－０４－１２修回
刘爱华，女，本科，实验师，研究方向：组织形态学。
Ｔｅｌ：０７１７－６３９６８１８　Ｅ－ｍａｉｌ：４５５２１３３７４＠ｑｑ．ｃｏｍ
石孟琼，通信作者，女，本科，实验师，研究方向：心脑血管药理。
Ｔｅｌ：０７１７－６３９６８１８　Ｅ－ｍａｉｌ：ｓｈｍｑ０２１２＠１２６．ｃｏｍ
珠子参总皂苷对大鼠心肌缺血／
再灌注损伤的保护作用及机制研究
刘爱华１，石孟琼１，杨文雁１，颜为红１，
龚学谦１，熊焱强１，周继刚２，罗 涛２，张继红２
１三峡大学医学院，宜昌４４３００２，湖北；２ 三峡大学中医临床医学院内科住院部，宜昌４４３００２，湖北
摘要　目的：研究珠子参总皂苷预处理对大鼠心
肌缺 血 再 灌 注 损 伤 （Ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／
Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ，ＭＩ／ＲＩ）的保护作用及可能
的作用机制。方法：实验大鼠随机分为假手术
组、缺血／再灌注模型组、珠子参总皂苷１００ 和
２００ｍｇ／ｋｇ组。治疗组各组大鼠分别给予相应的
药物，给药 ７ｄ 后，行冠状动脉结扎术，结扎
３０ｍｉｎ后，再灌注２４ｈ。记录再灌注后３０ｍｉｎ
内心律失常发生情况，２４ｈ后进行血流动力学测
定，然后取血进行乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶
（ＣＫ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化
物酶（ＧＳＨ－Ｐｘ）、丙二醛（ＭＤＡ）和过氧化氢酶
（ＣＡＴ）含量分析；心脏经ＴＴＣ染色和 ＨＥ染色，
计算心肌梗死面积和心肌组织形态学观察。实时
定量ＰＣＲ检测ＳＯＤ／ＧＰＸ／ＣＡＴ反应系统ＳＯＤ１
～ＳＯＤ３、ＧＰＸ１和ＣＡＴ基因表达，Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ
检测细胞质和细胞核 Ｎｒｆ２蛋白表达。结果：珠
子参总皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）可显著降低心律失
常发生率（Ｐ＜０．０１），能明显改善心功能，降低血
液中 ＣＫ、ＬＤＨ 含量和 ＭＤＡ 水平，增加ＳＯＤ、
ＧＳＨ－Ｐｘ、ＣＡＴ酶的活性；减轻ＲＯＳ所致心肌氧
化应激损伤，降低心肌梗死面积（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜
０．０１）和改善心脏组织形态学；上调ＳＯＤ／ＧＰＸ／
ＣＡＴ反应系统基因表达水平和促进 Ｎｒｆ２核移
位，增加心肌细胞核内 Ｎｒｆ２的表达水平（Ｐ＜
０．０１）。结论：珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ具有较好
的保护作用，激活Ｎｒｆ２抗氧化途径和抗脂质过氧
化可能是其作用机制之一。
关键词　珠子参总皂苷；缺血／再灌注损伤；转录
因子Ｎｒｆ２；氧化应激；保护机制
中图分类号：Ｒ９６５．２
文献标识码：Ａ
文 章 编 号：１００９－２５０１（２０１３）１１－１２２４－０９
随着人们生活方式的改变和人口老龄化，由
冠状动脉粥样硬化等引起的缺血性心脏病发病率
和死亡率逐年升高，严重威胁着人类的健康，成为
威胁人类健康的常见疾病之一。当前缺血性心脏
病治疗与预防工作面临严峻形势，已成为除脑血
管病、恶性肿瘤以外的人类第三大死亡原因，其发
病及死亡率快速上升给社会带来了巨大的负担。
大量临床研究证实，仅靠单纯的急救和西医治疗
是不够的，因为尽快恢复冠状动脉灌流的措施虽
可以减少心肌梗死范围，但再灌注本身也加重氧
化应激状态，加速心肌细胞的死亡，即心肌缺血／
再灌注损伤（Ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／Ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ
ｉｎｊｕｒｙ，ＭＩ／ＲＩ）［１］。近年来，随着溶栓或冠脉介
入治疗及冠状动脉旁路移植手术、激光心肌打孔
血运重建术等临床诊疗方法的推广应用，使得急
性心肌梗死患者的生存率得到了明显提高，但是
ＭＩ／ＲＩ的发生率却在日益增加，使其成为当前临
床上心脏病患者猝死的常见原因。因此，如何合
·４２２１·
理使用或找寻新的药物来延缓和控制 ＭＩ／ＲＩ病
理过程的发生发展，是目前心血管疾病研究领域
亟待解决的问题之一［２］。
珠子参（Ｐａｎａｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍａ）是临床应
用较为广泛的益气活血中药，具补肺养阴、祛瘀止
痛、止血之功，主要用于气阴两虚、烦热口渴、虚劳
咳嗽、跌扑损伤、关节痹痛、咳血、吐血、衄血、崩
漏、外伤出血、心悸等症［３－４］。本课题组前期研究
发现，其主要成分珠子参总皂苷对 Ｈ２Ｏ２ 诱导新
生大鼠心肌细胞氧化应激损伤具有较好的保护作
用，并初步证实珠子参总皂苷能够通过诱导 ＮＦ－
Ｅ２相关因子２（Ｎｕｃｌｅａｒ　ｆａｃｔｏｒ－ｅｒｙｔｈｒｏｉｄ　２－ｒｅｌａｔｅｄ
ｆａｃｏｒ　２，Ｎｒｆ２）核移位，来促进抗氧化基因的转
录，促进抗氧化酶体系的表达增强，抑制 Ｈ２Ｏ２ 致
心肌细胞氧化应激损伤中活性氧（Ｒｅａｃｔｉｖｅ　ｏｘｙ－
ｇｅｎ　ｓｐｅｃｉｅｓ，ＲＯＳ）增加，进而调节心肌细胞Ｂｃｌ－
２、Ｂａｘ和Ｃａｓｐａｓｅ－３、Ｃａｓｐａｓｅ－９表达，来抑制心肌
细胞凋亡［５－６］。因此本实验拟在此基础上通过在
体大鼠 ＭＩ／ＲＩ模型，研究其对大鼠 ＭＩ／ＲＩ的保
护作用及可能作用机制，为其临床用于缺血性心
脏病的防治提供理论依据。
１　材料与方法
１．１　药物　珠子参总皂苷的制备参见我们前期
研究［６］，由三峡大学天然产物研究与利用湖北省
重 点 实 验 室 提 供，纯 度 为 ９６．５％，批 号：
２０１１０７２４；其为淡黄色粉末，使用时用０．５％羧甲
基纤维素钠（ＣＭＣ－Ｎａ）配制成所需的浓度。
１．２　动物　ＳＰＦ级 Ｗｉｓｔａｒ大鼠１００只，雌雄各
半，体质量（２００±２０）ｇ，由湖北省疾病控制中心
实验动物中心提供，合格证：ＳＣＸＫ（鄂）２００８－
０００５。动物分笼饲养于空调室内，室温（２２±
２）℃，湿度（６０±５）％，每笼５只，每天每只动物
给予标准颗粒饲料，自由饮水和摄食。
１．３　仪器与试剂　Ｂｉｏｐａｃ多导生理记录仪
（Ｂｉｏｐａｃ　Ｓｙｓｔｅｍｓ，ＩＮＣ，ＭＰ１５０），美国Ｂｉｏｐａｃ公
司；ＡＬＣ－Ｖ８型动物呼吸机，上海奥尔特生物科技
有限公司；ＡＶ－Ｐ９６０Ｃ数字展示台，日本 Ｖｉｃｔｏｒ
有限公司；ＵＶ－２０００型紫外－可见分光光度计，尤
尼柯仪器有限公司；ＬＤＺ５－２型离心机，北京医用
离心机厂；ＵＬＴＲＡＣＵＴ－Ｒ型超薄切片机，德国
Ｌｅｉｃａ公司；Ｑ５００型图像分析仪，德国 Ｌｅｉｃａ公
司。２，３，５－氯化三苯基四氮唑（ＴＴＣ），美国Ｓｉｇ－
ｍａ公司；乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）、肌酸激酶（ＣＫ）、超
氧化物歧化酶（ＳＯＤ）、谷胱甘肽过氧化物酶
（ＧＳＨ－Ｐｘ）、丙二醛（ＭＤＡ）、过氧化氢酶（ＣＡＴ）
试剂盒，南京建成生物工程研究所；ＳＯＤ１、ＳＯＤ２、
ＳＯＤ３、ＧＰＸ１（谷胱甘肽过氧化物酶１）、ＣＡＴ以
及ＧＡＰＤＨ，上海生工生物工程有限公司合成，具
体引物序列见表１；Ｔｒｉｚｏｌ和ＤＥＰＣ，上海生工生
物工程有限公司；Ｐｒｉｍｅ　ＳｃｒｉｐｔＴＭ　ＲＴ　ｒｅａｇｅｎｔ
Ｋｉｔ、Ｔａｑ　ＤＮＡ 聚合酶，大连宝生物工程有限公
司；Ｎｒｆ２抗体，Ｂｉｏｗｏｒｌｄ公司；β－ａｃｔｉｎ抗体，北京
博奥森生物技术有限公司；羊抗兔二抗，北京中杉
金桥生物技术有限公司；总蛋白抽提试剂盒、细胞
核与细胞质蛋白抽提试剂盒、ＥＣＬ发光试剂盒、
蛋白含量测定试剂盒，碧云天生物技术研究所；其
他试剂均为市售分析纯。
表１　实时定量ＰＣＲ引物序列
基因名称 上游引物 下游引物
基因片段长度
（ｂｐ）
ＳＯＤ１ ＣＡＧＧＧＣＧＴＣＡＴＴＣＡＣＴＴＣ　 ＣＣＡＡＧＴＣＡＴＣＴＴＧＴＴＴＣＴＣＧ　 ２０５
ＳＯＤ２ ＧＡＧＣＡＡＧＧＴＣＧＣＴＴＡＣＡＧＡ　 ＣＴＣＣＣＣＡＧＴＴＧＡＴＴＡＣＡＴＴＣ　 １９５
ＳＯＤ３ ＧＡＡ　ＣＣＴ　ＣＡＧ　ＣＣＡ　ＴＧＧＴＧＧ　 ＧＣＴ　ＴＡＡ　ＧＴＧ　ＧＴＣ　ＴＴＧ　ＣＡＣ　 １８５
ＧＰＸ１ ＴＴＧＴＴＡＣＴＧＡＡＴＧＧＣＧＧＣＧＡＴＧＴＴ　 ＧＣＧＧＧＧＧＴＧＣＴＴＧＴＴＴＡＴＧＧ　 ３５７
ＣＡＴ　 ＣＧＴＡＴＣＧＡＧＡＧＣＡＡＧＧＡＡＧＣ　 ＣＡＧＡＧＣＡＴＧＡＴＴＡＧＧＣＡＡＡＣＴ　 ３１９
ＧＡＰＤＨ　 ＧＣＴＧＧＧＧＣＴＣＡＣＣＴＧＡＡＧＧ　 ＧＧＡＴＧＡＣＣＴＴＧＣＣＣＡＣＡＧＣＣ　 ３４３
１．４　方法
１．４．１　分组与给药　术前１周，选取心电图
（ＥＣＧ）正常的 Ｗｉｓｔａｒ大鼠随机分为假手术组、
ＭＩ／ＲＩ模型组、珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ和珠子
·５２２１·中国临床药理学与治疗学２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）
参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组。给药组灌胃给予相应
的药物，灌胃体积为２０ｍＬ／ｋｇ，每天给药１次，
连续给药１周，假手术组和模型组给予同体积
０．５％ＣＭＣ－Ｎａ溶液。
１．４．２　ＭＩ／ＲＩ模型的制备　各实验大鼠于末次
给药１ｈ后按文献［７］介绍的方法制作 ＭＩ／ＲＩ模
型。具体方法如下：ＭＩ／ＲＩ模型组、珠子参总皂
苷１００ｍｇ／ｋｇ和珠子参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组大
鼠分别用２０％氨基甲酸乙酯溶液（１．５ｇ／ｋｇ，ｉ．
ｐ．）麻醉后，经左侧第４肋间剪开皮肤，钝性分离
肌肉组织，打开胸腔，剪开心包膜，挤压出心脏，于
左心耳与肺动脉圆锥间穿６／０号丝线，进行硅胶
管套扎，形成心肌缺血。当观察到结扎点远端心
前壁变紫、ＥＣＧ显示ＳＴ段抬高为冠状动脉结扎
成功，松扎后抬高的ＳＴ段回落１／２以上为再灌
注成功的标志。实施３０ｍｉｎ缺血，再灌注２４ｈ，
建立 ＭＩ／ＲＩ模型。假手术组不造模，在肺动脉圆
锥与左心耳间穿线，不结扎，３０ｍｉｎ关胸，２４ｈ后
进行实验指标检测。
１．５　检测指标
１．５．１　大鼠ＥＣＧ观察　各组大鼠在实施心肌缺
血３０ｍｉｎ 后，然后再灌注 ３０ｍｉｎ，动态监测
ＥＣＧ，记录３０ｍｉｎ内各组大鼠室性早搏（ＶＰ）、室
性心动过速（ＶＴ）、心室颤动（ＶＦ）的发生率。
１．５．２　血流动力学测定　大鼠在再灌注２４ｈ后
进行，分别用２０％氨基甲酸乙酯溶液（１．５ｇ／ｋｇ，
ｉ．ｐ．）麻醉大鼠后，颈部切开，分离右侧颈总动脉，
进行颈总动脉和左心室插管，测定左心室内压。
首先将连接换能器的聚乙烯导管从向心脏方向由
右侧颈总动脉插入约１ｃｍ，记录颈总动脉压１
次，再进入左心室，记录血流动力学指标（心率：
Ｈｅａｒｔ　ｒａｔｅ，ＨＲ；左心室收缩压：Ｌｅｆｔ　ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ
ｓｙｓｔｏｌｉｃ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ＬＶＳＰ；左心室舒张末压：Ｌｅｆｔ
ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｅｎｄ－ｄｉａｓｔｏｌｉｃ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ＬＶＥＤＰ；左室
内压上升最大速率：Ｍａｘｉｍａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｉｎｃｒｅａｓｅ
ｏｆ　ｌｅｆｔ　ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ＬＶ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ；左室
内压下降最大速率：Ｍａｘｉｍａｌ　ｒａｔｅ　ｏｆ　ｔｈｅ　ｄｅｃｒｅａｓｅ
ｏｆ　ｌｅｆｔ　ｖｅｎｔｒｉｃｕｌａｒ　ｐｒｅｓｓｕｒｅ，ＬＶ－ｄｐ／ｄｔｍａｘ），导管
拔出左心室后，再记录颈总动脉压１次。血流动
力学指标分别取５段进行统计，取平均值。
１．５．３　血清的生化指标测定　记录完实验大鼠
心功能后，打开大鼠腹腔，腹腔主动脉取血，
３５００ｒ／ｍｉｎ离心１５ｍｉｎ，分离血清，按试剂盒说
明书标示方法测定血清中 ＬＤＨ、ＣＫ 和 ＳＯＤ、
ＣＡＴ、ＧＳＨ－Ｐｘ、ＭＤＡ活性及含量。
１．５．４　心肌梗死面积计算　取血完毕后，快速取
出大鼠心脏，用生理盐水洗去残留血液，用洁净纱
布吸干水分后，进行全心拍照，然后分别随即选取
每组一半大鼠的心脏，沿长轴从心尖到心底横向
均切成５片，将心肌组织切片置于１．０％ＴＴＣ溶
液中，３７℃ 避光孵育，每隔７～８ｍｉｎ翻动１次，
染色 １５ｍｉｎ，然后用生理盐水冲洗干净，并经
ＡＶ－Ｐ９６０Ｃ数字展示台拍照成像后，用Ｉｍａｇｅ／Ｊ
图像分析软件计算心肌梗死面积。每组大鼠其余
的心脏分别进行心肌组织形态学观察和分子生物
学实验。
１．５．５　心肌组织形态学观察　每组另取４只大
鼠心脏置于４％多聚甲醛中固定。固定完毕后，
将标本取出，常规梯度乙醇脱水、二甲苯透明、浸
蜡、包埋制成石蜡切块，连续冠状切片，切片厚
５μｍ，ＨＥ染色后光镜下观察。
１．５．６　实时定量ＰＣＲ检测　用Ｔｒｉｚｏｌ试剂提取
左心室心肌组织总 ＲＮＡ，按说明书操作。总
ＲＮＡ经紫外分光光度计测定２６０ｎｍ 与２８０ｎｍ
处光密度比值 ＯＤ（２６０）／ＯＤ（２８０）为１．８～２．０。
将提取的ＲＮＡ反转录为ｃＤＮＡ（按照反转录试
剂盒严格操作）；在ＲＮａｓｅ　Ｆｒｅｅ处理过的反应管
中加入 ＳＹＢＲ? Ｐｒｅｍｉｘ　Ｅｘ　ＴａｑＴＭ Ⅱ （２Ｘ）
１２．５μＬ，ＰＣＲ　Ｆｏｒｗａｒｄ　Ｐｒｉｍｅｒ（１０μｍｏｌ／Ｌ）
１μＬ，ＰＣＲ　Ｒｅｖｅｒｓｅ　Ｐｒｉｍｅｒ（１０μｍｏｌ／Ｌ）１μＬ，
ＤＮＡ 模板２μＬ，ｄＨ２Ｏ（灭菌蒸馏水）８．５μＬ，最
终反应体系为２５μＬ。将样品放入实时定量ＰＣＲ
扩增仪中按９５℃ 预变性３０ｓ、９５℃ 变性５ｓ、
退火３０ｓ、７２℃ 延伸２０ｓ条件扩增４０次。利用
ＰＣＲ仪汇出扩增曲线，进行结果分析。
１．５．７　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔ检测　按照细胞质－核蛋白
提取试剂盒说明，提取不同处理组别左心室心肌
组织细胞质蛋白和核蛋白，进行蛋白定量后，加样
品缓冲液煮沸５ｍｉｎ，各取２０μＬ加样；１０％聚丙
烯酰 胺 凝 胶，在 １２０Ｖ、２８ｍＡ 条 件 下 电 泳
１．５ｈ；１００ｍＡ条件下ＰＶＤＦ膜转膜３ｈ；５％脱
脂牛奶封闭，滴加Ｎｒｆ２一抗（１∶５０），４℃ 过夜；
用含０．１％ Ｔｗｅｅｎ　２０的ＴＢＳ冲洗５ｍｉｎ×３次，
再加辣根过氧化物酶标记的二抗（１∶５００）室温下
·６２２１· Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｔｈｅｒ　２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）
孵育２ｈ，用 ０．１％ ＴＢＳＴ 冲洗１５ｍｉｎ×３次，
ＥＣＬ发光检测，Ｘ光片显影，扫描图像，测得各条
带的灰度值，以β－ａｃｔｉｎ为内对照标准化后，比较
其表达量的变化。
１．６　统计学处理　所有实验结果的数据以均数
±标准差（ｘ±ｓ）表示，所有数据分析在 ＳＰＳＳ
１３．０统计软件包上进行，以单因素方差分析进行
多组间差异的比较，以Ｄｕｎｎｅｔｔ－ｔ检验比较两组
间均数的差异。Ｐ＜０．０５认为差异有统计学意
义。
２　结果
２．１　珠子参总皂苷对大鼠 ＭＩ／ＲＩ所致心律失常
的影响　假手术组在ＥＣＧ观察期间未见心律失
常，而模型组大鼠在再灌注３０ｍｉｎ期间出现了
ＶＰ和／或ＶＴ，其总发生率高达９４．１２％，并有２
只大鼠因ＶＦ而死亡，与假手术组比较具有统计
学差 异 （Ｐ ＜０．０１）；珠 子 参 总 皂 苷 （１００、
２００ｍｇ／ｋｇ）预处理后，其发生率显著降低，与模
型组比较具有统计学差异（Ｐ＜０．０１，表２）。
表２　珠子参总皂苷对大鼠 ＭＩ／ＲＩ所致心律失常的影响
组别 ｎ
ＶＰ发生率
（％）
ＶＴ发生率
（％）
ＶＦ发生率
（％）
心律失常总发生率
（％）
假手术组 １６　 ０．００　 ０．００　 ０．００　 ０．００
模型组 １７　 ４１．１８　 ５２．９４　 ０．００　 ９４．１２ｃ
珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组 １８　 ３３．３３　 ０．００　 ０．００　 ３３．３３ｆ
珠子参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组 １９　 ２１．０５　 ０．００　 ０．００　 ２１．０５ｆ
与假手术组比较ｃ　Ｐ＜０．０１；与模型组比较ｆ　Ｐ＜０．０１
２．２　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠血流动力学的
影响　与假手术组比较，模型组ＬＶＳＰ、ＬＶ＋ｄｐ／
ｄｔｍａｘ、ＬＶ－ｄｐ／ｄｔｍａｘ显著降低，ＬＶＥＤＰ明显升高
（Ｐ＜０．０１），提示大鼠 ＭＩ／ＲＩ后导致了心功能受
损；珠子参总皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）预处理后能
使异常变化的 ＬＶＥＤＰ、ＬＶＳＰ、ＬＶ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ、
ＬＶ－ｄｐ／ｄｔｍｉｎ水平得到明显逆转，与模型组比较，
具有统计学差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）；各实验
组心率变化没有统计学差异（表３）。
表３　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠血液流变学的影响（ｘ±ｓ）
组别 ｎ
ＨＲ
（ｂｅａｔｓ／ｍｉｎ）
ＬＶＳＰ
（ｍｍ　Ｈｇ）
ＬＶＥＤＰ
（ｍｍ　Ｈｇ）
ＬＶ＋ｄｐ／ｄｔｍａｘ
（ｍｍ　Ｈｇ／ｓ）
ＬＶ－ｄｐ／ｄｔｍａｘ
（ｍｍ　Ｈｇ／ｓ）
假手术组 １６　 ４２２．８±４４．５　 １４３．２±５．８　 ６．１２±１．７４　 ３７９０．１±１７５．９ －３４１１．１±２５６．３
模型组 １７　 ４１８．０±４８．８　 １１０．４±１１．８ｃ　 １７．０３±２．７５ｃ　 ３０６８．６±１５７．３ｃ －２９７２．６±１１９．９ｃ
珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组 １８　 ４３０．２±２７．５　 １２４．５±８．８ｅ　 １４．３０±２．１３　 ３２７７．２±１４７．１ｅ －３１３８．５±１３１．８ｅ
珠子参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组 １９　 ４２７．８±５３．０　 １２９．２±８．０ｆ　 １３．９８±１．３２ｅ　 ３３８９．６±１８８．９ｆ －３２４５．５±２０１．４ｅ
与假手术组比较ｃ　Ｐ＜０．０１；与模型组比较ｅ　Ｐ＜０．０５，ｆ　Ｐ＜０．０１
２．３　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠血清心肌酶的
影响　由表４可知：模型组大鼠血清ＣＫ和ＬＤＨ
酶活性显著升高，与假手术组比较具有统计学差
异（Ｐ＜０．０１）；珠子参总皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）预
处理后，其活性均明显降低，与模型组比较具有统
计学差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）。
表４　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠血清心肌酶的影响（ｘ±ｓ）
组别 ｎ　 ＣＫ（Ｕ／ｍＬ） ＬＤＨ （Ｕ／ｍＬ）
假手术组 １６　 ０．５４±０．１０　 ３．００±０．５８
模型组 １７　 １．４７±０．１４ｃ　 ５．３６±０．６５ｃ
珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组 １８　 １．２８±０．１４ｅ　 ４．２９±０．５１ｆ
珠子参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组 １９　 １．２３±０．１１ｆ　 ４．１６±０．５６ｆ
与假手术组比较ｃ　Ｐ＜０．０１；与模型组比较ｅ　Ｐ＜０．０５，ｆ　Ｐ＜０．０１
·７２２１·中国临床药理学与治疗学２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）
２．４　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠血清氧化指标
的影响　与假手术组比较，模型组大鼠血清
ＳＯＤ、ＣＡＴ 和 ＧＳＨ－Ｐｘ 活 性 显 著 降 低 （Ｐ＜
０．０１），而 ＭＤＡ含量明显升高（Ｐ＜０．０１）；珠子
参总皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）预处理后，大鼠血清
ＳＯＤ、ＣＡＴ和 ＧＳＨ－Ｐｘ活性升高，ＭＤＡ 含量降
低，与模型组比较具有统计学差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ
＜０．０１）。实验结果表明珠子参总皂苷能减轻再
灌注时的脂质过氧化损伤，显示出对大鼠 ＭＩ／ＲＩ
具有较好保护作用（表５）。
表５　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠血清氧化指标的影响（ｘ±ｓ）
组别 ｎ　 ＳＯＤ（Ｕ／ｍＬ） ＣＡＴ（Ｕ／ｍＬ） ＧＳＨ－Ｐｘ（Ｕ／ｍＬ） ＭＤＡ（ｎｍｏｌ／ｍＬ）
假手术组 １６　 １５０．２±７．５　 ２２．４６±１．８７　 ３９１．５±２３．５　 ３．０６±０．４１
模型组 １７　 １２５．１±９．０ｃ　 １３．５４±１．４３ｃ　 ３３１．６±１６．０ｃ　 ４．７９±０．４８ｃ
珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组 １８　 １３５．６±６．１ｅ　 １６．０２±２．１２ｅ　 ３５４．８±１７．４ｅ　 ３．８５±０．４９ｆ
珠子参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组 １９　 １３９．５±５．２ｆ　 １９．６７±１．８９ｆ　 ３６３．９±１８．３ｆ　 ３．７９±０．４６ｆ
与假手术组比较ｃ　Ｐ＜０．０１；与模型组比较ｅ　Ｐ＜０．０５，ｆ　Ｐ＜０．０１
２．５　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌梗死面积
的影响　肉眼观察心肌缺血再灌注大鼠心脏，我
们发现除假手术组外，可见全心有轻度水肿，并可
观察到结扎点远端左心室心前壁颜色变浅、变紫，
其中以模型组最为明显（图１Ａ）。取心肌组织切
片，用１．０％ＴＴＣ染色后，可见梗死部位为白色
略带粉红色、非梗死部位为红褐色，图中箭头所示
的区域分别心肌梗死区和非梗死区（图１Ｂ）；经
Ｉｍａｇｅ／Ｊ图像分析软件分析，模型组大鼠心肌梗
死面积（％）为：２１．７０±３．５６，与假手术组（０．００±
０．００）比较具有统计学差异（Ｐ＜０．０１）；珠子参总
皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）预处理后，心肌梗死面积
减小为：１７．３３±３．０２和１４．９０±２．９９，与模型组
比较具有统计学差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜０．０１）（图
１Ｃ）。
图１　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌梗死程度的影响（ＴＴＣ染色）
Ａ：全心照片；Ｂ：心脏切片经１．０％ＴＴＣ染色后照片；Ｃ：心肌梗死面积。ａ：假手术组；ｂ：模型组；ｃ：珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组；ｄ：珠子参
总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组；与假手术组比较ｃ　Ｐ＜０．０１；与模型组比较ｅ　Ｐ＜０．０１，ｆ　Ｐ＜０．０１
２．６　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌组织形态
学的影响　由图２可见，假手术组大鼠心肌纤维
排列整齐结构清楚，无心肌纤维的破坏，组织间隙
无炎性渗出，胞核清晰、胞间间隙正常；模型组大
鼠心肌内可见较大范围灶性病变，并伴有明显的
变性和坏死，心肌纤维变长呈波浪形，排列紊乱和
·８２２１· Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｔｈｅｒ　２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）
断裂，肌纤维间距增宽，间质水肿、充血，有炎症细
胞浸润；珠子参总皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）预处理
后，心肌病变的程度明显减轻，大部分心肌无明显
病变，有病变的心肌病灶也较局限，局部有散在心
肌细胞变性坏死，仅少量炎细胞浸润。实验结果
表明，珠子参总皂苷对大鼠 ＭＩ／ＲＩ具有较好的保
护作用。
图２　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌组织病理学的影
响（ＨＥ染色）
Ａ：假手术组；Ｂ：模型组；Ｃ：珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组；Ｄ：珠子
参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组
２．７　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌组织
ＳＯＤ、ＧＰＸ１和ＣＡＴ基因表达的影响　与假手术
组比较，模型组大鼠心肌细胞中ＳＯＤ１、ＳＯＤ２、
ＳＯＤ３、ＧＰＸ１和ＣＡＴ　ｍＲＮＡ表达水平明显下降
（Ｐ＜０．０５ 或 Ｐ＜０．０１）；珠子参总皂苷（１００、
２００ｍｇ／ｋｇ）处理后可使 ＳＯＤ１、ＳＯＤ２、ＳＯＤ３、
ＧＰＸ１和ＣＡＴ　ｍＲＮＡ表达水平得到明显改善，
与模型组比较具有统计学差异（Ｐ＜０．０５或Ｐ＜
０．０１），而且其改善作用随珠子参总皂苷剂量的增
加而增强（图３，表６）。
２．８　珠子参总皂苷对ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌组织Ｎｒｆ２
蛋白表达的影响　由图４可知，实验各组大鼠左
心室心肌组织细胞质中 Ｎｒｆ２蛋白表达水平无明
显差别。在细胞核中可见假手术组细胞核中
Ｎｒｆ２表达较少，模型组胞核中 Ｎｒｆ２表达较正常
组有所增加，但没有统计学差异（Ｐ＞０．０５）；珠子
参总皂苷（１００、２００ｍｇ／ｋｇ）预处理后可使细胞核
中Ｎｒｆ２蛋白表达水平升高，与模型组比较具有统
计学差异（Ｐ＜０．０１）。
图３　ＳＯＤ、ＧＰＸ１、ＣＡＴ和ＧＡＰＤＨ　ｍＲＮＡ电泳结果
图４　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌组织Ｎｒｆ２蛋白表
达的影响
１：假手术组；２：模型组；３：珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ；４：珠子参
总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ；与模型组比较ｃ　Ｐ＜０．０１
表６　珠子参总皂苷对 ＭＩ／ＲＩ大鼠心肌组织ＳＯＤ、ＧＰＸ１和ＣＡＴ基因表达的影响（ｘ±ｓ，ｎ＝４）
组别 ＳＯＤ１ ＳＯＤ２ ＳＯＤ３ ＧＰＸ１ ＣＡＴ
假手术组 ２．４２±０．１１　 ０．７８±０．１２　 ０．５８±０．０８　 １．２７±０．１１　 １．８９±０．１１
模型组 １．５２±０．１４ｃ　 ０．４６±０．０７ｂ　 ０．３２±０．０６ｃ　 ０．６３±０．０７ｃ　 １．１２±０．１３ｃ
珠子参总皂苷１００ｍｇ／ｋｇ组 １．９１±０．１５ｅ　 ０．５９±０．０４ｅ　 ０．４５±０．０５ｅ　 ０．８８±０．０６ｆ　 １．４１±０．１１ｅ
珠子参总皂苷２００ｍｇ／ｋｇ组 ２．２２±０．０９ｆ　 ０．６５±０．０６ｅ　 ０．５０±０．０４ｆ　 ０．９７±０．０８ｆ　 １．７４±０．１０ｆ
与假手术组比较ｂ　Ｐ＜０．０５，ｃ　Ｐ＜０．０１；与模型组比较ｆ　Ｐ＜０．０１
·９２２１·中国临床药理学与治疗学２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）
３　讨论
目前随着冠心病的发病率的增高，无论是溶
栓治疗还是心脏移植、冠状动脉搭桥术及经皮冠
状动脉球囊扩张术治疗，都会引起 ＭＩ／ＲＩ［１，８］，进
而影响临床治疗的预后，因此，探索新的心肌保护
机制是十分必要的，同时如何最大程度地减轻
ＭＩ／ＲＩ也成为医学界的研究热点之一。中医药
在缺血性心脏病的防治方面有其独特的优势，许
多中药及复方（如：三七、丹参、速效救心丸、丹参
滴丸等）对心肌缺血所致心绞痛、心肌梗死有良好
的防治效果。近年来，国内外学者通过借助现代
药物化学和药理学等研究手段，对中药抗心肌缺
血的药效物质基础进行了研究，从中发现了部分
具有良好抗心肌缺血的药物，如川芎嗪、丹参酮、
三七总皂苷、人参皂苷等［９］。因此，积极利用现代
研究手段找寻防治心肌缺血的中药及阐明其抗心
肌缺血的物质基础，将有助于提高缺血性心肌病
的防治水平。
珠子参具有较广泛的药理作用，对消化系统、
中枢神经系统、心脑血管系统、免疫系统等具有广
泛的药理作用［１０－１１］。本课题组前期研究发现珠
子参及其主要成分珠子参总皂苷对心肌缺血性损
伤具有较好的保护作用，并初步证实了抗氧化损
伤可能是其作用机制之一［５－６，１２］。本实验将在此
基础上进一步证实其对心肌缺血性损伤的保护作
用及作用机制。实验结果表明，珠子参总皂苷能
有效拮抗 ＭＩ／ＲＩ所诱发的心律失常，能有效逆转
心功能指标中升高的ＬＶＥＤＰ和降低的ＬＶＳＰ、
ＬＶ±ｄｐ／ｄｔｍａｘ水平；在进行心肌梗死面积和形态
学分析时后，研究发现珠子参总皂苷能显著降低
ＭＩＲＩ大鼠心肌梗死面积，使心肌病变的程度明
显减轻，减少炎细胞浸润，显示出珠子参总皂苷对
ＭＩ／ＲＩ具有较好的保护作用。
近年来，随着对ＲＯＳ研究的深入，国内外学
者证实它是导致 ＭＩ／ＲＩ发生发展的“关键物质”
之一［１３］。研究表明，在正常情况下，心肌细胞内
ＲＯＳ的产生和清除是平衡的，但是在心肌缺血，
特别是再灌注期间，引起高能磷酸化合物耗竭，使
依赖能量的离子泵功能受损，导致线粒体钙超载，
并通过心肌细胞线粒体、黄嘌呤氧化酶、中性粒细
胞的呼吸爆发等不同的信号传导途径产生大量
ＲＯＳ，进而破坏线粒体膜和心肌细胞膜的完整性，
导致心肌细胞膜的通透性增加，使心肌细胞内
ＬＤＨ、ＣＫ等大量释放 ［１４］，因此，过量ＲＯＳ产生
和聚集被认为是引起 ＭＩ／ＲＩ的主要机制。在进
行实验大鼠血液中心肌酶和氧化指标分析后，研
究发现模型组心肌细胞心肌酶和氧化还原系统受
到明显破坏，提示大鼠 ＭＩ／ＲＩ诱发了心肌氧化损
伤，实验结果与文献报道一致［１５－１６］。
通常情况下，内源性抗氧化物酶（如ＳＯＤ、
ＣＡＴ和ＧＳＨ－Ｐｘ等）是防止氧化应激产生的心肌
损伤的第一道防线，这些内源性的抗氧化物酶通
过清除过量的ＲＯＳ使机体处于平衡状态［６］。而
产生这一生物体抗氧化应激的防御机制主要是通
过抗氧化反应元件（Ａｎｔｉｏｘｉｄａｎｔ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｅｌｅ－
ｍｅｎｔ，ＡＲＥ，是许多抗氧化基因上游中的顺式作
用增强元件）。Ｎｒｆ２作为机体内一个尤为重要的
保护性转录分子，在机体正常生理情况下，Ｎｒｆ２
与胞质接头蛋白（Ｋｅａｐ１）偶联，并与肌动蛋白细
胞骨架结合锚定于胞浆，处于非活化状态。当受
到 ＲＯＳ 或其他亲电子试剂攻击后，Ｎｒｆ２ 与
Ｋｅａｐ１解离，激活后转位进入细胞核中，与小 Ｍａｆ
蛋白结合形成异二聚体，异二聚体与 ＡＲＥ结合
后激活了Ｎｒｆ２－ＡＲＥ信号通路以及其下游的抗氧
化蛋白基因的表达（如 ＨＯ－１，Ｔｘｎ－１、Ｔｘｎｒｄ－１和
ＧＣＬｃ等），从而发挥着重要的细胞保护作用［１７］。
国内外研究［１８］证实：Ｎｒｆ２－ＡＲＥ通路是体内有效
调节氧化应激平衡的重要因素，也是重要的抗氧
化应激通路，其在抗缺血性心肌损伤等方面发挥
重要作用。本研究中，检测了心肌组织细胞核内
和质 Ｎｒｆ２蛋白表达情况，结果表明，珠子参总皂
苷能够诱导Ｎｒｆ２由质转入核内，从而促进了相关
抗氧化基因的转录。
在生物体内源性抗氧化体系中，ＳＯＤ／ＧＰＸ／
ＣＡＴ是一组重要的抗氧化酶体系，它们分工合作
共同抵御机体在受到外源或内生的氧化应激损
伤，通常情况下，ＳＯＤ（ＳＯＤ１～ＳＯＤ３）负责将活性
氧转换成 Ｈ２Ｏ２，然后通过ＧＰＸ１和ＣＡＴ将其解
离成水［６］；在心肌缺血时，ＳＯＤ将产生的超氧阴
离子、转化为 Ｈ２Ｏ２，后者能直接诱导心肌细胞凋
亡，故Ｈ２Ｏ２ 等须被ＧＳＨ－Ｐｘ和ＣＡＴ及时转化成
Ｈ２Ｏ。研究证实ＳＯＤ基因的表达将增强机体清
·０３２１· Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｔｈｅｒ　２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）
除氧自由基的能力，而 ＧＰＸ１、ＣＡＴ缺失将导致
严重的氧化损伤［１９－２０］。本实验为了明确ＳＯＤ／
ＧＰＸ／ＣＡＴ基因是否参与了 ＭＩ／ＲＩ，我们分别对
ＭＩ／ＲＩ大鼠血液中ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ、ＣＡＴ、ＭＤＡ
含量和左心室心肌组织ＳＯＤ（ＳＯＤ１～ＳＯＤ３）、
ＧＰＸ１和ＣＡＴ基因表达水平进行了分析。实验
结果表明，模型组血液中ＳＯＤ、ＧＳＨ－Ｐｘ、ＣＡＴ含
量和心肌组织中ＳＯＤ１、ＳＯＤ２、ＳＯＤ３、ＧＰＸ１和
ＣＡＴ基因表达显著下降，ＭＤＡ含量显著升高，而
珠子参总皂苷能够明显逆转上述变化。上述结果
提示珠子参总皂苷可能通过上调 ＳＯＤ／ＧＰＸ／
ＣＡＴ抗氧化酶体系的基因表达，增强心肌细胞清
除超氧阴离子、Ｈ２Ｏ２ 的能力，从而保护心肌缺血
及再灌注所诱导的氧化损伤。
综上所述，珠子参总皂苷可拮抗因心肌缺血
再灌注所诱发的心律失常发生，改善心功能和心
肌组织形态学，增加血液中ＳＯＤ、ＣＡＴ、ＧＳＨ－Ｐｘ
酶活性，降低ＣＫ、ＬＤＨ 含量和血液中脂质过氧
化产物 ＭＤＡ水平，减轻ＲＯＳ对心肌的损伤和降
低心肌梗死面积。其可能的作用机制是通过诱导
Ｎｒｆ２核移位，来上调抗氧化基因（ＳＯＤ、ＧＰＸ１和
ＣＡＴ等）的转录，促进抗氧化酶体系的表达增强，
进而抑制 ＭＩ／ＲＩ时ＲＯＳ增加，从而发挥对心肌
缺血及 ＭＩ／ＲＩ的保护作用。
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ｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍａ　ｏｎ　ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ　ｉｎ
ｒａｔｓ
ＬＩＵ　Ａｉ－ｈｕａ１，ＳＨＩ　Ｍｅｎｇ－ｑｉｏｎｇ１，ＹＡＮ　Ｗｅｎ－ｙａｎ１，ＹＡＮＧ　Ｗｅｉ－ｈｏｎｇ１，ＧＯＮＧ　Ｘｕｅ－ｑｉａｎ１，
ＸＩＯＮＧ　Ｙａｎ－ｑｉａｎｇ１，ＺＨＯＵ　Ｊｉ－ｇａｎｇ２，ＬＵＯ　Ｔａｏ２，ＺＨＡＮＧ　Ｊｉ－ｈｏｎｇ２
１　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｓｃｉｅｎｃｅ　Ｃｏｌｌｅｇｅ，Ｃｈｉｎａ　Ｔｈｒｅｅ　Ｇｏｒｇｅｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｃｈａｎｇ　４４３００２，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ；
２　Ｍｅｄｉｃａｌ　Ｉｎｐａｔｉｅｎｔ　Ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｔｒａｄｉｔｉｏｎａｌ　Ｃｈｉｎｅｓｅ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ　Ｃｌｉｎｉｃａｌ　Ｈｏｓｐｉｔａｌ，Ｃｈｉｎａ　Ｔｈｒｅｅ　Ｇｏｒ－
ｇｅｓ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｙｉｃｈａｎｇ　４４３００２，Ｈｕｂｅｉ，Ｃｈｉｎａ
ＡＢＳＴＲＡＣＴ　ＡＩＭ：Ｔｏ　ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ　ｔｈｅ　ｃａｒｄｉｏ－
ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｆ　ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｐａｎａｃｉｓ
ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍａ　ｏｎ　ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ　ｉｓｃｈｅｍｉａ／ｒｅｐｅｒ－
ｆｕｓｉｏｎ　ｉｎｊｕｒｙ （ＭＩ／ＲＩ）ａｎｄ　ｉｔｓ　ｍｅｃｈａｎｉｓｍ．
ＭＥＴＨＯＤＳ：Ａｌ　ｒａｔｓ　ｗｅｒｅ　ｒａｎｄｏｍｌｙ　ｄｉｖｉｄｅｄ　ｉｎｔｏ
ｆｏｕｒ　ｇｒｏｕｐｓ：ｓｈａｍ－ｏｐｅｒａｔｅｄ，ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ　ａｎｄ
ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｏｆ　Ｐａｎａｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍａ（１００，
２００ｍｇ／ｋｇ）；Ｔｈｅ　ｐｒｅｔｒｅａｔｅｄ　ｇｒｏｕｐ　ｗａｓ　ｇｉｖｅｎ
ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｏｆ　Ｐａｎａｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍａ．Ａｆｔｅｒ
ｐｒｅｔｒｅａｔｉｎｇ　ｆｏｒ　７ｄａｙｓ，ｔｈｅ　ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ　ｉｓｃｈｅｍｉａ
ｍｏｄｅｌ　ｗａｓ　ｉｎｄｕｃｅｄ　ｂｙ　ｌｉｇａｔｉｎｇ　ｔｈｅ　ｌｅｆｔ　ａｎｔｅｒｉｏｒ
ｄｅｓｃｅｎｄｉｎｇ　ｃｏｒｏｎａｒｙ　ａｒｔｅｒｙ　ｉｎ　ｒａｔｓ．Ａｆｔｅｒ　ｌｉｇａ－
ｔｉｎｇ　３０ｍｉｎ，ａｎｄ　ｔｈｅｎ　ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｎｇ　２４ｈ．Ｔｈｅ　ｉｎ－
ｃｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ　ａｒｒｈｙｔｈｍｉａ　ａｔ　ｔｈｅ　ｂｅｇｉｎｉｎｇ　３０ｍｉｎ，
ａｎｄ　ｈｅｍｏｄｙｎａｍｉｃ　ｐａｒａｍｅｔｅｒｓ　ａｆｔｅｒ　２４ｈ ｗｅｒｅ
ｍｅａｓｕｒｅｄ；Ｔｈｅ　ｓｅｒｕｍ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ＬＤＨ，ＣＫ，
ＳＯＤ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＣＡＴ　ａｎｄ　ＭＤＡ　ｗｅｒｅ　ａｌｓｏ　ｍｅａｓ－
ｕｒｅｄ；Ｒｅａｌ－ｔｉｍｅ　ＰＣＲ　ｗａｓ　ａｐｐｌｉｅｄ　ｔｏ　ｄｅｔｅｃｔ　ｔｈｅ
ｍＲＮＡ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ＳＯＤ１－ＳＯＤ３，ＧＰＸ１ａｎｄ
ＣＡＴ　ａｎｔｉｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｇｅｎｅｓ，ｔｈｅ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ
Ｎｒｆ２ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｈｙａｌｏｍｉｔｏｍｅ　ａｎｄ　ｎｕｃｌｅｕｓ　ｗｅｒｅ
ｄｅｔｅｃｔｅｄ　ｂｙ　Ｗｅｓｔｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ．ＲＥＳＵＬＴＳ：Ｔｏｔａｌ
ｓａｐｏｎｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｐａｎａｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ（１００，２００
ｍｇ／ｋｇ）ｍｉｇｈｔ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｉｎｃｉｄｅｎｃｅ　ｏｆ
ａｒｒｈｙｔｈｍｉａ，ｉｍｐｒｏｖｅ　ｈｅａｒｔ　ｆｕｎｃｔｉｏｎ　ａｎｄ　ｈｅａｒｔ
ｈｉｓｔｏｍｏｒｐｈｐｏｌｇｙ，ｄｅｃｒｅａｓｅ　ｔｈｅ　ｌｅｖｅｌｓ　ｏｆ　ｓｅｒｕｍ
ＬＤＨ，ＣＫ，ＭＤＡ　ａｎｄ　ｉｎｆａｒｃｔ　ｓｉｚｅ，ｉｍｐｒｏｖｅ　ｔｈｅ
ａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ　ｏｆ　ＳＯＤ，ＧＳＨ－Ｐｘ，ＣＡＴ（Ｐ＜０．０５，Ｐ
＜０．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ）；Ｍｏｒｅｏｖｅｒ，ｔｈｅ　ｍＲＮＡ
ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　ＳＯＤ１－ＳＯＤ３，ＣＡＴ　ａｎｄ　ＧＰＸ１ｉｎ
ｔｈｅ　ｍｙｏｃａｒｄｉａｌ　ｔｉｓｓｕｅｓ　ｄｅｃｒｅａｓｅｄ　ｒｅｍａｒｋａｂｌｙ　ｉｎ
ｔｈｅ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ，ｗｈｉｌｅ　ｗｅｒｅ　ｕｐ－ｒｅｇｕｌａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｏ－
ｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｐａｎａｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ－ｐｒｅ－
ｔｒｅａｔｍｅｎｔ　ｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＜０．０５，Ｐ＜０．０１，ｒｅｓｐｅｃ－
ｔｉｖｅｌｙ），ｔｈｅ　ｐｒｏｔｅｉｎ　ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｓ　ｏｆ　Ｎｒｆ２ｉｎ　ｔｈｅ
ｎｕｃｌｅｕｓ　ｗｅｒｅ　ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ　ｉｎｃｒｅａｓｅｄ　ｃｏｍｐａｒｅｄ
ｗｉｔｈ　ｍｏｄｅｌ　ｇｒｏｕｐ（Ｐ＜０．０１，ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ），ｂｕｔ
ｉｔ　ｄｉｄ　ｎｏｔ　ｉｎｆｌｕｅｎｃｅ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｃｅｌ　ｎｕｃｌｅｕｓ　ａｍｏｎｇ　ｔｈｅ
ｇｒｏｕｐ．ＣＯＮＣＬＵＳＩＯＮ：Ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｐａｎａ－
ｃｉｓ　ｍａｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ　ｅｘｅｒｔｓ　ｂｅｎｅｆｉｃｉａｌｙ　ｃａｒｄｉｏｐｒｏ－
ｔｅｃｔｉｖｅ　ｅｆｆｅｃｔｓ　ｏｎ　ＭＩ／ＲＩ　ｒａｔｓ，ｍａｉｎｌｙ　ａｃｔｉｖａｔｉｎｇ
ａｎｔｉ－ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｐａｔｈｗａｙ　ｏｆ　Ｎｒｆ２ａｎｄ　ｏｐｐｏｓｉｎｇ　ｌｉｐ－
ｉｄ　ｐｅｒｏｘｉｄａｔｉｏｎ．
ＫＥＹ　ＷＯＲＤＳ　Ｔｏｔａｌ　ｓａｐｏｎｉｎ　ｆｒｏｍ　Ｐａｎａｃｉｓ　ｍａ－
ｊｏｒｉｓ　ｒｈｉｚｏｍｅ；Ｍｙｏｃａｒｄｉｕｍ　ｉｓｃｈｅｍｉａ－ｒｅｐｅｒｆｕｓｉｏｎ
ｉｎｊｕｒｙ； Ｎｒｆ２； Ｏｘｉｄａｔｉｖｅ　ｓｔｒｅｓｓ； Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ
ｍｅｃｈａｎｉｓｍ
本文编辑：储冀汝
·２３２１· Ｃｈｉｎ　Ｊ　Ｃｌｉｎ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌ　Ｔｈｅｒ　２０１３Ｎｏｖ；１８（１１）