全 文 ：山茱萸提取物对脑梗死大鼠大脑皮层
一氧化氮与核转录因子κΒ表达的影响
李春阳１），李 林１，李宇航２，艾厚喜１，张 丽１
（１．首都医科大学 宣武医院，北京１０００５３；２．首都医科大学 药理教研室，北京 １０００５４）
［摘要］ 目的：观察光化学法诱导脑梗死大鼠大脑皮层一氧化氮（ＮＯ）与核转录因子κΒ（ＮＦκΒ）含量的变化，
以及中药山茱萸提取物（主要成分为环烯醚萜苷）对其的影响。方法：大鼠预先灌胃给药７ｄ后，制作光化学致脑梗
死模型，采用分光光度法检测脑组织中ＮＯ和一氧化氮合酶（ＮＯＳ）的变化，免疫组织化学方法检测 ＮＦκΒ阳性细胞
数量的变化。结果：模型组与对照组相比，出现了明显的梗死灶，脑皮层ＮＯ含量与ＮＯＳ活性增加，ＮＦκΒ阳性细胞
数量增多。与模型组相比，山茱萸提取物能明显减小脑梗死面积，降低脑皮层 ＮＯ含量和 ＮＯＳ活性，并显著减少
ＮＦκΒ阳性细胞数量。结论：山茱萸环烯醚萜苷可通过影响脑内ＮＯ，ＮＦκΒ的水平发挥对脑梗死的治疗作用。
［关键词］ 山茱萸；环烯醚萜苷；光化学法；脑梗死；一氧化氮；ＮＦκΒ
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）２１１６６７０４
［收稿日期］ ２００５０３１７
［基金项目］ 国家重点基础研究发展计划（９７３计划）项目
（２００３ＣＢ５１７１０４）；北京市科技计划项目（Ｄ０２０４００３００００３１）；北京市自
然科学基金重大项目（７０５０００１）；北京市中医药重点学科项目（２００５）
［通讯作者］ 李林，Ｔｅｌ：（０１０）６３１３２７７９，Ｆａｘ：（０１０）６３０４２８０９，Ｅ
ｍａｉｌ：ｌｉｎｌｉ９７＠ｈｏｔｍａｉｌ．ｃｏｍ
山茱萸具有补肝益肾、收敛固涩的功效。有文
献报道山茱萸可影响免疫系统并对炎症反应有抑制
作用，是一种免疫抑制剂［１］。本室的研究工作证实
山茱萸提取物（主要含环烯醚萜苷）能有效地提高大
鼠的脑血流量，在蛋白磷酸酶抑制剂冈田酸（ＯＡ）致
神经细胞损伤模型中对细胞起到有效的保护作用。
脑梗死在我国发病率较高且有上升趋势。应用光化
学法可制备脑梗死动物模型，其原理为玫瑰红在光
照射下能产生并释放属于自由基的单链氧，使血管
内皮细胞不饱和脂肪酸发生脂质过氧化反应，造成
严重的血管内皮损伤，直接损害血管内皮的完整性，
使血小板黏附于血管内皮表面并发生释放反应，激
发凝血过程，导致血管内血栓形成，使得短时间内光
照区即可形成局限性梗死灶［２］。本研究利用光化学
反应致脑梗死模型探讨山茱萸提取物对一氧化氮
（ＮＯ）与核转录因子（ＮＦκΒ）含量的影响。
１ 材料与方法
１１ 药品与试剂 山茱萸提取物由宣武医院药物
研究室自行从山茱萸中提取，山茱萸生药加水煮沸
后将药液滤出，减压浓缩，与 ９５％乙醇充分混匀后
静置１周后过滤，将滤液再次减压浓缩并去除乙醇
后过ＨＰ２０大孔树脂色谱柱，并用乙醇洗脱，最后将
洗脱液进行减压浓缩和真空干燥，得到环烯醚萜苷
含量＞５４％的成品，提取率为１９５％。Ｆｏｌｉｎ酚购自
北京鼎国生物技术有限责任公司。玫瑰红（分子质
量１０１７６５，温州市东升化工试剂厂），一氧化氮
（ＮＯ）测试盒、一氧化氮合酶（ＮＯＳ）测试盒购自南京
建成生物技术有限公司。兔抗大鼠多克隆ＮＦκΒ抗
体购自北京中山生物技术有限公司。
１２ 仪器 ＳＮ－２Ｎ型大鼠脑立体定位仪（日本），
ＬＴ－Ｂ冷光源透照仪（河北泊头医疗器械厂），
ＷＦＺ８００－Ｄ３Ｂ型紫外可见分光光度仪（北京瑞利分
析仪器公司），６２０－Ｅ型冷冻切片机（英国山盾公
司），ＢＨ－２型光学显微镜（Ｏｌｙｍｐｕｓ日本），Ｍｉｃｒｏｆｕｇｅ
低温离心机（ＢＥＣＫＭＡＮ美国），ＰＴ１６００Ｅ高速电动匀
浆器（ＰＯＬＹＴＲＯＮＡｇｇｒｅｇａｔ瑞士）。
１３ 动物与分组 雄性 ＳＤ大鼠，体重２４０～２８０ｇ，
ＳＰＦ级，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。
根据ＳＰＳＳ统计软件产生随机数字后随机分为以下
５组：正常对照组、脑梗死模型组、山茱萸提取物大
剂量、中剂量和小剂量治疗组（分别为干粉 １８０，６０，
２０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）。每天灌胃给药１次，对照组和模
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型组给予相同容积的生理盐水。连续给药７ｄ后造
模。
１４ 光化学诱导脑梗死模型的制备 参照 Ｗａｔｓｏｎ
的方法［２］，以１０％的水合氯醛溶液４００ｍｇ·ｋｇ－１经腹
腔缓慢注射麻醉大鼠，颅顶部作 １～１５ｃｍ正中切
口，用１０％的双氧水清洗创口至颅骨清晰暴露。在
右侧股内侧作一１ｃｍ小切口，暴露股静脉，将５％玫
瑰红溶液以２ｍＬ·ｋｇ－１的剂量自股静脉缓慢注射入
血（注射时间不短于 １５ｍｉｎ）后将动物固定于大鼠
脑立体定位仪上，对照组则只注射玫瑰红溶液而不
给予光照。用一圆片（含一直径约２ｍｍ的圆孔）覆
盖于暴露的颅骨上，将孔对准照射部位，矢状缝右侧
旁开２０ｍｍ，前囟后２０ｍｍ，将单色冷光源的光导
纤维端口对准圆孔，紧贴但注意避免压迫颅骨。在
注射玫瑰红５ｍｉｎ后打开单色冷光源，准确照射 ２０
ｍｉｎ。照射完毕后，消毒并小心缝合头皮切口，从脑
立体定位仪上取下大鼠，并使其采取侧卧位送回鼠
笼。
１５ 动物的处死和取材 ２４ｈ后将大鼠按４００ｍｇ
·ｋｇ－１剂量腹腔注射１０％水合氯醛麻醉大鼠。动物
麻醉成功后，断头处死，快速取出全脑，冰浴分离出
大脑皮层，置液氮中速冻后保存于－７０℃冰箱以备
检测。其余大鼠使其仰卧于平台上，伸展固定四肢，
开胸腹充分暴露心脏和肝脏。剪开左侧心尖部，插
导管于左心室并固定，同时剪开右心耳。快速灌注
温生理盐水约２００ｍＬ至肝脏完全变白，右心耳流出
澄清液体后，换用 ４％多聚甲醛固定液灌注约 １５０
ｍＬ至大鼠僵硬，至大鼠肝脏变硬肢体僵直，即固定
完成。然后断头，完整取出鼠脑后投入含３０％蔗糖
的多聚甲醛溶液中固定。至脑下沉后，即可行冰冻
切片。
１６ 大鼠脑皮层 ＮＯ含量和 ＮＯＳ活性测定 将大
鼠患侧的皮层组织在电子天平上称重后，用高速电
动匀浆器在低温下制成 １０％的组织匀浆液。然后
置于低温高速离心机内，１２０００ｒ·ｍｉｎ－１离心３０ｍｉｎ。
取上清液分装成２管，一管用于ＮＯ和 ＮＯＳ的测定，
另一管用于Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔｉｎｇ的测定。采用Ｆｏｌｉｎ酚法
进行蛋白定量后，用分光光度法严格按照 ＮＯ和
ＮＯＳ测试盒说明书进行检测。脑皮层 ＮＯ含量以
μｍｏｌ·ｇ
－１蛋白表示，ＮＯＳ活性以Ｕ·ｍｇ－１蛋白表示。
１７ 大鼠脑皮层 ＮＦκΒ含量测定 每组选择 ３只
动物，每只动物选 ３张冰冻切片（厚 ４０μｍ），ＰＢＳＴ
洗，５ｍｉｎ×３次；用 ３％ Ｈ２Ｏ２室温孵育 １０ｍｉｎ，去除
内源性过氧化物酶活性；ＰＢＳＴ洗，５ｍｉｎ×３次；用
８％～１０％封闭羊血清孵育３０ｍｉｎ，以减少非特异性
吸附；吸出封闭血清，加入按１∶３００稀释好的兔抗大
鼠多克隆ＮＦκΒ一抗，４℃孵育过夜；吸出一抗，ＰＢ
ＳＴ洗，５ｍｉｎ×３次；加生物素化标记抗兔二抗（稀释
度为１∶３００），室温孵育１ｈ；ＰＢＳＴ洗，５ｍｉｎ×３次；加
辣根过氧化物酶标记链霉卵白素三抗（稀释度为１∶
３００），室温孵育１ｈ；ＰＢＳＴ洗，５ｍｉｎ×３次；用ＤＡＢ工
作液显色２ｍｉｎ左右，镜下控制染色程度；自来水终
止显色反应，裱片，晾干；梯度乙醇脱水，二甲苯透
明，中性树胶封片，显微镜下观察。用 ＩｍａｇｅｐｒｏＰｌｕｓ
图像分析系统进行量化分析。
１８ 统计学分析方法 全部数据以珋ｘ±ｓ表示，组
间样本均数比较应用ＯｎｅｗａｙＡＮＯＶＡ分析。
２ 结果
２１ 山茱萸提取物对模型大鼠脑梗死面积的影响
对照组大鼠脑皮层未见有任何异常改变；模型组
大鼠在右侧皮层发现有明显的梗死区，范围较大且
颜色较深；而山茱萸提取物小、中、大剂量组大鼠皮
层梗死区与模型组相比，颜色浅且梗死区范围较小。
２２ 山茱萸提取物对脑梗死模型大鼠脑皮层 ＮＯ
含量和 ＮＯＳ活性的影响 结果显示，模型组 ＮＯ含
量和ＮＯＳ活性较对照组明显升高（Ｐ＜００５）；山茱
萸提取物大剂量组和中剂量组能明显减少 ＮＯ的含
量（Ｐ＜００５）；山茱萸提取物各剂量组均能明显减
少ＮＯＳ活性的增高（Ｐ＜００５）（表１）。
表１ 山茱萸提取物对脑梗死模型大鼠脑皮层ＮＯ
含量和ＮＯＳ活性的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝９）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
ＮＯ含量
／μｍｏｌ·ｇ
－１
ＮＯＳ活性
／Ｕ·ｍｇ－１
正常对照 ０．７０±０．３２１） １．４４±０．４１２）
脑梗死模型 １．０９±０．６８ １．９６±０．３９
山茱萸提取物 １８０ ０．６２±０．３４１） １．２８±０．２６２）
６０ ０．６８±０．０７１） １．５４±０．３５１）
２０ ０．８３±０．１３ １．５６±０．２５１）
注：与模型组相比１）Ｐ＜０．０５，２）Ｐ＜０．０１（表２同）
２３ 山茱萸提取物对脑梗死模型大鼠脑皮层 ＮＦ
κΒ表达的影响 每组随机选取３只大鼠，每只动物
取相同位置３张脑片，在４倍物镜下拍摄照片并观
察，可见模型组脑皮层较对照组 ＮＦκΒ阳性染色细
胞数量增多；山茱萸提取物用药组与模型组相比较，
阳性细胞数量减少。用 ＩｍａｇｅｐｒｏＰｌｕｓ图像分析系
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统进行量化分析可以发现，模型组 ＮＦκΒ阳性细胞
计数和总面积比正常对照组明显增高（Ｐ＜００５）；
而山茱萸提取物给药组ＮＦκΒ阳性细胞计数明显减
少（Ｐ＜００１），大剂量组和中剂量组阳性细胞总面
积明显低于模型组（Ｐ＜００５）（表２）。
表２ 山茱萸提取物对脑梗死模型大鼠脑皮层
ＮＦκΒ表达的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝９）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
阳性计数 阳性细胞总面积
正常对照 １２．２４±１２．１１２） ０．３７±０．５９２）
脑梗死模型 １６０．０６±１０７．５６ ５．１１±３．４８
山茱萸提取物 １８０ ２１．７１±３０．０４２） ０．９７±１．３８２）
６０ ２９．１５±３１．２８２） ２．２０±２．５９１）
２０ ８３．６３±５８．６３２） ３．８３±２．７８
３ 讨论
本研究采用分光光度法和免疫组织化学法，研
究光化学致脑梗死动物模型中的 ＮＯ含量，ＮＯＳ活
性以及ＮＦκΒ的表达。结果表明缺血 ２４ｈ后，ＮＯＳ
活性增强，合成和释放的 ＮＯ增多。据文献报道，在
多种脑缺血模型，如大脑中动脉线栓所致的局灶性
缺血模型、四血管结扎所致的全脑缺血模型中，都存
在有ＮＯ含量的增加［３］，这与本研究中的结果吻合。
ＮＦκΒ是一种广泛存在于真核细胞内，能将信息从
胞浆传至胞核并引起相应基因表达的重要转录因
子［４］，它在机体免疫和炎症反应的基因转录过程中
具有重要的调控作用，可以通过调控多种凋亡相关
基因的表达引起神经细胞的损伤，并促进凋亡的发
生。由于大量的ＮＯ可以激活ＮＦκΒ，因此损伤侧皮
层缺血区的ＮＦκΒ表达较正常对照组明显增强。
作为一种传统中药，山茱萸在祖国医学中被广
泛用作补肾良药。也有专家将其用于急救。张锡纯
认为“萸肉救脱之功，较参、术、芪更胜”，“救脱之药
当以萸肉为第一”［４］。现代医学证明山茱萸总苷部
分无论在体内还是体外，均能明显抑制淋巴细胞转
化、淋巴因子激活的杀伤细胞（ＬＡＫ细胞）生成和体
内白细胞介素２的产生，是一种免疫抑制剂［５］。本
研究发现山茱萸提取物（主要含环烯醚萜苷）在光化
学致脑梗死大鼠模型上明显减小梗死面积，其作用
机制可能为抑制脑内 ＮＯＳ的激活，降低 ＮＯ在脑内
的含量并抑制 ＮＦκΒ的表达。此外，由于光化学致
脑梗死大鼠模型的原理与自由基增高、血管内皮损
伤和血栓形成有关，山茱萸提取物亦可能抑制这些
病理变化。上述研究结果表明山茱萸环烯醚萜苷对
防治脑梗死具有良好的应用前景和开发意义。
［参考文献］
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疫抑制作用．中国天然药物，２００４，２（１）：５０
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［４］ 李公文．张锡纯运用山茱萸肉治疗脱证的经验．中国中医急
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ＥｆｅｃｔｓｏｆｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＣｏｒｎｕｓｏｆｉｃｉｎａｌｉｓｏｎｎｉｔｒｃｏｘｉｄｅａｎｄＮＦκΒ
ｉｎｃｏｒｔｅｘｏｆｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｒａｔｍｏｄｅｌ
ＬＩＣｈｕｎｙａｎｇ，ＬＩＬｉｎ，ＬＩＹｕｈａｎｇ，ＡＩＨｏｕｘｉ，ＺＨＡＮＧＬｉ
（１．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＸｕａｎＷｕＨｏｓｐｉｔａｌｏｆＣａｐｉｔａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５３，Ｃｈｉｎａ；
２．ＤｅｐａｒｔｍｅｎｔｏｆＰｈａｒｍａｃｏｌｏｇｙ，ＣａｐｉｔａｌＵｎｉｖｅｒｓｉｔｙｏｆＭｅｄｉｃａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ１０００５４，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：Ｔｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ（ＮＯ）ａｎｄｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢ（ＮＦκΒ）ｉｎｔｈｅｃｏｒｔｅｘｏｆ
ｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｒａｔｉｎｄｕｃｅｄｂｙｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｃａｌｒｅａｃｔｉｏｎ，ａｎｄｓｔｕｄｙｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｅｘｔｒａｃｔｆｒｏｍＣｏｒｎｕｓｏｆｉｃｉｎａｌｉｓ（ｗｈｏｓｅｍａｉｎｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｉｓｉｒｉ
ｄｏｉｄｇｌｙｃｏｓｉｄｅ）ｉｎｔｈｅｃｏｕｒｓｅｏｆｄｉｓｅａｓｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ａｆｔｅｒｒａｔｓｗｅｒｅｆｅｄｗｉｔｈｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｄｒｕｇｓｆｏｒ７ｄａｙｓ，ｔｈｅｍｏｄｅｌｏｆｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｗａｓ
ｉｎｄｕｃｅｄ．ＳｐｅｃｔｒｏｐｈｏｔｏｇｒａｐｈｙａｎｄｉｍｍｕｎｏｈｉｓｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙｗｅｒｅｕｓｅｄｔｏｄｅｔｅｃｔｔｈｅｃｈａｎｇｅｏｆｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＮＯ，ＮＯＳａｎｄｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎｏｆＮＦκΒ
ｉｎｔｈｅｃｏｒｔｅｘ．Ｒｅｓｕｌｔ：Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｄｉｓｔｉｎｃｔｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｗａｓｖｉｓｉｂｌｅｉｎｔｈｅｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ａｎｄｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＮＯ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆ
ＮＯＳａｎｄｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｅｌｎｕｍｂｅｒｏｆＮＦκΒｗｅｒｅｉｎｃｒｅａｓｅｄｏｂｖｉｏｕｓｌｙ．Ｃｏｍｐａｒｅｄｗｉｔｈｍｏｄｅｌｇｒｏｕｐ，ｔｈｅｅｘｔｒａｃｔｏｆＣｏｆｉｃｅｉｎａｌｉｓｄｅｃｒｅａｓｅｄｔｈｅ
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Ｎｏｖｅｍｂｅｒ，２００５
ａｒｅａｏｆｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ，ｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＮＯ，ｔｈｅａｃｔｉｖｉｔｙｏｆＮＯＳａｎｄｔｈｅｐｏｓｉｔｉｖｅｃｅｌｎｕｍｂｅｒｏｆＮＦκΒ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｈｅｉｒｉｄｏｉｄｇｌｙｃｏｓｉｄｅｏｆ
ＣｏｆｉｃｉｎａｌｉｓｍａｙｈａｖｅｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌｅｆｅｃｔｏｎｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎｔｈｒｏｕｇｈｒｅｇｕｌａｔｉｎｇｔｈｅｃｏｎｔｅｎｔｏｆＮＯａｎｄＮＦκΒ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ｃｏｒｎｕｓｏｆｉｃｉｎａｌｉｓ；ｉｒｉｄｏｉｄｇｌｙｃｏｓｉｄｅ；ｐｈｏｔｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ；ｃｅｒｅｂｒａｌｉｎｆａｒｃｔｉｏｎ；ｎｉｔｒｉｃｏｘｉｄｅ；ｎｕｃｌｅａｒｆａｃｔｏｒｋａｐｐａＢ
［责任编辑 方文贤］
［收稿日期］ ２００５０１１０
［基金项目］ 安徽教育厅自然科学基金项目 （２００５ｋｊ１６０）
［通讯作者］ 宁康健，Ｔｅｌ：（０５５０）６７３３１１３，Ｆａｘ：（０５５０）６７３３１６５，
Ｅｍａｉｌ：ｎｋｊ２１０＠ｓｏｈｕ．ｃｏｍ
黄芪对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响
宁康健，阮祥春，吕锦芳，程郁昕
（安徽科技学院，安徽 凤阳 ２３３１００）
［摘要］ 目的：研究黄芪水煎剂（ＨＱＤ）对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬能力的影响。方法：取１８～２２ｇ昆明小鼠１００
只，随机分１０组，每组１０只。分别为对照组，灌服不同剂量黄芪水煎剂组，同剂量不同给药途径组，黄芪与地塞米
松并用组。各处理组每天给药１次，连续６ｄ。结果：在不同剂量灌服给药组中，高、中、低剂量试验组吞噬百分率和
吞噬指数均高于对照组（Ｐ＜００１），其中以高剂量组效果最好；在不同给药途径组中，吞噬百分率以腹腔注射的效
果优于皮下注射和灌服（Ｐ＜００１），但各组间的吞噬指数差异不明显（Ｐ＞００５）；在黄芪与地塞米松并用组中，黄芪
能明显对抗地塞米松的免疫抑制作用（Ｐ＜００１）。结论：黄芪不同剂量、不同给药途径给药对小鼠腹腔巨噬细胞吞
噬能力均有不同程度的增强作用，并能对抗地塞米松对其抑制作用。
［关键词］ 黄芪；小鼠；腹腔巨噬细胞；吞噬能力
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）２１１６７００３
黄芪为豆科多年生草本植物蒙古黄芪或膜荚黄
芪的根。中医认为其性甘，微温，归脾、肺经，具有补
气升阳、益卫固表、托毒生肌、利水退肿之功效［１］。
临床上主要治疗脾虚证、汗证、脾肺气虚证、气血两
虚证、疮疡、水肿等。近年来的研究发现黄芪含有多
种生物活性成分，如多糖、蛋白、生物碱、氨基酸、黄
酮类、苷类等［２］，一些活性成分有促进抗体生成，诱
导干扰素产生和促进免疫反应的作用，其中以黄芪
多糖（ＡＰＳ）的研究为多。本试验利用生黄芪制成黄
芪水煎剂，通过不同剂量、同剂量不同给药途径及黄
芪与地塞米松并用对比试验就黄芪对免疫效果的影
响作进一步的研究。
１ 材料
１１ 动物 昆明种健康小鼠，体重 １８～２２ｇ，雌雄
各半，由河南医科大学试验动物中心提供，合格证号
为豫医试动准字第 ４１０１１７号。
１２ 仪器 ７５６型分光光度计（上海第三分析仪器
厂）；ＴＤＬＳＯ－２Ｂ台式离心机（上海安亭科学仪器
厂）；生物显微镜（ＳＬ－ＢＬ－Ｓ－２）；显微摄影（日本
奥林巴斯显微摄影，ＣＨ３０－３１３Ｎ附自动摄影）等。
１３ 药物与试剂 生黄芪购于凤阳药材公司，经安
徽科技学院中药实验室周宗运副教授鉴定为蒙古黄
芪 Ａｓｔｒａｇａｌｕｓｍｅｍｂｒａｎａｃｅｕｓ（Ｆｉｓｈ）Ｂｅｇｖａｒｍｏｎｇｈｏｌｉｃｕｓ
（Ｂｅｇ）Ｈｓｉａｏ的干燥根片。地塞米松磷酸钠注射液
（天津药业，批号０２００４２），瑞氏染液由基础医学实验
室提供。
黄芪水煎剂制备：称取黄芪 ４００ｇ，清洗后加入
适量水浸泡３０ｍｉｎ，第１次煎９０ｍｉｎ，第２次６０ｍｉｎ，
第３次３０ｍｉｎ，合并３次滤液，用２０％的氢氧化钠溶
液调节ｐＨ为７０，将滤液浓缩后离心１０ｍｉｎ（４０００ｒ
·ｍｉｎ－１），取上清液定量至含生药１ｇ·ｍＬ－１的黄芪水
煎剂，装瓶消毒备用［３］。
黄芪多糖的测定［４］：取在 １００℃干燥至恒重的
无水葡萄糖 ０１ｇ，精密称定，置 １００ｍＬ容量瓶中，
加水溶解并稀释至刻度，摇匀即得对照品。精密量
取本品 ５０ｍＬ（如有沉淀，需先加热溶解，放冷）置
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Ｖｏｌ３０，Ｉｓｓｕｅ ２１
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