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The effect of Kanglaite injection(KLT) on the proliferation and telomerase activity of rat mesangial cells

康莱特对系膜细胞增殖及端粒酶活性影响的研究



全 文 :康莱特对系膜细胞增殖及端粒酶活性影响的研究
胡 颖 3 o梁 华 o龚维坤 o许则峰 o邹庆玲
k浙江大学 医学院 附属第二医院 o浙江 杭州 vtsss| l
≈摘要  目的 }探讨康莱特注射液kŽ×l对大鼠系膜细胞k ≤l增殖及端粒酶活性的影响 ∀方法 }采用活细胞
计数法检测不同浓度 Ž×对 ≤ 增殖的影响 o采用 ××法检测  ≤ 在 Ž× oŒ2tk白细胞介素2tl分别及共同刺激下
的增殖情况 o采用端粒重复序列扩增2酶联免疫吸附法及聚丙烯酰胺凝胶电泳银染法进行端粒酶活性定量及定性
检测并作相关统计学检验 ∀结果 }Ž×抑制  ≤增殖 o伴随端粒酶活性降低 ∀Œ2t刺激 ≤增殖 o伴随端粒酶活性升
高 ~两者先后共同作用 o抑制  ≤增殖 o抑制端粒酶活性 ∀结论 }康莱特对系膜细胞的增殖和端粒酶表达均有抑制作
用 o并可干预 Œ2t的刺激效应 o对防治 ≤ 增殖相关的肾小球肾炎可能有应用价值 ∀
≈关键词  康莱特注射液 ~系膜细胞 ~端粒酶
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsy2swxs2sw
≈收稿日期  ussw2sy2ux
≈基金项目  浙江省中医药管理局基金项目kussv≤s|yl
≈通讯作者  3 胡颖 oר¯ }ksxztl{zu|xuzz o ∞2°¤¬¯}«¼2§²¦·²µƒ
tyv1¦²°
康莱特kŽ×l是一种应用于临床的抗肿瘤中药
注射液 o具有抑制肿瘤细胞增殖 o双向调节免疫功能
的特点 ∀肾小球肾炎的免疫学发病机理已被公认 o
肾固有细胞大量增殖是病情进展最终导致肾纤维化
的重要环节 ∀本研究观察了康莱特和 Œ2t对大鼠
系膜细胞增殖及细胞端粒酶活性表达的影响 o旨在
从细胞水平探索康莱特治疗肾炎的前景 ∀
1 材料
111 药品 Ž× 注射液kts h o主要成分注射用薏
苡仁油l }杭州康莱特药业有限公司 o批号 usstsysx ∀
112 细胞 大鼠肾脏系膜细胞株k≤l由上海第二
军医大学长征医院梅长林教授惠赠 ∀
113 主要试剂 白细胞介素2tΒkŒ2tΒl购自北京邦
定泰克公司 ~⁄∞ 干粉为美国 ‹¼¦¯²±公司产品 ~台
盼蓝购自上海生物工程公司 ~×× 购自上海华美生
物工程公司 ~ר¯²°¨ µ¤¶¨2°≤• ∞Œ≥„试剂盒购自德国
•²¦«¨ 公司 ~…¬²2•¤§ ⁄ ≤ 蛋白质检测试剂盒购自美
国 …¬²2•¤§公司 ∀
2 方法
211 活细胞计数法检测 Ž× 对 ≤ 增殖的影响
取对数生长期细胞 o接种于 uw孔培养板 o设 v复孔 o
每孔 s1x ≅ tsw#°pt o加入不同浓度 Ž×ks ots oxs o
tss ouss owss ˏ# °ptl ovz ε 孵育 o每隔 uw «取一
培养板经洗涤 !消化 o加 s1w h台盼蓝 o计数台盼蓝
拒染的活细胞数 ∀细胞存活率k h l € k用药孔活细
胞数r无药对照孔活细胞数l ≅ tss h ∀绘制药物对
数浓度与细胞存活率的相关曲线 o据直线方程计算
Ž×的半数抑制浓度kŒ≤xsl ∀
212 ××法检测 Ž× oŒ2t对 ≤ 增殖的影响 分
组 }空白组k仅加 ⁄∞ 液l ~Œ2t组k含 ts ±ª#°pt
Œ2t的 ⁄∞ 液l oŽ× 组k含 tss Λª#°ptŽ× 的
⁄∞ 液l oŒ2t n Ž× 组k含 ts ±ª# °pt Œ2t 的
⁄∞ 液 oy «后加入 tss Λª#°ptŽ×l oŽ× n Œ2t
组k含 tss Λª#°pt Ž×的 ⁄∞ 液 oy «后加入 ts
±ª#°pt Œ2tl ∀ ≤接种于 |y孔培养板 o设 v复孔 o
每孔 s1x ≅ tsw#°pt o每隔 uw «取一培养板 o洗涤 o
加 t °ª#°pt ×× 工作液 ovz ε 温育 w «o弃上清 o
加 txs ˏ⁄≥’ o振荡溶解结晶 o置 xzs ±°波长检测
吸光度值kΑl ∀
213 ו „°2∞Œ≥„法定量检测端粒酶活性 操作按
照试剂盒说明书进行 ∀细胞分组同上 o每组接种 v
瓶 o分别于孵育 uw ow{ ozu «收集细胞再裂解 o裂解液
按 …¬²2•¤§⁄ ≤ 蛋白质检测试剂盒说明书定量后 o按
x Λª#xs ˏpt反应体系进行引物延伸 !°≤• 扩增 }|w
ε 预变性 o|w ε vs ¶变性 oxs ε vs ¶退火 ozu ε |s
¶延伸 o共 vs循环 o°≤• 产物经包被 !变性 !杂交 !酶
联抗体 !底物反应后 o测定 wxs ±°和 y|s ±°波长处
Α值 ∀差值 ϖ Α€ Αwxs p Αy|s代表细胞端粒酶活性 ∀
214 聚丙烯酰胺凝胶电泳法定性检测端粒酶活性
#sxw#
第 vs卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ y
¤µ¦«oussx
取剩余扩增产物浓缩 o经 tu h聚丙烯酰胺凝胶电
泳和银染制膜 o以出现扩增条带相差 y ¥³的数个
×ׄŠŠŠ的 ⁄‘„梯度片段为端粒酶阳性 ∀
215 统计学分析 应用 ≥°≥≥ts1s软件包 o组间细
胞数或 Α值的比较采用方差分析 θ检验 o组间端粒
酶活性值比较采用 τ检验 o相关性检验采用直线相
关分析 ∀
3 结果
311 不同浓度 Ž×对 ≤细胞数的影响 uw «后 o
Ž×浓度越高 o ≤ 细胞数越少 o w{ « ≤ 细胞存
活率与 Ž×浓度对数呈明显负相关 kψ€2s1xvxξ n
t1x|x o ρ€ s1|x{l o提示 Ž× 抑制 ≤ 细胞增殖呈
浓度依赖性 ∀且在 uw ∗ tus «o时间越长 o Ž× 的
Œ≤xs值越小 o即 Ž× 的抑制作用还呈时间依赖性
k图 tl ∀
图 t 不同浓度 Ž×对 ≤细胞数的影响
312 Ž× o Œ2t对 ≤ 增殖的影响 w{ «后 Œ2t
组 ≤ 增殖高于对照组 o而 Ž×组 ! Œ2t n Ž×组
和 Ž× n Œ2t组 ≤ 增殖受抑制 o与对照组均有
显著性差异 ∀ ×× 法标准曲线 k ψ € s1tt| ξ n
s1s{t o ρ€ s1||vl o细胞数与 Α值直线相关良好
k表 tl ∀
表 t Ž× oŒ2t单独及联合作用对 ≤增殖的影响 kcξ ? σl
组 别 Αs « uw « w{ « zu « |y «
空白 s1twy ? s1stt s1usz ? s1szv s1xwz ? s1sxt s1||y ? s1tvx t1u|| ? s1stt
Œ2t s1tu{ ? s1swu s1u{u ? s1szu s1z|u ? s1sxttl t1u|v ? s1twvul t1xxt ? s1t{zul
Œ2t n Ž× s1tzz ? s1svv s1t{x ? s1suy s1wv| ? s1tt|u ovl s1ysx ? s1tu{t ovl s1|vz ? s1t{st ovl
Ž× s1tu{ ? s1syx s1t{x ? s1svx s1wss ? s1syzt ovl s1wts ? s1sz|t ovl s1yw{ ? s1s{xt ovl
Ž× n Œ2t s1tvz ? s1sy| s1t{y ? s1sxs s1wvx ? s1s|wu ovl s1x|x ? s1sy|t ovl s1|tt ? s1tvut ovl
注 }与空白对照组比较tl Π s1st oul Π s1sx ~与 Œ2t组比较vl Π s1st
313 Ž× oŒ2t刺激下 ≤端粒酶活性定量检测
Œ2t刺激了 ≤端粒酶活性的表达 o Ž× 则显著下
调 ≤端粒酶活性 ~ Œ2t n Ž× 或 Ž× n Œ2t组端
粒酶活性受抑制 o并较 Œ2t组明显降低 k图 ul ∀
图 u Ž×和 Œ2t刺激下  ≤端粒酶活性定量值
与空白对照组比较tl Π  s1st oul Π  s1sx ~ 与 Œ2t 组比较vl
Π s1st
314 Ž× 和 Œ2t刺激下 ≤ 端粒酶活性定性检测
除阴性对照外 o各组均表达一定程度的端粒酶活
性 o康莱特组明显较弱而 Œ2t组较强 k图 vl ∀
图 v Ž×和 Œ2t刺激下 ≤ 端粒酶活性定性结果
t1 阳性对照 ou1 阴性对照 o v ∗ tz1 依次为 Œ2t ! 空白对照 !
Ž× n Œ2t组 ! Œ2t n Ž×组和 Ž×组 uw o w{ o zu «培养后的结

4 讨论
慢性肾小球肾炎中系膜细胞的异常增殖是导致
肾小球硬化的重要环节≈t  o多种细胞因子如 Œ2t
不但刺激系膜细胞增生 o还增强其对其他炎症介质
的敏感性≈u   o进一步加重病变 ∀因而阻断细胞增
殖 ! 抑制炎症介质一直是肾炎治疗领域的热点 ∀康
莱特是我国自行开发研制的中药 o其成分提自薏苡
仁 o具有抗肿瘤细胞增殖 o促进细胞凋亡 o双向调
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ y
¤µ¦«oussx
节免疫系统的特点≈v  ∀而且康莱特不良反应甚少 o
传统的肾炎治疗药物如类固醇激素 ! 免疫抑制剂等
仅能单向抑制免疫功能 o不良反应也较大 o因而探
索 Ž× 对肾脏固有细胞的作用 o对开辟新的治疗
途径有重大意义 ∀本研究观察到 Ž×浓度达 xs ˏ
#°pt表现出抑制 ≤增殖的作用 o浓度达 tss ˏ#
°pt o zu «接近半数抑制 o达 uss ˏ#°pt时细胞
停止生长 o且作用时间可长达 tus «∀即呈一定的
浓度和时间依赖性 } Ž× 药物浓度越高 o作用越
久 o对 ≤的抑制越强 ∀即使在 Œ2t刺激 y «后加
入 Ž× o仍可发现 ≤ 细胞数较空白对照 k Π 
s1sxl 和 Œ2t组 k Π s1stl 显著减少 o提示 Ž×
能阻断Œ2t引起的细胞增殖 ∀若是先加 Ž× o后加
Œ2t o同样可改善 Œ2t单独作用时 ≤ 的过度增殖
kΠ s1stl o提示康莱特可能还有一定的预防增殖
的作用 ∀
端粒酶活性在人的永生化细胞或恶性肿瘤细胞
中普遍存在并表达 o表明这种酶可能是细胞永生化
所必需的 ∀随着研究的深入 o人们发现非永生的 !
正常生理状态下增殖活跃的细胞也可检测到端粒酶
活性 o从而被公认为是一种细胞增殖的标志≈w  o并
在许多良性炎性增殖性疾病如类风湿关节炎≈x  ! 溃
疡性结肠炎≈y 的病变组织中发现了较高的端粒酶活
性表达 ∀端粒酶与慢性肾炎的关系迄今未见报道 ∀
作者曾检测 ys例肾炎患者肾组织脱落细胞 o发现
以系膜增生为主的系膜增生型和系膜毛细血管型肾
炎患者标本端粒酶活性显著高于其他类型 o提示端
粒酶活性可能与系膜细胞增生有关≈z  ∀本研究同步
检测 Ž×或 Œ2t刺激后系膜细胞端粒酶表达 o结
果显示 Ž× 在抑制系膜细胞增殖的同时 o也抑制
了细胞端粒酶活性 o作用于 uw «达高峰 o zu «后
仍显著低于对照组 ~Œ2t的结果则相反 o端粒酶活
性明显上调 ∀而 Œ2t作用 y «后再加 Ž× o同样发
现端粒酶活性被抑制 k Π s1sxl o其机理尚不明
确 ∀有研究证实乳腺癌细胞在 Šur 期端粒酶活性
几乎为零 o在 ≥期则明显高于其他各期≈{  o而康莱
特可阻滞细胞有丝分裂于 Šur 期 o使进入 ≥期的
细胞减少≈v  ∀因而推测康莱特可能通过这一途径干
扰细胞端粒酶表达 o进一步抑制细胞增殖 ∀
综上所述 o康莱特对大鼠肾脏系膜细胞的增殖
和端粒酶表达均有抑制作用 o并可干预 Œ2t的刺
激效应 o为该药临床应用于肾小球疾病的治疗及预
防提供了实验依据 ∀
≈参考文献 
≈t  ⁄²¬× q ׫¨ ¦²±·µ¬¥∏·¬²± ²© °¨ ¶¤±ª¬¤¯ ¦¨¯¯ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ·² ³µ²ªµ¨¶¶¬√¨
ª¯²°¨ µ∏¯¤µ¬±­∏µ¼q ϑ Μεδ Ινϖεστ ousst ow{kt2ul }t q
≈u  ‹∏¤±ª≥ oŽ²±¬¨¦½®²º¶®¬ o≥¦«¨¯¯¬±ª• o ετ αλqŒ±·¨µ¯¨ ∏®¬±2t ¶·¬°2
∏¯¤·¨¶∏± ‘2·¨µ°¬±¤¯r¶·µ¨¶¶2¤¦·¬√¤·¨§ ³µ²·¨¬± ®¬±¤¶¨ ¥¼ ¤± ¤µ¤¦«¬§²2
±¤·¨2§¨ ³¨ ±§¨ ±·°¨ ¦«¤±¬¶° ¬± ° ¶¨¤±ª¬¤¯ ¦¨¯¯¶q Κιδνεψ Ιντ ot||| oxx
kxl }uszs q
≈v  杨 骅 o王仙平 o郑 树 o等 q康莱特抗肿瘤的研究论文集 q杭
州 }浙江大学出版社 ot||{ qtsz q
≈w  ≤¤¶¶¤±§µ¤ ⁄ …o׫²°¤¶• ≠ o°¤·µ¬¦¬¤  o ετ αλqר¯²° ¤¨¶¨ ¤¦·¬√¬2
·¼}¤¥¬²°¤µ®²© §¨¯¯ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±o±²·°¤¯¬ª±¤±··µ¤±¶©²µ°¤·¬²±q Προχ
Νατλ Αχαδ Σχι ΥΣΑot||z o|w }tvyzz q
≈x  ≠∏§²«Žo ¤·¶∏±² ‹ o‘¨½∏®¤× o ετ αλq⁄¬©©¨µ¨±·° ¦¨«¤±¬¶°¶²©¶¼±2
²√¬¤¯ «¼³¨µ³¯¤¶¬¤ ¬± µ«¨ ∏°¤·²¬§ ¤µ·«µ¬·¬¶¤±§ ³¬ª° ±¨·¨§ √¬¯¯²±²§∏¯¤µ
¶¼±²√¬·¬¶} ·«¨ µ²¯¨ ²© ·¨¯²°¨ µ¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ¬± ¶¼±²√¬¤¯ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±q
Αρτηριτισ Ρηευµ ot||| owukwl }yy| q
≈y  ‹²¯½°¤±± ŽoŽ¯∏°³…o • ¬¨¶2Ž¯¨ °°  o ετ αλqר¯²° µ¨¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼¬±
²¯±ª2¶·¤±§¬±ª∏¯¦¨µ¤·¬√¨ ¦²¯¬·¬¶q Αντιχανχερ Ρεσousss ouskx≤l }v|xt q
≈z  龚维坤 o邹庆玲 o陈 杰 o等 q镜下少量血尿中尿脱落细胞端
粒酶活性的临床意义 q医师进修杂志 oussv ouykul }ux q
≈{  «∏ ÷ oŽ∏°¤µ• o ¤±§¤¯  o ετ αλq≤¨¯¯¦¼¦¯ 2¨§¨ ³¨ ±§¨ ±·°²§∏¯¤·¬²±
²©·¨¯²° µ¨¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼¬±·∏°²µ¦¨¯¯¶q Προχ Νατλ Αχαδ Σχι ΥΣΑot||y o
|vktul }ys|t q
Τηε εφφεχτ οφ Κανγλαιτεινϕεχτιον(ΚΛΤ) ον τηε προλιφερατιον ανδ
τελοµερασε αχτιϖιτψ οφ ρατ µεσανγιαλ χελλσ
‹˜ ≠¬±ªoŒ„‘Š ‹∏¤oŠ’‘Š • ¬¨2®∏±o ÷˜  2¨©¨ ±ªo’˜ ±¬±ª2¯¬±ª
(Σεχονδ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ, Τηε Μεδιχαλ Χολλεγε οφ Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου vtsss| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·²©Ž¤±ª¯¤¬·¨¬±­¨¦·¬²±kŽ×l ²±·«¨ ³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§·¨¯²° µ¨¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© ° ¶¨¤±ª¬¤¯ ¦¨¯¯¶
¬±µ¤·¶q Μετηοδ : ×× o·¨¯²° µ¨¨ µ¨³¨ ¤·¤°³¯¬©¬¦¤·¬²± ³µ²·²¦¤¯kו „°l o∞Œ≥„ o°„Š∞ ¤±§¶¬¯√ µ¨2¶·¤¬± º µ¨¨ ¤³³¯¬¨§·² §¨·¨¦··«¨ ªµ²º·«µ¤·¨
¤±§·¨¯²° µ¨¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© ≤ ¤©·¨µ¶·¬°∏¯¤·¬²± ²©Ž× ¤±§Œ2t q Ρεσυλτ : ׫¨ ªµ²º·«µ¤·¨ ²© ≤ º¤¶ ±¨«¤±¦¨§¥¼Œ2t ¶·¬°∏¯¤·¬²±oº«¬¦«º¤¶
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第 vs卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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¤¦¦²°³¤±¬¨§º¬·«¤µ¨§¨¦·¬²± ²©·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·¨¯²° µ¨¤¶¨ q „§√ µ¨¶¨ ¼¯ o·«¨ ªµ²º·«µ¤·¨ ²© ≤ º¤¶µ¨§∏¦¨§¥¼ Ž× o º«¬¦« º¤¶¤¦¦²°³¤±¬¨§
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±¤·¬√¨∏¶¨ ²©Œ2t ¤±§Ž× º¬·«²∏·¤±¼¬±©¯∏¨ ±¦¨ ©µ²°·«¨ ¶¨ ∏´¨ ±¦¨ ²©·«¨¬µ¤§°¬±¬¶·µ¤·¬²±q Χονχλυσιον : Ž× ¦²∏¯§¬±«¬¥¬·³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ¤±§
·¨¯²° µ¨¤¶¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© ≤ º¬·«²µº¬·«²∏·³µ¨2¶·¬°∏¯¤·¬²± º¬·«Œ2t qŽ× °¬ª«·¥¨ ∏¶¨©∏¯·²³µ¨√ ±¨·¤±§·µ¨¤·ª¯²° µ¨∏¯¤µ±¨ ³«µ¬·¬¶µ¨ ¤¯·¨§·² ≤
³µ²¯¬©¨µ¤·¬²±q
[ Κεψ ωορδσ] Ž¤±ª¯¤¬·¨¬±­¨¦·¬²±~ ° ¶¨¤±ª¬¤¯ ¦¨¯¯¶~·¨¯²° µ¨¤¶¨
≈责任编辑 方文贤 
核因子2ϑ…在四逆汤预处理诱导大鼠心肌
延迟预适应中的作用
刘 颖t ou 3 o吴伟康t o陈 晨v o刘克玄t
kt1 中山大学 中西医结合研究所 o广东 广州 xtss{| ~u1 广东药学院 病理生理教研室 o
广东 广州 xtsuuw ~v1 中国人民解放军第 wut医院 检验科 o广东 广州 xtsvt{l
≈摘要  目的 }探讨四逆汤能否诱导心肌延迟预适应及其可能机制 ∀方法 }≥⁄大鼠分为假手术组 !缺血再灌注
组 !延迟缺血预处理组 !四逆汤预处理组 ∀延迟缺血预处理组采用经典大鼠冠脉结扎 o缺血 x °¬±o再灌 x °¬±o反复
循环 v次 ouw «后缺血 t «o再灌 t «∀四逆汤预处理组给予四逆汤灌胃kx ª#®ªpt#§ptl连续 v §o末次灌药 uw «后缺
血 t «o再灌 t «∀以心肌梗死面积为评价指标并测定心肌中超氧化物歧化酶的活性 !丙二醛的含量 o通过 • ×2°≤•
检测 ±≥’⁄ °• ‘„及 ≤∏2±≥’⁄ °• ‘„的表达并利用免疫组织化学染色法检测大鼠心肌 ‘ƒ2ϑ…亚单位 °yx的表达 ∀
结果 }延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组心肌梗死面积明显小于缺血再灌注组 o ⁄„ 的含量低于缺血再灌注
组 o≥’⁄活性和 ±≥’⁄ °• ‘„的表达高于缺血再灌注组 o‘ƒ2ϑ…发生核转位且蛋白表达显著高于缺血再灌注组 ∀缺
血再灌注组 !延迟缺血预处理组及四逆汤预处理组的 ≤∏2±≥’⁄ °• ‘„表达均下降 ov组之间无差异 ∀结论 }四逆汤
能诱导心肌延迟预适应 o其机制可能与 ‘ƒ2ϑ…的激活相关 ∀
≈关键词  四逆汤 ~延迟预适应 ~核因子2ϑ…~锰2超氧化物歧化酶
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukussxlsy2swxv2sw
≈收稿日期  ussw2s{2sx
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kv|zzs|vyl
≈通讯作者  3刘颖 oר¯ }ksusl{zvvtyuw oƒ¤¬}ksusl{zvvtzz| o∞2
°¤¬¯ }¯¼¯ ¼ª½ƒ «²·°¤¬¯q¦²°
心肌缺血2再灌注损伤是一种临床上常见的病
理过程 ∀近年来 o研究发现心肌在经历短暂缺血后
能对随后发生的较长时间的缺血2再灌注损伤产生
明显的保护作用 o这就是心肌缺血预适应kŒ°≤l ∀
t||v年 o¤µ¥¨µ等≈t 发现心肌缺血预适应呈 / 双时
相0分布 o早期预适应k∞°≤l一般在缺血性刺激数分
钟后发生 o可持续 t ∗ v «~延迟预适应k⁄°≤l又称
/第二保护窗0k≥• ’°l在刺激后 tu ∗ uw «发生 o可持
续 zu «∀ ⁄°≤是一种内源性保护机制 o因其作用强
大 o保护时间长而成为研究热点 ∀随着研究的深入 o
人们发现可以通过药物激发保护机制而呈现心脏对
缺血 !缺氧的耐受 o即药理性预适应 ∀药理预适应与
缺血预适应一样都能促使心肌对缺血缺氧产生内源
性耐受反应 o其中中药因为其极少的不良反应及药
理作用多靶点而倍受关注≈u  ∀四逆汤k≥‘⁄l是汉代
张仲景5伤寒杂病论6的名方 o由附子 !干姜 !炙甘草
组成 o经多年的实验和临床研究证明具有较好的改
善冠状循环 !清除氧自由基 !保护缺血心肌的作
用≈v  o本实验在此基础上试探讨四逆汤是否可以模
拟 ⁄°≤的保护作用以及其可能机制 ∀
1 材料和方法
111 实验动物 ≥°ƒ 级雄性 ≥⁄大鼠 yw只 o体重
uxs ∗ vss ªo由中山大学动物实验中心提供 ∀
#vxw#
第 vs卷第 y期
ussx年 v月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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