全 文 ：表 2 12 3例患者I G O P的预防用药情况
项目 规律维生素D 十钙 单纯钙剂 不规律用药 不用药
例数 3 42 37 2 3 0
年龄 (岁 )2 3. 9 4+9 32 3 13 0 +0 1. 6 3 3 3 07 +9. 9 9 2 4. 6 3 +9 6 5
男/ 女/ 9 2 14 18 / 5 1/ 98 2 0/ 0 1
时间 (月 )6. 3 5+3. 9 7. 叩 +9. 57 15.8 0 +2 0, 40 * 8 24 + 8滩8
GC剂量 ( g ) 7滩2+ 3 . 92 7 .又+ 4 .以 一3 .印+ 一5 . 10* 7 .外 + 4 . 6 6
骨质异常(% ) 34 . 9% * 78 2 % 1阅% 73 .4%
与其它各组比较 , * P< .0 05
本组 6 . 7%患者出现骨质异常 , 而其中 80 % 以上无
任何症状 , 因此对应用 G C 的肾脏病患者进行骨密度检
测是非常必要 的 。 然而 , 本组 123 例均没有在此次就诊之
前做过骨密度检测 。 调查显示 ,规律应用维生素 D 加钙
剂组的骨质异常发生率明显低于单独应用钙剂及未进行
过任何预防用药治疗组 , 而前者仅约 占 13/ 。 以上都说明
对慢性肾脏病 ( C KD )患者服用 GC 引起的骨质异常缺乏
足够的认识 , 因此 ,在应用 G C 时应定期进行骨密度的监
测并采取相应的预防 、 治疗措施 。
表 3 功 ig ist 。 回归分析 参 考 文 献
项目 5 19 .
未预防用药
累积剂量
C o n s tan t
一 2 . 17 9
0
.
14 9
.s E
.
Wal d df
0
.
4 87 2 0
.
0 17 1
0 06 5 8
.
946 1
0
.
8 07 2
.
83 9 1
0
. 口沉)
0
.加3
0
.
09 2
三 、 讨论
研究表明接受 Gc 治疗的患者常常出现骨密度下降 , 2
骨密度的丢失与 GC 的累积剂量密切相关 。 快速的骨丢失
发生在 GC 开始治疗的最初几个月之内 , 随后是较缓慢的
下降 ; 同时 , 口服 GC 治疗开始后的 3一 6 个月骨折危险性
迅速增加 ,停止治疗后危险性下降 ,而且这种危险性是不
依赖于原有的基础病变 、 年龄 、 性别而独立存在的【’ 一 3 } 。
G ul iat 等 [’1 研究显示 , 与 同年龄组相比 , 经常复发组 〔GC
累积剂量 ( 14 . 0 士 12 . 1 ) g 〕骨密度 Z 值比不常复发组【GC
累积剂量 ( 5 . 63 上 6 . 3 ) 9 1显著降低 。 ujF iat 等川发现 , 应用
GC 时间较长 ,骨密度下降较多。 我们的横断面调查结果
与文献报道一致 。
1 Fuj i8t T
,
S a t o m u ar A
, 比d ak a M , et 吐 . Acut e 山 e ar t ion i n
肠 n e 而 n e ar l d e ns i t y an d b ioc h e而 e al mar k e玲 for bo ne二 t目阅 li s m i n n e phir it c P at ie n t s ecr e i v in g h ihg 一 dose
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C以e i f iT s u e
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(收稿 日期 : 2X() 5 一肠一 08 )
(本文编辑 : 李耀荣 )
羊掷镯根对慢性肾小球肾炎大鼠核因子 K B 表达的影响
刘建社 熊京 朱忠华 李贞琼 朱红艳 邓安 国
细胞因子诱导肾小球系膜细胞增殖和细胞外基质的
过度产生在肾损害过程中发挥了重要的作用 。 核转录因
子 K B ( N F一 K B )是一种重要的转录调节因子 ,在体机炎症
反应和免疫调节中扮演了重要的角色 。
一 、 材料与方法
1
. 材料 : 牛血清白蛋白 ( sB A )和脂多糖 ( L咫 )( 美国
S ig m a )
,鼠抗 N F一妞 p 65 单克隆抗体和辣根过氧化物酶标
记的羊抗鼠 I舀 (北京晶美 ) ,羊哪踢根由武汉协和医院罗
永炎教授提供 ,为 1 9 /血的羊哪周根水煎液 。
2
. 动物模型复制 :雄性 iW s住rI 大鼠 36 只随机分为对
照组 、 模型组和羊哪踢根治疗组 ,每组 12 只 。 模型组和治
疗组复制慢性免疫复合物肾小球肾炎模型 : 切除左侧肾
基金项 目 :河北省科技厅攻关项 目 ( 2X() 2从 3 0 10 34)
作者单位 : 43 X() 2 武汉 , 华中科技大学同济医学院附属协和
医院肾内科
脏 ; 1 周后 3 gm B s A 与完全弗氏佐剂混匀后双足垫注射 ,
然后每隔 2 周重复皮下多点注射一次 (预免疫 ) ; 至血清
抗 BsA 抗体滴度达到 :1 16 后 ,每 日腹腔注射 3 m g 的 BsA
(免疫 ) ; 3 周后腹腔注射 10 此 的 L SP 一次 ,免疫 6 周末
处死大鼠 。 对照组大鼠预免疫仅注射佐剂 。 从免疫开始 ,
治疗组用羊哪周根制剂灌胃 (l . 5 9 · kg · d一 , ) ,模型组 以同
体积生理盐水灌胃 。
3
. 生化指标检测及肾组织标本采集 : 4 周末和 6 周
末 , 收集 24 h 尿液和静脉血 ,检测 24 h 尿蛋白定量和血
肌醉浓度 。 处死大 鼠后取肾组织 ,光镜和电镜观察 。
4
. 实时荧光 CP R 法检测 I心 m R N A 的表达 : 提取总
RN A
, 以 总 NR A 为模板 , 。 il网T 为引物逆转录合成
c
DN A
,
SBY R G~ 荧光染料法进行实时荧光此R
。 扩增
结果采用 FT C 20( 刃 荧光 CP R 仪自带的分析程序分析 tC
值 ,计算得出基因表达的倍数改变即 2 一的 。
5
.
W e se tr n印迹法检测F N 一K B蛋 白的表达: 提取核蛋
白 , 样本各取 40 卜g 上样 , s D s 一 P AG E 电泳分离蛋 白 ,封
闭 , 一抗 、 二抗孵育 , E C L 显像成影 。 扫描后用 H PI A S 一 l 〕 X)
凝胶分析系统定量 ,计算吸光度值 。
6
. 统计学处理 : 实验数据以 牙士 、 表示 ,采用 SsP sl Z . O
统计软件进行 t 检验和组间方差分析 。
二 、 结果
1
. 生化指标改变 : 4 周和 6 周末模型组和治疗组的
24 h 尿蛋 白量及血肌醉均较对照组升高 , 但治疗组比模
型组显著降低 ,差异有统计学意义 ( P< 0 . 0 1 ) , 见表 1 。
表 1 各组不同时间 24 h 尿蛋白量 ( m g / 24 h) 和 s cr
(林m o l / L )的变化
图 2 N F 一 K B 蛋白表达
项目 对照组 模型组
4周 6周 4周 6周 4 周
治疗组
尿蛋白 2月土0 2 3 . 1士 0 . 3 753 士 9 . 1* ,
阮 r 45 ) 士 4 ` 7 45 . 8土5 . 3 49 . 2土 6 . 1*必
112
.
5士 14
.
7*
少
5 8 8士6乃* .
49
`
8士5 6* 80
46
.
2士5 7* 50 .
石*
2 *
碉一39t渐
与对照组比较 , * P< .0 ol ; 与治疗组 比较 , 切 <住。
2
. 肾脏组织学改变 : 光镜下可见模型组和治疗组 系
膜基质和系膜细胞增生 , 肾小球和间质炎症细胞浸润 , 局
灶节段性肾小球硬化等 ,但治疗组与模型组相比有显著改
善。 电镜下可见模型组内皮下和系膜区免疫复合物沉积 ,
治疗组未见明显免疫复合物沉积 。 见图 1 。
三 、 讨论
静息状态下 , 细胞中的 N F一 K B 二聚体结合在一种叫做
I K B 的抑制性蛋白上 , 以非活性形式存在于胞浆中 。 N F 一 K B
可能在肾小球免疫复合物反应中发挥了重要的作用川 。
杜鹃花科植物羊哪踢 (R ho 面凌nd or n Mo le ` . oD n) 是
一种有毒植物 , 其干燥花序 ( 闹羊花 )和成熟果序 (八里麻
子 )是我国传统中药 ,但因毒性较强 , 使用需慎重且不可
久用川 。 关于羊哪踢根化学成分和药理作用的研究较晚 ,
近年来始有报道 [’ , 4 ! 。 羊哪踢根味辛 ,性温 , 有驱风除湿 ,
消肿止痛等功效 〔2丁。 罗永众等 〔5 ]利用羊哪踢根在治疗类
风湿性关节炎上取得了一定的疗效 ,且未发现明显的不良
反应 , 从而逐渐受到关注 。
本实验在传统 的大鼠慢性血清病肾炎模型的基础上
增加了单侧 肾切除和腹腔注射 L PS ,这些措施可加速病变
的发展 , 〕。 实验结果显示羊哪镯根制剂能有效减轻蛋 白
尿 、改善肾功能及延缓病变的进展 。 大鼠肾组织中有大量
N F
一 K
B 的表达 , 羊哪踢根制剂可减少 仪B m RN A 的降解 ,
从而显著抑制 N F 一 K B 的激活 , 提示羊哪镯根制剂可能通
过抑制 N F一 K B 的激活和表达 , 对慢性肾小球 肾炎的治疗
发挥了重要的作用 。
从自然药物中提取免疫抑制剂具有来源广泛 、 价位
低廉和低毒性的优点 , 已成为制药界的共识 。 我们对羊掷
踢根治疗慢性肾小球肾炎进行 了初步的探讨 ,希望为 日后
提供高效低毒治疗慢性肾小球肾炎的药物作出贡献 。
参 考 文 献
A : 治疗组 ( HE x 4X() ) : B : 模型组 ( HE x 4X() ) ; C : 治疗组
(电镜 x 2 0 《X洲) ) : D : 模型组 (电镜 x l s (X洲〕 )
图 l 肾脏组织学病理改变
3
.
I K Bm R N A 的表达 : 模 型组 和治疗 组 肾组织
I KB m R N A 较对照组显著降解 (尸0< . 01 ) , 模型组为对照组
的 .0 46 倍 , 治疗组为对照组的 .0 59 倍 ;治疗组 I K Bm RN A
降解较模型组明显减少 , 差异有统计学意义 ( P< 0 . ol ) 。
4
.
N F
一 K B 蛋 白的表达 : 对照组大鼠肾组织可见少量
N F
一
kB 蛋 白表达 ; 模型组和治疗组 N F一 K B 蛋 白表达明显
增加 , 且模型组较治疗组显著增加 , 差异有统计学意义
( P< 0
.
o l )
, 见图 2 。
K im JH
,
H a S
,
H w an g C
, e t al
.
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(收稿 日期 : 20 5 一04 一 25 )
(本文编辑 :周丽华 )