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反相高效液相色谱法测定络石藤中芹菜素7-O-β-新橙皮糖苷的含量



全 文 :的各种性状都明显地高于其野生植株 ∀其中 o植株
高度和地下根长指标 o栽培植株分别是野生植株的
t1z| ou1ws倍 ~植株分枝指标 o栽培抱茎獐牙菜为其
野生植株的 t1xx倍 o分枝数远远高于其野生植株 ∀
单株生物量指标 o栽培抱茎獐牙菜为野生植株的
tt1wy倍k烘干重l ∀说明抱茎獐牙菜经过引种栽培
试验后 o从植株高度 !植株分枝 !单株生物量等指标
的比较来看 o其生长发育状况指标超过野生植株 ∀
表 v 野生与栽培抱茎獐牙菜k第 u年l发育状况kcξ ? σ, ν € usl
样品
株高
r¦°
根长
r¦°
主干分枝
r个
生物量rª
自然干重 烘干重
栽培k青海平安l xw qyu ? u qw| tt qvu ? s q|x t| qx{ ? t qzt z qvyz ? t qtyu y qvwz ? s q||{
野生k青海西宁l vs qxw ? x qtt w qzt ? t qtw tu qys ? u qty s qysw ? s qu|{ s qxxw ? s quyx
3 小结
311 引种栽培试验研究表明 o在青海高原自然环
境条件下 o抱茎獐牙菜为二年生草本植物 o与多数文
献有所差异≈t ou ow  ∀其植物生长发育特点为 }种子萌
发时间较长 o而且第 t年生长十分缓慢 o第 u年呈快
速生长状态 o并且在开花结实后完成其整个生活周
期 ∀抱茎獐牙菜等多数龙胆科植物以这种生活习性
来适应高山寒冷干旱的极端环境 ∀完成植物生长发
育需要约 ts ∗ tu个月的连续生长发育时间 ∀
312 栽培抱茎獐牙菜植物在植株高度 !分枝数量 !
单株生物量等生长状况指标明显高于野生植株 o而
且药效成分品质评价表明 o栽培植株的主要药效成
分与野生植株相近 o其中的獐牙菜苦苷k¶º¨ µ·¬¤°¬±l !
龙胆苦苷kª¨ ±·¬²³¬¦µ²¶¬§¨ l和芒果苷k°¤±ª¬©¨µ¬±l的含
量分别为 w1{wu { h os1vzs y h os1s{u w h k另文发
表l ∀由此表明 o栽培的抱茎獐牙菜可以解决野生抱
茎獐牙菜的资源供给问题 o有效保护珍稀野生獐牙
菜属药用植物资源 ∀
综上所述 o在青藏高原独特和脆弱的自然条件
下 o野生资源植物的过量采收 o可快速导致其资源量
的锐减 ∀高原野生重要植物资源的持续发展必须建
立在生物资源可持续利用和生态环境保护的基础
上 o培育地道地产中藏药材是实现高原地区中藏药
资源可持续利用的主要途径之一 ∀抱茎獐牙菜引种
栽培试验表明 o野生抱茎獐牙菜的人工栽培是可行
的 ∀
≈参考文献 
≈t  何廷农 o刘尚武 o吴庆如 q中国植物志 q第 yu卷 q北京 }科学
出版社 ot|{{ qwsu q
≈u  杨永昌 q藏药志 q西宁 }青海人民出版社 ot||t qttu q
≈v  刘海青 o刘亚蓉 o朱志强 q青海獐牙菜属药用植物资源开发与
保护 q中草药 ot||y ouzkul }ttu q
≈w  刘尚武 q青海植物志 q第 v卷 q西宁 }青海人民出版社 ot||y q
{{ q
≈责任编辑 张宁宁 
≈收稿日期  ussw2st2us
≈通讯作者  3 陈海生 oר¯ }ksutluxszsv{z o∞2°¤¬¯}«¤¬¶«¨ ±ª¦ƒ
«²·°¤¬¯1¦²°
反相高效液相色谱法测定络石藤中芹菜素
z2 Ο2Β2新橙皮糖苷的含量
谭兴起t ou o陈海生t 3 o钱正生u o雷云超u
kt1 第二军医大学 药学院 o上海 usswvv ~u1 解放军 |{医院 o浙江 湖州 vtssvsl
络石藤为夹竹桃科络石属植物络石藤 Τραχηε2
λοσπερµυµ ϕασµινοιδεσ k¬±§¯1l ¨°1 的干燥带叶藤
茎 o有祛风通络 !凉血消肿之功 o主治风湿热痹 !筋脉
拘挛 !腰膝酸痛等症≈t  ∀主要成分为黄酮 !木质素类
化合物≈u  ∀王杰松等≈v 的研究表明 o芹菜素类化合
物具有骨关节保护作用 ∀因此 o本研究采用反相高
效液相色谱法测定其中的主要黄酮 ) ) ) 芹菜素 z2
Ο2Β2新橙皮糖苷k„‘l o为络石藤质量标准的制定提
供依据 ∀
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第 vs卷第 uw期
ussx年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1vs oŒ¶¶∏¨ uw
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussx
1 材料
高效液相色谱仪k美国 • ¤·¨µ¶公司 oxtx 泵l ~
• ¤·¨µ¶uw{z ˜∂ 检测器 ~大孔吸附树脂k„…2{ o天津南
开大学化工厂l ∀甲醇为色谱纯 o其他试剂为分析
纯 o„‘对照品由作者自制 o纯度 ||1ux h k ‹°≤2
∞≥⁄归一化法测定l ∀络石藤药材由作者采自浙江
湖州 o经第二军医大学药学院黄保康博士鉴定为络
石藤 Τ1 ϕασµινοιδεσ∀
2 方法和结果
211 色谱条件 ≥¼°°¨ ·µ¼ ≤t{色谱柱kv1| °° ≅ txs
°° ox Λ°l o流动相甲醇2水kwsΒysl o流速 t1s °#
°¬±pt o检测波长 vws ±° o柱温为室温 o进样量 ts ˏ∀
色谱图见图 t ∀
图 t 对照品及样品的 ‹°≤ 图
„1 对照品 ~…1 样品 ~t1 芹菜素 z2 Ο2Β2新橙皮糖苷
212 标准曲线的制备 精密称取 „‘对照品 tv1us
°ª置 ux °量瓶中 ows h甲醇定容kxu{ °ª#ptl ∀
精密吸取 t ou ov ow ox °o置 ts °量瓶中 ows h甲醇
定容 ∀ts ˏ进样 o以 „‘对照品的含量为自变量
kΞl o以 „‘对照品峰面积为因变量k Ψl o回归方程
为 Ψ€ v1vx{ ≅ tsw Ξ p t1xss ≅ tsx o对照品在 xu1{ ∗
uyw °ª#pt线性关系良好kρ€ s1||| | , ν € xl ∀
213 稳定性试验 对照品溶液kxu1{ °ª#ptl在
s ot ou ow o{ ovu «测定 o测定峰面积值 o• ≥⁄ t1t h o表
明样品在 vu «内基本稳定 ∀
214 精密度试验 供试品连续进样 y次 o测定 „‘
峰面积值 o• ≥⁄t1u h o表明仪器精密度良好 ∀
215 重复性试验 测定同批样品 x份 o结果含量
的 • ≥⁄为 t1v h o重复性良好 ∀
216 加样回收率试验 已知含量的络石藤药材适
量 o加入一定量的 „‘o按 217所述方法测定 o测定结
果见表 t ∀
217 样品测定 本品粉末 t ªo精密称定 o置 xs °
烧瓶中加 zx h乙醇加热回流提取 v次 o每次 us °o
每次 s1x «o滤过 o合并滤液 o回收乙醇至无醇味 o加

表 t „‘加样回收率
样品含量
r˪
加入量
r˪
测得量
r˪
回收率
r h
平均值
r h
• ≥⁄
r h
|xs q{ xu q{ t ssu qu |z qv
|wv q| xu q{ ||w qv |x qw
|zv qx tsx qy t sz{ q{ || qz |{ qs t qy
|wu qt tsx qy t swy qz || qt
|ww qv utt qu t txu q{ |{ qz
|uv qy utt qu t tvs qy |{ qs
tss °蒸馏水 o通过 „…2{ 大孔吸附树脂柱k内径
t1s ¦°o长 us ¦°o流速 ts °#°¬±ptl ous h乙醇 uss
°洗脱后用 ws h乙醇 uss °洗脱 o收集 ws h乙醇
洗脱液 o回收至干 o残渣加甲醇定量转移至 ts °量
瓶中 o微孔滤膜过滤后取 ts ˏ进样 ∀另取对照品
溶液 ts ˏo测定峰面积 o外标二点法计算样品的含
量 o结果为 }t tsukusst2tu2stl o{yzkussu2sv2s|l o{xw
kussu2sy2sxl ot sut Λª#ªptkussu2s|2tsl o表明络石
藤中 „‘随季节变化不大 o平均为 t °ª#ªpt ∀
3 讨论
311 本品用甲醇超声提取后 o直接测芹菜素 z2 Ο2
Β2新橙皮糖苷的含量干扰十分严重 o且不完全 ∀经
探索 o用 zx h 乙醇加热回流提取后上大孔吸附树
脂 ows h乙醇洗脱部分的杂质对样品的测定几乎无
干扰 ∀
312 实验用 xs h的甲醇2水作流动相时 o对照品峰
前有一小峰干扰 o不能基线分离 ∀同样用 vs h的乙
腈2水也不能很好分离 ∀本研究所用流动相虽能较
好分离 o但保留时间偏长 o还有待进一步改进 ∀
313 从实验结果来看 o对照品在 xu1{ ∗ uyw1s °ª#
pt线性关系良好 o加样回收率 |{1s h o方法稳定可
靠 o可用于络石藤药材中芹菜素 z2 Ο2Β2新橙皮糖苷
的含量测定 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qusss quut q
≈u  ≥¤±¶¨¬‘¬¶«¬¥¨ o „®¬¼² ≥¤®∏¶«¬°¤oפ§¤·¤®¤ ‘²µ²o ετ αλq≥·∏§¬¨¶²±
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≈v  王杰松 o张俊平 o张 珉 o等 q脂多糖诱导细胞产生一氧化氮
及木黄酮对其的抑制作用 q第二军医大学学报 oussu ouvktul }
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≈责任编辑 张宁宁 
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第 vs卷第 uw期
ussx年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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