全 文 ：#研究报告#
胡椒中胡椒碱的提取工艺研究
刘 文 o孙宇章
k贵阳中医学院 o贵州 贵阳 xxsssul
胡椒来源于胡椒科胡椒属胡椒 Πιπερ νιγρυ µ
q的果实 o其主要成分胡椒碱≈t 是我室开发的新药
/癫痫胶囊0的主要成分 ∀为提高胡椒碱的提取率 o
我们以水为溶媒 o用正交试验法对药物的粉碎度 !提
取溶剂的 ³ 值 !溶剂用量进行了提取工艺的优选
研究 ~同时以乙醇为溶媒 o采用回流的方法提取胡椒
中的胡椒碱 o并将 u种溶媒提取的结果做对比 o现报
道如下 ∀
1 仪器与试药
°ttss高效液相色谱仪 ~胡椒k贵阳市药材公
司l o胡椒碱对照品k中国药品生物制品检定所l o甲
醇为色谱纯 o其他试剂均为分析纯 ∀
2 以水为溶媒 o提取胡椒中的胡椒碱
采用 |kvwl正交实验进行提取工艺优选 ∀
2 q1 因素水平的确定 采用 w因素 v水平进行正
交实验 o见表 t ∀
表 t 因素水平表
水平
Α
粉碎度
r目
Β
水溶液
r³ 值
Χ
酸水用量
r倍
t 原药材 t tsk第 t次 y倍 o第 u次 w倍l
u us目 v qx txk第 t次 ts倍 o第 u次 x倍l
v ws目 z usk第 t次 tu倍 o第 u次 {倍l
注 }酸水用 ≤¯配制
2 q2 色谱条件 ⁄≥色谱柱kw qy °° ≅ uss °° ox
Λ°l o流动相甲醇2水kzsΒvsl ~流速 t qs °#°¬±p t o
柱温 vs ε o检测波长 vwv ±° o进样量 ts Λ∀在选
定色谱条件下 o胡椒碱及胡椒样品液的色谱图见图
t o胡椒碱保留时间约为 w qv| °¬±∀
2 q3 标准曲线的绘制 精密称取胡椒碱对照品 x
°ªo置于 ts °容量瓶中 o用甲醇溶解并稀释至刻
度 o精密吸取此溶液 t ou ov ow oy o{ ots °分别置于
≈收稿日期 ussu2sy2uw
≈通讯作者 ר¯ }ks{xtlx|u|ty|
图 t 胡椒碱 °≤ 色谱图
q对照品
q胡椒样品 t q胡椒碱
ts °容量瓶中 o甲醇稀释并定容至刻度 o按上述色
谱条件进样 ts Λo测定峰面积 o以峰面积积分值为
纵坐标 o对照品进样量为横坐标 o绘制标准曲线 o计
算回归方程 }Ψ tu| |ws qxw Ξ p tzs qxxx sz o
ρ s q||| z o结果表明 o胡椒碱在 s qst ∗ s qt Λªo含
量与其峰面积积分值呈良好线性关系 ∀
2 q4 精密度试验 对同一浓度的样品连续进样 x
次 o ≥⁄为 s q|t h ∀
2 q5 重现性试验 取胡椒细粉按样品溶液的制备
方法制备 5 份供试液 o分别进样 o ≥⁄为 u q|u h ∀
2 q6 稳定性试验 对同一浓度的对照品溶液 o每
隔 t «进样 t次 o胡椒碱在 t u «内稳定 o ≥⁄为
t qx| h ∀
2 q7 回收率试验 取 x份已测定含量的同一胡椒
样品液 o分别准确加入胡椒碱对照品适量 o在选定色
谱条件下进样并测定峰面积值 o通过回归方程计算
胡椒碱的含量 o得平均回收率为|{ qzw h o ≥⁄为
u qvv h ∀
2 q8 样品测定 称取胡椒 vs ªo按表 u正交实验表
的要求 o将原药材粉碎成规定的粉碎度 o置于烧杯
中 o加入规定量的酸水 o煎煮 u次 o每次 s qx «o滤液
合并后置于冰箱中 o冷藏 tu «后 o取出抽滤 o将滤液
置于恒温水浴锅中浓缩至浸膏 o再置于真空干燥器
中真空干燥 o将干燥品用甲醇溶解 o过滤 o定容至 ts
°o按上述色谱条件下进样并测定峰面积值 o通过
回归方程 o计算胡椒碱的含量 o结果见表 u o方差分
析见表 v ∀
#yxw#
第 u{卷第 x期
ussv年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ qx
¤¼ oussv
表 u 正交实验结果分析
²q 胡椒碱含量r h
t s qv|y
u x qy|s
v s qxsx
w s qysz
x z q|sz
y t qy|{
z s qwy{
{ | qx{u
| t qt||
表 v 方差分析
方差来源 离差平方和 自由度 方差 Φ
Α v q|{{ u t q||w u q|w{
Β |y quuz u w{ qttv zt qtvu
Χ v qsuu u t qxtt u quvw
误差 t qvxv u s qyzy
3 以乙醇为溶媒 o提取胡椒中的胡椒碱
3 q1 样品液的制备 分别取 vs ª胡椒粉碎成不同
目粉 o分别加 ts 倍量 zx h 乙醇水浴回流提取 vs
°¬±o过滤 o药渣再加 x倍量 zx h乙醇水浴回流提取
vs °¬±o过滤 o合并滤液 o水浴蒸干乙醇 o残渣甲醇溶
解 o过滤 o定容于 ts °容量瓶中 ∀
3 q2 样品含量测定 按上述色谱条件下进样并测
定峰面积值 o通过回归方程 o计算胡椒碱的含量 o结
果见表 w ∀
表 w 含量测定结果
胡椒粉碎目数r目 胡椒碱含量r h
原药材 { qxyu
us | qvvz
ws ts qtvt
4 结论
4 q1 大多数生物碱类物质在水中溶解度较小 o采用
酸水提取 o可将胡椒中溶解度小的胡椒碱转变为溶
解度大的胡椒碱盐而被溶出 o本次实验运用正交试
验 o以胡椒碱含量为测评指标进行统计分析 o由表 v
的方差分析可知 o因素 Βk³ 值l对胡椒碱含量有显
著影响 o而因素 Α , Χ的影响不大 ∀通过极差 Ρ 的
比较可知 o影响胡椒碱含量的主次因素依次为 Β
Α Χo最佳工艺条件为 Αv Βu Χt o即用煎煮法提取
u次 o每次 s qx «o药材粉碎成 ws目 o提取溶媒 ³ 值
为 v qx o溶剂用量为 ts倍 ∀
4 q2 大多数生物碱类物质在乙醇中溶解度较大 o本
次实验 o将胡椒粉碎成不同目数 o采用 zx h乙醇提
取 o表 w的结果表明 ows目粉的胡椒碱含量达
ts qvv h o比表 u中的 | qx{u h略高 o但考虑到乙醇
的提取 !回收成本较高 o故未采用 ∀
≈参考文献
≈t 袁昌齐 q天然药物资源开发利用 q南京 }江苏科学技术出版社 o
usss quxv q
≈责任编辑 刘
°≤ 和紫外分光光度法测定葛根黄酮缓释片体外释放度
王雪莉 o朱春燕
k中国医学科学院 中国协和医科大学 药用植物研究所 o北京 tsss|wl
葛根是中医常用的祛风解表药 o以葛根为主要
成分的愈风宁心片具有解痉止痛 o增加脑及冠脉血
流量等作用 o可用于高血压头晕 o头痛 o颈项疼痛 o冠
心病 o心绞痛 o神经性头痛 o早期突发性耳聋等症 ∀
鉴于愈风宁心片服用次数多 o服药剂量大 o采用精制
的葛根黄酮制成葛根黄酮缓释片 ∀在测定缓释片体
≈收稿日期 ussu2sx2uz
≈通讯作者 ר¯ }kstslyu{|xs{w
外释放度时 o本实验选择了两种分析方法 }°≤ 法
和紫外分光光度法 o前一种方法以葛根素为测定指
标≈t2v o后一种方法以葛根黄酮为测定指标 ∀本实
验为葛根黄酮缓释制剂的进一步研究和开发建立了
准确 !可靠 !简便的分析方法 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶¯¯¬¤±¦¨ 高效液相色谱仪 o包括 • ¤·¨µ¶
yss型泵 !uw{zk⁄∏¤¯ Κl检测器 ! vu处理软件 ~zxu
型紫外光栅分光光度计k上海精密科学仪器有限公
#zxw#
第 u{卷第 x期
ussv年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o¶¶∏¨ qx
¤¼ oussv