全 文 ：#研究报告#
用蒸发光散射检测器的 °≤
测定绛糖舒胶囊中黄芪甲苷含量
李明炬t 3 o孙明玉u
kt q贵州省理化测试分析研究中心 o贵州 贵阳 xxsssu ~
u q遵义医学院 第二附属医院 o贵州 贵阳 xxsssul
绛糖舒胶囊处方来源于中医经验方 o由黄芪 !生地黄 !天
花粉 !五味子 !太子参 !南瓜粉 !甘草 z味中药组成 o具有益气
养阴 o生津止渴的功效 o用于气阴两虚所致的消渴 o多饮 o多
尿 o多食 o体倦乏力 ∀其标准中无含量测定项目 o为有效地控
制质量 o本实验用蒸发光散射检测器的 °≤ o对处方中君药
黄芪中的黄芪甲苷建立了含量测定的方法 o为进一步控制该
药品质量提供了依据 ∀
1 仪器 !试剂与样品
高效液相色谱仪 ª¬¯¨ ±·ttssk二元泵 !自动进样器 !ª¬2
¯¨ ±·化学工作站l ~¯ ·¯¨¦«usss型蒸发光散射检测器k奥泰公
司l ~无油空压机k天津蓝珂科技公司l ~×≤± p uxs型超声波
清洗器k功率 uxs • o频率 vw ®½o北京医疗设备二厂l ~黄芪
甲苷对照品k批号 sz{t2ussts| o供含量测定用l由中国药品生
物制品检定所提供 ~甲醇 !正丁醇 !氨水为分析纯 o乙腈为色
谱纯 ∀绛糖舒胶囊为贵州神奇药研所提供 ∀
2 实验部分
2 q1 色谱条件及检测方法
¼³¨µ¶¬¯ ⁄≥ ≤t{色谱柱kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l ~流动相
乙腈2水kvyΒywl ~柱温 ux ε ~流速 s q{ °#°¬±p t ∀蒸发光散
射检测器检测参数漂移管温度 tts ε o载气k空气l流速 u qx
#°¬±p t ∀
2 q2 系统适用性试验
在本色谱条件下 o供试品中黄芪甲苷成分得到较好分
离 o黄芪甲苷色谱峰的保留时间与对照品一致k见图 t !图
ul o缺黄芪药材的阴性试样未见黄芪甲苷色谱峰位置有其他
色谱峰干扰测定k见图 vl ∀本实验实际柱效大于 | sss o分离
度大于 u ∀推算理论板数达到 x sss即可使样品中其它组分
与黄芪甲苷完全分离 o故理论板数以黄芪甲苷峰计算拟定为
不低于 x sss o分离度应大于 t qx ∀
2 q3 供试品溶液的制备
2 q3 q1 提取分离方法的考察 本品系提制浸膏后制成的胶
囊剂 o甲醇超声提取法即可以达到含量测定的要求 ∀为使黄
≈收稿日期 ussv2st2us
≈通讯作者 3李明炬 oר¯ }ks{xtlx|xyvvv o∞2°¤¬¯} °¯ ³∏¥¯¬¦q
ª½q¦±
图 t 黄芪甲苷对照品色谱图
t q黄芪甲苷k图 u同l
图 u 样品色谱图
图 v 阴性试样色谱图
芪甲苷充分溶出同时又使操作简便 o比较了浸泡后超声处理
与直接超声提取及其不同超声时间的处理效果 o条件及测试
结果见表 t ∀结果表明 o直接超声与浸泡过夜超声无显著差
异 o且浸泡过夜超声的杂质较多 o直接超声提取 t «与 t qx «
略有差异 o故确定本品的提取方法为用甲醇直接超声处理
t qx «o然后以正丁醇进行萃取处理 ∀
表 t 不同提取条件下黄芪甲苷的含量
提取方法 提取时间r« 黄芪甲苷含量r°ª#ªpt
浸泡过夜超声提取 s qx s quys x
浸泡过夜超声提取 t qs s quyy |
浸泡过夜超声提取 t qx s quyz v
直接超声提取 s qx s quxt t
直接超声提取 t qs s qux{ s
直接超声提取 t qx s quyw z
2 q3 q2 供试品溶液的制备 取本品k规格为每粒装 s qw ªl
内容物约 x ªo精密称定 o置具塞锥形瓶中 o加甲醇 ux °o超
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第 u|卷第 {期
ussw年 {月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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声处理k功率 uxs • o频率 vw ®½lt qx «o滤过 o滤渣再加甲醇
ts °超声处理 ts °¬±o滤过 o用 x °甲醇洗涤滤渣 o合并滤
液与洗液 ∀合并液蒸干 o残渣加水 tx °o微热使溶解 o用水
饱和的正丁醇振摇提取 v次 o每次 us °o合并正丁醇提取
液 o用氨试液洗涤 u次 o每次 us °o弃去氨液 o正丁醇液蒸
干 o用甲醇溶解并转移至 x °量瓶中 o加甲醇至刻度 o摇匀 o
即得 ∀
2 q4 线性关系考察
精密称取黄芪甲苷对照品 tt qss °ªo置 ux °量瓶中 o
用甲醇溶解 o加甲醇至刻度 o摇匀 o制成 t °含 s qww °ª的对
照品溶液 ∀精密吸取对照品溶液 w oy o{ ots otu otx ot{ ous Λ
依次进样 o记录色谱 ∀
以峰面积为横坐标 o黄芪甲苷的进样量为纵坐标作图 o
Ψ t .sux x ≅ tsp v Ξ n t .tww y , ρ s q||| u ∀线性范围 t qzy ∗
{ q{s Λª∀采用外标两点法计算含量 ∀
2 q5 精密度试验
取供试液 t份 o精密吸取 ts Λ重复进样 x次 o测得黄芪
甲苷峰面积的 ≥⁄ s qwx h ∀
2 q6 重现性试验
取同一批样品 x份 o分别照前述方法测定 o黄芪甲苷含
量平均值为 s quyv{ °ª#ªp t o ≥⁄ s q{t h ∀
2 q7 稳定性试验
取供试品溶液 o分别于放置 s ou ow oy o{ «后测定 o记录色
谱 o黄芪甲苷平均含量为 s quyt z °ª#ªp t o ≥⁄ t qx h o结果
表明供试品溶液在 { «内测定稳定 ∀
2 q8 加样回收试验
取样品 x份 o各约 u qx ªk含量均值为 s quyv { °ª#ªptl o
精密称定 o分别加入浓度为 s qywz u ª#pt的黄芪甲苷对照品
溶液 t °o依法制备供试液 o测定 o结果见表 u ∀
表 u 黄芪甲苷加样回收率实验结果
样品称量
rª
样品含量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
≥⁄r h
u qxss s s qyx| x t qu{s |x q|
u qxss z s qyx| z t qu{| |z qu
u qxss z s qyx| z t qu{z |y q| |z qs t q{
u qxst s s qyx| { t qvsy || q{
u qxss t s qyx| x t qu{s |x q|
注 }黄芪甲苷加入量均为 s qywz u °ª
2 q9 样品测定
根据上述方法学研究结果 o取对照品浓度为 s qw ª#pt o
分别精密吸取 x Λ和 tx Λ进样测定 ~供试品溶液进样量为
ts Λo按两点法计算含量 ∀ v 批样品 ussssutx oussssut{ o
ussssvts测定结果分别为每粒 s qtsx os qs|u os qs{{ °ªk ν
vl ∀
3 讨论
3 q1 黄芪甲苷的含量测定 方法较多 o主要有薄层层析2比
色法≈t !高效薄层扫描法≈u2w !高效液相色谱法≈x oy 等测定其
中的总黄芪苷或异黄酮苷 !黄芪甲苷 ∀前 u种方法操作较繁
琐 o重现性也欠佳 ∀高效液相色谱法是目前测定黄芪中黄芪
甲苷较好的方法 ∀但是 o由于黄芪甲苷的最大紫外吸收在末
端 usx ±°处 o常规的紫外检测器对其检测的灵敏度极低 o对
制剂中黄芪甲苷的含量很难准确 !重现的测定 ∀新型检测器
/蒸发光散射检测器0的普及应用 o解决了紫外检测器对于
/黄芪甲苷0末端吸收灵敏度低 !其他干扰杂质背景影响的缺
点 o样品处理可不用过 ⁄tst大孔树脂柱洗脱≈w ∀方法学考
察结果表明 o本法具有回收率好 o精密度 !重现性高 o样品处
理较简便 o分析快速的优点 ∀
3 q2 蒸发光散射检测器选择参数主要为漂移管温度及载气
流速 ∀经试验 o本实验条件使用空气作载气即可 o气压以流
速表示为 u qx #°¬±p t适应于大多数成分分析 ∀本法的流动
相为乙腈2水系统 o漂移管温度为 tts ε 可蒸发除去乙腈和
水 o此温度又在黄芪甲苷的熔点ku|x ε l以下很多 o干燥的
黄芪甲苷颗粒经激光散射其响应值较大 o故能很好的检测制
剂中的黄芪甲苷 ∀漂移管温度及载气流速这两个参数根据
不同的仪器或其他影响因素可适当调整改变 ∀
≈参考文献
≈t 陈发奎 q常用中草药有效成分含量测定 q北京 }人民卫生出版
社 ot||z qyut q
≈u 中国药典 q一部 qusss quw| q
≈v 鲁 静 q黄芪甲甙的薄层扫描法测定 q中成药 ot||u otwkyl }vw q
≈w 孙文基 o谢世昌 q天然药物成分定量分析 q北京 }中国医药科技
出版社 oussu qw{ q
≈x 赵灵芝 o朱丹妮 o严永清 q°≤2∞≥⁄法测定黄芪中黄芪甲甙
含量 q蒸发光散射检测器应用报告及论文集 o科达科技k中国l
有限公司 ousst q|s q
≈y 余 灏 q黄芪皂甙分析方法近况 q华西药学杂志 ot||v o{kvl }
tyv q ≈责任编辑 袁桂京
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