全 文 ：肝靶向蕨麻素毫微粒的制备工艺研究
袁海龙 3 o肖小河 o蔡光明 o何雪莲 o赵艳玲 o周韶华 o贺承山
k解放军第 vsu医院 药学部 o北京 tsssv|l
蕨麻来源于蔷薇科植物鹅绒委陵菜k蕨麻委陵菜l Πο2
τεντιλλα ανστερινα q的干燥块根 ∀在广泛的药效学实验基础
上 o作者筛选和确认了蕨麻抗病毒性肝炎的有效部位 o并对
其所含的主要化学成分进行了分离鉴定 ∀该有效部位命名
为蕨麻素 o主要含三萜类成分 o具有抗病毒 !调节免疫功能 !
保肝利胆等活性≈t ou ∀其中主要成分命名为蕨麻 素 o在蕨
麻素中的含量可达到 xs h 以上 o为质量评价提供了可准确
测定的代表成分 ∀由于蕨麻素在体内为全身分布 o肝脏局部
血药浓度低 ∀已有研究表明 o毫微粒载药系统不仅可使给药
量的 {s h的药物浓集于肝脏≈v o并可进入肝细胞 ∀为提高
蕨麻素治疗病毒性肝炎的疗效 o本研究用乳化聚合法研制了
蕨麻素聚氰基丙烯酸正丁酯毫微粒 k∏¨ °¤¶∏ ³²¯¼¥∏·¼¯2
¦¼¤±²¤¦µ¼¯¤·¨ ±¤±²³¤µ·¬¦¯ ¶¨o≥2°
≤2°l o正交实验法优化了
制备工艺 ∀
1 仪器与试药
°ttss高效液相色谱仪 o≤ tus投射电镜k°¬¯¯³¶o¨·«¨µ2
¤¯±§¶l o×≤± p uxs超声波清洗器k北京医疗设备二厂l o°≥ p
ux型 °计k上海雷磁仪器厂l o±p |st涡旋混合器k江苏海
门麒麟仪器厂l o×p ≤ 台式高速冷冻离心机k北京四环科
学仪器厂l ~蕨麻素k自制l o蕨麻 素k自制 o纯度经 °≤ 归
一化法检测大于 |{ h l o聚乙二醇 wssk天津市博迪华工有限
公司l o聚氰基丙烯酸正丁酯k°
≤l o°¯ ∏µ²±¬¦ƒ p y{ o ⁄¨ ¬·µ¤±
p zsk≥¬ª°¤公司l o其他试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 制备工艺的确定
采用乳化聚合法制备蕨麻素毫微粒 ∀将一定量的蕨麻
素溶于适量聚乙二醇 wss中再加入适量的水配成一定浓度
的溶液 o精密称取 °¯ ∏µ²±¬¦ƒ2y{ o⁄¨ ¬·µ¤±2zs o亚硫酸钠 o溶于水
中 o将以上主药 !辅料混合用稀盐酸调 ³ 值到 u o加入 °
2
≤ o涡旋 t °¬±得澄明液 ∀以粒子形态和包封率为评价指
标 ∀
2 q2 实验因素与试验水平的确定
制备工艺的基本路线确定后 o为了优化制备条件 o采用
测定包封率为主要指标 o考察溶液的 ³ 值 !主药用量 !°
≤
≈收稿日期 ussv2sz2us
≈基金项目 国家中医药管理局基金项目kussu22±2vxl
≈通讯作者 3 袁海龙 oר¯ }kstslyy|vvvuw o∞2°¤¬¯}¼«¯ ¬¯¼t|zs
¼¤«²²q¦²° q¦±
的用量和涡旋时间 w个因素 ov个水平 o应用 |kvwl正交表安
排试验 o见表 t ∀
表 t 因素水平表
水平
Α
³
Β
主药的量
rΛ
Χ
°
≤量
rΛ
∆
涡旋时间
r°¬±
t t qx tss tss t
u u qs txs txs t qx
v u qx uss uss u
2 q3 质量评价方法
2 q3 q1 分别按上述正交表试验制备后 o取样品溶液少许 o滴
于铜网上 o加入 t qx h 的磷钨酸染色 o干后放入电镜中观察
形态并拍照 ∀
2 q3 q2 取一定量超速冷冻离心kws ε otx sss µ# °¬±p t oys
°¬±l o取上清夜测定包封率 o采用外标一点法计算上清液中
蕨麻 素的含量k Χul o胶体溶液中的含量为k Χtl o毫微粒中
的含量为k Χt p Χul ∀按下面的公式可以算出包封率k ΕΡl ∀
ΕΡ ( Χt p Χu)/ Χt ≅ tss%
2 q4 正交试验结果及方差分析 o见表 u o表 v
表 u 正交试验结果
试验编号 包封率r h 试验编号 包封率r h
t yt qvx y xw qzu
u {s qws z x{ qtt
v zu qs| { zs qwz
w xu q|u | ys quw
x xw qsy
表 v 正交试验的方差分析表
方差来源 自由度 离差平方和 均方 Φ Π
2 { {s qxv
Α u xs qvz ux qtx u{ q|v s qsx
Β u t| qy{ | q{w tt qvt s qsx
∆ u { qzv w qvz x qsu s qsx
误差k Χl u t qzw s q{z
由上面的方差分析表可见 o溶液的 ³ 值k Αl对包封率
的影响最显著k Π s qsxl o影响因素的大小顺序为 Α Β
∆ Χo°
≤量k Χl因素的极差最小 o可作为误差项 ∀确定
最佳工艺为 Αt Βu Χu ∆v o即溶液 ³值 u o主药的量和 °
≤的
量都为 txs Λo涡旋时间是 u °¬±∀
#|{x#
第 u|卷第 y期
ussw年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ y∏±¨ oussw
2 q5 最佳工艺条件制备毫微粒验证实验
2 q5 q1 形态观察 按照最佳工艺条件制备毫微粒 o电镜观
察可见粒子均匀圆整 o粒径均在 uss ±°以内 o分布范围满足
肝靶向对粒径的要求 ∀见图 t ∀
图 t ≥2°
≤2°电镜照片
2 q5 q2 包封率测定
色谱条件 ³«¨ ±²° ±¨¨ ¬ k∏±¤ ≤t{ w qy °° ≅ uxs °° ox
Λ°l分析柱 o甲醇2水kywΒvyl为流动相 o流速 t qs °#°¬±p t o
检测波长 us{ ±° o室温 ∀
测定方法 对照品溶液的制备 }取蕨麻 素对照品适
量 o精密称定 o加流动相制成每 t °含 s qu °ª的溶液 o即得 ∀
供试品溶液的制备 }毫微粒溶液经超速冷冻离心kws ε otx
sss µ#°¬±p t oys °¬±l o取上清液用微孔滤膜ks qwx Λ°l滤过 o
取续滤液 o即得 ∀
测定法 分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 ts
Λo注入液相色谱仪 o测定 o计算 o即得 ∀见图 u ∀
图 u 蕨麻 素 °≤ 色谱图
q蕨麻 素对照品 ~
q样品 ~t q蕨麻 素
2 q5 q3 样品测定 采用最佳工艺制备 3 批样品 o测定结果
见表 w ∀用 v 批最佳工艺制备的样品测定结果 o包封率为
{t q|z h o粒子平均圆整 o平均粒径 tss ∗ uss ±° o说明最佳工
艺稳定 o重现性好 ∀
表 w 样品测定结果
样品编号 包封率r h 平均粒径r±°
t {s qxy tts quw
u {t qyw tsy qzx
v {v qzu tzz qtw
3 讨论
纳米技术在医药领域的延伸发展 o是当前纳米科技研究
的一个焦点 ∀纳米技术运用于治疗癌症方面的报道较多 o同
时 o由于其具有良好的肝脏靶向性 o将是抗乙肝病毒的优良
载体 ∀我们在国家科技部新药基金资助下 o研制出蕨麻素有
效部位制成的制剂 o体内外显示良好的抗病毒活性 o有较好
的临床效果 ∀但由于其局部血药浓度低 o且药物很难进入肝
实质细胞内杀灭病毒 o并不能彻底地治疗乙肝 ∀为提高蕨麻
素治疗病毒性肝炎的疗效 o采用乳化聚合法研制了 ≥2°
2
≤2°∀正交实验结果 o影响粒子的主要因素是溶液的 ³
值 o主药的浓度 o°
≤ 的用量 o涡旋时间 o通过正交实验可
知 o影响因素为的影响大小顺序为 Α Β ∆ Χo影响因素
最大是 ³值k Π s qsxl o³ 值选择至关重要 o这与文献≈w2
y 报道一致 ∀ °
≤量因素影响最小 o选用和主药相同的量 o
可见蕨麻素载药量较高 ∀采用最佳制备工艺制备的样品溶
液 o经过包封率的测定和形态观察 o粒子均匀圆整 o包封率
高 ∀由于在实验条件下所得样品的粒径均能达到肝靶向要
求 o而且电镜观察成本较高 o因此正交实验中没有考察粒径 ∀
肝靶向毫微粒给药系统已经成为药剂领域当今发展的
极具开发前景的靶向给药系统之一 ∀本研究首次建立了中
药蕨麻素有效部位的毫微粒给药系统 o为有效成分相对明确
的中药肝靶向研究提供了范例 ∀该研究将为抗肝病中药提
供新的治疗手段和依据 o提高疗效 o降低毒副作用 o有助于中
药现代化国际化 o具有重要的现实意义和良好的前景 ∀
≈参考文献
≈t 赵艳玲 o蔡光明 o张新全 o等 q赋肝能抗病毒作用研究 q中国药
学杂志 ousst ovykxl }vsx q
≈u 赵艳玲 o蔡光明 o胡 琳 o等 q中药制剂赋肝能对小鼠实验性肝
损伤的保护作用 q中国药学杂志 ousst ovykzl }ww{ q
≈v 张志荣 o何 勤 q肝靶向万乃洛毫微粒的研究 q药学学报 o
t||{ ovvk|l }zsu q
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≈x 张志荣 o廖工铁 o侯世祥 q米托蒽醌聚氰基丙烯酸正丁酯毫微
粒的研究 q药学学报 qt||w ou| }xww q
≈y 蒋学华 o廖工铁 o姚 倩 o等 q吸附法制备阿克拉霉素 聚氰基
丙烯酸异丁酯毫微粒的研究 q中国药学杂志 ot||x ovkxl }uzw q
≈责任编辑 袁桂京
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第 u|卷第 y期
ussw年 y月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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