全 文 ：续表 t
序号 τ r°¬± 化合物 相对含量r h
tx t{ qu| 异龙脑 ¬¶²¥²µ±¨ ²¯ u qvu
ty t{ qxw 辛酸 ²¦·¤±²¬¦¤¦¬§ s qzx
tz ut qxw u2烯基2癸酮 k Εl2u2§¨ ¦¨±¤¯ s qx{
t{ ut q{s 壬酸 ±²±¤±²¬¦¤¦¬§ s qyv
t| uv qsu t otχ2二环己烷 t otχ2¥¬¦¼¦¯²«¨ ¬¼¯ t quy
us ux qzw 己酸己酯 «¨ ¬¤±²¬¦¤¦¬§o«¨¬¼¯ ¶¨·¨µ s qwz
ut vt qty 十二酸 §²§¨¦¤±²¬¦¤¦¬§ s qz{
uu vu qyz 肉豆蔻酮 ·¨·µ¤§¨¦¤±¤¯ s qu{
uv vy qzs 肉豆蔻酸 ·¨·µ¤§¨¦¤±²¬¦¤¦¬§ s q{z
uw vz q|{ u oy ots otw2四甲基2十六烷 u oy ots otw2·µ·µ¤°¨ ·«¼¯2«¨ ¬¤§¨¦¤±¨ s qwu
ux v{ q{v y ots otw2三甲基2u2十五酮 y ots otw2·µ¬° ·¨«¼¯2u2³¨ ±·¤§¨¦¤±²±¨ s qvv
uy ws q|x 棕榈酸甲酯 ° ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ«¨ ¬¤§¨¦¤±²¬¦¤¦¬§ s qyw
uz wt quz tt p烯基2棕榈酸 k Ζl2tt2«¨ ¬¤§¨¦¨±²¬¦¤¦¬§ s qxw
u{ wt q|s 棕榈酸 «¨ ¬¤§¨¦¤±²¬¦¤¦¬§ y qww
u| wu qsz |2烯基2棕榈酸乙酯 «¨ ¬¤§¨¦¨±²¤·¨ s q{z
vs wu qvt |2烯基2棕榈酸 |2«¨ ¬¤§¨¦¨±²¬¦¤¦¬§ s qz{
vt wu qyu 棕榈酸乙酯 ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ«¨ ¬¤§¨¦¤±²¬¦¤¦¬§ w qyt
vu ww q{{ 亚麻酸甲酯 ¬¯±²¯ ¬¨¦¤¦¬§° ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ s quz
vv wx qsy ts2烯基2亚麻酸甲酯 k Ζl2ts2¯¬±²¯ ¬¨¦¤¦¬§° ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ s qws
vw wx qz| 亚麻酸 k Ζ , Ζl2| otu2¯¬±²¯ ¬¨¦¤¦¬§ u q|v
vx wx q|v 油酸 ²¯ ¬¨¦¤¦¬§ u qzu
vy wy qwu 亚麻酸乙酯 ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ| otu2²¦·¤§¨¦¤§¬¨±²¤·¨ y qwx
vz wy qxx 亚油烯酸乙酯 ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ¯¬±²¯ ±¨¬¦¤¦¬§ w qu{
v{ wz qt| 硬脂酸乙酯 ·¨«¼¯ ¶¨·¨µ¶·¨¤µ¬¦¤¦¬§ s qz|
v| xt qxy 十八酰胺 k Ζl2|2²¦·¤§¨¦¨±¤°¬§¨ s qy|
ws yz qu| 豆甾醇 ¶·¬ª°¤¶·¨µ²¯ s qwx
wt y{ q|u Β2谷甾醇 Β2¶¬·²¶·¨µ²¯ t qt{
wu y| qxu 羽扇豆醇 ∏¯³¨ ²¯ s qzt
≈参考文献
≈t 中国药典 q一部 qusss qvt q
≈u 路志强 q川楝子的性味功能与现代临床应用 q内蒙古中医药 o
t||z ot }wx q
≈责任编辑 李 禾
高效液相色谱法测定地耳草中槲皮素的含量
田 刚 3 o彭国平
k南京中医药大学 o江苏 南京 utssu|l
地耳草又名田基黄为藤黄科植物地耳草 Ηψπεριχυµ
ϕαπονιχυµ ׫∏±¥q的干燥全草 ∀具有清利湿热 o散瘀消肿的作
用 ∀用于急 !慢性肝炎 o疮疖痈肿 ∀田基黄注射液对 ≤≤¯ w 所
致的肝损伤有明显保护作用≈t ∀田基黄注射液能抑制 ≤≤¯ w
所致的 ≥°×升高和肝脂质过氧化 o尤其对 ≤≤¯ w 引起的肝细
胞色素 °2wxs含量的降低具有明显保护作用≈u ∀地耳草还
≈收稿日期 ussv2|2us
≈通讯作者 3田刚 oר¯ }ksuxlyz|{t{y o∞2°¤¬¯}·ª²²²² ¶¬±¤q¦²°
对肿瘤细胞有抑制作用 o而对正常细胞无抑制作用≈v ∀地耳
草的化学成分主要有黄酮 !黄烷醇及其苷类和间苯三酚衍生
物≈w ∀未见文献报道其含量测定方法 o为了更有效地对其进
行质量控制 o本实验参考文献≈x o采用正交设计法对样品的
提取和水解条件进行了研究 o建立了地耳草中槲皮素高效液
相色谱测定方法 ∀
1 仪器与试药
• ¤·¨µ¶xts高效液相色谱仪 o • ¤·¨µ¶w{y 紫外检测器 o
• ⁄p |x色谱工作站 ∀
#yzw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ x
¤¼oussw
槲皮素对照品k购自中国药品生物制品检定所 o批号
s{t2|ssv o供含量测定用 o纯度在 |{ h以上l ~地耳草药材购
自亳州药材市场 o经南京中医药大学吴启南教授鉴定为 Ηψ2
περιχυµ ϕαπονιχυµ ׫∏±¥q的干燥全草 ~甲醇为色谱纯 o水为重
蒸馏水 o其余试剂均为分析纯 ∀
2 色谱条件
µ²°¤¶¬¯ ≤t{色谱柱kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l o柱温 vs
ε ~流动相甲醇2s qt h三氟乙酸kxvΒwzl o进样量 x Λk定量
环l ~流速 s q{ °#°¬±pt o检测波长 vys ±° ∀分离结果见图 t ∀
图 t 地耳草 °≤图
q槲皮素对照品 ~
q样品 ~t q槲皮素
3 方法和结果
3 q1 溶液的制备 对照品溶液的制备 精密称取于 ys ε
减压干燥至恒重的槲皮素适量 o精密称定 o制成每t °含
s qs{ °ª的溶液 o即得 ∀
供试品溶液的制备 取地耳草细粉 t qs ªk过 ws目筛l o
精密称定 o准确加 zs h甲醇 xs °o称重 o超声 ws °¬±k超声功
率为 uxs • o频率为 xs ®½l ∀放冷 o称重后 o用 zs h 甲醇补
足减失的重量 o摇匀 o过滤 o精密移取 vs °续滤液 o加入
ux h盐酸 tx °水浴回流水解 ys °¬±o快速冷却 o定容至 xs
°o摇匀 o离心kts sss µ#°¬±p tlts °¬±o取上清液滤过ks qwx
Λ°微孔滤膜l o即得 ∀
3 q2 样品提取方法的优选 提取地耳草中以槲皮素为苷元
的黄酮主要取决于所用溶剂种类以及提取时间 o对提取溶
剂 !提取时间进行考察 o本实验选用 |kvwl正交表 o以提取水
解后的槲皮素的峰面积和称重的比值k Σ/ Ωl作为考察指标 o
进行了 |次试验 o取药材细粉 t ªo精密称定 o按表 t操作 o考
察提取条件 o水解条件与样品测定条件一致 ∀
表 t 地耳草中槲皮素提取方法因素水平表
² Α甲醇浓度r h
Β
提取时间r°¬±
t ys us
u zs vs
v {s ws
方差分析表明 o两因素对提取结果影响均不显著 o但
zs h的甲醇作为提取溶剂较好 o提取时间为 ws °¬±较好 ∀在
正交实验之前曾经比较提取时间对提取结果的影响 o结果表
明提取 ws °¬±即可提取完全 o延长时间也不能使提取效率更
高 ∀结果表明用 zs h的甲醇超声提取 ws °¬±o能使地耳草中
以槲皮素为苷元的黄酮提取完全 ∀
3 q3 样品水解方法的优选 要将地耳草中提取液中以槲皮
素为苷元的总黄酮水解完全主要取决于酸的浓度及水解时
间 o对盐酸浓度和水解时间进行考察 o本实验选用 |kvwl正
交表 o以提取水解后的槲皮素的峰面积作为考察指标 o进行
了 |次试验 o按优选的提取条件得提取液 vss °o各精密移
取 vs °o按表 u操作 ∀
表 u 地耳草中槲皮素水解方法选择正交试验结果表
² Αzs h甲醇提液Βux h盐酸
Β
水解时间r°¬±
t yΒt us
u wΒt ws
v uΒt ys
方差分析表明 o两因素对提取结果影响均不显著 o但用
zs h的甲醇提液Βux h盐酸kuΒtl为水解溶剂 o水解效率较高 ∀
故因素 Α选择水平 v ∀因素 Β选择水平 v o选择水解时间为
ys °¬±∀
在正交实验之前曾经比较水解时间的影响 o超过 ys °¬±
水解效率也不能再提高 ∀结果显示 ovs °提取液加入 tx °
ux h盐酸水浴回流水解 ys °¬±能使地耳草中以槲皮素为苷
元的黄酮水解完全 ∀
3 q4 标准曲线 精密称取于 ys ε 干燥至恒重的槲皮素对
照品 v qtw °ªo置于 ts °容量瓶中 o加甲醇稀释至刻度 o制成
槲皮素标准贮备液kvtw °ª#ptl ∀采用逐级稀释法再分别配
成 txz oz{ qx ov| qux ot| qyux o| q{tu x °ª#pt的系列对照品液 o
分别吸取上述溶液 o液相色谱仪进样 x Λ测定 o以峰面积为
纵坐标 o对照品浓度k°ª#ptl为横坐标 o绘制标准曲线 o得回
归方程 }Ψ tvs ts Ξ2y wy| oρ s q||| | ~槲皮素浓度在 | q{ ∗
vtw °ª#pt呈良好的线性关系 ∀
3 q5 精密度测定 精密吸取上述对照品溶液 o连续重复进
样 y次 o每次 x Λo槲皮素峰面积 ≥⁄为 s qy h ∀
3 q6 稳定性试验 将样品溶液在室温下贮存 o于s ou qs o
w qs oy qs o{ qs ots qs otu «测定 o结果样品溶液在 ts «内稳定 o
槲皮素峰面积 ≥⁄为 t qt h ∀
3 q7 重现性试验 取同一批的地耳草药材 y份 o分别精密
称定 o按上述样品溶液制备方法和色谱条件测定 o计算含
量 o ≥⁄为 t qw h k ν yl ∀
3 q8 加样回收率试验 取已知含量的地耳草样品适量 o精
密称定 o分别精密加入槲皮素适量 o按上述样品溶液制备方
法和色谱条件测定 o计算含量 o槲皮素平均回收率为 |{ qz
h o ≥⁄ t qt h ∀结果见表 x ∀
3 q9 样品测定 按 3 q1 项下操作 o分别对 v批样品按上述含
量测定方法进行测定 o另进对照品溶液 o以外标法计算含量 o
结果 v批样品中槲皮素的含量分别为 | qus o| qut o{ qwx °ª#
ªp t ∀
4 讨论
#zzw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ x
¤¼oussw
表 x 地耳草中的加样回收率试验结果
样品量
r°ª
加标量
r°ª
检出量
r°ª
回收率
r h
平均回收率
r h
≥⁄
r h
w qw{z v qx{s { qsyu || q|
w qw|{ v qx{s { qst{ |{ qv
w qxts w qwzx { q|xw || qv |{ qz t qtw qwzx w qwzx { q{wu |z qy
w qxsv x qvzs | q{xu || qy
w qxwt x qvzs | qzzu |z qw
4 q1 指标性成分的确定 由于地耳草基础研究很不充分 o
国内外尚未进行系统的化学成分研究 o其药理研究仅局限于
全草提取物或某一部位 o因此地耳草中缺乏能够直接测定的
有效成分或指标成分 o或含量太低 o根据文献报道地耳草中
黄酮类主要有槲皮素 !槲皮苷 !白前苷
等≈w ∀以槲皮素为
苷元的黄酮类化合物是其中的主要成分之一 o因此作者采取
先提取后水解 o然后测定槲皮素的含量 o实验表明本方法快
速 !简便 !准确 o可作为地耳草及其制剂的质量控制指标成
分 ∀
4 q2 提取水解方式的选择 作者比较了回流和超声等提取
方式 o结果表明超声提取较好 o且操作简便 o因此选用超声提
取法 ~然后考察了提取时间和甲醇浓度的影响 o结果 zs h甲
醇超声 ws °¬±提取率较高 ~后又考察了水解过程盐酸浓度和
酸水解时间的影响结果结果显示 ozs h 甲醇体液提取液 vs
°加入 tx °ux h盐酸水浴回流水解 ys °¬±能使地耳草中
以槲皮素为苷元的黄酮苷水解完全 o盐酸的浓度不宜再高 o
酸性太强对进样阀和色谱柱的腐蚀作用较大 ∀
4 q3 地耳草的质量控制 地耳草因疗效独特而广泛应用于
临床 o然而其质量评价方法报道极少 o因而本试验为地而草
及其制剂的质量控制提供了分析方法 ∀
≈参考文献
≈t 黎七雄 o王玉山 q彭仁 o等 q地耳草k田基黄l注射液对四氯化
碳引起小鼠肝损伤的保护作用 q中草药 ot||u ouvkyl }vtt q
≈u 黎七雄 o彭仁 o高 平 q田基黄注射液对小鼠醋氨酚肝脏毒性
的保护作用 q中国药学杂志 ot||u ouzk{l }wzu q
≈v 孙忠义 o黎七雄 o龚坦夫 q等 q中草药/田基黄0治疗原发性肝癌
的临床研究 q武汉市医学科研 ot||y ot{kul }ux q
≈w 辛义周 o张希成 o唐文照 q地耳草的化学成分及药理作用研究进
展 q山东医药工业 oussv ouukul }u{ q
≈x 鞠兴荣 o汪海峰 q银杏叶提取物中黄酮类化合物的高效液相色
谱测定 q食品科学 ousst ouuktul }yy q
≈责任编辑 李 禾
康灵口服液对动物学习记忆能力的影响
许 莉 3 o苏富琴 o杨宏艳 o王玉春 o齐占朋 o
单 威 o宋 娟 o苗 术 o李 涛
k齐齐哈尔医学院 药理教研室 o黑龙江 齐齐哈尔 tytswul
随着老龄化社会的到来 o老年性痴呆的发病率日益增
加 o其中阿尔茨海默病k ¯ ½«¨¬° µ¨. ¶§¬¶¨¤¶¨ o⁄l的临床症状
主要是记忆障碍 o认知功能缺失及痴呆≈t ∀为提高老年人的
生活质量 o延缓衰老 o笔者将本院附属医院中医科常用的治
疗/肝肾阴虚而致须发早白 o血虚头晕 o目眩 o腰膝酸软无力 o
失眠 !健忘0的方剂 o制成了康灵口服液 o进行动物学习记忆
能力的研究测试 o现报告如下 ∀
1 材料
1 q1 动物 •¬¶·¨µ大鼠 o体重 uss ∗ vss ª~昆明种小鼠 o体重
us ∗ ux ªo雌雄兼用 o由齐齐哈尔医学院实验动物中心提供 ∀
1 q2 药品 康灵口服液组方 }丹参 !何首乌 !灵芝 !山楂 ∀制
备方法 }水煎提取 ψ滤过 ψ加 us h蔗糖 ψ灌封 ψ灭菌 ~含生
药 tusª#pt ~吡拉西坦片剂 o沈阳第一制药厂生产 o批号
≈收稿日期 ussv2ts2uv
≈通讯作者 3许莉 oר¯ }kswxulyzvttzs
||tust ~氢溴酸东莨菪碱注射液 o上海禾丰制药有限公司生
产 o批号 |{s|st ∀
1 q3 仪器 p u型迷津刺激器 o张家港市生物医学仪器
厂生产 ~小鼠跳台刺激箱 o中国医学科学院药物研究所研制 ∀
2 方法与结果
2 q1 康灵口服液对小鼠学习记忆能力的影响k跳台实验
法l≈u 选取健康小鼠 zx只 o随机分为 x组 o即 ´组 }康灵口
服液低剂量组k临床剂量按体表面积折算于小鼠 o下同 ∀含
生药 tu ª#®ªptl ~µ组 }康灵口服液高剂量组ku倍临床剂量 o
含生药uwª#®ªp tl ~¶组 }吡拉西坦k³¬µ¤¦¨·¤±l阳性对照组
ks qt ª#®ªp tl ~·组 }空白对照组 ~∏组 }模型组 ∀ · o∏组均
给同容量生理盐水k≥l ∀各组均灌胃k¬ªl给药 o容量 s qu °
#tsªp t体重 o每日 t次 o连续 u周 ∀于第 tv天上午给药 t «
后 o开始训练 ∀训练前 ts °¬±o·组腹腔注射k¬³l生理盐水
s qt °#ts ªp t体重 o其余各组 ¬³等容量氢溴酸东莨菪碱
k≥¦²³²¯¤°¬±¨ «¼§µ²¥µ²°¬§¨ ot qx °ª#®ªptl ∀训练时先将小鼠放
#{zw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ x
¤¼oussw