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Determination of aristolochic acid A in Radix Aristolociae and Herba Asari by RP-HPLC

RP-HPLC测定不同产地青木香和细辛中马兜铃酸A的含量



全 文 :3 q2 玫瑰不同品种花器官的鉴别特征可概括为香
水玫瑰 t号属离生花柱式 o其余品种为头状花柱式 ~
丰花玫瑰雄蕊瓣化 o其余品种皆无此现象 ~紫枝玫瑰
在花梗 !花托基部 !花萼基部均无腺毛和非腺毛 o有
别于其他 v个品种 ∀这些特征可作为生产中品种鉴
定及商品药材的鉴别依据 ∀
3 q3 开花过程中受环境因素影响较大 o主要是温
度 !风和降雨 ∀在温度 t{ ∗ us ε 时开花进程加快 ~
风大开花进程生产中应注意适宜栽培环境的选择 ∀
3 q4 紫枝玫瑰开花习性与月季相似 o自始花后每月
开花 t次 o具有抽枝即能开花的特点≈v  o该品种既可
药用 o也具有较高的观赏价值 ∀
≈参考文献 
≈t  金敬宏 q玫瑰的综合开发 q中国野生植物资源 ousss ot|kyl }
ut q
≈u  刘秀湘 o余仲元 o陈宗元 q玫瑰花色素的研究 q天然产物研究与
开发 ot||w oykul }xy q
≈v  郭永来 q紫枝玫瑰及其栽培管理 q农业科技通讯 ot||{ ok{l }
tz q
Χοµ παρισον οφ τηε βοτανιχ µ ορπηολογψ
ανδ βλοοµινγ χηαραχτεριστιχσ οφ φουρ χυλτιϖαρσ οφ ροσε
• „‘Š Ž¤±ª2¦¤¬t oׄ‘Š ÷¬¤²2 ¬´±ªt o≥‹∞‘Š ¬±2¯¬t o ÷˜ ÷¬¤²2¯ ¤±t oƒ„‘Š «¨ ±u
(t . Νανϕινγ Αγριχυλτυρε Υνιϖερσιτψ, Νανϕινγ utss|x Χηινα ;
u Σανϕιυ Μεδιχαλ & Πηαρµαχευτιχαλχο , ΛΤ∆ , Σηενζηεν xt{su| , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ¶¨·¤¥¯¬¶«¬§¨±·¬©¼¬±ª ° ·¨«²§©²µ©∏µ·«¨µ§¨√¨¯²³° ±¨·¤±§∏·¬¯¬½¤·¬²± ¥¼ ¶·∏§¼¬±ª ¥²·¤±¬¦ °²µ³«²¯²ª¼ ¤±§
¥¯²²°¬±ª¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©©²∏µ√¤µ¬¨·¬¨¶²©µ²¶¨¶¬±­¬¤±ª¶∏³µ²√¬±¦¨ q Μετηοδ : ƒ¯ ²º µ¨2¥∏§¤±§©¯²º µ¨2©²µ° º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨¥¼ §¬¶¶¨¦·¬²± ¤±§
³¯¤±·°²§¤¯¬·¼ ¤±§¥¯²²°¬±ª³µ²¦¨¶¶º µ¨¨ ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨§q Ρεσυλτ ανδ Χονχλυσιον :׫¨ ©¯²º µ¨©²µ° ¤±§³¯¤±·°²§¤¯¬·¼ º¤¶²¥√¬²∏¶¯¼ §¬©©¨µ¨±·¤2
°²±ª·«¨ w √¤µ¬¨·¬¨¶²©µ²¶¨¶~׫¨ ³µ²¦¨¶¶²©§¬©©¨µ¨±·¬¤·¬²± ²©©¯²º µ¨2¥∏§¦²∏¯§¥¨ §¬√¬§¨§¬±·²©¬√¨¶·¤ª¨¶}·«¨ ·µ¤±¶©²µ°¤·¬²± ²©±∏·µ¬·¬√¨ªµ²º·«
¦²±¨ o·«¨ ²¦¦∏µµ¨±¦¨ ¤±§§¨√¨¯²³° ±¨·²©¶¨³¤¯ o©²µ°¤·¬²± ²©³¨·¤¯ ³µ¬°²µ§¬∏° o©²µ°¤·¬²± ²©³¬¶·¬¯¤±§¶·¤° ±¨q׫¨ ¥¯²²°¬±ª³µ²¦¨¶¶º¤¶°¤§¨
∏³²© ©¯²º µ¨2¥∏§ ³¨µ¬²§o §¬¶³¯¤¼2³¨·¤¯ ³¨µ¬²§o¬±¬·¬¤·¬±ª ¥¯²²°¬±ª ³¨µ¬²§o ¥¯²²°¬±ª ³¨µ¬²§o º¬·«¨µ¬±ª ³¨µ¬²§ ¤±§¦²µµ¨¶³²±§¬±ª ¥¬²¯²ª¬¦¤¯
°¤µ®¶q
[ Κεψ ωορδσ] µ²¶¨ ~¥²·¤±¬¦°²µ³«²¯²ª¼~©¯²º µ¨2¥∏§§¨√¨¯²³° ±¨·~¥¯²²° ≈责任编辑 王康正 
• °2‹°≤测定不同产地青木香和
细辛中马兜铃酸 „的含量
姜 旭 o王智民 3 o由丽双 o代丽萍 o丁广治
k中国中医研究院中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }测定不同地区市售青木香 !细辛中马兜铃酸 „的含量 o用于指导临床用药和相关研究 ∀方法 }
应用高效液相色谱法 o选用 „¯ ·¯¨¦«≤t{色谱柱kw qy °° ≅ uxs °° ox Λ°l o甲醇2水2醋酸ky{ΒvuΒtl为流动相 o流速为 t qs
°#°¬±p t o柱温为 vx ε o紫外检测波长为 v|s ±° ∀结果 }马兜铃酸 „在 s qtt| ∗ t q{| Λª有良好的线性关系 o平均加
样回收率为 tst q{ h o• ≥⁄为 u qs| h ∀不同产地青木香中马兜铃酸 „的含量在 s q|ty | ∗ t q|sz y °ª#ªp t o其中以河
北安国产青木香的含量较高kt q|sz y °ª#ªp tl ~细辛中马兜铃酸 „的含量在 s ∗ vxt ª#ªpt o其中以吉林市售品含量
≈收稿日期  ussw2st2tx
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目kvsuztytul ~国家中医药管理局资助项目kvsuztytul
≈通讯作者  3王智民 oר¯kstsl{wstwtu{ oƒ ¬¨}kstslywstv||y o∞2°¤¬¯}½«°ºtuv ƒ uyv q±¨ ·
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第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
¤¼oussw
较高 ∀结论 }本方法精密度高 o重现性好 o可用来含马兜铃酸类中药材中马兜铃酸 „的含量测定 ~含马兜铃酸的中
药中以关木通中马兜铃酸 „的含量最高 o青木香中的含量约为关木通中的含量的 trv o细辛的含量最低 ∀
≈关键词  青木香 ~细辛 ~马兜铃酸 „ ~• °2‹°≤法 ∀
≈中图分类号  ≥ xyz ~• u{w qt ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswlsx2sws{2sv
青木香为马兜铃科多年生缠绕草本植物马兜铃
Αριστολοχηια δεβιλισ ≥¬¨¥q¨·∏¦¦q的根 ∀临床上广泛应
用于肝胃气滞 o秽浊内阻引起的脘腹疼痛 o虫蛇咬
伤 o诸毒热肿 o风湿痹痛 o外伤淤滞肿痛等 ∀细辛为
马兜铃科植物北细辛 Ασαρυµ ηετεροτροποιδεσ ƒµq
≥¦«°¬§·√¤µq µανδσηυριχυµ k¤¬¬°qlŽ¬·¤ªq!汉城细辛
Α. σιδβολδιι ¬´ q√¤µq¶¨²∏¯ ±¨¶¨ ‘¤®¤¬或华细辛 Α.
σιεβολδιι ¬´ q的干燥全草 ∀临床上用于祛风散寒 o通
窍止痛 o温肺化饮≈t  ∀其中所含的马兜铃酸为硝基
菲酸类成分 o虽然它们具有一定的生理活性 o如抗
癌 o抗感染及吞噬细胞活性的作用 o还可提高抗菌素
及化疗药物的治疗效果 o但同时又是一种有毒成分 o
具有强烈的肝 !肾毒性 o长期或过量服用易导致癌症
或肾衰竭等 ∀近年来 o国内外已有不少因服过量含
马兜铃酸的中药而导致肾衰竭的病例 o而引起国内
外极大的关注 ∀为了解这些含马兜铃酸类中药的毒
性成分的含量情况 o为临床的安全用药提供依据和
参考 o作者对全国不同地区市售的关木通≈u  !青木
香 !细辛等含马兜铃酸类中药材进行了马兜铃酸 „
的含量调查 ∀文献中对于青木香中马兜铃酸 „的含
量测定方法有薄层扫描法≈v  o反相离子对色谱法≈w 
等 ~而细辛中马兜铃酸 „的含量测定方法尚未见报
道 ∀本试验首次以 ‹°≤ 法测定了不同产地青木
香 o细辛中马兜铃酸 „的含量 ∀
1 仪器与试药
‹ º¨¯ ·¨p °¤¦®¤µ§ttss液相色谱仪 o包括 }四元
泵 !自动进样器 !二极管阵列检测器 !化学工作站 ~甲
醇k优级纯l北京化工厂 ~甲酸为分析纯 o乙酸为分析
纯 o水为高纯水 ~马兜铃酸 „对照品k中国药品生物
制品检定所 o批号 szwy2usstsvl ∀青木香药材购于
吉林 !浙江 !云南 !安徽 !河北等地 o细辛药材购于吉
林 o辽宁 o由中国中医研究院中药研究所何希荣副研
究员鉴定 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件 „¯ ·¯¨¦« ≤t{色谱柱kw qy °° ≅ uxs
°° ox Λ°l ~流动相甲醇2水2醋酸ky{ΒvuΒtl ~流速 t qs
°#°¬±pt ~柱温 vx ε ~紫外检测波长为 v|s ±°∀
2 q2 对照品溶液的制备 精密称取马兜铃酸 „标
准品 tt q{v °ªo用无水乙醇溶解 o定溶于 ts °容量
瓶中 o制得浓度为 t qt{v °ª#°pt的标准品储备液 ∀
2 q3 供试液的制备 取 t ª青木香或细辛药材粉
末 o精密称定 o置 ux °容量瓶中 o加入甲醇2ts h甲
酸水kwΒtl约 us °o浸泡 t «后 o超声提取 v次 o每次
tx °¬±o最后定容置 ux °o过微孔滤膜 o弃去初滤
液 o收集续滤液 o即得 ∀
2 q4 线性关系的考察 分别精密吸取 t .t{v ª#pt
的马兜铃酸 „标准储备液 s qx ot ou ow o{ °置于 ts
°容量瓶中 o用无水乙醇稀释至刻度 o则马兜铃酸
„的浓度为 x q|x ott q{v ouv qyy owz qvu o|z qyw ª#
°pt ∀各进样 us ˏ以液相色谱仪分析 o以进样量
÷kΛªl为横坐标 o马兜铃酸 „ 吸收峰面积 Ψ为纵坐
标 o绘制标准曲线 ∀
回归方程 }Ψ € w .|zu { n ttsv .yzu z Ξ oρ€
s q||| | o结果表明马兜铃酸 „在 s qtu ∗ t q{| Λª与其
色谱峰面积积分值呈良好的线形关系 ∀液相色图 o
见图 t ∗ v ∀
图 t 马兜铃酸 „标准品液相色谱图
t q马兜酸 „k图 u ov同l
图 u 青木香提取液的液相色谱图
#|sw#
第 u|卷第 x期
ussw年 x月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| oŒ¶¶∏¨ x
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图 v 细辛提取液的液相色谱图
2 q5 精密度试验
精密吸取同一份供试品溶液 o重复进样 x次 o每
次 us ˏo马兜铃酸 „的峰面积的 • ≥⁄为 s qwx h ∀
2 q6 稳定性试验
精密吸取供试品溶液 us ˏo依法测定在 s ∗ t{
«每隔 u «测定 t次 o第 uw «测定 t次 o结果 • ≥⁄为
s qvvw h k ν € ttl ∀表明供试品溶液在 uw «内稳定 ∀
2 q7 重复性实验
取云南丽江青木香 y份 o按样品溶液制备方法
处理 o进样 us ˏo依法测定 o样品中马兜铃酸 „结果
样品中马兜铃酸 „ 含量的平均值为 ||s q| Λª#ªpt o
其 • ≥⁄为 u q|x h k ν € xl ∀
2 q8 加样回收率
取知含量的云南丽江青木香 s qx ªo精密称定 o
分别定量加入马兜铃酸 „ 对照品 w|y q| Λªo按供试
品溶液制备方法制备 o依法测定 o结果马兜铃酸 „的
平均加样回收率为 tst q{ h o• ≥⁄€ u qs| h k ν € xl ∀
2 q9 含量测定
收集不同产地的青木香 !细辛 o测定不同产地青
木香及细辛药材中马兜铃酸 „ 的含量 ∀结果见表
t !表 u ∀
表 t tt个不同产地青木香中马兜铃酸 „的含量
产地 含量r°ª#ªpt 产地 含量r°ª#ªpt
安徽岳西 t q{ys 江苏江阴 t qtv|
安徽潜山 t qttw 河南郑州 s q|vu
河北安国 t q|s{ 四川重庆 s q|vy
湖北汉川 t qvvs 江苏吴江 s q|uu
吉林松源 s q|tz 安徽定远 t qyxs
云南丽江 s q||u
表 u y个细辛市售样品中马兜铃酸 „的含量
样品名 品种鉴定 含量rΛª#ªpt
吉林市售品 t 北细辛 xs qy|
吉林市售品 u 华细辛 zt qsy
吉林市售品 v 北细辛 vxt qt
辽宁市售品 t 北细辛 uy qwz
辽宁市售品 u 华细辛 twx qs
辽宁市售品 v 北细辛 s
3 讨论
不同产地青木香中马兜铃酸 „的含量在 s q| ∗
u °ª#ªpt o而细辛市售品中马兜铃酸 „ 的含量则较
低 o在 s ∗ vxt Λª#ªpt ∀可为临床安全用药提供参
考 ∀
≈参考文献 
≈t  中国药典 q一部 qusss q
≈u  由丽双 o王智民 o姜 旭 o等 q反相 ‹°≤ 法测定不同产地关木
通中马兜铃酸 „的含量 q中国中药杂志 oussv ou{kxl }wyx q
≈v  常朝霞 o聂贵华 o陈汇强 o等 q薄层扫描法测定青木香中马兜铃
酸的含量 q中成药 ousss ouukvl }uu| q
≈w  赵 霓 o来剑峰 o毕开顺 o等 q反相离子对色谱法测定青木香中
马兜铃酸 „的含量 q沈阳药科大学学报 ousst ot{kul }tux q
∆ετερµινατιον οφ αριστολοχηιχ αχιδ Α ιν Ραδιξ Αριστολοχιαε ανδ
Ηερβα Ασαρι βψ ΡΠ2ΗΠΛΧ
Œ„‘Š ÷∏o • ¤±ª«¬2°¬±o ≠²∏¬2¶«∏¤±o⁄¤¬¬2³¬±ªo⁄¬±ª Š∏¤±ª2½«¬
(Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα , Χηινα Αχαδεµψ οφ Τραδιτοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Βειϕινγ tsszss , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ §¨ √¨¯²³¤ ‹°≤ ° ·¨«²§·²§¨·¨µ°¬±¨ ·«¨ ¦²±·¨±·¶²©¤µ¬¶·²¯²¦«¬¦„¬±¤µ¬¶·²¯²¦«¬¤§¨¥¬¯¬¶¤±§ Ασαρυµ ¶³³qq
Μετηοδ : ° ·¨«¤±²¯2º¤·¨µ2©²µ°¬¦¤¦¬§ ¬¨·µ¤¦·¶º µ¨¨ ¶³¨µ¤·¨§²± ¤± ¤¯ ·¯¨¦« ≤t{ ¦²¯∏°± º¬·« ° ·¨«¤±²¯2º¤·¨µ2¤¦¨·¬¦¤¦¬§ky{ΒvuΒtl ¤¶°²¥¬¯¨
³«¤¶¨ q׫¨ ©¯²º µ¤·¨ º¤¶t qs °#°¬±pt q˜∂ §¨·¨¦·¬²± º¤√¨¯ ±¨ª·«º¤¶v|s ±° q≤²¯∏°±·¨°³¨µ¤·∏µ¨ º¤¶vx ε qΡεσυλτ : „µ¬¶·²¯²¦«¬¦¤¦¬§„
º¤¶¶¨³¤µ¤·¨§º¨¯¯q׫¨ µ¨ ¤¯·¬²±¶«¬³²©¬±­¨¦·¬²± ¤°²∏±·¶¤±§³¨ ¤®¤µ¨¤¶º¤¶ ¬¯±¨ ¤µkρ€ s q||| |l ·«¨ µ¤±ª¨ ²©s qtu ∗ t q{| Λª#ªp t ¤±§·«¨
µ¨¦²√ µ¨¼µ¤·¨ º¤¶tst q{ h k ν € xl qtt ¶¤°³¯ ¶¨²©¤µ¬·²¯²¦«¬¤§¨¥¬¯¬¶º«¬¦«¥²∏ª«·©µ²° §¬©©¨µ¨±·¤µ¨¤¶¬± ≤«¬±¤º µ¨¨ §¨·¨µ¬±¨ §o¤±§·«¨ ¦²±2
·¨±·¶²©¤µ¬¶·²¯²¦«¬¦¤¦¬§„ √¤µ¬¨§©µ²° s q|·²u °ª#ªpt q׫¨ §¬©©¨µ¨±¦¨ ²©·«¨ ¦²±·¨±·¶¬± Ασαρυµ ¶³³qº¤¶²¥√¬²∏¶q׫¨ «¬ª«¨¶·¬¶s qvx o
¤±§¤µ¬¶²¯²¦«¬¦¤¦¬§„ ¦²∏¯§±.·¥¨ §¨·¨¦·¨§¬± ²± ¶¤°³¯¨q
[ Κεψ ωορδσ] • ¤§¬¬ „µ¬¶·²¯²¦¬¤¨ ~¤µ¬¶·²¯²¦«¬¦¤¦¬§„ ~ • °2‹°≤
≈责任编辑 王康正 
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第 u|卷第 x期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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