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Effect of Components of Dang-Gui-Bu-Xue Decoction on Hematopenia

当归补血汤促进造血功能的成分及其作用的研究



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[ Κεψ ωορδσ] ·¨·µ¤±§µ¬±¨ ~√¬±¦µ¬¶·¬±¨ ~ °∏¯·¬§µ∏ªµ¨¶¬¶·¤±¦¨ ~¤³²³·²¶¬¶~«∏°¤± ¥µ¨¤¶·¦¤µ¦¬±²°¤  ≤ƒ2z ¦¨¯¯¶
≈责任编辑 方文贤 
当归补血汤促进造血功能的成分及其作用的研究
宁 炼 o陈长勋 o金若敏 o吴耀平 o张海贵 o孙成立 o宋纯清 o胡之璧
k上海中医药大学 o上海 usssvul
≈摘要  目的 }探讨当归补血汤不同的组分或成分对血虚模型小鼠造血功能的作用及其机理 ∀方法 }采用整
体实验法 ! × × 比色法 !v ‹2ק• 参入法 !半固体造血细胞集落形成技术等 o测定血虚小鼠外周血象 !骨髓有核细胞
数和造血干r祖细胞集落水平 ∀结果 }当归补血汤的多糖与非多糖组分均有补血作用 o多糖组分作用较强 o尤以当
归多糖的作用更为显著 ∀非多糖组分中以阿魏酸作用最强 o黄芪异黄酮等也有一定的作用 ∀以上各成分可在不同
的作用环节上促进造血细胞的形成 ∀结论 }当归补血汤通过多成分 !多环节改善血虚动物的造血功能 ∀
≈关键词  当归补血汤 ~造血功能 ~成分 ~作用机理
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulst2ssxs2sw
当归补血汤为临床常用补血基本方之一 ∀本方
现代主要用于治疗贫血 !白细胞减少症 !对抗放化疗
副作用等 ∀我们曾证明当归补血汤对改进的血虚动
物模型的造血功能有明显的促进作用≈t  ∀为探讨当
归补血汤改善造血系统功能的物质基础及作用环
节 o本文进一步对该方中的多糖与非多糖部分中不
同成分的药理作用进行研究 ∀
1 实验材料
1 q1 受试药物 当归补血汤多糖组分 !当归补血汤
非多糖组分 !黄芪多糖 !黄芪甲苷 !黄芪异黄酮 !黄芪
异黄烷 !黄芪皂苷 !当归多糖 !阿魏酸 }由上海中医药
大学中药研究所宋纯清教授提供 o临用时各以
≈收稿日期  usst2su2sx
≈基金项目  /九五0国家攀登项目k|{°⁄s|l
≈作者通讯  电话 }ksutlxwuvuu|s ∞2°¤¬¯}¯¬²±¬±ªƒ ·¨¤¦«¨µq
¦²°
t qx h二甲亚砜生理盐水溶液配制成所需浓度 ∀
1 q2 试剂 环磷酰胺k≤ ≠l }上海华联制药有限公
司产品 ~乙酰苯肼 k „°‹l }上海试剂三厂产品 ~
 × × }华美生物工程公司产品 ~¦„  ° o¦Š  ° 试剂
盒 }由上海中医药大学同位素室提供 ∀
1 q3 主要仪器 • ¨¯ ¶¯¦¤±2  Žu 自动酶标仪 o
≥|{ss液闪计数仪 o¬¶¨2§u倒置显微镜 ∀
1 q4 动物 昆明种小鼠 o雌雄皆用 o体重 t{ ∗ uu ªo
清洁级 o由上海中医药大学实验动物中心提供 ∀
Œ≤ • 小鼠 !…¤¯¥r¦小鼠 o雌雄皆用 o体重 t{ ∗ uu ªo清
洁级 o均由中国科学院实验动物中心提供 ∀
2 方法与结果
2 q1 多糖与非多糖组分对血虚动物造血功能的影

2 q1 q1 对血虚小鼠≈t 外周血象的影响 取昆明种
小鼠 o随机分为正常组 !模型组 !当归补血汤非多糖
#sx#
第 uz卷第 t期
ussu年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qt
¤±qoussu
组 !多糖组 ∀小鼠按表 t分别灌服给药k剂量内以生
药量表示 o表 u同l o正常组与模型组小鼠同时灌服
给予等容量生理盐水 o每日 t次 o连续 tx §∀于第 u o
x 天模型组与给药组小鼠皮下注射乙酰苯肼 ws ous
°ª#®ªp t o从第 x天起模型组与给药组小鼠腹腔注
射环磷酰胺 ws °ª#®ªp t o连续 w §o正常组小鼠同时
注射等容量 ‘≥ ∀末次给药或 ‘≥ t qx «后小鼠眼眶
取血 o按文献方法计数红细胞 !白细胞 !网织红细
胞≈u ov  ∀结果表明当归补血汤的多糖组分和非多糖
组分均能显著增加血虚小鼠外周血中红细胞数 !减
少网织红细胞数 ~多糖组分可显著增加血虚小鼠的
白细胞数 ∀与等剂量非多糖组分相比 o当归补血汤
多糖组分升高红细胞和白细胞的作用更强k表 tl ∀
表 t 当归补血汤不同提取组分对血虚小鼠外周血象的影响k ξ ? σl
组别 ν 剂量rª#®ªp t 红细胞数r ≅ tstu#p t 白细胞数r ≅ ts|#p t 网织红细胞r红细胞 ≅ ts p v
正常组 tt | qv ? t qwul y qt ? u qvtl x qt ? u qwul
模型组 tt w qx ? s qz v qx ? t qv t|t qv ? ws qx
非多糖组 ts us y qx ? s q|ul w qt ? s q| vv qu ? t| qttl
ts ts y qs ? s q|tl w qv ? t qw yt qv ? vt qwul
多糖组 ts us z qu ? s q|tl w q| ? t q|tl xt qs ? uy qxul
ts ts y q{ ? s q{u ovl y q| ? u q{t owl || qv ? yu qtul
注 }与模型组相比 tl Π s .sx u) Π s .st 与非多糖等剂量组相比 v) Π s .sx w) Π s qstk表 u同l
2 q1 q2 对血虚小鼠骨髓有核细胞数的影响≈v  取
昆明种小鼠 o分组 !给药 !造模同实验 2 q1 q1 方法 ∀
末次给药或 ‘≥ t qx «后小鼠剖取一侧股骨 o计数骨
髓有核细胞数 ∀结果表明当归补血汤的多糖组分和
非多糖组分均能显著增加血虚小鼠的骨髓有核细胞
数 o与等剂量非多糖组分相比 o当归补血汤多糖组分
的作用更强k表 ul ∀
表 u 当归补血汤不同提取组分对血虚
小鼠骨髓有核细胞数的影响k ξ ? σl
组别 ν
剂量
ª#®ªp t
骨髓有核细胞数
r ≅ tsy#p t
正常组 tt w qs ? s q|ul
模型组 tt t qu ? s qu
非多糖组 ts us t qx ? s qvtl
ts ts t qw ? s qvtl
多糖组 ts us u qu ? s qxu owl
ts ts u qs ? s qxu owl
2 q2 不同成分对血虚模型动物造血功能的影响
2 q2 q1 对血虚小鼠骨髓有核细胞增殖的影响≈x 
取 Œ≤ • 小鼠 ts只 o造模同实验 2 q1 q1 方法 o于末次
注射环磷酰胺 t qx «后 o取小鼠一侧股骨 o用 • ° Œ2
tyws培养液冲洗出骨髓并稀释成浓度为 x ≅ tsp x的
细胞悬液 ∀在 |y孔培养板内每孔加入细胞悬液 s qt
°o不同成分或溶剂对照液各 ws ˏo混匀 o每种受
试样品重复 y孔 o置 x h ≤ ’u ovz ε 培养 uw «后 o每
孔加入 s qx h  × × us ˏo继续培养 w «ot sss µ#
°¬±p t离心 tx °¬±o弃去上清液 o每孔加入二甲亚砜
uss ˏo置自动酶标仪于波长 xws ±°处测定吸收度
k„l ∀结果表明 o当归多糖 !阿魏酸 !黄芪多糖 !黄芪
异黄酮和黄芪皂苷均能显著提高血虚小鼠骨髓有核
细胞数k表 vl ∀
表 v 不同成分对血虚小鼠骨髓有核细胞数的影响k ξ ? σl
成分
药物浓度r°ª#°p t
t s qx s qux
当归多糖 s qzyz ? s qxstul s qy|z ? s qxwytl s q{wu ? s qysttl
阿魏酸 s qxxv ? s qsysul s qutx ? s qsxwul s qtv| ? s qst{ul
黄芪多糖 s qzyx ? s qwz{tl s qwvx ? s qwsz s qztw ? s qwt|tl
黄芪甲苷 s qtsz ? s qst{ s qtss ? s qssu s qtsz ? s qssw
黄芪异黄酮 s qtsv ? s qss{ s qs|w ? s qsvw s qtwt ? s qstsul
黄芪异黄烷 s qtsx ? s qssz s qttt ? s qssx s qttt ? s qssy
黄芪皂苷 s qtut ? s qss|tl s qtty ? s qstz s qttx ? s qsts
溶剂对照 s qts| ? s qssz
注 }与溶剂对照相比 tl Π s .sx u) Π s qstk表 w ox同l
2 q2 q2 对血虚小鼠骨髓有核细胞 ⁄‘„ 合成的影
响≈y  取 Œ≤ • 小鼠 ts只 o造模同实验 2 q1 q1 o于末
次注射环磷酰胺 t qx «后 o取小鼠一侧股骨 o用 • °2
Œ2tyws培养液冲洗出骨髓并稀释成浓度为 t ≅ tsy
的单细胞悬液 ∀在 |y孔培养板内每孔加入细胞悬
液 s qu °o不同成分或溶剂对照液各 xs ˏo每组重
复 y孔 o置 x h ≤ ’u ovz ε 培养 |y «o终止培养前 ty
«加入v ‹2ק• s qx Λ≤¬r孔 ∀用多头细胞样品收集器
收集样品于玻璃纤维纸上 o在液体闪烁计数器上测
定¦³°值 ∀结果表明 o当归多糖 !阿魏酸 !黄芪异黄
酮 !黄芪异黄烷和黄芪皂苷均能显著加快血虚小鼠
骨髓有核细胞 ⁄‘„的合成k表 wl ∀
#tx#
第 uz卷第 t期
ussu年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qt
¤±qoussu
表 w 不同成分对血虚小鼠骨髓
有核细胞 ⁄‘„合成的影响k ξ ? σl ¦³°
成分
药物浓度r°ª#°p t
t s qx s qux
当归多糖 {{t q{z ? vzy quvul |{t qv| ? w{t qsxul y{y qsv ? t|v quuul
阿魏酸 v|y q|{ ? vtt q|vtl zt| qx{ ? uuy qz{ul zzz qxz ? tyz q{sul
黄芪多糖 {z qu{ ? vw quw xv qts ? | qyx yx q{z ? t| qwu
黄芪甲苷 yv qzu ? ut qu| {x qsv ? uv qtu u|u qx{ ? tuw qvu
黄芪异黄酮ttt quz ? v| q|z txu q|u ? yy qxvtl yu qs{ ? tx qtv
黄芪异黄烷t{z qyy ? ys qs|ul vys qty ? {s qtuul yx qx{ ? tz q{w
黄芪皂苷 zv qys ? ww qty t{{ qt{ ? tst qxytl usx qts ? x{ qtzul
溶剂对照 {s qwt ? w{ qut
2 q2 q3 对血虚小鼠混合造血干r祖细胞集落生成的
影响≈| 
取 …¤¯¥r¦小鼠 ts只 o造模同实验 2 q1 q1 o于末
次注射环磷酰胺 t qx «后 o取小鼠一侧股骨 o用 • °2
Œ2tyws培养液冲洗出骨髓并制成细胞悬液 o备用 ∀
半固体培养基含 s q| h甲基纤维素 !us h胎牛血清 !
t h脱离子牛血清清蛋白及 xs ˏ不同提取组分 !单
体或溶剂对照液 o将骨髓细胞悬液加入半固体培养
基 o并经显微镜下观察将细胞浓度调整为 x ≅ tsx o加
入 uw孔板 o每孔 s qx °o置 x h ≤ ’u ovz ε 的培养
箱中培养 z §后 o于倒置显微镜下计数混合造血干r
祖细胞集落形成数 ∀结果表明当归多糖能显著提高
血虚小鼠 ≤ƒ ˜2 ¬¬的生成k表 xl ∀
表 x 不同成分对血虚小鼠 ≤ƒ ˜2 ¬¬
生成的影响k ξ ? σl ≤ƒ ˜2 ¬¬rtsx
成分
药物浓度r°ª#°p t
t s qx s qux
当归多糖 y qxw ? v qzsul | qys ? v qxyul z qws ? u qw{ul
阿魏酸 w q|w ? | qvs s qws ? s qyy t q{y ? u quw
黄芪多糖 u qyy ? v qzw s qwy ? s q{u s q{y ? t qys
溶剂对照 s ? s
3 分析与讨论
本实验观察了当归补血汤多糖与非多糖两部分
对血虚小鼠的外周血象 !骨髓有核细胞数的影响 ∀
结果发现在等剂量情况下 o多糖部分的补血活性强
于非多糖部分 ∀
血细胞均起源于骨髓产生的造血干细胞 o在骨
髓中它先分化形成各系定向祖细胞 o然后发育成为
形态上可辨认的各系幼稚细胞 o并进一步分别成熟
为具有特殊细胞功能的各类终末血细胞如红细胞 !
白细胞等 o最后有规律地分批释放进入血液循环 ∀
以往进行的体外实验多数采用正常动物 o本实验首
次采用血虚动物进行体外细胞培养实验 o结果证明
多糖部分中的当归多糖能加快血虚动物骨髓有核细
胞 ⁄‘„的合成 o增加骨髓有核细胞数量 o提高骨髓
造血细胞的总量 o并刺激造血干r祖细胞集落形成 o
加快血细胞的分化与成熟 o促进血虚动物外周血细
胞数量恢复正常 ~黄芪多糖虽能够增加血虚动物的
骨髓有核细胞数量 o但对骨髓有核细胞 ⁄‘„合成和
造血干r祖细胞集落形成却无明显影响 o由此看来当
归多糖对血细胞生成的直接影响大于黄芪多糖 o补
血作用较强 ∀在非多糖部分中 o阿魏酸 !黄芪异黄
酮 !黄芪异黄烷 !黄芪甲苷 !黄芪皂苷等成分在不同
浓度时均有促进造血功能的作用 ∀其中以阿魏酸的
作用最为显著 o它能通过促进血虚动物骨髓有核细
胞 ⁄‘„合成而增加骨髓有核细胞的数量 o其作用强
于其它非多糖成分 ∀为了深入分析各成分在血细胞
形成过程中的作用 o我们选择了当归多糖 !黄芪多
糖 !阿魏酸 v种作用较强的成分 o观察它们对造血干
r祖细胞混合集落生成数量的影响 o结果显示以当归
多糖作用为最强 ∀
当归补血汤由黄芪 !当归以 xΒt配伍而成 o当归
的剂量虽然低于黄芪 o但其有效成分当归多糖和阿
魏酸对血细胞生成过程的直接影响最为显著 o这也
表明中医将当归作为常用补血药是有其科学依据
的 ∀现代研究认为一些免疫细胞如淋巴细胞和免疫
因子如 Œ2y等对造血细胞的增殖均有一定调控作
用≈{ o|  o黄芪多糖等不同成分对机体免疫系统的调节
功能可能是黄芪参与造血过程的作用机理之一 ∀当
归补血汤中有较多的已知成分直接或间接参与了血
细胞的生成 o也反映了该复方是通过多成分 !多环节
来改善血虚动物造血系统的功能 ∀
≈致谢  本实验得到上海中医药大学药理毒理中心李
仪奎教授的大力协助与热忱指导 ∀
≈参考文献 
≈t  金若敏 o宁 炼 o陈长勋 o等 q血虚动物模型的制备及当归补血
汤的作用研究 q中成药 ousst ouvkwl }uy{ q
≈u  李仪奎 q中药药理实验方法学 q上海 }上海科学技术出版社 o
t||t quxs ouxt ouys q
≈v  金若敏 o张晓晨 o陈长勋 o等 q黄芪毛状根对造血系统的作用 q中
药材 ot||{ outktl }uy q
≈w  滕佳琳 q当归补血汤补气作用机理探讨 q中药药理与临床 o
t||w otskxl }w q
≈x  周道洪 q测定淋巴细胞转化和鼠白细胞介素2u 活性的新方法
) ) )  × × 比色分析法 q中国免疫学杂志 ot|{y ouktl }v| q
≈y  谢蜀生 q西咪替丁对小鼠骨髓细胞的抑制作用 q上海免疫学杂
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第 uz卷第 t期
ussu年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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志 ot|{| o|kvl }tu| q
≈z  张 毅 q小鼠静脉内注射 Œ2{对动员骨髓造血干r祖细胞的作
用研究 q中华血液学杂志 ot||{ ot|ktul }ywu q
≈{  洪介民 q黄芪多糖对小鼠巨核系祖细胞的影响 q中药新药与临
床药理 ot||{ o|kvl }tyt q
≈|  杨 岚 q白细胞介素 y 与造血调控 q国外医学#血液学分册 o
t||x ot{ktl }ws q
Εφφεχτ οφ Χοµ πονεντσ οφ ∆ανγ2Γυι2Βυ2Ξυε ∆εχοχτιον ον Ηεµ ατοπενια
‘Œ‘Š ¬¤±o≤ ‹∞‘≤«¤±ª2¬∏± oŒ‘ • ∏²2°¬±o • ˜ ≠¤²2³¬±ªo ‹ „‘Š ‹¤¬2ª∏¬o≥˜‘≤«¨ ±ª2¯¬o≥’‘Š ≤«∏±2 ¬´±ªo ‹ ˜ «¬2¥¬
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× «¨ ¦²°³²±¨ ±·¶²© ⁄Š…÷ ⁄ µ¨ °¤µ®¤¥¯¼ ¬±¦µ¨¤¶¨§·«¨ ∏´¤±·¬·¼ ²© • …≤ o • …≤ o¤±§… ‘≤ q≥²°¨²©·«¨ ¦²°³²±¨ ±·¶³µ²°²·¨§·«¨
³µ²¯¬©¨µ¤·¬²± ²© … ‘≤ ¤±§¬±¦µ¨¤¶¨§·«¨ ∏´¤±·¬·¼ ²© ≤ƒ ˜2 ¬¬q „ °²±ª·«¨ ° o³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ²©¤±ª¨ ¬¯¦¤ º¤¶ °²¶·³²·¨±·qΧονχλυ2
σιον : × «¨ ¶·∏§¬¨¶¶«²º ·«¤··«¨ ¬¨·µ¤¦·¶¤±§¶²°¨¦²°³²±¨ ±·¶²© ⁄Š…÷ ⁄¦¤± ³µ²°²·¨·«¨ «¨ °²³²¬¨·¬¦©∏±¦·¬²±¶¼¶·¨° ²©·«¨ °²§¨¯
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[ Κεψ ωορδσ] ⁄¤±ª2Š¬∏2÷∏¨ §¨¦²¦·¬²± ~³«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ° ¦¨«¤±¬¶° ~¦²°³²±¨ ±·~«¨ °¤·²³²¬¨·¬¦©∏±¦·¬²±
≈责任编辑 方文贤 
利用稻瘟霉分生孢子筛选海兔抗有丝分裂活性组分
林厚文t o汤海峰u o张 纯t o沈 阳t o郭 澄t o易杨华u
kt q第二军医大学 附属长征医院 药学部 o上海 ussssv ~
u q第二军医大学 药学院 海洋药物研究室 o上海 usswvvl
≈摘要  目的 }利用稻瘟霉生物活性成分跟踪筛选模型 o筛选海兔中抗有丝分裂活性成分 ∀方法 }通过观察样
本引起稻瘟霉的分生孢子或菌丝形态生长异常或生长抑制的情况 o跟踪筛选活性组分 o并与体外肿瘤细胞毒试验
对照 ∀结果 }从海兔乙醇粗提物中筛选得到 u个具有细胞毒活性的组分 o其体外对 °v{{和 ‹2ys的 Œ≤xs分别为
uv qw ot{ qy ot| qw otu qx Λªq°p t ∀结论 }本模型首次用于海洋天然活性化合物的追踪分离 o方便 !快捷 !成本低 o显
示了广阔的应用前景 ∀
≈关键词  稻瘟霉 ~海兔 ~抗有丝分裂 ~活性筛选
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussulst2ssxv2sv
从生长在海洋特殊生态环境中的海洋生物中跟
踪筛选具有独特生理活性的物质 o已成为人们普遍
关注的新课题 ∀而标准化的生物检测方法的建立 o
≈收稿日期  usst2su2sx
≈基金项目  国家自然科学基金资助项目 okvssssut|l
≈作者通讯   电话 }ksutl uxszs|zt2ysty 传真 }ksutl
yxvsztvv
对海洋抗癌药物的筛选起着很重要的作用 ∀
特别是在初筛阶段 o灵敏 !方便 !快捷且相关性
好的活性筛选模型是提高成功率的保证 ∀近年来 o
以微管系统为靶点筛选新的抗肿瘤 !抗真菌药物已
引起学者的广泛注意≈t  ∀日本东京大学开发建立了
以观察稻瘟霉的分生孢子或菌丝形态生长异常或生
长抑制为指标的简易微管活性测试体系 o并成功地
#vx#
第 uz卷第 t期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qt
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