全 文 ：ＴｈｅｓｔｕｄｙｏｆｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅｏｎｒｅｖｅｒｓｉｏｎｏｆＰ１７０ａｎｄａｐｏｐｔｏｓｉｓｏｆ
ｏｂｔａｉｎｅｄｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｌｅｏｆｍｉｃｅＳ１８０’ｓｔｕｍｏｕｒｃｅｌ
ＳＵＮＦｕｊｕｎ１，ＮＩＥＸｕｅｃｈｅｎｇ２，ＬＩＧｕｉｈａｉ１，ＹＩＮＧｅｐｉｎｇ３
（１ＳｈａｎｄｏｎｇＡｃａｄｅｍｙｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭｅｄｉｃｉｎｅ，Ｊｉｎａｎ２５００１４，Ｃｈｉｎａ；
２ＪｉｎｉｎｇｔｈｅｆｉｒｓｔＰｅｏｐｌｅ’ｓＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉｎｉｎｇ２７２１００，Ｃｈｉｎａ；
３ＪｉｎａｎＭｉｌｉｔａｒｙＧｅｎｅｒａｌＨｏｓｐｉｔａｌ，Ｊｉｎａｎ２５００３１，Ｃｈｉｎａ）
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅｏｎｒｅｖｅｒｓｉｏｎｏｆｍｉｃｅＳ１８０’ｓｏｂｔａｉｎｅｄｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｔｕｍｏｒｃｅｌｉｎ
ｄｕｃｅｄｂｙｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙｂｙＰＦＣ．ＡｎｄｔｈｅｎｄｉｓｃｕｓｓｔｈｅｍｏｌｅｃｕｌａｒｍｅｃｈａｎｉｓｍｏｆｉｔｆｏｒｔｈｅｕｓｅｏｆＴＣＭｉｎｃｌｉｎｉｃｔｏｒｅｓｔｒａｉｎｔｈｅｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｔｏｆ
ｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ，ｔｈｅｒｅｂｙｉｍｐｒｏｖｅｔｈｅｃｕｒａｔｉｖｅｅｆｅｃｔ．Ｍｅｔｈｏｄ：ＢｙｔｈｅｍｅｔｈｏｄｓｏｆｌｅｓｓｄｏｓａｇｅｏｆｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙＰＦＣ，ｇｉｖｅｔｈｅｍｏｕｓｅｃｉｓｐｌａｔｉｍ３
ｍｇ·ｋｇ－１ｉｐ，ｏｎｃｅａｗｅｅｋ；ＣＴＸａｎｄ５ＦＵ３ｍｇ·ｋｇ－１ｉｇｆｏｕｒｗｅｅｋｓ，ｓｅｔｕｐｔｈｅｍｉｃｅｍｏｄｅｌｓｏｆｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆＳ１８０ｔｕｍｏｒｃｅｌ，ａｎｄ
ｔｈｅｎｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅＰ１７０，Ｆａｓ，ＣＤ５４ａｎｄａｐｏｐｏｓｉｓｂｙｆｌｏｗｃｙｔｏｍｅｔｒｙ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｅｔｒａｎｄｒｉｎｅｃａｎｏｂｖｉｏｕｓｌｙｌｏｗｅｒｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｏｆＰ１７０ｉｎｃｒｅａｓｅｔｈｅｅｘ
ｐｒｅｓｓｏｆＦａｓａｎｄｔｈｅａｐｏｐｏｓｉｓｏｆｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｔｔｕｍｏｒｃｅｌ．Ａｎｄａｔｔｈｅｓａｍｅｔｉｍｅｉｔｃａｎｏｂｖｉｏｕｓｌｙｒｅｄｕｃｅｔｈｅｅｘｐｒｅｓｓｏｆｉｎｔｅｒｃｅｌｕｌａｒａｄｈｅｓｉｏｎ
ｍｏｌｅｃｕｌｅ（ＣＤ５４）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ｔｅｒａｎｄｒｉｎｅ，ｗｉｔｈｔｈｅｉｔｓａｄｊｕｓｔｍｅｎｔｏｆｃｏｒｅｌａｔｅｄｂｉｏｔｉｃａｃｔｉｖｅｍａｔｅｒ，ｃａｎｉｎｔｅｒｖｅｎｅｔｈｅｏｃｃｕｒｅｎｃｅｏｆｔｈｅｍｕｌｔｉ
ｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅｏｆｔｕｍｏｒｃｅｌｓｉｎｄｕｃｅｄｂｙｃｈｅｍｏｔｈｅｒａｐｙ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ ｔｅｔｒａｎｄｒｉｎｅ；ｍｕｌｔｉｄｒｕｇｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ；ｍｉｃｅ；Ｐ１７０；Ｆａｓ ［责任编辑 方文贤］
［收稿日期］ ２００４０５２６
［通讯作者］ 李延平，Ｔｅｌ：（０７５９）２３８８３１５，Ｆａｘ：（０７５９）２２８４１０４，
Ｅｍａｉｌ：ｌｉｙｐ０４０６＠ｙａｈｏｏｃｏｍｃｎ
蜜环菌多糖对环磷酰胺损伤小鼠
骨髓细胞的保护作用
李延平，吴科锋，刘 义
（广东医学院 天然药物研究与开发重点实验室，广东 湛江 ５２４０２３）
［摘要］ 目的：观察蜜环菌多糖对环磷酰胺所致小鼠骨髓细胞损伤的保护作用。方法：纯系昆明小鼠５０只，
随机分为５组，正常对照组；阳性对照组（ｒｈＧＣＳＦ２０μｇ·ｋｇ
－１·ｄ－１）；环磷酰胺（１５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）损伤组；蜜环菌多
糖（２５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）低剂量保护组；蜜环菌多糖（５００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）高剂量保护组。阳性对照组ｓｃｒｈＧＣＳＦ６ｄ，ｉｐ
环磷酰胺３ｄ。保护组ｉｐ蜜环菌多糖８ｄ，ｉｐ环磷酰胺３ｄ。记数外周血 ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ和骨髓细胞悬液 ＷＢＣ，ＢＭ
ＮＣ，骨髓象分析。结果：保护组、阳性对照组外周血中的ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ，骨髓细胞悬液中 ＷＢＣ，ＢＭＮＣ明显高于损
伤组，Ｐ＜００１；保护组中骨髓早幼粒、分叶核细胞数，高剂量组比低剂量组明显增多。结论：蜜环菌多糖对环磷酰
胺所致小鼠骨髓细胞损伤有较好的保护作用。
［关键词］ 蜜环菌多糖；环磷酰胺；骨髓细胞
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）０４０２８３０４
蜜环菌 Ａｒｍｉｌａｒｉａｍｅｌｅａ（ＶａｎｅｘＦｒ）Ｑｕｅｌ为
担子菌纲白蘑科真菌。与天麻相似的药理作用，引
起国内外许多学者对蜜环菌化学成分、结构及药理
作用进行深入研究，特别是蜜环菌多糖对抗辐射［１］、
调节免疫功能［２］方面的研究国内外均有报道。但对
于蜜环菌多糖抗化学药物损伤、保护骨髓细胞的研
究国内未见报道。本实验采用蜜环菌多糖保护环磷
酰胺损伤小鼠骨髓细胞，以探讨蜜环菌多糖对骨髓
细胞保护的作用。
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第３０卷第４期
２００５年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３０，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００５
１ 材料和仪器
１１ 药品、试剂
蜜环菌多糖，自制，按参照文献［３］制备。蜜环
菌丝体干粉购于浙江金湖制药厂，经去脂、热水提
取、醇沉、除蛋白、脱碳、透析、浓缩、冻干，得水溶性
多糖含量为 ８５１％；环磷酰胺（ＣＹ），江苏恒瑞医药
股份有限公司生产，批号 ０１１１１２２１，规格：２００ｍｇ。
溶于２０ｍＬ生理盐水，稀释浓度１０ｇ·Ｌ－１；基因重组
粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧＣＳＦ），日本麒麟啤酒株式
会社生产，规格：７５μｇ，溶于２０ｍＬ生理盐水中，稀释
浓度１０ｇ·Ｌ－１；其他均为国产分析纯试剂。
１２ 仪器
日本ＳｙｓｍｅｘＳＦ－３０００半自动血常规生化分析
仪、日本ＯＬＹＭＰＵＳ显微镜。
１３ 实验动物
纯系昆明小鼠，♂，体重 １８～２２ｇ，由广东医学
院动物中心提供，动物合格证号：２００３Ａ０２６。
２ 方法与结果
２１ 实验分组及给药方法
纯系昆明小鼠 ５０只，随机分为 ５组，每组 １０
只。正常对照组 ｉｐ生理盐水；阳性对照组背部 ｓｃ
（ｒｈＧＣＳＦ２０μｇ·ｋｇ
－１·ｄ－１）６ｄ；蜜环菌多糖低、高剂
量（２５０，５００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）保护组，每天给药１次，
连续８ｄ，第９天后同阳性对照组，环磷酰胺损伤组
一并 ｉｐ环磷酰胺１５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１，连续给药３次。
２２ 观察指标
２２１ 外周血象检查 阳性对照组和蜜环菌多糖
保护组经环磷酰胺３次给药损伤后０，８，１２ｄ分别采
小鼠尾静脉血，采用半自动血常规生化分析仪记数
白细胞（ＷＢＣ），红细胞（ＲＢＣ），血小板（ＰＬＴ）数。
２２２ 骨髓有核细胞（ＢＭＮＣ）记数 实验结束后，
脱臼处死小鼠，剥离双侧股骨，取一侧完整股骨用５
ｍＬ生理盐水冲洗骨髓腔，制备小鼠骨髓细胞悬液，
实验方法参照文献［４］。将骨髓细胞悬液 ２５倍量
稀释，半自动血常规生化分析仪记数ＢＭＮＣ，ＷＢＣ。
２２３ 骨髓象分析 将另一侧股骨头 １／３处分别
切成斜面直接涂片，姬姆萨染色油镜下观察，采用血
液专业网中国血液在线骨髓形态学图文分析软件
进行骨髓象分析。
２３ 统计学处理 数据以珋ｘ±ｓ表示，组间比较采
用 ｔ检验。
２４ 结果
２４１ 蜜环菌多糖对小鼠外周血白细胞、红细胞、
血小板的影响 正常对照组无明显变化，损伤组与
正常对照组比较有非常显著差异（Ｐ＜００１），阳性
对照组及保护组经损伤前给药，ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ高
于正常对照组，但经环磷酰胺损伤后１２ｄＷＢＣ，ＲＢＣ
低于正常对照组，高于损伤组（表 １）。说明蜜环菌
多糖对骨髓造血系统有一定的保护作用。
２４２ 蜜环菌多糖对小鼠骨髓ＷＢＣ，ＢＭＮＣ的影响
阳性对照组及保护组 ＷＢＣ，ＢＭＮＣ与损伤组比较
均有非常显著性差别（Ｐ＜００１，表 ２），保护组且呈
剂量依赖性。说明蜜环菌多糖有抗环磷酰胺损伤小
鼠骨髓细胞的作用。
２４３ 蜜环菌多糖对小鼠骨髓象的影响 损伤组
可见骨髓细胞损伤严重，尤其是粒系体积增大，核
变性、溶解。保护组骨髓细胞数量增多，早幼粒、
分叶核细胞增多，但可见微量的损伤细胞，说明蜜
环菌多糖具有抗环磷酰胺损伤骨髓细胞的作用 （图
１～４）。
表１ 蜜环菌多糖对小鼠ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
损伤前
ＷＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＲＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＰＬＴ／×
１０１２·Ｌ－１
损伤后
０ｄ
ＷＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＲＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＰＬＴ／×
１０１２·Ｌ－１
８ｄ
ＷＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＲＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＰＬＴ／×
１０１２·Ｌ－１
１２ｄ
ＷＢＣ
／×１０９·Ｌ－１
ＲＢＣ／×
１０９·Ｌ－１
ＰＬＴ／×
１０１２·Ｌ－１
正常对照 ８３０ ７０３ ３５４３６ ８８９ ７２６ ３２３４８ ８２６ ６９０ ３４５００ ８１８ ０８１ ３５８１０
±１９４ ±１２４ ±３５８９ ±２４７ ±１７２ ±４１３９ ±１３２ ±１９７ ±２１０２ ±１４２ ±１４２ ±２５２６
ｒｈＧＣＳＦ４） ２０ １３６７ ７８８ ４９８４７ ９４８ ６９３ ４６４３４ ８８５ ６２１ ３９１３７ ７３４ ５４９ ３０３２１
±２１２ ±１５６ ±３３５４ ±１７５２） ±１８７２） ±５８１５２）±２０６２） ±２３１３） ±６１１１２） ±１８７２） ±２３２２） ±４７３７２）
环磷酰胺 １５０ ９３５ ８１２ ４７８３６ ４８３ ４１１ ２０５６４ ３６０ ２５９ ９４７６ ３０３ ２０１ ７９１５
±１８５ ±１８９ ±３４９４ ±１９２１） ±１９０１） ±７７１２１）±１０８１） ±１９２１） ±３１６５１） ±０２３１） ±０３２１） ±３９２４１）
蜜环菌多糖 ２５ １０３４ ８０３ ５５８４１ ９５８ ７９２ ５００９２ ８７２ ７７７ ４７２３４ ５１１ ６４７ ３６９５３
±２０３ ±１７７ ±５０２２ ±１８２２） ±６０２５２） ±１５１２）±１５１２） ±５２１５２） ±１９４２） ±１９４２） ±１９６２） ±８２３１２）
５０ １１８３ ９１１ ６６８１５ １０１１ ８０６ ５２７４３ ９９５ ７８１ ４８４２０ ７８８ ７０２ ４０１３５
±１９２ ±０９７ ±６１２３ ２１０２） ±２０４２） ±７１５１２）±３３７２） ±２４８２） ±３２５１２） ±２６９２） ±３２７２，３） ±７９３７２，３
注：与正常对照组比１）Ｐ＜００１；与ｒｈＧＣＳＦ组比２）Ｐ＜００１；与环磷酰胺组比３）Ｐ＜００５；４）剂量单位为μｇ·ｋｇ
－１（表２同）
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表２ 蜜环菌多糖对小鼠骨髓细胞中有核细胞及
白细胞记数的影响（珋ｘ±ｓ，ｎ＝１０）
组别
剂量
／ｍｇ·ｋｇ－１
ＷＢＣ／×１０９
／股骨
ＢＭＮＣ／×１０９
／股骨
正常对照 ２０１３±３９８ １０１３±０４３
ｒｈＧＣＳＦ ２０ １３１２±４８２２） ６２５±１３１２）
环磷酰胺 １５０ ７６０±２０３１） ２８８±０３３１）
蜜环菌多糖 ２５ １０９３±２８８２） ７１８±１２８２）
５０ １５８０±５４５２） ７９３±１７０２）
图１ 生理盐水组骨髓象 （×２００）
图２ 环磷酰胺损伤组骨髓象 （×２００）
图３ 蜜环菌多糖低剂量组骨髓象 （×２００）
３ 讨论
环磷酰胺是一种氮芥类的抗肿瘤药物。在体外
无活性，进入体内后在肝脏或血液中进行活化，变成
图４ 蜜环菌多糖高剂量组骨髓象 （×２００）
具有烷基化的代谢产物，而发挥抗肿瘤的作用，它的
副作用是严重损伤骨髓细胞造血功能［５］。本实验结
果说明：蜜环菌多糖具有抗环磷酰胺损伤小鼠骨髓
细胞的作用。保护组小鼠经环磷酰胺损伤后，外周
血中ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ，骨髓悬液中 ＷＢＣ，ＢＭＮＣ均明
显高于环磷酰胺损伤组；阳性对照组皮下注射基因
重组粒细胞集落刺激因子（ｒｈＧＣＳＦ），ＷＢＣ高于保护
组，但 ＲＢＣ，ＰＬＴ低于保护组，说明 ｒｈＧＣＳＦ也具有
保护作用。骨髓象分析结果表明：保护组小鼠骨髓
有核细胞数增多，尤其是早幼粒、分叶核细胞增多。
说明蜜环菌多糖刺激骨髓细胞产生幼稚细胞增多，
分化成成熟细胞，致使分叶核细胞增多，拮抗环磷酰
胺对骨髓细胞的损伤，保护骨髓造血系统，其作用结
果呈剂量依赖性关系。蜜环菌多糖是否可作为骨髓
细胞的保护剂，抗放射，抗化学药物对骨髓造细胞损
伤，是值得深入研究的课题。
［参考文献］
［１］ 张庆林，张慧娟，王秉及．蜜环菌多糖的分离纯化及组成分析．
中国药学杂志，１９９５，３０（７）：４０１．
［２］ 于 敏，沈业寿，梅一德，等．蜜环菌多糖的免疫增强作用研究．
生物学杂志，２００１，１８（４）：１６．
［３］ 陈晓梅，郭顺星，王秋颖，等．蜜环菌不同发育阶段多糖成分的
研究．中国中药杂志，２００１，２６（６）：３８１．
［４］ 张君惠．骨髓细胞悬液．见：徐叔云，卞如濂，陈 修．药理实验
方法学．第２版．北京：人民卫生出版社，１９９４．１１０７．
［５］ ＧｈｉｅｌｍｉｎｉＭ，ＶａｎｄｅｒＢｏｓｃｈＳ，ＢｏｓｓｈａｒｄＭ，ｅｔａｌ．ＰｈａｓｅＩＩｓｔｕｄｙｏｆ
ｅｓｃａｌａｔｉｎｇｄｏｓｅｓｏｆａｍｉｆｏｓｔｉｎｅｃｏｍｂｉｎｅｄｗｉｔｈｈｉｇｈｄｏｓｅｃｙｃｌｏｐｈｏｓ
ｐｈａｍｉｄｅ．ＣａｎｃｅｒＣｈｅｍｏｔｈｅｒＰｈａｒｍａｃｏｌ，２００１，４７（６）：５３２．
ＰｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｆＡｒｍｉｌａｒｉａｍｅｌｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ
ｏｎｍｉｃｅｂｏｎｅｍａｒｒｏｗｃｅｌｄａｍａｇｅｃａｕｓｅｄｂｙＣｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ
ＬＩＹａｎｐｉｎｇ，ＷＵＫｅｆｅｎｇ，ＬＩＵＹｉ
（ＧｕａｎｇｄｏｎｇＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＲｅｓｅａｒｃｈＤｅｖｅｌｏｐｍｅｎｔｏｆＮａｔｕｒａｌＤｒｕｇ，Ｚｈａｎｊｉａｎｇ５２４０２３，Ｃｈｉｎａ）
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Ｖｏｌ．３０，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００５
［Ａｂｓｔｒａｃｔ］ Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅ：ＴｏｏｂｓｅｒｖｅｔｈｅｅｆｅｃｔｏｆＡｒｍｉｌａｒｉａｍｅｌｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｏｎｍｉｃｅｂｏｎｅｍａｒｏｗｃｅｌｓｄａｍａｇｅｃａｕｓｅｄｂｙＣｙ
ｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ．Ｍｅｔｈｏｄ：Ｋｕｎｍｉｎｇｐｕｒｅｂｒｅｄｍｉｃｅｗｅｒｅｕｓｅｄａｎｄｓｔｏｃｈａｓｔｉｃｄｉｖｉｄｅｄｉｎｔｏ５ｇｒｏｕｐｓ：ｎｏｒｍａｌｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ，ｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ
ｇｒｏｕｐ（ｒｈＧＣＳＦ２０μｇｋｇ
－１·ｄ－１），ｄａｍａｇｅｇｒｏｕｐｏｆＣｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ（１５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１），ｔｈｅｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐｗｉｔｈＡｍｅｌｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａ
ｒｉｄｅ，ｌｏｗｄｏｓｅ（２５０ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）ａｎｄｈｉｇｈｄｏｓｅ（５００ｍｇ·ｋｇ－１·ｄ－１）．ＰｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌｗａｓｓｃｒｈＧＣＳＦ６ｄａｎｄｉｐＣｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ３
ｄ．Ａｍｅｌｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｗａｓｉｐ８ｄ．ａｎｄＣｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅｉｐ３ｄ．ＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ，ＢＭＮＣｗｅｒｅｃｏｕｎｔｅｄｉｎｐｅｒｉｐｈｅｒａｌｂｌｏｏｄａｎｄｂｏｎｅ
ｍａｒｏｗｃｅｌｓ．Ｔｈｅｍｙｅｌｏｇｒａｍｗｅｒｅａｎａｌｙｚｅｄｉｎｂｏｎｅｍａｒｏｗ．Ｒｅｓｕｌｔ：ＴｈｅＷＢＣ，ＲＢＣ，ＰＬＴ，ＢＭＮＣｏｆｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐａｎｄｐｏｓｉｔｉｖｅｃｏｎｔｒｏｌ
ｇｒｏｕｐｗｅｒｅｈｉｇｈｅｒｔｈａｎｄａｍａｇｅｇｒｏｕｐ（Ｐ＜００１）ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｆｌｙｈｉｇｈｄｏｓｅｇｒｏｕｐｉｎｃｒｅａｓｅｒｔｈａｎｌｏｗｄｏｓｅｇｒｏｕｐｉｎｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｇｒｏｕｐｔｈｅｎｕｍｂｅｄ
ｏｆＰｒｏｍｙｅｌｏｃｙｔｉｃａｎｄｌｏｂｕｌａｔｉｏｎｎｕｃｌｅａｒｏｆｍａｒｏｗ．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ：Ａｍｅｌｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅｈａｓｐｒｅｆｅｒａｂｌｙｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅｅｆｅｃｔｏｎｄａｍａｇｉｎｇｍｉｃｅ
ｂｏｎｅｍａｒｏｗｃｅｌｃａｕｓｅｄｂｙＣｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ．
［Ｋｅｙｗｏｒｄｓ］ Ａｒｍｉｌａｒｉａｍｅｌｅａｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ；Ｃｙｃｌｏｐｈｏｓｐｈａｍｉｄｅ；ｂｏｎｅｍａｒｏｗｃｅｌ
［责任编辑 方文贤］
［收稿日期］ ２００４０５２７
［通讯作者］ 谷卫，Ｔｅｌ：（０５７１）８７７８３５１７，Ｆａｘ：（０５７１）８７０２２７７６，
Ｅｍａｉｌ：ｇｕｗｅｉ＠ａｉｏｃｒｍ．ｃｏｍ
小檗碱对 ３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞脂联素表达的影响
谷 卫，曾文衡，胡海英
（浙江大学 医学院 附属第二医院，浙江 杭州 ３１０００９）
［摘要］ 目的：探讨小檗碱和胰岛素对３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞脂联素表达的影响。方法：检测分别经小檗碱及胰岛
素处理后３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞脂联素表达水平改变，以βａｃｔｉｎ为内对照，半定量法ＲＴＰＣＲ测定脂联素ｍＲＮＡ表达。结
果：经小檗碱（１０μｍｏｌ·Ｌ
－１）干预后３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞脂联素表达显著增加（Ｐ＜００５），加入胰岛素后脂联素的表达受
到抑制，高浓度胰岛素有显著抑制作用（Ｐ＜００５）。结论：体外实验中，小檗碱使３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞脂联素的表达增
加，而胰岛素可抑制小檗碱增加脂联素表达的作用。
［关键词］ 小檗碱；脂联素；胰岛素；３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞
［中图分类号］Ｒ２８５５ ［文献标识码］Ａ ［文章编号］１００１５３０２（２００５）０４０２８６０３
小檗碱是中药黄连的主要成分，具有改善胰岛
素抵抗和降血糖作用［１］。近年的研究发现脂肪细胞
不仅是脂质的贮存库，它还分泌多种激素参与机体
的能量代谢。脂联素（ａｄｉｐｏｎｅｃｔｉｎ）就是其中一种与
胰岛素敏感性密切相关的脂肪细胞因子。大量研究
表明：动物和人体的血浆脂联素浓度与空腹血糖浓
度、空腹胰岛素浓度、胰岛素抵抗呈负相关；与胰岛
素敏感性呈正相关［２］。本研究通过观察小檗碱和胰
岛素对体外脂肪细胞脂联素表达的影响，探讨脂联
素表达的调控机制和小檗碱改善胰岛素抵抗的分子
机制。
１ 材料和方法
１１ 材料和试剂 ３Ｔ３Ｌ１脂肪细胞株由中国科学
院生物化学和细胞生物学研究所赠送；ＤＭＥＭ细胞
培养粉购自Ｇｉｂｃｏ公司；特级新生小牛血清，胎牛血
清购自杭州四季青生物制品公司；重组人普通胰岛
素购自 Ｎｏｖｏ公司；地塞米松，３异丁基１甲基黄嘌
呤购自 Ｓｉｇｍａ公司；小檗碱购自抚顺制药厂；Ｔｒｉｚｏｌ
购自 ＧｉｂｃｏＢＲＬ公司；ＲＴＰＣＲ试剂盒购自 Ｐｒｏｍｅｇａ
公司。
１２ 方法
１２１ ３Ｔ３Ｌ１细胞培养和诱导 将３Ｔ３Ｌ１脂肪细
胞用含１０％小牛血清高糖 ＤＭＥＭ培养液在 ３７℃，
５％ＣＯ２的条件下培养，细胞状态良好时接种于培养
板，待细胞融合２ｄ后，加含０５ｍｍｏｌ·Ｌ－１３异丁基
１甲基黄嘌呤，０２５μｍｏｌ·Ｌ
－１地塞米松，１０μｇ·ｍＬ
－１
胰岛素、１０％胎牛血清的高糖ＤＭＥＭ培养４８ｈ，换以
含１０μｇ·ｍＬ
－１胰岛素的培养液再培养４８ｈ，随后以
１０％胎牛血清的高糖ＤＭＥＭ培养液继续培养，２ｄ换
·６８２·
第３０卷第４期
２００５年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３０，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００５