全 文 ：‹∞  2¨¼∏±t o ±˜2…²u oŒ ÷¬¤²2©¨ ±ªt
(t1 Τηε Ποστδοχτορατε Ρεσεαρχη Χεντρε οφ Τηε Φιρστ Αφφιλιατεδ Ηοσπιταλ, Ζηεϕιανγ Υνιϖερσιτψ, Ηανγζηου , vtsssv , Χηινα ;
u1 Ηυναν Χολλεγε οφ Τραδιτιοναλ Χηινεσε Μεδιχινε , Χηανγσηα wtsssz , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ©¨©¨¦·¶²©≥«¨ ±°¤¬k≥l ¬±­¨¦·¬²± ²±·«¨ ±¨ ∏µ²±¤¯ ¤³²³·²¶¬¶µ¨ ¤¯·¨§ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²±¬±µ¤·¥µ¤¬±
¤©·¨µ¬±·µ¤¦¨µ¨¥µ¤¯ «¨ °²µµ«¤ª¨ 1 Μετηοδ : • ¬·« •²¶¨±¥¨µª °²§¨ ¶¯²©µ¤·¬±·µ¤¦¨µ¨¥µ¤¯ «¨ °²µµ«¤ª¨ o º¨¶·∏§¬¨§·«¨ ³¤·«²¯²ª¬¦¦«¤±ª¨¶²© ±¨ ∏2
µ²±¤¯ ¶·µ∏¦·∏µ¨ ¬± «¬³³²¦¤°³¤¯ ≤„t ¤µ¨¤¶¤±§ª¨ ±¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²© …¤¬¤±§…¦¯2u1 Ρεσυλτ : ≥ ¬±­¨¦·¬²± «¤§ ©¨©¨¦·¶²±¬±«¬¥¬·¬±ª·«¨ ³¼µ¤°¬§¤¯
¦¨¯¯¶¤³²³·²¶¬¶¬±·«¨ «¬³³²¦¤°³¤¯ ≤„t ¤µ¨¤¶o¬±¦µ¨¤¶¬±ª·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²©…¦¯2u ª¨ ±¨ o¤±§µ¨§∏¦¬±ª·«¨ ¬¨³µ¨¶¶¬²± ²© …¤¬ ª¨ ±¨ µ¨¶∏¯·¬±ª§¨2
¦¨¤¶¨§·«¨ µ¤·¬²²©…¤¬ °• ‘„ r…¦¯2u °• ‘„1 Χονχλυσιον : ≥ ¬±­¨¦·¬²±¦¤±µ¨ª∏¯¤·¨·«¨ ¤³²³·²¶¬¶ª¨ ±¨ o¤±§¬±«¬¥¬··«¨ ¤³²³·²¶¬¶¬±µ¤·¥µ¤¬±
¤©·¨µ¬±·µ¤¦¨µ¨¥µ¤¯ «¨ °²µµ«¤ª¨ 1
[ Κεψ ωορδσ] ≥«¨ ±°¤¬Œ±­¨¦·¬²±~¬±·µ¤¦¨µ¨¥µ¤¯ «¨ °²µµ«¤ª¨ ~±¨ ∏µ²±¤¯ ¤³²³·²¶¬¶~¤³²³·²¶¬¶µ¨ ¤¯·¨§ª¨ ±¨
≈责任编辑 方文贤 
≈收稿日期  ussw2sv2u|
≈基金项目  四川省中医药管理局资助项目k„2usss2ttl
≈通讯作者  3 张杰 oר¯ }ksu{l{xwtuw{x o∞2°¤¬¯}…¬²¼¤±ª ƒ
tyv1¦²°
八珍汤对ys≤²Χ照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡研究
赵弋清t o罗 霞t ou o陈东辉t ou o余梦瑶t o程耀锋t o张 杰t 3
kt1 四川大学 生命科学学院 o四川 成都 ytssyw ~
u1 四川省中药研究所 o四川 成都 ytsswtl
≈摘要  目的 }探讨八珍汤对ys≤²Χ射线照射小鼠骨髓细胞及脾细胞凋亡的影响 ∀方法 }利用ys≤² Χ射线一次
性全身照射小鼠 o动态观察其骨髓细胞 !脾细胞凋亡情况 ∀结果 }实验观察到照射后模型组小鼠骨髓细胞在 y «其
凋亡数最多 o以后随时间延长而逐渐减少 o八珍汤组小鼠骨髓细胞和脾细胞凋亡数与模型组相比两者在 y «处有显
著性差异k Π s1sx oΠ s1stl ~在 tu ot{ ouw «也能相应的拮抗细胞的凋亡 ∀结论 }八珍汤对ys≤² Χ射线照射小鼠骨
髓细胞及脾细胞凋亡有较好的抑制作用 o可能也是八珍汤补血的机制之一 ∀
≈关键词  八珍汤 ~脾细胞 ~骨髓细胞 ~辐射 ~凋亡
≈中图分类号  • u{x1x ≈文献标识码  „ ≈文章编号  tsst2xvsukusswltu2ttyx2sv
八珍汤源自5正体类要6 o是四君子汤和四物汤
的复方 o为经典的气血双补 o补血 !活血 !调经之良
方 ∀本实验主要观察辐射后不同时间点八珍汤对小
鼠骨髓细胞和脾细胞凋亡的影响 o以期为八珍汤的
临床应用提供更多的理论依据 ∀
1 材料
111 药物 八珍汤由当归 | ª!白芍 y ª!白术 ts ª!
熟地黄 | ª!人参 tx ª!川芎 x ª!茯苓 tu ª!甘草 v ª
组成 o购自成都同仁堂药店 o均经四川省中药研究所
生药室鉴定为正品 ∀以上各药按常法煎至 u ª#
°pt的药液 ∀
112 动物分组
健康昆明小鼠 o雌雄各半 o体重 t{ ∗ uu ªo由四
川省中药研究所提供 ∀随机分为 v组 }正常组 o模型
组 o八珍汤组 ∀八珍汤组用八珍汤 s1u °#ts ªpt灌
胃 o连续 z §o第 {天给模型组和八珍汤组小鼠 t
次ys≤²Χ射线照射 o剂量为 x1x Š¼o分别于照射后 y o
tu ot{ ouw «颈椎脱臼处死 ∀
113 试剂 基因组 ⁄‘„纯化试剂盒 !• °Œ2tyws培
养基kŠŒ…≤’l !ts h小牛血清 !ts h胎牛血清 !≤²±„ o
s1{v h ×µ¬¶2‘‹w≤¯ ∀
2 方法
211 骨髓细胞 ⁄‘„的提取及凝胶电泳 小鼠颈椎
脱臼处死 o无菌取双侧股骨 o用 y号针头吸 • °Œ2
#xytt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
tyws培养液冲洗骨髓腔 o混合骨髓细胞悬液过 w tu
号针头 o形成单细胞悬液用含 ts h小牛血清的 • °2
Œ2tyws培养液体系调细胞数至 x ≅ tsy# °pt o取
s1x °悬液按基因组 ⁄‘„ 纯化试剂盒方法提取
⁄‘„ o然后进行琼脂糖凝胶电泳检测 ∀
212 脾细胞 ⁄‘„的提取及凝胶电泳 小鼠颈椎脱
臼处死 o无菌取脾 o用 • °Œ2tyws培养液洗涤 o在 uss
目钢丝网上剪碎 o用灭菌玻璃注射芯轻磨 !过滤 o制
成脾淋巴细胞悬液 os1{v h ×µ¬¶2‘‹w≤¯ 破坏红细胞 o
冰浴静置 ts °¬±ot xss µ#°¬±pt离心 ts °¬±~小心倒
去上清 o用 • °Œ2tyws培养液洗涤细胞 u次 ∀经台
盼蓝染色 o细胞计数测定细胞活率大于 |x h o以含
ts h胎牛血清的 tyws制成 x ≅ tsy#°pt脾淋巴细胞
悬液 o补充 ≤²±„使其终浓度为 x Λª#°pt ∀取 s1x
°悬液按基因组 ⁄‘„ 纯化试剂盒方法提取 ⁄‘„ o
然后进行琼脂糖凝胶电泳检测 ∀
3 结果
311 八珍汤对照射后小鼠骨髓细胞不同时间点细
胞凋亡的影响 x1x Š¼ Χ射线全身一次性照射 o模
型组各时点 ⁄‘„裂解百分率显著高于正常组相应
时点 o并且在 y «达到最高峰 o之后逐渐下降k图 tl ∀
从表 t可见在各时间点模型组小鼠骨髓细胞凋亡都
较八珍汤组显著增加 ∀预先给予八珍汤可使模型组
小鼠骨髓细胞拮抗凋亡的能力较模型组提高 v h ∗
ts h ∀⁄‘„琼脂糖凝胶电泳检测骨髓细胞的凋亡
带显示 o模型组与八珍汤组在 y «处有显著性差异
k Π s1sxl o说明八珍汤在照射后 y «能明显抑制小
鼠骨髓细胞的凋亡 o对照射所致小鼠骨髓细胞凋亡
有一定的保护作用 ∀
图 t 八珍汤对 x1x Š¼ Χ射线照射小鼠骨髓细胞
不同时间点细胞凋亡的影响
t1 ¤µ®~u1y «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~v1tu «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~
w1t{ «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~x1uw «细胞凋亡 ⁄‘„条带
312 八珍汤对照射后小鼠脾细胞不同时间点细胞
凋亡的影响 小鼠于 x1x Š¼ Χ射线全身照射后 o模
表 t 八珍汤对 x1x Š¼ Χ射线照射小鼠骨髓
细胞凋亡的影响kcξ ? σ, ν € yl
组别 ⁄‘„裂解百分率y « tu « t{ « uw «
正常组 w1tz ? s1vxul w1tz ? s1vxul w1tz ? s1vxul w1tz ? s1vxul
模型组 tu1vz ? y1|{ tu1sw ? y1{z |1|z ? x1vw z1ys ? x1ty
八珍汤组 x1zx ? v1yytl y1sz ? v1vx y1yv ? v1|w x1tu ? v1sx
注 }与模型组比较tl Π s1sx oul Π s1stk表 u同l
型组在 y «出现明显的细胞凋亡峰 ouw «出现再次
凋亡峰 ∀模型组 y ouw « ⁄‘„ 裂解百分率显著高于
八珍汤组相应时点k图 ul ∀由表 u可见 o八珍汤组
较模型组在 y ouw «脾细胞凋亡明显减少 k Π 
s1stl o可使小鼠脾细胞凋亡较模型组减少 | h ∗
uu h o表明八珍汤对照射小鼠脾细胞凋亡有一定抑
制作用 ∀
图 u 八珍汤对 x1x Š¼ Χ射线照射小鼠脾细胞凋亡
不同时间点凋亡的影响
t1 ¤µ®~u1y «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~v1tu «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~
w1t{ «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~x1uw «细胞凋亡 ⁄‘„条带 ~y1空白孔
表 u 八珍汤对 x1x Š¼ Χ射线照射小鼠骨脾
细胞凋亡的影响kcξ ? σ, ν € yl
组别
⁄‘„裂解百分率
y « tu « t{ « uw «
正常组 u1|t ? s1wuul u1|t ? s1wuul u1|t ? s1wuul u1|t ? s1wuul
模型组 vu1sx ? t|1{x tt1zy ? {1ys |1vz ? v1{u tv1xs ? {1su
八珍汤组 ty1zx ? tv1yuul tu1|y ? ts1s| ts1xv ? y1zu y1ss ? v1yyul
4 讨论
细胞调亡是一种不同于细胞坏死的细胞死亡方
式 o它作为一种主动方式 o是由体内外因素诱发细胞
内预存的死亡程序而诱导的细胞死亡过程 ∀就生物
个体而言 o在其整个的生长发育过程中不断地发生
细胞凋亡 o这对保证机体的生存 !保持机体对内外环
境变化的适应能力 !维持其正常的发育均具有重要
意义 ∀琼脂糖凝胶电泳中出现的梯状条带一直是人
们判定细胞调亡的特异生化指标 ∀
生物机体特别是骨髓造血系统及免疫系统对辐
射非常敏感 o在机体受照早期即可累积损伤 o是急性
#yytt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw
放射病的主要病理变化 o也是肿瘤患者接受放化疗
以及慢性辐射病患者常见的并发症 o由此引起的气
血亏虚 !感染和出血常危及患者的生命≈t  ∀许多实
验证明 oΧ射线所致造血功能障碍是由于造血干细
胞增殖能力的抑制或丢失而引起的 ∀八珍汤是中医
/气血双补0的传统名方 o主治气血双虚 o广泛应用于
放化疗后造血系统 !免疫系统的恢复 ∀本实验研究
了八珍汤对 Χ射线全身照射后小鼠骨髓细胞和脾细
胞凋亡的时程变化 o结果表明 }八珍汤可有效拮抗照
射后小鼠骨髓细胞和脾细胞凋亡 o以 y «的影响最
显著 o其中模型组脾细胞出现了两次凋亡峰 o第 u次
凋亡峰的产生可能与脾细胞的不均性k脾细胞包含
有多种细胞类型及亚群l造成其对辐射的敏感性不
同 o对 ⁄‘„损伤的耐受性也不同有关 o八珍汤对这
两个凋亡峰都有拮抗作用 ∀表明八珍汤对小鼠骨髓
细胞和脾细胞都有保护作用 o可抑制骨髓细胞及脾
细胞凋亡 ∀由此看来 o八珍汤可能是通过诱导骨髓
细胞和脾细胞分泌较高的类造血因子活性物质 o促
进造血干r祖细胞的增殖 !分化 o进而促进血细胞的
生成 o并对骨髓造血系统及免疫系统进行调控 o抑制
骨髓细胞和脾细胞的凋亡 o达到使机体造血机能恢
复 !免疫低下得以纠正 o免于细菌 !病毒的侵袭 o这一
研究可为临床应用提供理论基础 ∀
≈参考文献 
≈t  从玉文 o陈家佩 o邵 源 1 辐射后造血细胞对造血因子增殖反
应性变化的研究 1 军事医学科学院院刊 ot||| ouvkul }tt|1
≈u  高依卿 o陈玉春 o王碧英 1 八珍汤对粒系 !单核系细胞养血补血
作用机理的研究 1中医研究 ousss otvkul }uu1
≈v  焦向英 o罗 宁 o赵荣瑞 1 预缺血对大鼠心肌缺血再灌注凋亡
的影响 1 中国动脉硬化杂志 oussu otsktl }wt1
≈w  马淑梅 o刘晓冬 o鞠桂芝 1 不同剂量 ÷ 射线全身照射对小鼠骨
髓细胞周期进程的影响 1 辐射防护 oussu ouukwl }uvy1
≈x  潘景轩 o朱振宇 o李树浓 o等 1 亚致死量ys≤²Χ线照射后小鼠骨
髓造血细胞程序性死亡特性研究 1 实验血液杂志 ot||y owkul }
t|x1
≈y  唐佩弦 1有关造血干r祖细胞的若干新概念 1 实验血液杂志 o
t||y owkvl }uux1
≈z  王圣巍 o潘景轩 o李振宇 o等 1 小剂量ys≤²Χ射线照射诱导体外
培养小鼠骨髓细胞凋亡研究 1 延安大学学报 oussu outkvl }z{1
≈{  向绍杰 o宋 涛 1 八珍汤及其制剂药理作用实验研究概况 1 时
珍国药研究 ot||{ o|kul }tuz1
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1 河北中西医结合杂志 ot||{ ozktul }t{zy1
≈ts  祝红焰 o谭允育 1 八珍汤对ys≤²照射小鼠骨髓细胞及相关细
胞因子影响的实验研究 1 中国免疫学杂志 ousss otykul }{t1
≈tt  祝红焰 o吴 君 o谭允育 1 八珍汤对辐射损伤小鼠免疫及造血
功能的影响 1 北京中医药大学学报 ousst ouwkyl }ws1
≈tu  …µ¤§¯ ¼¨ × • o  ·¨¦¤¯© ⁄1 ׫¨ ªµ²º·«²© °²∏¶¨ ¥²±¨ °¤µµ²º ¦¨¯¯¶¬±
∏¬·µ²1 Αυστ ϑ ΕΞΠ µεδ σχι ot||y owkvl }u{z1
≈tv  Ž¨µµƒ • o • ¼¯ ¬¯¨ „ ‹ o≤∏µµ¬¨ „ • 1 „³²³·²¶¬¶¬¶¤¥¤¶¬¦¥¬²¯²ª¬¦¤¯
³«¨ ±²°¨ ±²± º¬·«º¬§¨µ¤±ª¬±ª¬°³¯¬¦¤·¬±¶¬±·¬¶¶∏¨ ®¬±¨ ·¬¦¶1 Βρϑ Χαν2
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≈tw  ’«¼¤°¤ ‹ o ≠¤°¤§¤× o ’«®¤º¤ „ o ετ αλ1 •¤§¬¤·¬²±2¬±§∏¦¨§©²µ°¤2
·¬²± ²©¤³²³·²¶¬¶¥²§¬¨¶¬±µ¤··«¼°∏¶1 Ραδιατ Ρεσot|{x otst }tuv1
≈tx  • ¼¯ ¬¯¨ „ ‹ o Ž¨µµƒ o≤∏µµ¬¨ „ • 1 ≤¨¯¯ §¨¤·«1 ׫¨ ¶¬ª2±¬©¬¦¤±¦¨ ²©
¤³²³·²¶¬¶1 Ιντ Ρεϖ Χψτολot|{s oy{ }uxt1
Στυδψ οφ Βαζηεν δεχοχτιον ον τηε µαρροω χελλ ανδ σπλεεν
χελλ αποπτοσισ οφ µιχε εξποσεδ το ysΧο Χ2ραψ
‹„’ ≠¬2 ¬´±ªt o˜’ ÷¬¤tou o≤‹∞‘Š ⁄²±ª2«∏¬tou o ≠˜  ±¨ª2¼¤²t o≤‹∞‘Š ≠¤²2©¨ ±ªt o‹„‘Š ¬¨t
(t1 Σιχηυαν Υνιϖερσιτψ, Χηενγδυ ytssyw , Χηινα ;
u1 Σιχηυαν Ινστιτυτε οφ Χηινεσε Ματεριαλ Μεδιχα , Χηενγδυ ytsswt , Χηινα)
[ Αβστραχτ] οβϕεχτιϖε : ׫¬¶¶·∏§¼¬¶¤¬° §¨¤·¨ ¬³¯²µ¬±ª ©¨©¨¦·¶²©…¤½«¨ ± §¨¦²¦·¬²± ²±·«¨ °¤µµ²º ¦¨¯¯ ¤±§¶³¯¨¨ ± ¦¨¯¯ ¤³²³·²¶¬¶²©°¬¦¨
¬¨³²¶¨§·²ys≤² Χ2µ¤¼1 Μετηοδ : ׫¨ ¤³²³·²¶¬¶³«¨ ±²° ±¨¤²© °¬¦¨ °¤µµ²º ¦¨¯¯ ¤±§¶³¯¨¨ ± ¦¨¯¯ º¤¶¶∏µ√ ¼¨¨ §¤©·¨µ·«¨ °¬¦¨ º µ¨¨ º«²¯ ¼¯¬µµ¤§¬2
¤·¨§º¬·«ys≤²Χ2µ¤¼1 Ρεσυλτ : …¤½«¨ ± §¨¦²¦·¬²± ªµ²∏³¤±§·«¨ °²§¨¯ªµ²∏³¶¬ª±¬©¬¦¤±·¯¼ §¬©©¨µ¬±·«¨ ¤³²³·²¶¬¶²© °¤µµ²º ¦¨¯¯ ¤±§¶³¯¨¨ ± ¦¨¯¯ o
¤±§·«¨ °¤µµ²º ¦¨¯¯ ²©·«¨ °²§¨¯ ªµ²∏³«¤§·«¨ °²µ··² ¤³²³·²¶¬¶¤©·¨µ¬µµ¤§¬¤·¨§¶¬¬ «²∏µ¶¤±§·«¨ ± ªµ¤§∏¤¯ ¼¯ §¨¦µ¨¤¶¨§1 …¤½«¨ ± §¨¦²¦·¬²±
ªµ²∏³¦¤± ¤¯¶²µ¨¶¬¶··«¨ ¤³²³·²¶¬¶¤·tu «ot{ «¤±§uw «1 Χονχλυσιον : …¤½«¨ ± §¨¦²¦·¬²±¦¤± ∏´¬·¨ º¨¯¯¬±«¬¥¬··«¨ ¤³²³·²¶¬¶²© °¬¦¨ °¤µµ²º
¦¨¯¯ ¤±§¶³¯¨¨ ± ¦¨¯¯ ¬µµ¤§¬¤·¨§¥¼ ys≤² Χ2µ¤¼1
[ Κεψ ωορδσ] …¤½«¨ ± §¨¦²¦·¬²±~¶³¯ ±¨¬¦¦¨¯¯ ~ °¤µµ²º ¦¨¯¯ ~µ¤§¬¤·¬²±~¤³²³·²¶¬¶
≈责任编辑 方文贤 
#zytt#
第 u|卷第 tu期
ussw年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯1u| oŒ¶¶∏¨ tu
⁄¨ ¦¨ °¥¨µoussw