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Comparative studies on pharmacological effects of the main chemical constituents of Peucedanum praeruptorum from He‘nan and Jiangxi

河南与江西产白花前胡主成分药理作用比较研究



全 文 :河南与江西产白花前胡主成分药理作用比较研究
张 村,李 文,肖永庆
(中国中医研究院 中药研究所,北京 100700)
[摘要] 目的:比较江西和河南产白花前胡香豆素类主成分的药理作用。方法:鉴定主成分结构,比较镇咳、
抗炎、祛痰作用。结果:2种植物主成分均有较好的镇咳、抗炎作用,祛痰作用均不明显。结论:河南产白花前胡与
江西产白花前胡的香豆素类主成分有类似的功效。
[关键词] 白花前胡;化学成分;药理作用
[中图分类号]R2855 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2005)17135603
[收稿日期] 20050125
[通讯作者] 肖永庆,Tel:(010)84040221,Email:xheqi@
163com
前胡为伞形科植物白花前胡的干燥根,主产于
浙江、江西、安徽、福建、江苏、四川等省,具有疏散风
热、降气化痰的作用。江西为白花前胡的主产地之
一,所产前胡主要含有白花前胡甲素等吡喃香豆素
类化合物,药理研究表明白花前胡甲素有抗心律失
常、抗心肌缺血等作用[1];白花前胡乙素可显著降低
肾性高血压大鼠血压和降低肠系膜动脉对去甲肾上
腺素的反应性[2];cis3′,4′disenecioylkhelactone有抗
血小板聚集作用[3]。上述成分未见有与前胡主治功
能相关的镇咳、祛痰等药理作用的研究报道。河南
产前胡为前胡属植物白花前胡,分布于河南西部伏
牛山脉,当地药材市场以“前胡”入药。在作者进行
白花前胡质量标准研究的过程中,发现产自河南的
白花前胡与产自江西、浙江、福建等省白花前胡主成
分的HPLC图谱存在着较大差异。为了合理利用药
源,作者对其主成分与主治、功能相关的镇咳、抗炎、
祛痰作用进行了比较研究。
1 仪器与材料
高效液相色谱仪:Waters600Pump,Waters600
Controler,Waters486紫外检测器;水为纯水,甲醇为
色谱醇,其他试剂均为分析纯。动物:SD1小鼠,雌
雄兼有,19~24g,由北京市维通利华实验动物技术
有限公司提供,合格证号:SCXK(京)20020003。晶
体管超声波雾化器(鞍山市无线电一厂),分光光度
计(Humalyzer半自动生化测定仪),离心机(上海医
用分析仪器厂),天平(沈阳龙腾电子称量仪器有限
公司)。
河南产前胡药材采自洛阳栾川县,江西产前胡
药材采自江西广丰县,分别经中国中医研究院中药
研究所谢宗万研究员、黄璐琦研究员鉴定,均为白
花前胡 Peucedanumpraeruptorum的根。
2 2种药材主成分的提取、分离及其结构鉴定
取江西、河南产白花前胡根粗粉各 10kg,分别
以95%乙醇渗漉提取,浓缩至浸膏,以水溶解,上
D101大孔树脂柱,分别以水,40%乙醇,60%乙醇,
95%乙醇及丙酮洗脱,弃去水液,收集 95%乙醇及
丙酮洗脱部分,浓缩至浸膏进行硅胶柱色谱和 ODS
柱色谱,从江西产白花前胡根中得到结晶1(白花前
胡甲素,得率12%),从河南产白花前胡得到结晶2
(cis3′,4′disenecioylkhelactone,得率05%)和结晶3
(白花前胡乙素,得率07%),通过质谱及核磁共振
等现代波谱技术,并与文献[3,4]对照确定结构。
3 HPLC图谱比较
31 色谱条件 色谱柱 kromasilC18柱(46mm×
250mm,5μm);流动相甲醇水(3∶1);检测波长 321
nm,柱温30℃;流速08mL·min-1。
32 样品溶液的制备 取 2种药材各 10g,加甲
醇25mL超声提取15min后,滤过,取续滤液,以微
孔滤膜(045μm)滤过,备用;另取白花前胡甲素、白
花前胡乙素和 cis3′,4′disenecioylkhelactone适量,
加甲醇制成1mg·mL-1的溶液,即得。
33 HPLC图谱比较 精密吸取以上5种溶液各5
μL,注入液相色谱仪,依法测定(图1)。
从相同条件下的HPLC色谱图中可以看出,2种
药材的主要成分差异较大。江西产白花前胡以白花
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第30卷第17期
2005年9月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol30,Issue 17
September,2005
图1 2种药材的HPLC图
1江西前胡;2河南前胡;3结晶1;4结晶2;5结晶3
a白花前胡甲素;bcis3′,4′disenecioylkhelactone;
c白花前胡乙素
前胡甲素为主,而河南产白花前胡则以 cis3′,4′
disenecioylkhelactone和白花前胡乙素 2种成分含量
较高。
4 药理作用比较研究
41 药物的配制 样品 A,B,C为白色结晶体(分
别为结晶1、结晶2、结晶3,含量分别为95%,91%,
95%),不溶于水,实验前按所需浓度用 2%阿拉伯
胶溶液配成混悬液备用。
42 镇咳作用(浓氨水喷雾法)[5] 选取体重19~
22g健康小鼠50只,雌雄各半,平均分为5组,每组
10只。分别为空白对照组(蒸馏水02mL·10g-1),
阿拉伯胶溶剂对照组(2%阿拉伯胶 02mL·10
g-1),样品 A、样品 B、样品 C3组,均为 100mg·
kg-1,每日给药1次,连续给药 3d。第 4天给药后
30min用浓氨水恒压喷雾致咳,以小鼠出现咳嗽的
时间及在2min内咳嗽的次数为指征。
结果3个给药组对浓氨水引起的小鼠咳嗽反应
均有明显的镇咳作用(表1)。
表1 镇咳、抗炎实验结果(珋x±s,n=10)
组别
剂量
/mg·kg-1
咳嗽潜
伏期/s
止咳率
/%
双耳肿胀
差值/g
空白对照组 - 26.9±3.38 - 23.4±1.01
溶剂对照组 26.5±3.92 -26.5 23.9±4.05
样品 A 100 33.4±15.1 53.61) 22.2±1.892)
样品 B 100 29.5±5.74 53.11) 21.6±2.482)
样品 C 100 30.0±9.82 55.11) 21.9±2.392)
注:与对照组比较1)P<001,2)P<005
43 祛痰作用(气管酚红冲洗液) 选取体重22~
24g,雄性小鼠50只,按体重随机分成5组,每组10
只。分别为空白对照组(生理盐水02mL·10g-1),
溶剂对照组(2%阿拉伯胶02mL·10g-1),3个受试
药样品A、样品 B和样品 C,均为 100mg·kg-1。灌
胃给药连续3d,第4天给药后30min,每只小鼠腹
腔注射05%酚红 05mL。30min后处死,仰位固
定,解剖分离气管,用注射器抽取5%碳酸氢钠溶液
05mL,注入气管内,反复推抽 3次,并用相同方法
冲洗3次,将 3次冲洗液收集到试管中以 3000r·
min-1离心10min,取上清液用分光光度计在546nm
处测定 A值,以吸光度在标准曲线上查出酚红浓度
值,各组与对照组进行 t检验。
结果显示各给药组与对照组之间没有差异。
44 抗炎作用(二甲苯耳廓致炎法)[5] 选用体重
22~24g,雄性小鼠 50只,按体重随机分成 5组,每
组10只。空白对照组(生理盐水 02mL·10g-1),
溶剂对照组(2%阿拉伯胶02mL·10g-1),3个受试
药组样品 A、样品 B和样品 C,均为 100mg·kg-1。
灌胃给药每天 1次,连续 3d。第 4天给药后 30
min,在小鼠右耳正反两面均匀涂抹二甲苯各25μL,
1h后将动物处死,沿耳廓将双耳剪下,用 8mm的
专用打孔器,冲下双耳片称重,以两耳的差值计算肿
胀度。
结果各给药组对二甲苯引起的小鼠耳廓肿胀,
具有较明显的抗炎作用(表1)。
5 讨论
2种药材的主要成分均为香豆素类化合物,易
溶于氯仿、甲醇、乙醇等有机溶剂,故以甲醇作为提
取溶剂进行 HPLC比较研究,结果表明二者主成分
差异较大。
曾有文献报道中药前胡由于存在产地和品种不
同,其药理作用也有一定差异[6]。本实验对道地(江
西)白花前胡的主成分(白花前胡甲素)与河南白花
前胡的主成分(白花前胡乙素等2种)进行的药理研
究结果提示,两药材的主成分均有较好的镇咳、抗炎
作用,3种成分之间无明显差异,为今后合理利用白
花前胡药材资源提供了依据。
[参考文献]
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第30卷第17期
2005年9月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol30,Issue 17
September,2005
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[6] 刘 元,韦焕英,姚树汉,等.中药前胡类祛痰药理作用比
较.湖南中医药导报,1997,1(3):40.
Comparativestudiesonpharmacologicalefectsofthemainchemical
constituentsofPeucedanumpraeruptorumfromHe’nanandJiangxi
ZHANGCun,LIWen,XIAOYongqing
(InstituteofChineseMateriaMedica,ChinaAcademyofTraditionalChineseMedicine,Beijing100700,China)
[Abstract] Objective:TocomparethepharmacologicalefectofthemaincoumarinconstituentsofPeucedanumpraeruptorumfrom
JiangxiandHe’nan.Method:TheconstituentswereisolatedbycolumnchromatographyonsilicagelandODSandidentifiedbyNMRandMS
spectroscopicmethods.Theantitussive,expectorantandantiimflammatoryefectsofmaincoumarinconstituentsofPpraeruptorumobserved
inthepresentstudy.Result:ThemainconstituentsofPpraeruptorumfrombothJiangxiandHe’nanshowedthesignificantantitussiveand
antiinflammatoryefectswithoutobviouslyexpectorantefect.Conclusion:Thepharmacologicalefectsofthemaincoumarinconstituentsof
QianhufromJiangxiandHe’nanaresimilar.
[Keywords] Peucedanumpraeruptorum;chemicalconstituents;pharmacologicalefect
[责任编辑 方文贤]
灵芝多糖对高脂血症大鼠血脂及脂质过氧化的影响
陈伟强,罗少洪,李红枝,杨 红
(广东药学院 基础学院,广东 广州510224)
[摘要] 目的:探索灵芝多糖对高脂血症大鼠血脂及脂质过氧化的影响。方法:50只大鼠随机分成5组:正常
对照组、高血脂组和不同含量灵芝多糖组,除正常组外,其他组的大鼠采用高脂食物喂养1个月后,鼠尾采血测定
血清总胆固醇(TC),甘油三脂(TG),高密度脂蛋白胆固醇(HDLc)和低密度脂蛋白胆固醇(LDLC),谷胱甘肽过氧化
物酶(GSHPx)和超氧化物歧化酶(SOD)活性及脂质过氧化物(LPO)。结果:灵芝多糖能明显降低 TC,TG和 LDLC
的浓度(P<001),能使HDLC浓度升高(P<005),能明显提高血液 GSHPx和 SOD酶活性(P<001),降低血液
LPO的浓度(P<005)。结论:灵芝多糖能调节大鼠高脂血症的脂代谢和增强抗脂质过氧化的作用。
[关键词] 灵芝多糖;高脂血症;血脂;脂质过氧化
[中图分类号]R2855 [文献标识码]A [文章编号]10015302(2005)17135803
[收稿日期] 20041210
[基金项目] 广东省中医药局基金资助项目(20030127)
[通讯作者] 杨红,Tel:(020)39352187
灵芝是一种珍贵的药用真菌,并含有多种有效
成分,其中多糖类是其主要成分之一。药理学研究
证实灵芝具有多种生物活性和药理作用。多年来对
灵芝的研究主要集中在体液免疫功能、体液免疫调
节及抗肿瘤等方面。有关灵芝多糖对高脂血症及脂
质过氧化酶的作用,在近5~10年的文献检索中似
未见有相关报道。由于体内血脂代谢异常及氧化损
伤是导致动脉粥样硬化发生发展的重要原因之一,
本研究旨在探讨灵芝多糖对高脂血症大鼠体内血脂
及脂质过氧化物的影响,为灵芝多糖的临床应用提
供科学依据。
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第30卷第17期
2005年9月
中 国 中 药 杂 志
ChinaJournalofChineseMateriaMedica
Vol30,Issue 17
September,2005