全 文 :°≥单体 ¥¯对豚鼠心脏乳头肌动作电位
和收缩力的影响
张 斌¯ o金士翱u o况 铣v o姚伟星w o夏国谨w o江明性w
kt q广东省佛山市中医院 o广东 佛山 xu{sss ~
u q华中科技大学 同济医学院 附属同济医院 o湖北 武汉 wvssvs ~
v q昆明医学院 第一附属医院 o云南 昆明 yxssvu ~
w q华中科技大学 同济医学院 o湖北 武汉 wvssvsl
≈摘要 目的 }了解 °≥ 单体 ¥¯对豚鼠心脏乳头肌动作电位和收缩力的影响 ∀方法 }运用带有动作电位和
收缩力分析软件控制的细胞内微电极技术 o研究了三七皂苷k°≥l单体 ¥¯对豚鼠正常心脏乳头肌动作电位k°l
各特征参数及收缩力kƒ≤l的影响 ∀结果 } ¥t ts ∗ vs Λ°²¯#p t分别使 °⁄ us o°⁄ |s 明显缩短 oƒ≤ 显著下降k Π
s .st , ν xl o并可降低高钾诱发的豚鼠乳头肌慢反应动作电位的动作电位幅值k°l及零相最大上升速率
k∂ °¤¬lk Π s qsx oν xl ∀但对静息电位k °l o° o∂ °¤¬及 ° 的超射值k≥l无明显影响k Π s qsx oν xl ∀另
外 o ¥¯可浓度依赖性地抑制乳头肌收缩力kƒ≤l o ° o° 不随 ¥¯剂量增加而产生明显变化 o呈典型的兴奋2收缩
脱藕联 ∀结论 }其效应可能通过阻滞钙通道而产生 ∀
≈关键词 ¥¯ ~乳头肌 ~动作电位 ~收缩力
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukussvlsw2svyy2sv
三七皂苷单体 ¥¯是从三七总苷k°≥l 分离纯
化得到的单体成分 ∀结构式如下 } ≤wu zvstw us≈t ∀
°≥具有扩张血管 !降低血压 !抗实验性心律失常
以及对抗钙离子 !去甲肾上腺素k∞l 引起的离体
血管条收缩等作用 o其中 o ¥¯能改善异丙肾上腺素
诱发的心肌损伤 o并对结扎冠脉引起的心肌缺血性
损伤有一定的保护作用≈u2w ∀为进一步阐明其药理
机制 o本实验探讨了该单体对豚鼠心脏乳头肌动作
电位k°l 和收缩力kƒ≤l 的影响 o为进一步研究及
临床开发提供更详尽的实验资料 ∀
1 材料和方法
1 q¯ 材料
电极 }用长 { ¦° o直径 t qw ∗ u qs °°有芯玻璃
管 o经微电极拉制仪 t 次拉制而成 o其尖端直径为
s qx Λ° o电阻 ts ∗ vs 8 ∀拉好的电极浸泡在 v °²¯
#p¯ ≤¯溶液中 o经 ts ∗ vs °¬± 即可完成冲灌 ∀
≈收稿日期 ussu2sw2sv
≈基金项目 云南省卫生厅中医中药管理处研究基金资助项目
k|xssszl
≈通讯作者 ר¯ }kszxzluuuuwtut2vtwv ∞2°¤¬¯} ⁄t|v
«²·°¤¬¯q¦²°
引导电极用 ª2ª≤¯泛化电极 ∀ r⁄板和动作电
位分析软件和 ≠ 2t 型电刺激隔离器为华中科技大
学生物物理研究所研制 ∀微电极放大器采用日本生
产 ∞ ztst 型放大器 ∀其他设备有微电极微分
器 !微电极操纵杆 !心肌标本灌流槽 !刺激电极铂丝 !
2⁄
型电子蠕动泵以及
微机系统等 ∀
1 q2 方法
豚鼠 ovss ∗ vxs ªo雌雄不拘 o猛击头部致昏 o迅
速剪开胸腔 o取出心脏 o投入充有 |x h u n x h
≤ u混和气体的台氏液中 o心脏仍良好搏动 o驱出腔
内残血后将心脏转入充有同样混和气体的标本制备
槽内 o用针头固定 o剪开右室 o分离寻找细而长的乳
头肌 o将其两端用丝线结扎 o打好套结 o剪下标本 o置
于¯ °恒温灌流槽内 o以水平位置将标本一端固定
于池中钢柱 o另一端固定于传感器应变梁的钢钩上 ∀
用 vx ε 恒温台氏液循环灌注标本 o灌流速度为 tx
°#°¬±p¯ o³ z qu ∗ z qw o持续通以 |x h u n x h
≤ u混合气体 ∀稳定 vs °¬± 后 o由微机数r模转换
器k⁄≤l 输出频率为 ¯ ½!波宽为 v °¶!tus h 阈
电压的方波 o经隔离器至双极铂金丝电极驱动标本 o
用充满 v °²¯#p¯ ≤¯溶液的玻璃微电极以固定微
#yyv#
第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qu{ o²qw
³µqoussv
电极法引导电位 o通过泛化电极输至微电极放大器 o
连同同步计录的收缩力信号通过模r数转换器
k⁄≤l 输入计算机储存 ∀采样时间 xss °¶ o间距
uss °¶ ∀将微电极插入细胞内得到正常动作电位 o
各项特征参数稳定 vs °¬±后开始给药 o药物在灌流
x °¬±后起作用 ous °¬±达到稳定状态 ∀因此给药
后 us °¬±计录药物作用的结果 ∀同步记录心肌动
作电位k°l和收缩力kƒ≤l ∀记录慢反应 °时 o当
稳定记录快反应 ° tx °¬±后 o将正常台氏液换成
高钾台氏液k其中 ¤n 浓度随 n 浓度提高而降
低l ∀
1 q3 溶液和试剂
改良台氏液k °°²¯ #p tl }¤≤ t¯vy q|s o≤¯
x qw o ≤¤≤ u¯ t q{s o ª≤ u¯ t qsx o ¤≤ v t q| o
¤u°w s qwu o ¯ ∏¦²¶¨ x qx o持续通以 |x h u n
x h ≤ u混合气体 o³ z qu ∗ z qw ∀药品 } ¥¯为昆明
医学院植化室提供 ∀ ±∏¬±¬§¬±¨ 为华中科技大学同
济医学院心血管药理研究室提供 ∀
1 q4 动作电位和收缩力分析
整个过程均在计算机程序控制下自动分析和测
量动作电位的各项参数和收缩力信号 }零相上升最
大速率k ς°¤¬l ~动作电位幅度k°l ~静息电位
k °l ~超射值k≥l ~°⁄us k§∏µ¤·¬²± ²©us h §¨ ³²2
¤¯µ¬¯¤·¬²±l ~ °⁄|s k§∏µ¤·¬²± ²© |s h §¨ ³²¯¤µ¬¯¤·¬²±l ∀
图形 !计算结果均存于计算机硬盘并可输出打印 ∀
计录慢反应动作电位时 o只分析其 ° 和 ς°¤¬ ∀
2 结果
乳头肌在浴槽稳定 vs °¬±后 o开始输出方波刺
激标本 o引出正常动作电位和收缩力曲线 ∀待动作
电位各特征参数稳定 tx °¬±后开始加药 o第 t个剂
量的浓度为 v ≅ tsp y °²¯#p¯依次为 v ≅ tsp x °²¯#
p¯和 v ≅ tsp w °²¯#p¯ ∀每个剂量间隔 tx °¬±∀可
见豚鼠心脏乳头肌动作电位平台期减小至消失 o动
作电位时程k°⁄us o °⁄|sl缩短 o收缩力显著降
低 o效应呈浓度依赖性 ∀但对静息电位k°l !动作
电位幅度k°l及超射值k≥l无明显影响k表 tl ∀
为观察慢反应动作电位 o实验中提高细胞外钾浓度 o
至心肌细胞去极化 o快钠通道失活 o此时 ° 主要由
≤¤u n荷载的慢内向电流所致 ∀待慢反应动作电位稳
定 tx °¬±后 o加入 ±∏¬±¬§¬±¨ tsp w °²¯#p¯后 o电活
动无明显变化 o而 ¥t v ≅ tsp x °²¯#p¯可以使 °⁄
缩短 !ς°¤¬减小 o改变其动作电位构型 ∀
表 t v ≅ ts p y ∗ v ≅ ts p w °²¯#p¯对 ° 各个参数的影响k ξ ? ξ , ν xl
分组 剂量r°²¯#p¯ ς°¤¬r∂#¶p t °r°∂ ≥r° °r°∂ °⁄usr°¶ °⁄|sr°¶ ƒ≤r°ª
对照 t|x ? tv {u ? v {y ? v tus ? y tut ? v uuw ? v yw ? tw
¥t v ≅ ts p y uty ? u| {s ? u v| ? y tt{ ? w tut ? x uus ? tv y| ? tx
v ≅ ts p x usy ? u{ {v ? w vw ? x tty ? y ttx ? {tl t|z ? tytl u ? tytl
v ≅ ts p w uts ? vv {t ? v vx ? u ttz ? y |{ ? xul t{v ? ttul t{ ? tsul
注 }与对照组比 tl Π s .sx u) Π s qst
3 讨论
运用胞内微电极技术记录心肌细胞动作电位是
心肌电生理研究的基本方法之一 o在国内外较为普
及 ∀过去采用示波器照相的方式记录动作电位的波
形 o再通过定标后测量其各项特征参数 o势必出现各
种人为误差≈x ∀本实验采用华中科技大学生物物理
研究所研制的计算机分析软件 o对心肌细胞动作电
位和收缩力适时同步记录 o以观察药物对心肌电2机
械活动的影响 o较为准确 o也较直观 ∀ ≤¤u n是慢内向
电流的主要荷载离子 o在兴奋2收缩藕联中起关键作
用 ∀心肌动作电位 s相主要是快钠通道的 ¤n内流
所致 o而 u 相平台期则主要由慢钙内流与钾外流相
互作用而形成 ∀结果表明 o ¥¯可明显降低乳头肌收
缩力的同时 o使 u 相平台期乃至 °⁄显著缩短 o但
不影响 ° o ° 及 ≥ o产生兴奋2收缩脱藕联 ∀
另外 o当细胞外高钾使快钠通道失活 o此时使用 ¥t
v ≅ tsp x °²¯ #p¯即可使 °⁄缩短 o ς°¤¬减小 o而
∏´¬±¬§¬±¨ tsp w °²¯ #p¯无显著影响 ∀有实验证实 o
¥t可以降低心肌细胞膜钙电流幅度 o提示 ¥¯的上
述作用是通过阻断钙通道而发挥作用≈y ∀
≈参考文献
≈t 魏均娴 o王菊芬 o张良玉 o等 q三七的化学研究 q药学学报 o
t|{s oy }vys q
≈u 张 斌 o金士翱 o况 铣 o等 q三七皂甙单体 ªt对心肌细胞膜
钙离子通道的影响 q中国中药杂志 ot||| ouwktsl }yuw q
≈v 季宇彬 q中药有效成分药理 q哈尔滨 }黑龙江科学技术出版
社 ot||x qxtv q
≈w 伍杰雄 o陈俊秀 q三七皂甙对血管平滑肌的作用 q中国药理学
报 ot|{{ o| }tw q
≈x 徐叔云 q药理学实验方法 q第二版 q北京 }人民卫生出版社 o
t||w qvt| q
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第 u{卷第 w期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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≈y 张 斌 o金士翱 o况 铣 o等 q三七皂甙单体 ¥t对心肌细胞膜 钙离子通道的影响 q中国药理学通报 ot||{ otwktl }vv q
Εφφεχτσ οφ Ρβλ ον Αχτιον Ποτεντιαλσ ανδ Φορχε οφ Χοντραχτιον
ιν Γυινεα Πιγ ς εντριχυλαρ Παπιλλαρψ Μυσχλεσ
¬±t o≥«¬2¤²u o ÷¬¤±v o ≠ • ¬¨2¬¬±ªw o ÷ ∏²2¬±ªw o ¬±ª2¬¬±ªw
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¬¯¯¤µ¼ °∏¶¦¯ ¶¨q Μετηοδ : × «¨ √ ±¨·µ¬¦∏¯¤µ³¤³¬¯¯¤µ¼ °∏¶¦¯ ¶¨²©ª∏¬±¨ ¤³¬ª º µ¨¨ ¬¶²¯¤·¨§µ¨ª∏¯¤µ¯¼ ¤±§¬°° µ¨¶¨§ º¬·« ×¼µ²§¨ o¶¶²¯∏·¬²±
q × «¨ ©¨©¨ ¦·¶²© ¥¯ k ³∏µ¬©¬¨§¶¤³²±¬±¶²©³¤±¤¬±²·²ª¬±¶¨±ªl ²±·«¨ ¤¦·¬²± ³²·¨±·¬¤¯¶k°l o·«¨ ¶¯²º ¤¦·¬²± ³²·¨±·¬¤¯¶¤±§·«¨ ©²µ¦¨
²©¦²±·µ¤¦·¬²± kƒ≤l ²©·«¨ °∏¶¦¯ ¶¨ º µ¨¨ ¶·∏§¬¨§ q× «¨ ° ¤±§ƒ≤ º µ¨¨ ° ¤¨¶∏µ¨§¶¼±¦«µ²±²∏¶¯¼ q Ρεσυλτ : ¥¯¶«²µ·¨±¨ §·«¨ §∏µ¤·¬²±
²© ° o¬±¦¯∏§¬±ª °⁄u ¤±§ °⁄|s o¤±§µ¨§∏¦¨§·«¨ ƒ≤k ν x , Π s qstl o¥∏·§¬§±. ·¤©©¨¦··«¨ µ¨¶·³²·¨±·¬¤¯ k °l o·«¨ ¤°³¯¬2
·∏§¨ ²©¤¦·¬²± ³²·¨±·¬¤¯k°l o²√ µ¨¶«²·k≥l ¤±§ °¤¬¬°¤¯ ∏³¶·µ²®√¨¯²¦¬·¼ k∂ °¤¬l q ¥¯ ¤¯¶² §¨¦µ¨¤¶¨§·«¨ ° ²©¶¯²º ¤¦·¬²± ³²2
·¨±·¬¤¯ o¥∏· ∏´¬±¬§¬±¨ «¤§±²¶∏¦« ©¨©¨ ¦·¶qΧονχλυσιον : ¥¯ °¤¼ ¥¨ ¤¦«¤±±¨ ¯ ¥¯²¦®¨ µq
[ Κεψ ωορδσ] ¥t ~³¤³¬¯¯¤µ¼ °∏¶¦¯ ¶¨~¤¦·¬²± ³²·¨±·¬¤¯ ~©²µ¦¨ ²©¦²±·µ¤¦·¬²±
≈责任编辑 方文贤
k上接第 u|t页l
虽然邪气盛 o单纯攻邪 o邪难以驱除 ∀方剂调节的作用方式
恰恰是/实必顾虚 o泻必先补0治疗思想的具体体现 ∀
此外 o方剂配伍中的佐使药 o特别是反佐药的应用 o更是
体现方剂重在调节 o避免简单补充 !对抗和因此带来的弊端 ∀
综上所述 o方剂是通过配伍将中药饮片整合为一整体
后 o干预作为整体的疾病状态下的人 ∀它对人干预的范围是
多重的 o作用途径也是多样的 ∀它干预主要方式是调节 o即
便是单纯补充或对抗 o也强调祛邪不伤正 o扶正不留邪 ∀方
剂治疗的主要目的是通过调节人体的阴阳 !脏腑 !气血等功
能关系 o达到机体内环境以及机体与环境之间的动态平衡与
和谐统一 ∀这种整体综合调节的作用方式是方剂治疗的特
色 o也是治疗优势所在 ∀要满足整体综合调节作用方式的要
求 o就要在辨证的基础上 o制订正确的治疗原则 ~在方剂配伍
理论指导下 o以中药药性理论为依据进行处方遣药 o这样才
能开具符合治疗原则的方剂 ∀
中医药现代化发展 o既要继承和发扬优势与特色 o同时
又要在原有的基础上 o更上一层楼 o不断发展 o不断创新 o才
能满足人们日益增长的对健康的需求 ∀方剂的现代化发展 o
也应在继承和发扬优势特色的基础上 o满足当代人们对健康
的需求 ∀
≈参考文献
≈t 于友华 o王永炎 o赵宜军 o等 q方剂配伍规律的研究 q中国中药
杂志 ousst ouykwl }ut| q
≈u 王燕昌 q王氏医存#古方用药之妙 q南京 }江苏科学技术出版
社 ot|{v qvx q
≈v 金观涛 q整体的哲学 ) ) ) 组织的起源 !生化和演化 q成都 }四川
人民出版社 ot|{z qw q
≈w 柯 琴 q伤寒来苏集#伤寒论翼 q北京 }中国中医药出版社 o
t||{ quv{ q
≈x 刘 肪 q幼幼新书#叙 q北京 }人民卫生出版社 ot|{z qtz q
≈y 李 杲 q金元四大家医学全书#东垣试效方 q天津 }天津科学技
术出版社 ot||u qyzx q
≈z 张介宾 q景岳全书 q上海 }上海科学技术出版社 ot|{w q|zw o
vtz q
≈{ 吴 瑭 q温病条辨 q北京 }人民卫生出版社 ot|z{ qtz{ q
≈| 朱震亨 q丹溪心法 q沈阳 }辽宁科学技术出版社 ot||z quz q
≈ts 罗 美 q古今名医方论 q南京 }江苏科技出版社 ot|{v qy otu o
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≈责任编辑 古云霞
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第 u{卷第 w期
ussv年 w月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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