全 文 ：续表１
样品编号 产地 采收季节 含量
２９ 广东新乐 冬 ００５０３９
３０ 广东大全 春 ００２８１２
３１ 广东郁南 夏 ００７８４４
３２ 广东云浮 夏 ００３９２４
３３ 广东高要 夏 ００６８６０
３４ 广东高要 秋 ０１４２７
３５ 广东封开 秋 ００５２０５
３６ 广东德庆 春 ００２１２２
３７ 广东高要 冬 ００２３１８
３８ 广东德庆 冬 ００１４８９
３９ 广东杨柳 春 ００４５６１
４０ 云南河口 夏 ０１１５５
４１ 越南 不详 ００６０３８
３ 讨论
３１ 对于测定波长的选择，紫外扫描结果显示，原
儿茶酸在２６０ｎｍ及 ２８０ｎｍ均有最大吸收峰，本研
究选择２６０ｎｍ作为检测波长，灵敏度高，样品中的
其他成分干扰小。
３２ 本试验结果表明活性成分较高的优质桂枝，均
产于广东、广西海拔较高的县乡。
３３ 对不同产地、不同采收季节以及对同一产地、
不同采收季节的桂枝的含量测定结果表明，桂枝中
原儿茶酸的含量以秋夏季节较高，春冬季节较低，这
为药材的采收提供了参考依据。
［参考文献］
［１］ 倪坤仪，张国清 反相高效液相色谱法测定丹参注射剂的三种
有效成分．药学学报，１９８８，２３（４）：２９３．
［２］ 孔丹云 用薄层扫描法测定血尿胶囊中主成分的含量 中成
药研究，１９８７，（４）：８．
［责任编辑 王康正］
山豆根组织培养获得再生植株
覃文流１，凌征柱２，许鸿源１，蓝祖栽２，吴庆华２，何 冰１
（１广西大学，广西 南宁 ５３００２３；
２广西药用植物园，广西 南宁 ５３００２３）
［收稿日期］ ２００４０１１６
［基金项目］ 国家经贸委中药材生产扶持资金建设项目
（２００２９７８）；广西教育厅植物学硕士点重点建设项目（Ｄ１００８）
［通讯作者］ 许鸿源，Ｔｅｌ：（０７７１）３２３８４６４，Ｅｍａｉｌ：ｘｕｈｙ０８＠１２６．
ｃｏｍ
山豆根为豆科灌木状植物越南槐 Ｓｏｐｈｏｒａｔｏｎｋｉ
ｎｅｎｓｉｓＧａｐｎｅｐ．的干燥根及根茎，为传统中药，主产广
西［１，２］，具有清热解毒，消肿利咽等功效。传统用于
治疗火毒蕴结，咽喉肿痛，牙龈发炎等［２］。近代临床
还常用其治疗湿热黄疸、湿热带下，以及钩端螺旋体
病、心率失常、膀胱癌、喉癌、恶性葡萄胎等症［２，３］。
其有效成分为苦参碱和氧化苦参碱［４］。但是，山豆
根分布范围很窄，常是零星生长于石山岩缝之中。
自然状况下，完全靠种子繁殖。然而种子往往还未
成熟，就已经大部分脱落散失。所以，不仅自然繁殖
系数颇低，而且通过采收种子进行人工繁育难度也
很大，至今没有人工栽培。
由于山豆根的药用部位是根系和根茎，掠夺性
的采挖已经使野生广豆根资源濒临枯竭。为抢救这
一中药资源，保障市场供应，笔者对其组织培养技术
进行了研究，现报告如下。
１ 材料
原始材料是采自广西靖西县爱布乡石山区野生
越南槐 Ｓ．ｔｏｎｋｉｎｅｎｓｉｓ的种子。
２ 培养条件
试验以ＭＳ为基本培养基［５］，添加不同浓度的
植物激素。诱导培养基：① ＭＳ＋ＢＡ１０ｍｇ·Ｌ－１（单
位下同）＋ＮＡＡ０１；② ＭＳ＋ＢＡ２０＋ＮＡＡ０２；③
ＭＳ＋ＢＡ２５＋ＮＡＡ０３。继代培养基：④ ＭＳ＋
ＢＡ１５＋ＮＡＡ０２。生根培养基：⑤ １／２ＭＳ＋ＮＡＡ
１５。以上培养基均含 ２５％蔗糖，０７％琼脂，ｐＨ
５８～６０，培养温度（２５±２）℃，光照 １５００～２０００
ｌｘ，每天１０ｈ。
３ 方法与结果
３１ 无菌苗的获得 将山豆根种子置于０１％升汞
·３０３·
第３０卷第４期
２００５年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３０，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００５
溶液浸泡消毒 １０ｍｉｎ，在超净工作台上用无菌水浸
洗４次，每次浸洗２ｍｉｎ，然后将种子播种于ＭＳ基本
培养基。播种 ２０瓶，每瓶 ５粒，共播种 １００粒。在
室内自然散射光照下培养。结果发芽率为９２％，有
５瓶污染。优选６０株诱导丛生芽。
３２ 丛生芽的诱导 当上述无菌苗长至 ５～６ｃｍ
后，切取上部２５～３０ｃｍ长的顶芽茎段，分别接种
到①②③培养基上进行丛生芽的诱导。每种培养基
重复２０瓶，每瓶接种３个顶芽茎段。培养２５ｄ后，
即有丛生芽形成。在①号培养基有 ３０个分化出丛
生芽，诱导率为５０％；在②号培养基有４８个，诱导率
为８０％；③号培养基有 ３９个，诱导率为 ６６％（只要
有丛生芽形成，不论是否污染，均计数）。可见细胞
分裂素ＢＡ和生长素ＮＡＡ用量偏高未必有利于丛生
芽形成。所以在④号继代培养基中，选用了较为适
中的浓度。
３３ 丛生芽继代增殖 在①②③培养基上培养５０
ｄ后，丛生芽平均高度可达３～４ｃｍ。将丛生芽分别
切成单芽、２芽一簇和３芽一簇，转至④号培养基上
继代增殖。以每簇增殖至５０个丛生芽为准，观察基
础（母）芽数对继代增殖效率的影响。结果，单芽的
生长时间需要６０ｄ以上，２芽一簇需要４５ｄ，３芽一
簇只需 ３０ｄ。各组平均每天得到的芽数依次为：
０８，１１和 １６。可见用一簇多芽为增殖材料比用
单芽的总体增殖效率更高。在培养基③上，３０ｄ为
一个周期，增殖倍数可达 １６。但是，如何既提高增
殖效率又节省“母芽”，即“母芽”数目的高限以多少
为宜？尚需继续试验。
３４ 诱导生根 待继代增殖的丛生芽多数长至 ４
ｃｍ以上时，将健壮较大的芽单切，并转接到⑤号培
养基上诱导生根。余下较小者仍分切成２～３芽一
簇，继续用④号培养基继代增殖。结果，单芽在⑤号
培养基上大约 １５ｄ后，基部切口处开始分化出根，
３０ｄ后，形成具有 ３～５条粗壮根系的完整再生植
株，生根率８５％以上。同时，大多数苗都会长出一
定数量的分枝。
３５ 试管苗的移栽 将发育良好，具有 ２～３张展
开叶片的试管苗瓶盖打开，置于室温下炼苗３～４ｄ。
取出小苗，用清水洗去根部的培养基，在有 ７０％遮
荫度的大棚内，移栽到菜园土菌渣（１∶１）为基质的
苗床上或营养杯中。浇透水，并用塑料薄膜覆盖。
每天上午或下午揭开薄膜换气 ３０ｍｉｎ，喷水雾保持
空气湿度８５％以上。７ｄ后，可揭去薄膜，按常规管
理。结果成活率达到８０％以上，可以满足人工大量
栽培的需要。
４ 小结
本研究建立起来的山豆根组织培养技术，以 ３
芽一簇为基础，３０ｄ为一个周期，增殖倍数可达１６，
实现了快速繁殖的目的。经过薄层色谱技术鉴定，
证明该技术培养出来的山豆根试管苗具有生物合成
药用有效成分苦参碱和氧化苦参碱的能力（另文报
告）。所以本项研究结果具有实用价值，对当前边远
农村退耕还林，特别是石山区修复生态和扩大药物
资源保障市场供应均有积极意义。
［参考文献］
［１］ 中国药典．一部．２０００．２１．
［２］ 江苏新医学院．中药大辞典．上册．上海：上海科学技术出版社，
１９７７．１８１．
［３］ 李希新．广豆根的研究概况．山东中医药大学学报，２０００，２４
（３）：２３５．
［４］ 林启寿．中草药成分化学．北京：科学出版社，１９９７．７０９．
［５］ 关成本，刘进平．热带亚热带植物微繁殖．长沙：湖南科技出版
社，２００１．５０．
［责任编辑 王康正］
本刊投稿须知
本刊目前一律不收网上投稿，请作者务必以邮寄方式投稿。
来稿应为打印稿，一式两份；投稿时不必附软盘；实验性文章应附单位介绍信。
投稿同时请从邮局汇寄处理费（５０元／篇），切勿在稿件中夹带现金；汇款时请注明文章第一作者姓名及
稿件题目。本刊将于收到稿件后的１个月之内给予回执及发票。
·４０３·
第３０卷第４期
２００５年２月
中 国 中 药 杂 志
ＣｈｉｎａＪｏｕｒｎａｌｏｆＣｈｉｎｅｓｅＭａｔｅｒｉａＭｅｄｉｃａ
Ｖｏｌ．３０，Ｉｓｓｕｅ ４
Ｆｅｂｒｕａｒｙ，２００５