全 文 ：w种川芎化学成分与心肌细胞膜受体作用的研究
张延妮 o岳宣峰 o张志琪 3
k陕西师范大学 药用植物资源与天然药物化学教育部重点实验室 o陕西 西安 ztssyul
≈摘要 目的 }研究川芎化学成分与心肌细胞膜受体的作用 ∀方法 }通过 w 种川芎化学成分k川芎嗪 !香兰素 !
大黄酚和阿魏酸l在心肌细胞膜固定相色谱柱上的保留特性 o研究其与心肌细胞膜受体的作用 ~进一步将这些保留
特性与心肌细胞膜上已知受体拮抗剂和激动剂的色谱保留特性比较以研究作用的受体类型 ∀结果 }川芎嗪 !香兰
素 !大黄酚在心肌细胞膜固定相色谱柱上有保留特性 o阿魏酸无保留 ~川芎嗪的保留特性与 Α受体拮抗剂和 Α受体
激动剂相近 o香兰素的保留特性与 Βt受体激动剂相近 ∀结论 }川芎嗪 !香兰素 !大黄酚均可作用于心肌细胞膜受体 o
阿魏酸不与心肌细胞膜上的受体作用 ~川芎嗪有可能作用于 Α受体 o香兰素有可能作用于 Βt受体 ∀
≈关键词 川芎 ~化学成分 ~心肌细胞膜受体 ~细胞膜色谱
≈中图分类号 u{x qx ≈文献标识码 ≈文章编号 tsst2xvsukusswlsz2syys2sv
川芎为伞形科植物 Λιγυστιχυµ χηυανξιονγ ²µ·的
干燥根茎 o味辛 !性温 o具有活血止痛 !行气开郁 !祛
风燥湿之功效≈t ∀川芎的化学成分主要为生物碱 !
酸性物质 !酚性物质 !挥发油和中性物质k内酯类l
等 ∀目前 o虽然对川芎的化学成分及药理作用的研
究都比较深入 o但在细胞水平上研究其与膜受体的
作用还很不够 ∀贺浪冲等≈u2w 曾将活性细胞膜固定
在硅胶载体表面 o对几种常见中药的色谱保留特性
进行了比较 o得到了化合物在细胞膜色谱中的保留
特性和其药理作用显著相关的结论 ∀作者将家兔心
肌细胞膜固定在硅胶载体上 o研究了川芎中 w 种已
知化学成分k川芎嗪 !香兰素 !大黄酚和阿魏酸l在心
肌细胞膜固定相色谱柱上的保留特性 o以比较这些
成分与心肌细胞膜受体的作用 ∀
1 仪器与材料
×≤p ty冷冻离心机k上海安听科学仪器厂l ~
玻璃匀浆器k西安玻璃仪器厂l ~{ p {s低温超速离
心机k美国
¨ ¦®°¤±公司l ~×≠ p ys脱色摇床k南京
大学生物技术开发公司l ~≥ p vss⁄超声清洗仪k宁
波科申仪器厂l ~≤≠ p tss装柱机k北京福思源机械
加工部l ~• ¤·¨µ¶txss 高效液相色谱仪k美国 • ¤·¨µ¶
≈收稿日期 ussw2st2sx
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目kustzxstul ~教育部科
技重点项目ksttxyl
≈通讯作者 3张志琪 oר¯ }ksu|l{xvs{vw| oƒ¤¬}ksu|l{xvss{s| o
∞2°¤¬¯}½´ ½«¤±ª ¶±±∏q¨§∏q¦±
公司l o配有 u||y二级管阵列检测器 otxux 型色谱
泵 o∞°³²º¨ µ³¨µ¶²±¤¯ 色谱工作站 ∀
盐酸川芎嗪注射液k齐齐哈尔第二制药厂 o批号
sus|s{stl o香兰素k浙江省温州东升化学试剂厂l o
阿魏酸k上海试剂一厂l o标准品大黄酚k宣州市甙尔
塔天然有机化合物信息中心l ∀已知心肌细胞膜受
体激动剂和拮抗剂 }重酒石酸去甲肾上腺素注射液
k上海禾丰制药有限公司 o批号 stsvstl o甲磺酸酚妥
拉明注射液k上海旭东海普药业有限公司 o批号
susxsul o盐酸异丙肾上腺素k上海禾丰制药有限公
司 o批号 ||svstl o盐酸多巴酚丁胺注射液k江苏省黄
海药业有限公司 o批号 sususzl o盐酸异丙嗪注射液
k无锡市第七制药有限公司 o批号 susttzl o西咪替丁
注射液k山东省方明药业有限公司 o批号 sxzsuyl o盐
酸氟西汀片k常州四药制药有限公司 o批号 susxsyl o
恬尔心k上海延安制药厂 o批号 sssvsul ∀健康家兔 o
雌雄不限 ~大孔球形硅胶k粒径 w ∗ x Λ° o孔径 ts ∗ tt
±°l o购自中国科学院化学研究所 ∀
2 实验方法
2 q1 色谱条件 色谱柱 w .y °° ≅ uxs °° o填充心
肌细胞膜固定相 ~流速 s qv °# °¬±pt ~检测波长
uz{±° ~流动相xs °°²¯ #pt磷酸盐缓冲溶液k³
z qwl ∀
2 q2 样品溶液配制 取样品适量 o加入适量的 xs
°°²¯#pt磷酸盐缓冲溶液k³ z qwl溶解 o配成 s qt ª
#pt的供试品溶液 o用微孔滤膜ks qwx Λ°l滤过 ∀
2 q3 心肌细胞膜固定相k≤≥°l色谱柱的制备 心
#syy#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw
肌细胞膜制备参阅 ¨¨等≈x 的方法 o并加以改进 ∀
具体步骤如下 }取健康家兔 o注射空气 o迅速开胸取
出心脏 o置于 w ε ×µ¬¶2≤¯ 缓冲液中k³ z qw o整个膜
制备均用该缓冲液l ~洗净残余血液 o剪去心房 o用滤
纸吸干 o研碎 o用 ts倍体积的缓冲液制备成匀浆液 ~
用 u层纱布过滤 o所得滤液 tu sss µ#°¬±pt离心 vs
°¬±o再反复匀浆 !离心 u次 ~收集 v次离心后的上清
液 o再以 vu sss µ#°¬±pt离心 vs °¬± o弃上清 o沉淀用
缓冲液冲洗 u次 o每次均 vu sssµ#°¬±pt离心 vs °¬±~
最后 o将所得沉淀用缓冲液混悬 o即得心肌细胞膜悬
液 ∀取经表面活化处理过的硅胶于反应管中 o
加入细胞膜悬液 o振荡吸附 o至吸附反应达到平衡 o
u sss µ#°¬±pt离心除去未结合的细胞膜 o得到家兔
心肌细胞膜固定相 ∀超声脱气 o采用低压湿法装柱 o
即得家兔心肌细胞膜固定相色谱柱 ∀
3 实验结果
3 q1 盐酸川芎嗪的 ≤ ≥°色谱保留特性 以磷酸
缓冲液为流动相 o考察盐酸川芎嗪在心肌 ≤ ≥°色
谱柱上的保留特性 o发现在保留时间为 yy qzu °¬±处
有一强色谱峰k图 tl o说明盐酸川芎嗪可作用于心
肌细胞膜受体 ~在相同的色谱条件下 o将盐酸川芎嗪
心肌 ≤≥°色谱图与心肌细胞膜上部分已知受体拮
抗剂和激动剂的色谱流出曲线比较 o其保留时间与Α
受体拮抗剂甲磺酸酚妥拉明k图 ul和 Α受体激动剂
重酒石酸去甲肾上腺素k图 vl的保留时间基本一
致 o提示盐酸川芎嗪有可能作用于 Α受体 o这也与文
献≈y 报道的/川芎嗪可能作用于 Α受体0一致 ∀
图 t 盐酸川芎嗪 ≤ ≥°色谱图
3 q2 香兰素的 ≤≥°色谱保留特性 以磷酸缓冲
液为流动相 o考察香兰素在 ≤ ≥°色谱柱上的保留
特性 o发现香兰素在保留时间为 uu qzw °¬±处有一色
谱峰k图 wl ~相同的色谱条件下 oΒt受体激动剂盐酸
异丙肾上腺素的色谱峰位于保留时间 uu quz °¬±处
k图xl o盐酸多巴酚丁胺的色谱峰位于保留时间
uu qux °¬±处k图 yl ∀说明香兰素可作用于心肌细
胞膜受体 o而且有可能作用于 Βt受体 ∀
图 u 甲磺酸酚妥拉明 ≤ ≥°色谱图
图 v 重酒石酸去甲肾上腺素 ≤ ≥°色谱图
图 w 香兰素 ≤ ≥°色谱图
图 x 盐酸异丙肾上腺素 ≤ ≥°色谱图
图 y 盐酸多巴酚丁胺 ≤ ≥°色谱图
3 q3 大黄酚的 ≤≥°色谱保留特性 以磷酸缓冲
液为流动相 o考察大黄酚在 ≤≥°色谱柱上的保留
特性 o发现大黄酚在保留时间为 t{ qy| °¬±处有一色
谱峰k图 zl o说明大黄酚可作用于心肌细胞膜上的
某种受体 ∀在相同的色谱条件下 o所试验的心肌细
胞膜上已知受体拮抗剂和激动剂在此保留时间附近
#tyy#
第 u|卷第 z期
ussw年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂²¯ qu| o¶¶∏¨ z
∏¯¼ oussw
均无明显的色谱峰出现 ∀
3 q4 阿魏酸的 ≤≥°色谱保留特性 对阿魏酸在
≤ ≥°色谱柱上的保留特性进行研究发现 o阿魏酸在
≤ ≥°色谱柱上无任何保留 o说明阿魏酸不与心肌细
胞膜上的任何受体作用 ∀
图 z 大黄酚 ≤ ≥°色谱图
4 讨论
作者所采用的硅胶载体心肌细胞膜固定相色谱
柱具有细胞膜活性和色谱分离双重特性 o其与药物
的作用能够模仿药物在体内与受体的作用过程 o有
利于反映药物与细胞膜受体的相互作用 o克服了经
典的研究方法步骤烦琐 o劳动强度高 o并且成功概率
低的缺点 o是研究药物与受体作用的一种较为理想
的模型 ∀实验结果表明 o川芎嗪 !香兰素以及大黄酚
均可作用于心肌细胞膜上的某种受体 o这些研究为
进一步的药理实验奠定了一定的基础 ∀至于他们是
与何种受体作用还有待于进一步的试验确证 ∀
≈参考文献
≈t 江苏新医学院 q中药大辞典 q上海 }上海人民出版社 ot||z quus q
≈u 贺浪冲 o杨广德 o耿信笃 q固定在硅胶表面细胞膜的酶活性及
其色谱特性 q科学通报 ot||| owwkyl }yvu q
≈v 赵惠茹 o杨广德 o贺浪冲 o等 q用细胞膜色谱法筛选当归中的有
效成分 q中国药学杂志 ousss ovxktl }tv q
≈w 高 琨 o贺浪冲 o杨广德 q用细胞膜色谱法筛选研究红毛七中
的有效成分 q中国药学杂志 oussv ov{ktl }tw q
≈x ¨¨ o ²¨ ¶®¨ • o≠¤°¤°∏µ¤ q ¬ª«¤©©¬±¬·¼ ¶³¨¦¬©¬¦≈v
k n l°uss2tts ¥¬±§¬±ª·² §¬«¼§µ²³¼µ¬§¬±¨ µ¨¦¨³·²µ¶¤¶¶²¦¬¤·¨§ º¬·«
¦¤¯¦¬∏° ¦«¤±±¨ ¶¯¬±µ¤·¦¨µ¨¥µ¤¯ ¦²µ·¨¬¤±§«¨¤µ·q Λιφε σχιενχεσ ,t|{w o
vxkzl }zut q
≈y 韩 玲 o陈可冀 q川芎嗪对缺血再灌注心肌保护作用的研究进
展 q解放军药学学报 oussu ot{ktl }wt q
Στυδψ ον τηειντεραχτιονσ βετωεεν φουρ χοµ πονεντσιν
Λιγυστιχυµ χηυανξιονγ ρηιζοµε ανδ αχχεπτορσ ον χαρδιαχ µ υσχλε µεµ βρανε
≠¤±2±¬o ≠∞ ÷∏¤±2©¨ ±ª o «¬2 ¬´
( Κεψ Λαβορατορψ οφ Μεδιχιναλ Πλαντ Ρεσουρχε ανδ Νατυραλ Πηαρµαχευτιχαλ Χηεµιστρψ
οφ Μινιστρψ οφ Εδυχατιον , Σηαανξι Νορµαλ Υνιϖερσιτψ, Ξι. αν ztssyu , Χηινα)
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε : ײ¶·∏§¼·«¨ ¬±·¨µ¤¦·¬²±¶¥¨·º¨¨ ±©²∏µ¦²°³²±¨ ±·¶¬± Λιγυστιχυµ χηυανξιονγ µ«¬½²°¨¤±§«¨ ¤µ·¦¨¯¯ ° °¨¥µ¤±¨
¤¦¦¨³·²µ¶q Μετηοδ : ׫µ²∏ª«²¥¶¨µ√¬±ª·«¨ µ¨·¨±·¬²± ¦«¤µ¤¦·¨µ¬¶·¬¦¶²©·«¨ ©²∏µ¦²°³²±¨ ±·¶k·¨·µ¤° ·¨«¼¯³¼µ¤½¬±¨ o√¤±¬¯¯¬¦o¦«µ¼¶²³«²¯ o©¨µ∏¯¬¦
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¤¯¯¦²°¥¬±¨ º¬·«¦¤µ§¬¤¦°∏¶¦¯¨ ° °¨¥µ¤±¨ ¤¦¦¨³·²µ¶oº«¬¯¨ ©¨µ∏¯¬¦¤¦¬§¦¤± ±²·~·¨·µ¤° ·¨«¼¯³¼µ¤½¬±¨ ³µ²¥¤¥¯¼ ¤¦·¶²± Α¤¦¦¨³·²µ¤±§√¤±¬¯¯¬¦
¤¦·¶²± Βt ¤¦¦¨³·²µq
[ Κεψ ωορδσ] Λιγυστιχυµ χηυανξιονγ ~¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²°³²±¨ ±·¶~¦¤µ§¬¤¦°∏¶¦¯¨ ° °¨¥µ¤±¨ ¤¦¦¨³·²µ~¦¨¯¯ ° °¨¥µ¤±¨ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼
≈责任编辑 方文贤
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第 u|卷第 z期
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Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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