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Influence of Drug Compatibility on Extractive Retes of Chlorogenic Acid and Isochlorogenic Acid in Simiaoyonglan Tang Decoction

方药配伍对四妙勇安汤中绿原酸和异绿原酸溶出率的影响



全 文 :#药性理论与临床#
方药配伍对四妙勇安汤中
绿原酸和异绿原酸溶出率的影响
席先蓉 刘光亮 3
k贵阳中医学院 贵阳 xxsssul
摘要 目的 }研究不同药物配伍对四妙勇安汤中绿原酸 !异绿原酸溶出率的影响 ∀方法 }用 ׏≤2
˜ ∂ 分光光度法测定了四妙勇安汤分煎液 !四妙勇安汤合煎液 !金银花水煎液 o金银花与方中其余各单
味药材配伍水煎液中绿原酸和异绿原酸的含量 o并对测定结果作了统计检验 ∀结果 }各配伍组水煎液中
绿原酸含量均较金银花水煎液显著降低k Π s qstl ~与金银花水煎液中异绿原酸含量相比 o全方合煎液
中异绿原酸含量无显著性差异 o而其余各配伍组水煎液中则显著降低k Π s qstl ∀结论 }方药配伍是四
妙勇安汤中绿原酸 !异绿原酸溶出率发生变化的主要原因之一 ∀
关键词 四妙勇安汤 金银花 方药配伍 绿原酸 异绿原酸
四妙勇安汤源自5验方新编6卷二 o由金银
花 !玄参 !当归和甘草组成 ∀功效清热解毒 o活
血止痛 o为治疗脱疽的有效方剂 ∀临床用于血
栓闭塞性脉管炎 o动脉栓塞性坏疽症 o栓塞性大
静脉炎属于热毒型或湿热型患者 ∀方中君药金
银花具有清热解毒 o抗菌消炎的功效 o绿原酸和
异绿原酸为金银花清热解毒的主要有效成
分≈t  o故用薄层洗脱2紫外分光光度法测定了四
妙勇安汤 o金银花及金银花与玄参 !当归 !甘草
分别配伍的水煎液中绿原酸和异绿原酸的含
量 o以探讨方药配伍对四妙勇安汤中绿原酸和
异绿原酸溶出率的影响 o从四妙勇安汤内在成
分角度 o客观理解中药方剂配伍不是单味药简
单相加 o对复方质量标准制定提供实验依据 ∀
1 仪器与材料
⁄˜2zs …¨ ¦®°¤±分光光度计 o微量进样器
k上海医用激光仪器厂l ∀
金银花为忍冬科植物黄褐毛忍冬 Λονιχερα
φυλϖοτοµεντοσα ‹¶∏ ·¨≥ q≤ q¦«¨ ±ª的带花梗的
花及花蕾 o玄参为玄参科植物玄参 Σχροπηυλα2
ρια νινγποενσισ ‹¨°¶¯ q的干燥根 o当归为伞形
科植物当归 Ανγελιχα σινενσισ k’ ¬¯√ ql⁄¬¨ ¶¯q的
干燥根 o甘草为豆科植物胀果甘草 Γλψχψρρηιζα
ινφλατα …¤·q的干燥根 o经本院鉴定教研室刘芃
副教授鉴定 ∀绿原酸对照品购自中国药品生物
制品检定所 ∀硅胶 Šk青岛海洋化工厂l2t h
≤  ≤薄层板 otts ε 活化 s qx«后置于干燥器中
备用 ∀其余试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 样品溶液制备
2 q1 q1 根据四妙勇安汤配方比例≈u  o取金银花
yªo玄参 yªo当归 uªo甘草 tªo置烧杯中 ∀加入
txs °¯ 水 o浸泡 s qx«o电炉上加热至沸 o保持微
沸 t«o过滤 o收集滤液 ~滤渣加 tus °¯ 水 o煎煮
保持微沸 t«o过滤 ∀合并两次滤液 o浓缩至适
当体积 o加入 |x h乙醇使含醇量达 zs h o并定
容至 ux °¯ o即得四妙勇安汤全方合煎液 ∀
2 q1 q2 照 2 q1 q1 方法 o分别制备金银花kyªl o
金银花与玄参kyªΒyªl o金银花与当归kyªΒuªl o
金银花与甘草kyªΒtªl的各组水煎液和四妙勇
安汤全方分煎液 ∀
2 q1 q3 取金银花 tªo精密称定 o置具塞锥形瓶
中 o准确加入 zs h乙醇 ts °¯ o浸泡 uw«o即得金
银花醇浸液 ∀
3 中外合资银信药业有限公司 贵阳 xxssvx
#w|y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
2 q2 × ∂ ≤2˜ ∂ 分光光度法测定绿原酸和异绿
原酸含量
2 q2 q1 测定波长的确定
取金银花醇浸液 o绿原酸对照液和异绿原
酸对照液各适量 o条状点于同一块硅胶 Š薄层
板上 o用二甲苯2乙酸乙酯2zs h乙醇2甲酸kv qxΒ
v qxΒtΒs qyl作展开剂≈v 上行展开 tx¦° o取出晾
干 o在 uxw±° ˜ ∂ 灯下定出异绿原酸k层析为两
条相邻的色带l和绿原酸位置 ∀将绿原酸和异
绿原酸斑点分别定量刮于离心管中 o加 ts °¯ 蒸
馏水 o搅拌 o离心 o倾出上清液 ∀重复此操作直
至将绿原酸和异绿原酸定量洗脱 ∀洗脱液合并
适当浓缩 o定容于 ts °¯ 容量瓶中 ∀用同样方法
制备空白洗脱液 ∀在 ⁄˜2zs分光光度计上 o以
空白洗脱液为空白 o测定样品中分离的绿原酸 !
异绿原酸及对照品绿原酸 !异绿原酸的吸收曲
线 o均在 vus±°有最大吸收 o故选 vus±°为测
定波长 ∀
2 q2 q2 标准曲线的制备
用微量进样器分别吸取绿原酸 zs h 乙醇
对照液ku qu°ª# °¯ p tlts ous ovs ows oxs oys ozs o
{sΛ¯ o条状点于硅胶 Š薄层板上 o照 2 q2 q1 方法
展开 o洗脱 o在 vus±°处测定吸收度 „ o得到回
归方程 Α € p s .svwt n s .swt| Χ, ρ€ s q||v| ∀
2 q2 q3 含量测定
精密吸取金银花醇浸液 uxΛ¯ o条状点于硅
胶 Š板上 o同时点上绿原酸及异绿原酸对照液
适量 o照 2 q2 q2 方法分别测定绿原酸及异绿原
酸吸收度 o代入回归方程 o计算供试液中绿原
酸 !异绿原酸的浓度 o然后计算金银花醇浸液中
绿原酸和异绿原酸的百分含量 ∀
用同样方法测定四妙勇安汤全方合煎液 !
分煎液 !金银花水煎液 !金银花与其余各单味药
材配伍水煎液中绿原酸及异绿原酸百分含量 o
结果见表 t ∀
表 t 各种样品溶液中绿原酸和异绿原酸含量
样品
绿原酸
平均含量
ª#tssªp t
ΡΣ∆
h
相对溶出率
h
异绿原酸
平均含量
ª#tssªp t
ΡΣ∆
h
相对溶出率
h
金银花醇提液 x qzxw t q{{ v q|sv t q|x
金银花水煎液 x qwtt u qu| tss qs u qwvv t qy{ tss qs
金归水煎液 v qy{| u qxv y{ qt{ t q{xu t qss zy qtu
金玄水煎液 v qyww t qtw yz qvw t q|us t qxy z{ q|t
金甘水煎液 v q|tt t qwx zu qu{ t qyx| u qzu y{ qt|
全方分煎液 v qzuz t qwy y{ q{{ u qsvt u qzy {v qw{
全方合煎液 v q{zx u qyw zt qyt u qvuu u qzz |x qww
注 }ν € v
2 q2 q4 稳定性试验
取金银花醇浸液适量 o照 2 q2 q3 方法操作 o
测定绿原酸和异绿原酸洗脱液吸收度 o吸收度
值在 u«内基本不变 ∀
2 q2 q5 回收率试验
取金银花 s qtª精密称定 o加入绿原酸对照
品 u qu°ªo定量加入 zs h乙醇 t °¯ 于具塞锥形
瓶中 o浸泡 uw«o按 2 q2 q3 方法操作 o测定回收率
为 tsu qx h oΡΣ∆ h € u qvtk ν € vl ∀
2 q2 q6 以药材配伍作为试验因素 o对测定结果
进行单因素方差分析和多重检验 ∀
无论是绿原酸或异绿原酸的方差分析 o在
显著水平 s qssx下 o统计量 Φ的计算值k绿原
酸 oΦ€ usu q|w ~异绿原酸 oΦ€ tu{ qxsl均明显
大于临界值 Φs qssxk € y qszl o因此可认为各水煎
液中绿原酸和异绿原酸含量均有极显著性差
异 o说明了药材配伍对绿原酸和异绿原酸的溶
出率的影响极显著 ∀为进一步了解水煎液中绿
原酸 !异绿原酸含量变化情况 o对测定结果进行
了多重检验 o结果见表 u ∀
3 小结与讨论
3 q1 药材配伍对绿原酸溶出率的影响 根据
#x|y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期
表 u 水煎液中绿原酸含量和异绿原酸含量多重检验
水煎液 绿原酸 异绿原酸
金银花水煎液r全方合煎液 t qwzztl s qttt
金银花水煎液r全方分煎液 t qyxutl s qvwytl
金银花水煎液r金甘水煎液 t qxystl s qz|stl
金银花水煎液r金玄水煎液 t qzv{tl s qxswtl
金银花水煎液r金归水煎液 t qy|utl s qysttl
金归水煎液r全方合煎液 s qutx s qw|stl
金归水煎液r全方分煎液 s qsyz s quxxtl
金归水煎液r金甘水煎液 s qtvu s qt|stl
金归水煎液r金玄水煎液 s qswy s qs|z
金玄水煎液r全方合煎液 s quyt s qv|vtl
金玄水煎液r全方分煎液 s qttv s qtx{tl
金玄水煎液r金甘水煎液 s qtz{ s qu{ztl
金甘水煎液r全方合煎液 s qs{v s qy{stl
金甘水煎液r全方分煎液 s qsyx s qwxxtl
金甘水煎液r全方分煎液 s qtw{ s quvxtl
注 }水煎液平均百分含量差值之绝对值 tl Π s qst
测定结果和方差分析结果可知 o与金银花水煎
液中绿原酸含量相比 o其余各水煎液中绿原酸
含量均存在极显著差异 o提示除金银花外的各
单味药材及单味药材的组合都对绿原酸溶出率
的降低产生了显著影响 ~除金银花水煎液外 o其
余两两水煎液之间绿原酸含量无显著性差异 o
可认为不论是单味药材或是单味药材的组合均
对绿原酸溶出率的降低产生相同影响 ∀
3 q2 药材配伍对异绿原酸溶出率的影响 与
金银花水煎液中异绿原酸含量相比 o除全方合
煎液外 o其余各水煎液均有极显著差异 o说明各
单味药材对异绿原酸溶出率的降低产生了显著
影响 ∀但另一方面全方合煎液中异绿原酸含量
与金银花水煎液不存在显著性差异 o也说明了
全方合煎液中异绿原酸的溶出不是单味药材作
用的简单加和 o而是全方各组成药材间各成分
间在共同加热情况下协同作用的结果 ∀
3 q3 测定结果还显示 o方药配伍使四妙勇安汤
中总绿原酸含量降低 ∀而总绿原酸是方中君药
金银花中清热解毒的主要有效成分 o那么是否
会在某种程度上对四妙勇安汤的主要功效清热
解毒产生负面影响呢 ‚这一方面说明了5验方
新编6的论述和后人运用四妙勇安汤的经验 o即
四妙勇安汤用时剂量宜重 o轻则效果不佳是有
一定道理的 ∀但另一方面 o也不能忽视四妙勇
安汤中其他药物的作用 ∀四妙勇安汤所治脱
疽 o部位是在四肢远端 o尤多见于下肢 ∀正是由
虚毒化火内郁而成 o火毒内阻 o血行不畅 o瘀滞
筋脉 o所以患处红肿且痛 o溃烂腐臭 ∀方中重用
金银花 o清热解毒为主 o而甘草与金银花是一常
用药对 o二药配伍 o甘草助金银花加强清热解毒
之力 ∀但其二药药力偏弱 o须与其他清热解毒
药相伍 o方能奏效 ∀故配玄参凉血泻火解毒 o加
上活血化瘀当归 o全方作用更大 ∀四药相伍 o使
毒祛 o血行 o肿消痛止 ∀因此该方清热解毒作用
不惟是总绿原酸所为 o而是四妙勇安汤各组成
药物间 o各有效成分间协同作用 o从而最大限度
地达到从整体上治疗疾病的目的 ∀
4 参考文献
t 丁济 o李志和 o龚秀珍 1tw种金银花中异绿原酸 !绿原酸的
测定比较 1 中草药 ot|{t oktl }ts
u 中国医学百科全书编辑委员会 1 中国医学百科全书#方剂
学 1 上海 }上海科学技术出版社 ot|{z1yy
v 张秀琴 o徐礼燊 1 总绿原酸的快速脉冲极谱测定法 1 药物
分析杂志 ot|{z ozkvl }tyu
t||{2s{2uy收稿
服山豆根精制颗粒致儿童胃肠道反应 z例
宋国绪 k山东省泰安市中医院 泰安 uztsssl
z例均为门诊轻 !中度上呼吸道感染患儿 o
中医辨证属风热感冒 o因病情不重 o均单纯使用
中药汤剂治疗 ∀
年龄 v qx ∗ {岁 o平均 x qz岁 ∀方用 }山豆
根 tsªo黄芩 tsªo金银花 tsªo连翘 tsªo牛蒡子
k炒ltsªo葛根 tsªo柴胡 yªo荆芥 tsªo生甘草
vª∀以上为单味精制颗粒真空包装的固定剂
量 o服用时将各包药混合 o温开水溶化后口服 ∀
#y|y# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 tt期