全 文 :益气活血中药复方对肿瘤细胞
增殖的抑制作用
李萍萍 吕桂芝 孙红 杨新宇 史桂芝
北京市肿瘤防治研究所
摘要 实验证明益气活血复方可明显改善肿瘤细胞核仁和膜表面微绒毛形态显著改进微管蛋白
的组装对细胞间隙连接通讯功能有升调作用∀ 细胞周期动力学表明阻断人胃癌细胞的增殖主要作用
在 期∀
关键词 微管蛋白 细胞间隙连接通讯功能 细胞周期
我们对益气活血中药复方抑制肿瘤作用的
研究曾有过报道≈∀ 为了进一步探讨该中药复
方抑瘤作用的机理我们采用先进的技术方法
观察了该中药复方给荷瘤小鼠灌胃后对肉瘤
≥肿瘤细胞膜和核仁的作用∀ 人胃癌 ≤ 2
细胞体外培养后对微管蛋白和细胞间隙连
接通讯功能的影响以及抑制人胃癌 ≤ 2
细胞增殖与细胞周期时相的分布∀
1 材料和方法
111 中药制备
药物黄芪 白术 当归 川芎
红花 莪术 地龙 水煎 次
浓缩成 ∀用 酒精沉淀 次去渣取上
清温水浴挥发酒精后用 1Λ 的滤器过滤∀
含生药浓度 1∀ 置 ε 冰箱备用∀
112 电镜下对小鼠 ≥实体瘤形态观察
小鼠皮下接种 ≥瘤株后分为对照组和
中药组∀药物剂量 ∀连续灌胃 周后将
两组小鼠的实体瘤标本分别切成 小块固
定于 戊二醛 ε °≥ 冲洗 次再用
锇 酸 固 定 ε 梯 度 酒 精 脱 水
∞°包埋超薄切片机切片醋酸双氧铀和
柠檬酸铝双染透射电镜下观察∀扫描电镜观察
时基本程序一样酒精脱水后醋酸异戊酯置
换≤ 临界点干燥器干燥喷金后用扫描电镜
观察∀
113 间接免疫荧光抗体法≈对微管蛋白组装
的观察
实验细胞为人胃腺癌 ≤ 2细胞培
养基为 加 小牛血清和适量双抗兔
抗微管蛋白抗体 χ公司产∀ 细胞种植在
带盖片的小平皿内次日换培养基∀实验组加中
药Β 原液稀释∀ 对照组只加培养基∀
后取细胞盖片进行免疫荧光细胞化学染色在
荧光显微镜下观察∀
114 划痕标记荧光染料示踪技术≈对细胞间
隙连接通讯功能的观察
实验细胞用 ≤ 2 细胞亚系 细
胞∀培养基为 加 小牛血清加双抗∀细
胞种植在小平皿内达密度饱和贴壁后加中药
处理 铺满底质的细胞锐刀划痕加
∏ 荧光染液 1 °≥
用 °≥ 洗去染液直接在荧光显微镜下
观察∀
115 流式光度术对细胞周期时相分布的检测
实验细胞为人胃癌 ≤ 2细胞∀药物浓
度 Β Β 原液稀释∀ 取对数生长的对照
组和实验组细胞分别经 酒精固定后贮存
于 ε 冰箱内∀ 实验时用 °碘化丙锭荧光染
色用流式光度术对两组细胞分别进行周期时
相分布的分析∀
2 结果
211 小鼠 ≥实体瘤形态观察
对照组癌细胞膜表面具有多而长的微绒毛
图 细胞内线粒体等细胞器发达核内的核
仁数目不等∀多数核仁的类型呈网状型网眼内
有电子密度低的纤维中心∀ 中药组瘤细胞膜表
面光滑平坦微绒毛少见∀ 核仁多呈环状类型
## 中国中药杂志 年第 卷第 期
断人胃癌细胞在 期延缓了细胞周期进
程抑制了细胞的增殖∀
附表 中药对人胃癌细胞周期时相分布的影响
组 别 药物浓度 ≥
对照组 1 1 1
中药组 Β 1 1 1
中药组 Β 1 1 1
3 讨论
肿瘤细胞的中心特征之一是它们不受控制
地增殖与生长有关的细胞功能是由通过有组
织的细胞骨架所传递的信号来调节的∀ 微管作
为细胞稳定性条件之一它的功能损伤或控制
失调与肿瘤的发 生有内在联系≈∀本实验所用
的中药益气活血复方对肿瘤细胞的微管有明显
的改进作用∀ 说明本中药复方对肿瘤细胞的作
用不是直接杀伤作用而是通过改善微管蛋白
的组装间接抑制肿瘤细胞的生长∀ 对细胞间隙
连接通讯功能的实验亦表明本方可使肿瘤细
胞丧失的间隙连接通讯功能得到恢复而转化
或癌变过程中的细胞间隙连接通讯功能却逐渐
丧失≈∀ 说明本中药复方对细胞增殖调控中起
重要作用的细胞间隙连接通讯功能有促进作
用∀ 从而间接抑制肿瘤细胞增殖∀ 细胞周期时
相的分布结果提示本方阻断人胃癌细胞作用在
期延缓了细胞周期的进程抑制了肿瘤
细胞的增殖∀ 灌服中药后对小鼠实体瘤细胞核
仁!细胞膜的形态观察也表明本中药复方可使
恶性细胞的核仁!膜表面发生改变趋向正常细
胞进一步说明了该中药复方在抑制肿瘤细胞
生长方面有多重作用∀
中药复方是中医治疗肿瘤的重要手段之
一是中医根据理!法!方!药组方和辨证论治理
论在临床应用的体现因而在临床占有重要地
位∀然而由于复方药味多提取物多为粗制剂等
因素使中药复方作用机理的研究难以深入∀本
实验运用细胞生物学和分子生物学的先进技
术从体内体外两方面研究了中药益气活血复
方的抑瘤作用机制使祖国医药学的研究提高
到分子肿瘤学水平对中西医结合研究肿瘤有
重要的理论与实践意义∀
4 参考文献
李萍萍中医杂志 Β
刘志林等中国医学科学院学报 Β
∞2ƒ∏ ∞¬ ≤ Β
韩锐肿瘤化学预防及药物治疗北京北京医科大学中国
协和医科大学联合出版社Β
吕桂芝等实验生物学报 Β
) ) 收稿
补肾调冲药对去卵巢大鼠下丘脑单胺类
神经递质含量的影响
夏蓉西 崔洪英 陈秋梅
天津中医学院
我院妇科专家韩冰教授运用补肾调冲药治
疗卵巢功能失调性不孕症取得显效∀临床观察
例其有效率达 1 并用 超监测治疗
前后的排卵情况没有出现卵巢过度刺激症∀显
然此法摒弃了激素类促排卵药的弊端又优于
单纯补肾的中药人工周期疗法∀ 本文观察摘除
卵巢大鼠用药前后下丘脑单胺类神经递质含量
的变化从这个角度来研究补肾调冲药的作用
机制∀
1 材料与方法
111 动物 采用 • 雌性大白鼠 只体
重 ∗ 由军事科学院第四研究所动物
室提供∀在室温 ? ε 自来水和饲料任服的
条件下饲养∀
## 中国中药杂志 年第 卷第 期