全 文 ：≈w  徐元秀 o宋耕英 o张鲁彤 q中药苦丁茶对动物子宫平滑肌的作
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≈x  方晓惠 o白春学 o钮善福 o等 q地塞米松对豚鼠离体气管平滑
肌收缩功能的影响 q中国药理学通报 ot||x ottkwl }wsv q
≈y  徐端正 o赵定义 q药理2受体参数 ³⁄u o³„u o³⁄u. 估计 ) ) ) 附
统一计算机程序 q上海第一医学院学报 ot|{x otukxl }vwu q
≈z  陈杖洲 q开发利用前景广阔的苦丁茶 q茶叶通报 ot||y ot{
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≈责任编辑 方文贤 
葛根素对乳鼠心肌细胞缺氧2复氧损伤时
‘’ 产量增加的抑制作用
朱智彤 o李会强 o卢 奕 o娄建石 o姚 智
k天津医科大学 o天津 vssusvl
≈摘要  目的 }观察葛根素对缺氧2复氧损伤诱导的大鼠乳鼠心肌细胞一氧化氮k‘’l产生的作用 ∀方法 }采用
硝酸还原酶法测定对照组 !模型组 !及 t os qt os qst ª#p t °∏¨ 给药组在各个时间点时细胞培养上清液中 ‘’ 含量
的变化 ∀结果 }复氧开始后 o模型组 ‘’ 合成显著性地增加k Π s qstl ∀复氧后 y «o‘’ 合成激增 o并一直保持 ∀v
种剂量的 °∏¨ 在复氧后 y «才表现显著性抑制k Π s qstl‘’ 合成的作用 o并保持至其后 uw «∀结论 }在 ‘’ 合成
量激增时 °∏¨ 才表现出显著降低缺氧2复氧损伤时心肌细胞分泌的 ‘’ o并呈剂量依赖趋势 ∀
≈关键词  缺氧2复氧 ~心肌细胞 ~葛根素 ~一氧化氮
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstltu2s{xy2sw
≈收稿日期  usss2sz2t{
≈基金项目  天津市科技发展计划项目k|yvts|wxtl
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第 uy卷第 tu期
usst年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qtu
⁄¨ ¦qousst
心肌缺氧2复氧损伤及缺血2再灌注损伤的共性
为组织遭受了缺氧及其后更为严重的复氧损伤 ∀而
一氧化氮k‘’l产量的变化与缺氧2复氧时心肌细胞
结构及功能的损害密切相关 ∀本实验采用给培养的
心肌细胞换用缺氧 o及有氧培基而造成缺氧2复氧损
伤来探究葛根素 Š ª¨¨ ±¶∏k拉丁名 ³∏¨µ¤µ¬±o简称为
°∏¨ l抗缺氧和k或l复氧造成的心肌细胞损伤的作用
途径 !‘’的变化及量效关系 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料 • ° Œ tyws培养基kŠ¬¥¦²l ~胰蛋白酶
k≥¬ª°¤l ~|x h ‘u2x h ≤ ’u o|x h ’u2x h ≤ ’u高纯混
合气k天津市华北氧气厂l ~葛根素k化学名 }w oz2二
羟基2{2Β2⁄2葡萄糖基异黄酮 o分子量 }wty qw o广东燕
塘生物化学药业有限公司 o批号 ||svtut oxs ª#
ptl ~‘’测定试剂盒k南京建成生物工程研究所l ∀
1 q2 实验动物 出生后 t ∗ w §的 • ¬¶·¤µ大鼠 o雌
雄不拘 o购自军事医学科学院四所 ∀
1 q3 心肌细胞的培养 参照文献≈t 并有改进 ∀肝
素k每只 tss ∏l抗凝后无菌取心室 o剪成 s qx ∗ t
°°v 碎块 ∀用终浓度含 s qt h 胰蛋白酶 !s qsu h
∞⁄× „及 s qt h柠檬酸钠的消化液消化 ∀用含 us h
小牛血清的 • ° Œ tyws培基将心肌细胞沉淀混匀 o
过 uss目钢丝网 o制成细胞悬液 o并用分次静置法纯
化后 o配成 x ≅ tsx# °¯ p t的浓度 o分装于铺鼠尾胶的
培养瓶内 o每瓶 u °¯ ∀
放入培养箱中培养 ∀uw «后换液 ∀w{ «后换为
无血清 • ° Œ tyws培基 ∀选生长状态佳者于 zu «
后进行实验 ∀
1 q4 实验方法 参照文献≈u 并有改进 ∀对照组 }
实验开始时换用有糖 • ° Œ tyws培基 t q{ °¯ n °…≥
s qu °¯ o放普通培养箱培养 u «∀换上述液体 o继续
培养 ∀模型组 }换 ‘u 饱合k Π’u  t qt ®°¤l的无糖
• ° Œ tyws培基 t q{ °¯ n °…≥ s qu °¯ o置持续通以
|x h ‘u2x h ≤ ’u混合气kw °¯ # °¬±p tl的密闭孵育
器中 ovz β≤ ou «∀再换 ’u饱合k Π’u  |v qt ®°¤l的
有糖 • ° Œ tyws培基 t q{ °¯ n °…≥ s qu °¯ o置持续
通以 |x h ’u2x h ≤ ’u 混合气kw °¯ #°¬±p tl的密闭
孵育器中 ovzβ ≤ ot «∀结束后 o放入普通培养箱培
养 ∀给药组 }实验开始 o及复氧开始时 o分别加入终
浓度为 t os qt os qst ª#pt °∏¨ o其余过程同模型组 ∀
分别在缺氧结束后 !复氧结束后 t oy otu ouw «取上
清液测 ‘’ ∀实验重复 y次 ∀
1 q5 ‘’的测定 用硝酸还原酶法测定 o具体步骤
遵照试剂说明书 ∀
1 q6 统计方法 数值用 ξ ? σ来表示 ∀两组间均
数的比较用 τ检验 ∀多组间的比较用双因素方差分
析 o其中均数间的两两比较用 ≥·∏§¨ ±·2‘¨ º °¤±2
Ž¨∏¯¶检验 ∀
2 结果
2 q1 缺氧2复氧对 ‘’ 产量的影响 心肌细胞在一
般情况下即自发分泌一定量的 ‘’ ∀缺氧未能刺激
‘’的分泌量发生显著性变化 ∀但在复氧开始后 o模
型组 ‘’合成量显著性地增加k Π s qstl ∀复氧后
y «o‘’合成激增 o可达对照组的 u qz倍 o且保持至
复氧后 uw «k表 tl ∀
表 t 缺氧2复氧损伤后各组 ‘’ 产量的变化
组别
剂量
rª#p t
‘’rΛ°²¯#p t
缺氧后即刻 复氧后 u « 复氧后 y « 复氧后 tu « 复氧后 uw «
对照组 wv q| ? { qt x{ q{ ? z qv yv qy ? | qs zy qx ? z qy {w qw ? ts qz
模型组 xt q| ? | qy {t q| ? { qytl ty| qx ? tw qxtl tzv qy ? y qutl t{s qw ? tw qxtl
°∏¨ s qst w{ qs ? { qz z{ q{ ? { qvtl tuv q{ ? ts qst ovl tyt qz ? ts qtt oul ty| qx ? tt qwtl
°∏¨ s qt xt qx ? { qy {x qs ? ts qytl tt{ qu ? tt qvt ovl twy qw ? tt qyt ov owl txw qw ? z qst ovl
°∏¨ t x| qy ? | q{ |w qx ? tw qutl tsx q{ ? tv qyt ov owl tv{ qv ? | qst ov oxl twv qz ? ts qzt ov oxl
注 }≠ ξ ? σ  ν € y ≈与对照组相比 t) Π s .st …与模型组相比 u) Π s .sx v) Π s qst  与 s qstªr°∏¨ 组相比 wl Π s .sx
x) Π s qst
2 q2 不同剂量 °∏¨ 对 ‘’ 产量的影响 °∏¨ 对 ‘’
的作用在复氧后 y «才出现 o表现为显著性抑制k Π
 s qstl‘’的合成k表 tl ∀
3 讨论
正常情况下 o心肌细胞能自发分泌一定量的 ‘’
来维持生理状态 ∀而在受到刺激后 o诱导型 ‘’ 合
酶k¬‘’≥l开始表达 ∀在缺氧时 ‘’的分泌量无显著
性变化 o一方面可能与 ‘’≥合成的底物之一 o即 ’u
的量明显受限有关 o另一方面也可能与¬‘’≥蛋白合
成需要一定时间有关 ∀
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第 uy卷第 tu期
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qtu
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复氧后 o’u大量涌入 o‘’≥的底物大大增加 ∀¬2
‘’≥大量表达 o‘’合成量激增 o在复氧后 y «最为
明显 o并维持至复氧后 uw «∀这种分泌形式间接反
映出¬‘’≥活性随刺激时间增加而增加的特点 o但在
我们的实验中 o‘’ 合成的底物有限 o故在 y «后 o无
进一步显著增加 ∀
综述众多的对 ‘’ !‘’供体 !‘’ 抑制剂在缺血
2再灌注损伤中的作用的研究 o会发现无论对于心肌
细胞 o还是内皮细胞而言 o在 ‘’ 的分泌量适当时 o
会出现保护性作用 o这包括维持血管张力 !抑制血小
板聚集 !抑制白细胞粘附至血管壁≈v  ∀但若 ‘’ 的
量出现异常k可表现为过度增高或过度降低l o就会
表现出其恶性的一面 o这包括引发血管松驰反应 o并
出现对血管收缩剂和全身刺激的低反应性≈w  !降低
分离的心肌细胞及整个心脏的收缩功能≈x ∗ z  !降低
心肌线粒体的功能≈{  o甚至能诱导心肌细胞的凋
亡≈|  ∀大量产生的 ‘’还可与反应性氧片段结合生
成过氧化亚硝酸盐k’‘’’ p l o加重心肌细胞的脂
质过氧化损伤≈z  ∀
°∏¨ 在缺氧及复氧后对心肌细胞 ‘’ 合成的影
响有一个显著的特点 o即其产生作用的时间较晚
) ) ) 复氧后 y «∀此作用表现为各剂量 °∏¨ 均能显
著地降低 ‘’ o并呈剂量依赖趋势 ∀随着剂量的减
小 o作用强度减小 o效应持续时间缩短 ∀这些特点最
明显地体现在 t os qst ª#pt °∏¨ 治疗组上 ∀而 °∏¨
生效的介入点正是 ‘’ 大量增加的时候 ∀这时模型
组的 ‘’分泌量是对照组的 u qz倍 o但在复氧后 u
«o其分泌量只是对照组的 t qw倍 ∀即 °∏¨ 只在 ‘’
分泌量异常变化非常明显时才起作用 o并可使之趋
于平衡 o而达到缓解特定病理性损害的作用 ∀
总之 o°∏¨ 能降低缺氧2复氧损伤时心肌细胞产
生的过量的 ‘’ o且这种作用呈剂量依赖趋势 ~°∏¨
的作用起始于复氧后 y «o而对缺氧时 !复氧后 u «
的 ‘’分泌量无显著性作用 ∀这种作用提示 °∏¨ 对
‘’分泌的作用可能与微环境中 ‘’的量有关 o在一
定范围内 o会/默许0 ‘’ 分泌增加 o但若超过一定限
度而大量地异常增加时 o°∏¨ 就会表现出显著地抑制
‘’分泌的作用 ∀
≈参考文献 
≈t  徐叔云 o卞如濂 o陈 修 q药理实验方法学 q第 u版 q北京 }人
民卫生出版社 ot||t qxvt q
≈u  Ž¬µ¶«¨ ±¥¤∏° „ o≥¬±ª¤¯ ° Žq≤«¤±ª¨ ¶¬± „±·¬²¬¬§¨ ∞±½¼°¨¬±
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≈y  朱洪生 o黄忠耀 o崔世涛 o等 q实验性缺血再灌注心肌顿抑与
一氧化氮的关系及东莨菪碱对其影响 q中华心血管病杂志 o
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Ινηιβιτιϖε Εφφεχτ οφ Πυεραριν ον Ινχρεασεδ ΝΟ Προδυχτιον βψ
Νεοναταλ Χαρδιοµ ψοχψτεσ ∆υρινγ Ηψποξια/ Ρεοξψγενατιον Ινϕυρψ
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中 国 中 药 杂 志
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¶¬²±q Χονχλυσιον : °∏¨ ¬¨¨ µ·¶¬±«¬¥¬·¬√¨ ©¨©¨ ¦·²±¯ ¼ ¤©·¨µ‘’ ³µ²§∏¦·¬²± ¬¶ ±¨«¤±¦¨§¶«¤µ³¯¼ §∏µ¬±ª «¼³²¬¬¤r
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[ Κεψ ωορδσ] «¼³²¬¬¤rµ¨²¬¼ª¨ ±¤·¬²±~¦¤µ§¬²°¼²¦¼·¨ ~³∏¨µ¤µ¬±~±¬·µ¬¦²¬¬§¨
≈责任编辑 方文贤 
山茱萸乙醇提取液对 ‘Œ⁄⁄ 大鼠骨骼肌 Š˜×w
表达影响的实验研究
钱东生 o朱毅芳 o朱 清
k南通医学院 药理学教研室 o江苏 南通 uuysstl
≈摘要  目的 }在明确山茱萸降糖 !促进胰岛增生和增加胰岛素分泌作用的基础上 o研究山茱萸乙醇提取液对
非胰岛素依赖型糖尿病k‘Œ⁄⁄ l大鼠骨骼肌 Š˜×w °• ‘„和蛋白表达的影响 o探讨其降糖作用的分子机制 ∀方
法 }制备 ‘Œ⁄⁄ 大鼠模型 ∀将动物分为 v组 o每组 y只 }≠ 正常对照组 o ‘Œ⁄⁄ 模型组 o≈ ‘Œ⁄⁄ 模型 n山茱
萸乙醇提取液给药组 ∀动物每天灌胃一次 o连续给药一个月 ∀用 ‘²µ·«¨µ± ¥¯²·方法检测骨骼肌组织中 Š˜×w
°• ‘„ 表达量 o• ¶¨·¨µ± ¥¯²·方法检测骨骼肌组织 Š˜×w蛋白表达 ∀结果 }‘Œ⁄⁄ 大鼠骨骼肌 Š˜×w °• ‘„表
达显著减少 o用山茱萸乙醇提取液治疗后 oŠ˜×w °• ‘„ 表达明显上调 ~Š˜×w蛋白的表达变化与其 °• ‘„ 表
达变化一致 ∀结论 }山茱萸通过促进 ‘Œ⁄⁄ 大鼠胰岛修复增生 o增加进食后胰岛素的分泌 o使骨骼肌等外周组织
Š˜×w °• ‘„和蛋白表达增加 o发挥快速转运葡萄糖的作用 ∀
≈关键词  山茱萸 ~非胰岛素依赖型糖尿病 ~葡萄糖转运体 w
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstltu2s{x|2sw
山茱萸为山茱萸科植物山茱萸 Χορνυσ οφφιχι2
ναλισ ≥¬¨¥q¨·∏¦¦的果实 ∀我们先前研究了山茱萸
对非胰岛素依赖性糖尿病k‘Œ⁄⁄ oµ型糖尿病l大
鼠的治疗作用 o结果表明 o山茱萸乙醇提取物能明显
改善 ‘Œ⁄⁄ 大鼠一般情况 o降低其进食后血糖水
平 o升高血浆胰岛素水平 o促进胰岛增生≈t  ∀但其降
糖作用的分子机制尚不清楚 ∀葡萄糖的跨膜转运是
糖代谢的限速步骤 o主要是通过葡萄糖转运体实现
的 o葡 萄 糖 转 运 体2w k Š¯ ∏¦²¶¨ ×µ¤±¶³²µ·¨µ w o
Š˜×wl主要分布在心脏 !骨骼肌 !脂肪等外周组
织 o其功能受胰岛素调控 o对进食后葡萄糖的跨膜转
运有重要意义 o其功能的异常是导致 µ型糖尿病主
要 原 因≈u ov  ∀对 ‘Œ⁄⁄ 大 鼠 骨 骼 肌 Š˜× w
≈收稿日期  usst2su2s{
°• ‘„表达变化及其与胰岛素分泌的关系本室曾有
研究报道≈w  o在此基础上本实验研究了山茱萸乙醇
提取液对 ‘Œ⁄⁄ 大鼠骨骼肌 Š˜×w °• ‘„ 和蛋
白表达的影响 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 药物 山茱萸用乙醇浸泡提取 o减压回收乙
醇后每克浸膏加 s qx °¯ t h ≤  ≤ 混悬备用 ∀
1 q1 q2 试剂 链脲佐菌素k¶·µ¨³·²½²·²¦¬±o≥םl o
≥¬ª°¤公司 ~限制性核酸内切酶 o华美生物工程公
司 ~随机引物标记试剂盒 o°µ²° ª¨¤公司 ~‹¼¥²±§2‘
n 尼龙膜 o„ ° µ¨¶«¤° 公司 ~×µ¬½²¯ oŠ¬¥¦² 公司 ~
≈Αvu° 2§≤ ×° o北京亚辉公司 ~含葡萄糖转运体 w
kŠ˜×wl¦⁄‘„质粒 o南通医学院分子生物学研究
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第 uy卷第 tu期
usst年 tu月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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