全 文 ：附表 结晶 ´的tv≤2 数据
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{ vv1x ≤ v ys1x
| v|1t ys1|
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v2l oy1xzkt o¶o{2l oy1|skt o¶ox2l oz1zy
kt o§o |½ow2l ∀ ≥ °r½}t|uk n l otzz
k n p ≤ vl otywk n p ≤ l otw|k n p ≤ v p
≤ l otux otut oz| oy| oxt oxs ∀光谱数据与文
献≈x 的东莨菪内酯基本一致 ∀
4 参考文献
t 江苏新医学院 q中药大辞典 q下册 q上海 }上海人民出版社 o
t|zz }twxu
u 刘恒志等 q中医药信息 ot||s ~zktl }us
v 翟宏斌等 q药学学报 ot||s ~uxkul }tts
w 刘嘉森等 q化学学报 ot|z| ~kvl }uu|
x 国家医药管理局中草药情报中心站 q植物药有效成分手
册 q北京 }人民卫生出版社 ot|{y }|y{
致谢 核磁共振谱及质谱由中国医学科学院药物
研究所和军事医学科学院测试中心代测 ∀
t||y ) s{ ) t|收稿
泰山赤灵芝肽多糖的化学研究
黎铁立 3 何云庆 李荣芷
k北京医科大学药学院 北京 tsss{vl
摘要 从泰山赤灵芝中分离得到 z个肽多糖 o对主要成分化学研究证明 × °2u 分子量 us1| ≅
tsw o为 Β2kt ψ vlkt ψ wl连接的甘露葡聚糖肽 o× °2v分子量 w1x ≅ tsw o为 Β2kt ψ vlkt ψ wlkt ψ yl甙键
连接的葡聚糖肽 o并有 Α2甙键存在 o× °2y分子量 v1u ≅ tsw o为 Β2kt ψ vlkt ψ wl甙键相连的葡聚糖肽 o
× °2z分子量 ts ≅ tsw o为 Β2kt ψ vlkt ψ wlkt ψ yl糖甙键的半乳聚糖肽 ∀
关键词 泰山赤灵芝 多糖 肽多糖
多糖及其复合物参于细胞的生命活动 o表
现了多方面生物活性 ∀我们从灵芝中分离鉴定
了多种多糖均一体 o经分子生物学 !免疫药理学
研究发现 o具有 Β2kt ψ vl oΒ2kt ψ yl甙键的多糖
体及肽多糖均表现了较强的生物活性≈t ou ∀
从泰山赤灵芝子实体中分离得到总多糖
× ° o药理研究证明具有增强正常小鼠和环磷
酰胺抑制小鼠的迟发性过敏反应k⁄× l和空斑
形成细胞k°ƒ≤l反应 ∀体外实验证明 o× °
对白细胞介素2uk2ul的产生及混合淋巴细胞
反应k l均有促进作用≈v ∀对 × °中的
大分子部位进行分离 o得到 z个多糖均一体 o证
明它们均为肽多糖 o主要成分为 × °2u o
× °2v o× °2y o× °2z o为探讨构效关系 o
对它们进行了化学研究 ∀
1 材料和仪器
泰山赤灵芝子实体购于山东泰安 o经中国
科学院微生物研究所赵继鼎教授鉴定为 Γαν2
οδερµ α λυχιδυ µ k • q≤∏µ·qƒµql ¤µ¶·∀
岛津2uys型紫外光谱仪 o° µ¨®¬±2∞¯ ° µ¨|{v
型红外光谱仪 o日立 {vx2xs 氨基酸自动分析
仪 o⁄≠2 • u 型 电 泳 仪 ∀ 标 准 ⁄¨ ¬·µ¤± 及
≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2xs o2tss 均为 °«¤µ°¤¦¬¤产品 o
⁄∞∞2≤¨¯ ∏¯¯²¶¨ 为
∏§¤³¨¶·∏±ª¤µ¼ 出品 o其
3 广东省妇幼保健院 广州 xtssts
#z{w# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 {期
它试剂及单糖标准品均为国产分析纯 ∀
2 实验部分
211 多糖的提取分离
泰山赤灵芝子实体粗粉 t®ªo热水提取 v
次 o提取液 ys ε 以下浓缩 o加乙醇至 xs h o滤取
沉淀 o乙醇 !丙酮洗涤 ∀沉淀物置透析袋中逆向
流水透析 w{«o≥ √¨¤ª法除游离蛋白 ts余次 o乙
醇沉淀 o得 × ∀取 t1xª× 经 ⁄∞∞2
≤¨¯ ∏¯¯²¶¨ k
wu p 型l柱层析 o水洗脱部分得
× °2t o× °2 u ~硼砂梯度洗脱部分得
× °2v ∗ × °2y ~s1t°²¯r氢氧化钠洗脱部
分得 × °2z ∀硼砂及氢氧化钠溶液洗脱部分
经透析 o≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2xs脱盐 o冰冻干燥 ∀
212 纯度和分子量测定≈w
≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2tss 柱层析kws¦° ≅ t¦°l o上
样 t°ªos1t h 氯化钠洗脱 o流速 s1x °¯ r°¬±∀
琼脂糖凝胶电泳kz1x¦° ≅ u1x¦° os1sux°²¯r
硼酸盐溶液 o电压 vss∂ o电流 ts ∗ tx° o电泳
t«os1t h阿利新蓝染色l测定纯度 ∀
凝胶过滤法测定分子量 }≥ ³¨«¤§¨ ¬ 2tss
柱kws¦° ≅ t1s¦°l o标准分子量 ⁄¨ ¬·µ¤±kw|1w
≅ tsw ouu1t ≅ tsw oz1| ≅ tsw ow1s ≅ tsw ot qs ≅
tsw及 s1|z ≅ tswl及蓝葡聚糖 o上样 t1s°ª∀
213 完全酸水解及水解产物检识
取均一体各 u°ªou°²¯r硫酸封管 otss ε
水解 {«o碳酸钡中和 o纸色谱检识 ∀系统 }≠ 正
丁醇2冰醋酸2乙醇2水kwΒtΒtΒul o 乙酸乙酯2
吡啶2乙醇2水kxΒuΒuΒtl ∀
214 过碘酸盐氧化及 ≥°¬·«降解反应
精密称取各均一体 ts°ªo加 s1sty{°²¯r
过碘酸钠溶液 tu1x °¯ o置 w ε 暗处每隔 uw«定
量测定过碘酸钠消耗量及甲酸生成量 ∀待反应
中止 o各加入 x °¯ 乙二醇 o摇荡 vs°¬±o透析
w{«o内容物加 xs°ª硼氢化钠 o避光放置 uw«o
醋酸调 ³x ∗ y o透析 o内容物蒸干 ou°²¯r硫
酸 tss ε 封管 o水解 y«o碳酸钡中和 o纸色谱检
识 o溶剂系统 正丁醇2乙醇2水kwΒtΒul o溴甲酚
紫显色 ∀
215 氨基酸组成定性定量分析
精密称取各均一体 t°ªo加稀盐酸封管 o内
充氮气 otss ε 水解 uw«o氨基酸自动分析仪测
定 k分析柱 u1y°° ≅ txs°° o缓冲液流速
s1uux °¯ r°¬±l ∀
3 结果与讨论
从泰山赤灵芝子实体热水提取物中分离得
到大分子总多糖 × o经 ⁄∞∞离子交换纤
维素色谱分离 o得到 z个多糖均一体 ∀经凝胶
色谱测定均呈对称洗脱峰 o琼脂糖凝胶电泳均
为 t 个蓝色斑点 ∀对主要均一体 × °2u o
× °2v o× °2y o× °2z进行了化学结构研
究 ∀
311 肽多糖 × °2u
分子量 us1| ≅ tsw o ¦°p t }{ts o{zs o{|s o
vwts otywu otvyz为 Β2甙键 !甘露糖及酰胺基的
特征峰 ∀完全酸水解检识糖组成主要为葡萄糖
及微量甘露糖 ∀过碘酸盐氧化反应需 tus«完
成 o无甲酸生成 o表明无kt ψyl或kt ψul甙键存
在 o≥°¬·«降解反应检出赤藓醇及葡萄糖 o无丙
三醇色点 o进一步证明这一结论 ∀肽链的氨基
酸组成k h l }甘氨酸ktz1vl o丝氨酸ktu1xl o谷
氨酸k|1yl o丙氨酸k|1ul o缬氨酸kz1{l o天门冬
氨酸kz1ul o苯丙氨酸ky1ul o异亮氨酸ky1tl o亮
氨酸ky1sl o苏氨酸kx1|l等 tw种氨基酸 o肽的
含量占总多糖肽的 {1| h o× °2u的化学结构
为含 Β2kt ψvlkt ψwl甙键的甘露葡聚糖肽 ∀
312 肽多糖 × °2v
分子量 w1x ≅ tsw o经红外光谱除多糖特征
峰外 o在 {|v o{xs o{vx¦°p t处有吸收峰 o表明有
Β2甙键及 Α2甙键存在 ~vwtz otywv otwt{ ¦°p t处
吸收峰为酰胺基特征峰 ∀过碘酸盐氧化反应需
tus«完成 o有甲酸生成 ∀ ≥°¬·«降解反应产物
检出葡萄糖 !丙三醇及赤藓醇 !说明糖甙键有kt
ψvl okt ψ yl及kt ψ wl连接方式存在 ∀完全酸
水解仅检出葡萄糖 o证明该多糖为葡聚糖 ∀多
肽部分的氨基酸分析检测结果k h l }苏氨酸
ktv1sl o丙氨酸ktv1sl o甘氨酸ktu1tl o丝氨酸
ktu1sl o缬氨酸ktt1wl o天门冬氨酸kts1ul o谷
氨酸kz1yl o脯氨酸kz1vl o异亮氨酸ky1yl o亮氨
酸ky1ul等 tw种氨基酸组成 o多肽占总肽多糖
的 w h o肽多糖 × °2v的化学结构为含kt ψvl
#{{w# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 {期
kt ψwlkt ψ yl甙键的葡聚糖肽 o甙键构型既有
Β2又有 Α2构型存在 ∀
313 肽多糖 × °2y
分子量 v1u ≅ tsw o ¦°p t }{|s ovwu| o
tyu| otvxy处吸收峰表明有 Β2甙键及酰胺基存
在 ∀过碘酸盐氧化反应 tus«完成 o无甲酸生
成 o说明不存在kt ψyl或kt ψul糖甙键 o进一步
≥°¬·«降解反应产物仅检出赤藓醇及葡萄糖 o
证明糖甙键为含kt ψwlkt ψvl甙键 ∀完全酸水
解的水解产物分析仅检出葡萄糖 o说明多糖类
型为葡聚糖 ∀肽链的氨基酸组成定性定量分析
结果k h l }甘氨酸ktu1tl o丙氨酸ktt1|l o丝氨
酸ktt1yl o苏氨酸ktt1tl o天门冬氨酸kts1|l o
谷氨酸k{1|l o缬氨酸k{1vl o异亮氨酸kx1|l等
tw种氨基酸组成 o肽含量占 v1z h ∀ × °2y的
化学结构为含 Β2kt ψ vlkt ψ wl甙键的葡聚糖
肽 ∀
314 肽多糖 × °2z
分子量 ts1s ≅ tsw o ¦°p t }{|s o{zx o
vv|y otysy otwtw 表明 Β2甙键及可能有半乳糖
基存在 o并有酰胺基吸收峰 ∀完全酸水解仅检
出半乳糖 o说明该肽多糖为半乳聚糖肽 ∀过碘
酸盐氧化 tus«完成并有甲酸生成 o说明半乳糖
基可能以kt ψ yl甙键连接 o≥°¬·«降解产物测
定既有赤藓醇 !丙三醇又有半乳糖存在 o说明半
乳糖基除kt ψyl甙键外 o尚有kt ψ wlkt ψ vl甙
键存在 ∀肽链的氨基酸定性定量分析结果
k h l }天门冬氨酸ktz1zl o甘氨酸ktu1{l o谷氨
酸ktu1wl o丙氨酸kts1xl o苏氨酸k{1wl o丝氨酸
k{1ul o缬氨酸kz1tl o亮氨酸kw1{l等 tx种氨基
酸组成 o肽含量占 x1x h ∀ × °2z的结构为含
Β2kt ψvlkt ψwlkt ψyl糖甙键的半乳聚糖肽 ∀
从泰山赤灵芝多糖的大分子部位中分离的
z个均一体 o它们的组成分析结果均为肽多糖 o
主要肽多糖的结构研究表明 o它们大部分都含
Β2kt ψvl及 Β2kt ψ yl甙键 o为说明泰山赤灵芝
多糖 × °有较强的免疫活性提供了依据 ∀
4 参考文献
t 林志彬 q北京医科大学学报 ot||u ~uwkwl }uzt
u 李荣芷等 q北京医科大学学报 ot||t ~uvkyl }wzv
v 何云庆等 q北京医科大学学报 ot||x ~uzktl }x{
w 方积年 q药物研究 ot|z| ~ux }uv
t||y ) sy ) t|收稿
草麻黄中麻黄和木贼麻黄挥发油
化学成分的 ≤2 ≥分析
吉力 徐植灵 潘炯光 杨健
k中国中医研究院中药研究所 北京 tsszssl
摘要 用气相色谱2质谱联用法分析了草麻黄 !中麻黄和木贼麻黄挥发油的化学成分 o并测定了各
成分的相对百分含量 ∀共鉴定了 tuz个化学成分 oλ2Α2松油醇kvt qyw h l !t ow2桉叶素ktu1{s h l和十六
烷酸kuy1uu h l分别是草麻黄 !中麻黄和木贼麻黄挥发油中的主要成分 ∀
关键词 草麻黄 中麻黄 木贼麻黄 挥发油 气相色谱2质谱联用
麻黄为麻黄科植物草麻黄 !中麻黄和木贼
麻黄的干燥草质茎 ∀性味辛 !微苦 o温 ∀有发汗
散寒 o平喘 o消肿等功效≈t ∀药理实验表明麻黄
挥发油有平喘 !祛谈 !抑菌 !抗病毒 !解热 !镇静 !
对蟾蜍心脏有抑制作用和对兔呼吸有先兴奋后
抑制等多种作用≈u ∗ x ∀从麻黄挥发油中分离出
3 国家自然科学基金资助课题 ²qv|uzs{ws
#|{w# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 {期