全 文 ：心肌肽素的分离组分及组分相加
对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用
杨联萍 o孔祥平 o李茹冰 o曾平鲁
k中国人民解放军第 wx{医院 传染病中心分子生物学科 o广东 广州 xtsysul
≈摘要  目的 }研究心肌肽素的分离组分及组分相加对阿霉素中毒大鼠心肌细胞的修复作用 ∀方法 }采用
 × × 比色法 o观察阿霉素中毒心肌细胞内线粒体琥珀酸脱氢酶的活力 ∀结果 }心肌肽素及 x个分离组分均显示了
促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 o其中 °t组分活力较强 ~各组分相加亦显示促进酶活力的作用 o但未见显示相加效
应 ∀结论 }心肌肽素对阿霉素所致心肌细胞损伤的促进修复作用 o系各组分所含物共同作用的结果 ∀
≈关键词  心肌肽素 ~阿霉素 ~细胞培养
≈中图分类号 • u{x2x ≈文献标识码 … ≈文章编号 tsst2xvsukusssl2sy2svyu2su
动物脏器是中药的重要组成部分≈t  ∀利用生化
技术提取脏器中有效成分 o应用于临床 o已有报
道≈u  ∀心肌肽素系从乳猪心室肌中提取的有机活性
混合物质 ∀本文研究了其组分及组分相加对阿霉素
损伤心肌细胞的修复作用 ∀现将结果报道如下 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料 心肌肽素溶液 }本所研制并应用 ‹°≤
技术将其分离纯化 o得到 x 个组分k°t o°u o°v o°w o
°xl ~⁄ ∞ 培养基k≥¬ª°¤l ~阿霉素 }华明医药有限
公司 ~胰蛋白酶 }tuxs ≥∞• ∂ „ ~u ov2二苯基溴化四唑
k  × ×l ~|y孔细胞培养板k≤²¶·¤µl ~≥⁄大鼠乳鼠k出
生 v天内l }购自中山医科大学实验动物中心 ~Ε |ys
酶标仪k台湾l ~≤ ’u孵育箱k‹Œ• „≥„ • „ oŠ°l ∀
1 q2 方法 取 ≥⁄乳鼠 o酒精消毒后活杀 o无菌分
离心脏 o去筋膜 !心房 !血管等 o将心室肌剪碎成 t
°°v以下的小块 o以 s qux h胰蛋白酶液 u °¯ 吹打均
匀 o静置 u °¬±o吸弃上清k内含红细胞和组织碎片l o
再加 s qux h胰蛋白酶液约 u °¯ ovz ε 消化 x ∗ ts
°¬±o静置 o取上清 o加入含 us h小牛血清 ⁄ ∞2us
培养基溶液中中止消化 o如此重复 o直到心肌组织块
消化完全 ot sss µ# °¬±p t ox °¬±离心 o沉淀洗涤 v
次 o弃上清液 o沉淀用 ⁄ ∞2us培养液稀释后置培
养瓶中 ovz ε x h ≤ ’u条件下培养 t qx ∗ u «o吸取悬
≈收稿日期  t|||2s{2ux
≈基金项目  /九五0国家重点科技攻关项目k|y o|su2st2swl
浮细胞调至细胞浓度为u ≅ tsx ∗ x ≅ tsx个r °¯ o
s qu h台盼蓝染色 o活细胞比率  |s h ∀
取细胞悬液接种于 |y孔细胞培养板内 otss Λ¯r
孔 ovz ε x h ≤ ’u条件下培养 w{ «o搏动细胞数应
 {x h ∀弃上清液 o实验分组 }ktl空白对照组 o心肌
细胞用 ⁄ ∞2us tss Λ¯r孔培养 ∀kul损伤对照组 o
阿霉素损伤组以 t Λª# °¯ p t阿霉素 tss Λ¯r孔损伤细
胞 o培养 t «后 o以 ⁄ ∞2us 洗板 u 次 o加入
⁄ ∞2us tss Λ¯r孔培养 ∀kvl实验组 o阿霉素损伤
t «后的心肌细胞 o以 ⁄ ∞2us洗板 u次 o分别加
入分离组分及组分相加的心肌肽素 tss Λ¯r孔 ∀上
述实验组继续培养x« o吸净培养液后每孔加入
s qtx °ª# °¯ p t  × × 溶液 tss Λ¯ o振荡器振荡 us
°¬±o以 Ε |ys酶标仪测定各孔 „ 值 o检测波长 xzs
±° o参考波长 yvs ±° ∀
2 结果
2 q1 心肌肽素各组分对阿霉素中毒心肌细胞酶活
力影响 表 t显示 x个组分均有促进琥珀酸脱氢酶
活力的作用 ∀其中 °t活力较强 ∀
2 q2 心肌肽素各组分相加对中毒心肌细胞酶活力
的影响 表 u显示各组分相加均对阿霉素中毒心肌
细胞有促进琥珀酸脱氢酶活力的作用 o且各实验组
间也未表现出酶活力的差异 ∀
3 讨论
阿霉素主要损伤心肌细胞的线粒体 o使心肌细
胞的有氧代谢能力下降和能量供应不足≈v  ∀  × ×
#uyv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ qux o‘²qy
∏±¨ ousss
表 t 心肌肽素各组分对中毒心肌细胞酶活力k„值l的影响
空白对照组 阿霉素组
心肌肽素rxΛª# °¯ p t
°t °u °v °w °x 心肌肽素
s qvww ? s qstw s quzu ? s qstx s qvt{ ? s qsswvtl s qu|x ? s qstutl s qvs| ? s qstutl s qvtz ? s qstztl s qvsv ? s qstwtl s qu|{ ? s qssxtl
注 }≠ ξ ? σ  ν € { ≈与阿霉素组比较 t) Π s qstk下表同l
表 u 心肌肽素各组分相加对中毒心肌细胞酶活力的影响
空白对照组 阿霉素组
心肌肽素rxΛª# °¯ p t
°t n °u °t n °v °t n °w °t n °x
„值 s qvvt ? s qstt s quyw ? s qstu s qu|x ? s qssyxtl s qu|t ? s qstttl s qu{| ? s qststl s qu|| ? s qstutl

心肌肽素rxΛª# °¯ p t
°u n °v °u n °w °u n °x °v n °w °v n °x °w n °x
„值 s qu{z ? s qsstttl s qu{{ ? s qstutl s qu{| ? s qss{ttl s qu{{ ? s qstutl s qu{x ? s qss|vtl s qu{z ? s qssywt
比色法主要原理在于检测细胞内线粒体琥珀酸脱氢
酶的活力 o在一定程度上反映了细胞的生存活力≈w  ∀
以往试验表明 o心肌肽素在 x ∗ tss Λª# °¯ p t浓度范
围内均有促进阿霉素损伤心肌细胞琥珀酸脱氢酶活
力作用 o从而加强氧化磷酸化过程 o使损害的心肌细
胞尽快得到修复 o其原因在于心肌肽调节酶活力作
用 o有个阈值 o高于此值 o可以促进酶活力 o与增加剂
量无直接关系 ∀为此我们对各组分的用量均选用 x
Λª# °¯ p t ox个组分都有活性 o表明组分中都有活性
多肽 ∀心肌肽素各组分相加亦显示促进修复作用 o
但未显示相加效应 ∀从而推测心肌肽素对阿霉素中
毒所致心肌细胞损伤的促进修复作用 o系各组分所
含物质共同作用的结果 ∀
≈参考文献 
≈t  邓明鲁 o常兆生 q中国东北长白山区域动物资源开发研究进展 q
长春中医学院学报 ot||x ottktl }xs1
≈u  周 霞 o谢 青 o严振宜 1 促肝细胞生长素治疗重型肝炎的临
床观察 1 临床肝胆病杂志 ot||x otk增刊l }z{ q
≈v  王 旭 o王宴平 o马海燕 1 维奥欣对阿霉素所致大鼠心肌线粒
体毒性的保护作用 1 中华心血管病杂志 ot||{ ouyktsl }vwx q
≈w  周建军 o乐秀芳 o韩家娴 q评价抗癌物质活性的改良  × × 方法 q
中国医药工业杂志 ot||v ouw }wxx q
≈x  中华人民共和国卫生部药政局 1 新药临床前研究指导原则汇
编k药学 !药理学 !毒理学l1t||v1zt q
Ρεχοϖερψ Εφφεχτ οφ Χαρδιοµ ψοπεπτιδιν Φραχτιονσ ανδ
Φραχτιον Αδδιτιον ον Χαρδιαχ Μυσχλε Χελλσιν Ρατσ ∆αµ αγεδ βψ Αδριαµ ψχιν
≠ „‘Š ¬¤±2³¬±ªoŽ’‘Š ÷¬¤±ª2³¬±ªoŒ • ∏2¥¬±ªo∞‘Š °¬±ª2¯ ∏
k⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²©  ²¯ ¦¨∏¯¤µ…¬²¯²ª¼ o·«¨ Œ±©¨ ¦·¬²∏¶⁄¬¶¨¤¶¨ ≤ ±¨·¨µo·«¨ wx{·« ‹²¶³¬·¤¯ ²© °„ o
Š∏¤±ª½«²∏ xtsysu o Š∏¤±ª§²±ªo≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨·«¨ µ¨¦²√ µ¨¼ ©¨©¨ ¦·²©¦¤µ§¬²°¼²³¨ ³·¬§¬± ©µ¤¦·¬²±¶¤±§©µ¤¦·¬²± ¤§§¬2
·¬²± ²±·«¨ ¦¤µ§¬¤¦°∏¶¦¯¨¦¨¯¯¶¬± µ¤·¶§¤°¤ª¨ §¥¼ ¤§µ¬¤°¼¦¬±qΜετηοδσ: ’¥¶¨µ√¬±ª·«¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²©·«¨ ¶∏¦¦¬±¬¦
§¨ «¼§µ²ª¨ ±¤¶¨ º«¬¦«¬¶¤·°¬·²¦«²±§µ¬²±¬±·«¨ ¦¨¯¯¶§¤°¤ª¨ §¥¼ ¤§µ¬¤°¼¦¬± º¬·«  × × qΡεσυλτσ:ƒ¬√¨©µ¤¦·¬²±¶
«¤√¨¤¯¯³µ²°²·¨§·«¨ ¤¦·¬√¤·¬±ª ©¨©¨ ¦·²©·«¨ ±¨½¼°¨o·«¨ ¤¦·¬²± ²©°t ¥¨¬±ª«¬ª«¨µ·«¤±·«¨ ²·«¨µ¶qƒµ¤¦·¬²±¤§2
§¬·¬²± «¤¶¤¯¶²³µ²°²·¨§·«¨ ¤¦·¬√¤·¬±ª ©¨©¨ ¦·²©·«¨ ±¨½¼°¨o¥∏·º«¬·«²∏·¤§§¬·¬√¨ ©¨©¨ ¦·qΧονχλυσιον :׫¨ µ¨¦²√2
µ¨¼ ©¨©¨ ¦·²©¦¤µ§¬°¼²³¨ ³·¬§¬± §¨ ³¨ ±§¶²±·«¨ ¬±·¨µ³¯¤¼ ¤°²±ª·«¨ ©µ¤¦·¬²±¶q
[ Κεψ ωορδσ] ¦¤µ§¬²°¼²³¨ ³·¬§¬±~¤§µ¬¤°¼¦¬±~¦¨¯¯ ¦∏¯·∏µ¨
≈责任编辑 方文贤 
#vyv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤  §¨¬¦¤
∂ ²¯ qux o‘²qy
∏±¨ ousss