全 文 ：正交设计研究甘草蜜制工艺
席先蓉t o陈 庆u
kt q贵阳中医学院 药学系 o贵州 贵阳 xxsssu ~u q贵州宏宇药业有限公司 o贵州 贵阳 xxssswl
≈摘要 目的 }考察甘草蜜制的几个影响因素 }加蜜量k Α) ,烘制温度( Β) ,烘制时间( Χl ∀方法 }用正交试验
设计 |kvwl安排试验 o分别测定了各炮制品中的甘草次酸和黄酮类化合物的含量 o并采用综合评分法对测定结果
进行分析 ∀结果 }影响甘草炮制的主次因素是 Β Α Χo蜜制甘草的最佳工艺是 Αu Βv Χu o即加入 ux h的蜂蜜 o闷
润透心后 o在 ys ε 烘 ys °¬±∀结论 }优选得到的工艺简单可行 ∀
≈关键词 甘草 ~甘草次酸 ~黄酮类化合物 ~蜜制工艺 ~正交试验设计
≈中图分类号 u{v qv ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsz2swys2sv
甘草为一味重要的传统中药 o具有清热解毒 o
补气益脾胃 o润肺祛痰 o缓急止痛 o调和诸药的作用 ∀
甘草的炮制方法 o古代有多种 o现代临床主要使用生
甘草片和蜜甘草片 ∀对甘草的蜜制已有了很多的研
究 o但多以甘草酸作检测指标 ∀
甘草次酸和黄酮类化合物亦为甘草中重要活性
成分 o它们分别具有多种药理作用≈t ∀
蜜制甘草的方法 o5中国药典6t||x年版虽有规
定 o但各地差异较大 o炮制过程中影响质量的因素较
多 ∀
为此 o以甘草中甘草次酸和黄酮类化合物为检
测指标 o选择蜂蜜用量 o烘制温度 o烘制时间 v个主
要影响因素 o选用 |kvwl表安排各因素水平进行试
验 o探讨甘草的最佳蜜制工艺 ∀
1 仪器 !试剂与药材
zxu2紫外光栅分光光度计k上海第三分析仪器
厂l o电热恒温鼓风干燥箱k上海跃进医疗器械厂l ∀
甘草购自贵阳中医学院第一附属医院 o经本院
生药教研室董立莎副教授鉴定为甘草 Γλψχψρρηιζα
υραλενσισ ƒ¬¶¦«q的干燥根及根茎 ∀
甘草次酸 o芦丁对照品k中国药品生物制品检定
所l o硅胶 ƒuxwk中国青岛海洋化工集团公司l o其余
试剂均为分析纯 ∀
2 实验方法与结果
2 q1 试验设计
用 |kvwl正交表安排试验 o因素水平见表 t ∀
≈收稿日期 usss2tt2tx
表 t 蜜制甘草因素水平表
水平
Α
加蜜量
r h
Β
烘制温度
r ε
Χ
烘制时间
r°¬±
t ws tus |s
u ux |s ys
v ts ys vs
2 q2 甘草的炮制
生甘草选净除杂后 o精密等量称取各约 xs ª共
|份 o按 |kvwl正交表安排的 |种工艺 o加入相应量
的炼蜜 o闷润透心后 o单层铺于搪瓷盘中 o依照条件
分别烘制 o取出 o晾凉 ∀再精密称取各蜜制品重量 o
计算各炮制品得率 ∀
2 q3 甘草次酸含量测定
2 q3 q1 标准曲线的制备
精密吸取 t °ª# °¯ p t甘草次酸2无水乙醇对照
液 ws oys o{s otss otus otws Λ¯ 条状点于硅胶 ƒuxw薄
层板上 o用石油醚2苯2乙酸乙酯2冰醋酸ktsΒusΒzΒ
s qxl≈u 上行展开 tw ¦°左右 o取出 o挥干溶剂后 o于
紫外灯kuxw ±°l下观察 o确定斑点位置 ∀刮于 ts °¯
具塞离心管中 o用无水乙醇定量洗脱 o随行空白 o于
ux{ ±°处测定吸收度 ∀以浓度 Χ对相应吸收度 Α
作一元线性回归方程 Α s .ssttwv n s .ssvwwv Χ,
ρ s q||xu ∀
2 q3 q2 供试液制备
甘草生品和各炮制品磨成粗粉 o各精密称取 u
ªo置于索氏提取器中 o加入 xs °¯ 氯仿和 v °¯ 盐酸 o
水浴回流定量提尽甘草次酸ku «r次 o共 u次l ∀合
并提取液 o水浴浓缩至干 o无水乙醇溶解 o定量转移
#syw#
第 uy卷第 z期
usst年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qz
∏¯ qousst
至 ts °¯ 容量瓶中 o并用无水乙醇稀释至刻度 ∀
2 q3 q3 稳定性实验
吸取甘草次酸对照液适量 o点于硅胶薄层板上 o
照 2 q3 q1 方法展开 o洗脱后 o每隔 s qx «测 t次吸收
度 ∀结果表明 o吸收度值至少在 w «内基本不变 ∀
测定可控制在洗脱后的 w «内进行 ∀
2 q3 q4 含量测定
分别精密吸取各供试液适量 o条状点于硅胶薄
层板上 o甘草次酸对照液点于样品条斑一侧 o作为对
照 ∀按 2 q3 q1 项下方法展开 o紫外灯下刮取于对照
品相同位置处的条斑 o再照 2 q3 q1 方法操作 o测定吸
收度 o代入回归方程计算浓度 Χo求出百分含量 o并
将其折算成生品中含量 ∀测定结果见表 u ∀
2 q3 q5 回收率试验
精取已准确测定含量的甘草样品供试液 v份 o
加入一定量的甘草次酸对照液 o混匀 ∀照 2 q3 q1 项
下方法操作 o计算回收率为 |{ q|z h oΡΣ∆ t .uv%
( ν vl ∀
2 q4 黄酮类化合物含量测定
2 q4 q1 样品溶液制备
精密称取甘草生品及各炮制品粗粉约 u qx ªo置
索氏提取器中 o用 {s h乙醇提尽黄酮k约 w «l o将提
取液用 {s h乙醇定容至 tss °¯ 备用 ∀
2 q4 q2 含量测定≈v
参照文献方法 o以芦丁为对照品 ox h ¤u2
ts h k¯vlv2t qs °²¯ #pt ¤ 溶液系统显色 o
于波长xts±°处测定吸收度 ∀芦丁吸收度 Α在
s qsu ∗ s qt °ª# °¯ p t与浓度 Χ线性关系良好 ,其回
归方程为 Α s .sut|s n u .tx| Χ , ρ s .|||{
( ν yl o各样品含量测定结果k已折算成生品含量l
见表 u ∀回收率实验结果为 |z q{u h o ΡΣ∆ t .|zx
( ν vl ∀
2 q5 最佳炮制工艺优选
试验中采用指标多于 t o为尽量客观反映各个
因素之间的关系及因素水平对炮制甘草质量的影
响 o拟采用综合评分法 ∀
2 q5 q1 评分标准
各炮制品的外观性状 }不粘手t qs分 o略粘手
s q{分 o粘手 s qx分 ~深黄色 t qs分 o黄色 s q{分 o棕
黄色 s qy分 ∀甘草次酸 }k各样品含量 Α|个样品中
最高含量l ≅ w ~黄酮类化合物 }k各样品含量 Α |个
样品中最高含量l ≅ v ∀综合评分结果见表 u ∀
表 u 正交试验筛选甘草蜜制工艺测定结果
试验号
指标
甘草次酸
r h
黄酮类化合物
r h
综合评分
t s qv{sy s qzzs{ w qysv
u s qx|v| t qs||{ y qvtv
v s qzu{| t qxu{t z qtv{
w s qyu{y t qtutu y qxsx
x s q{{|y t qst{{ z qzsz
y s q{sty t qtzux z qxy|
z s qu|ww t qusvx x qvwt
{ s qu{tv t qxy{t x q{|v
| s qyzvu t qz|sv { qsuz
注 }ν v
2 q5 q2 以综合评分的结果作单指标直观分析及方
差分析 结果见表 v ∀
表 v 方差分析表
方差来源 离差平方和 自由度 方差 Φ值 显著性
Α u qwtt u u qwttru ts q|y Π s qts
Β y qysz u y qyszru vs qsv Π s qsx
Χ t qwsz u t qwszru y qws
误差 s quus u s quusru
总和 ts qywx {
注 }Φs .ts(u ,u) | .ss Φs qsxku oul t| qss
因素显著性 }Β Α Χ,最佳工艺 : Αu Βv Χu
2 q6 验证实验
根据筛选得到的最佳工艺 Αu Βv Χu炮制 v批样
品 ∀分别测定甘草次酸和黄酮类化合物的含量 ∀按
最佳工艺炮制的甘草均匀 !深黄色且不粘手 ~甘草
次酸含量为ks q{vx{ ? s qsttwl h oΡΣ∆ t qvy h ~
黄酮类化合物含量为kt qxty| ? s qstzxl h o ΡΣ∆
t qtx h ∀
3 小结与讨论
3 q1 用综合评分的方法将 v个指标转化为单指标2
分数后所作的方差分析结果显示 o对蜜制甘草的质
量具有显著影响的因素是 Β( Π s .sx) ,即烘制温
度 ,而影响因素主次是 Β Α Χ∀直观分析的结
果显示蜜制甘草的最佳工艺是 Αu Βv Χu ∀
3 q2 曾分别以甘草次酸及黄酮类化合物含量作单
指标直观分析 o得到的最佳工艺不尽相同 o分别为
Αu Βv Χv及 Αv Βv Χu ∀这当然是由于甘草次酸和黄
酮是两类不同物质 o化学性质有差异 o因此 o炮制时
#tyw#
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中 国 中 药 杂 志
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∂ ²¯ quy o²qz
∏¯ qousst
即使是相同的条件 o也可能对它们产生不同的影响 ∀
但由综合评分的方差分析显示 o在 v个因素中 o只有
因素对炮制甘草的质量有显著影响k Θ s qsxl o
而分别以两者含量为指标得到的最佳工艺皆有 Βv o
因此 o可认为分别以甘草次酸 o黄酮类化合物含量为
指标得到的最佳工艺与综合评分得到的最佳工艺并
无显著差别 ∀但由于综合评分兼顾了炮制品的外观
颜色及甘草次酸 !黄酮类化合物的含量 v个方面 o故
最佳工艺仍以 Αu Βv Χu为好 ∀
3 q3 在最佳工艺条件 Αu Βv Χu 下进行验证实验 ∀
按此工艺炮制的甘草外观呈均匀的深黄色 o不粘手 o
甘草次酸 o黄酮类化合物的平均含量分别是
s q{vx{ h和 t qxty| h o综合评分 { qvss o高于 |个样
品中最高分 { qsuz ∀验证实验证明了该工艺简单 o
可行 ∀因此 o在本实验条件下 o筛选得到的最佳蜜制
工艺为 }加入药材重量 ux h的炼蜜 o闷润透心后在
ys ε 下烘 ys °¬±∀
≈参考文献
≈t 郑虎占 o董泽宏 o佘 靖 q中药现代研究与应用 q第二卷 q北京 }
学苑出版社 ot||z qtuzt q
≈u 杨建江 o韩桂如 o冯 丽 o等 q薄层扫描法测定甘草次酸的含量 q
中国中药杂志 ot||u otykwl }uvu q
≈v 孙秀梅 o黄树明 o王英姿 q甘草 ≥
∞法与 • ∞法的成分比较 q中
国中药杂志 ot||z ouwk|l }xwu q
≈责任编辑 刘
补肾益精方水提物和醇提物
化学指标及药效的比较研究
史万忠t o徐德生u o沈培芝t o石印玉t
kt q上海市中医药研究院 骨伤科研究所 o上海 usssvu ~
u q上海中医药大学 附属曙光医院 o上海 usssutl
≈摘要 目的 }评价中药补肾益精方水提物和醇提物对化学成分指标含量以及对绝经后骨质疏松症大鼠模型
骨矿密度的影响 o考察化学成分指标与药效的相关性 o探讨复方有效组分 ∀方法 }分别采用水提和醇提工艺制备补
肾益精方的提取物 o用 °≤ 法测定淫羊藿苷和柚皮苷含量 o并观察两种提取物预防性给药对切除卵巢诱导的绝
经后骨质疏松症大鼠模型的作用 ∀结果 }水提物和醇提物均具有抗骨质疏松作用 o且水提物的作用略强于醇提物 o
而水提物中的淫羊藿苷和柚皮苷的含量低于醇提物 o淫羊藿苷和柚皮苷的含量与复方抗骨质疏松作用非正性相
关 ∀结论 }补肾益精方以水提为佳 o复方中水溶性成分和醇溶性成分都具有抗骨质疏松的作用 o复方的提取工艺筛
选以药效为指标较妥 ∀
≈关键词 补肾益精方 ~提取工艺 ~骨质疏松症 ~骨矿密度 ~高效液相色谱法
≈中图分类号 u{v qysv ~ u{v qysx ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstlsz2sv|w2swyu2sw
中药补肾益精方k密骨胶囊l系上海中医药大学
附属曙光医院医院制剂 o经临床试验和实验研究证
明具有独特的防治原发性骨质疏松症的作用≈t ou o
它是由制何首乌 !淫羊藿 !骨碎补等 z味中药组成的
中药复方制剂 o长期以来以水煎提取制备 ∀从目前
天然抗骨质疏松症药物的研究进展来看 o认为植物
雌激素≈v 是最有研究价值的抗骨质疏松天然药物中
≈收稿日期 usss2sv2ut
≈基金项目 国家/九五0攻关资助项目k|y2|sy2s|2sxl
的活性成分 o已发现的植物雌激素的化学结构有黄
酮k异黄酮l类 !二苯乙烯类 !三萜和甾醇等 ∀补肾益
精方中含有较多的黄酮类成分及二苯乙烯类成分 o
这些成分无论是以苷或以苷元存在 o都能在中等浓
度的乙醇中有较好提取 ∀复方中淫羊藿和骨碎补的
抗骨质疏松作用已较为肯定≈w ox o因此选用这两味
药中的黄酮成分淫羊藿苷和柚皮苷为指标 ∀结合经
典的切除卵巢诱导的绝经后骨质疏松症大鼠动物模
型实验 o对水提和醇提工艺制备的提取物进行比较 ∀
考察化学成分指标与药效的相关性 o探讨复方有效
#uyw#
第 uy卷第 z期
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中 国 中 药 杂 志
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