全 文 ：丹皮酚对脂质过氧化反应及
低密度脂蛋白氧化修饰的抑制作用
戴 敏 o刘青云 o顾承刚 o张海燕
k安徽中医学院 o安徽 合肥 uvssv{l
≈摘要  目的 }观察丹皮酚k以下简称 °¤¨ l对脂质过氧化反应及低密度脂蛋白k⁄l氧化修饰的抑制作用 ∀
方法 }采用含胆固醇高脂膳食喂养大鼠 y周形成高脂血症模型 o硫代巴比妥酸kׅ„l比色法和酶标多克隆抗体夹
心法分别测定丙二醛k  ⁄„l和氧化低密度脂蛋白k²¬2⁄l o改良沉淀法分离健康人血清 ⁄∀结果 }°¤¨ kvss o
txs °ª#®ªp tl可明显抑制高脂大鼠血清 !主动脉及肝脏脂质过氧化反应 ~°¤¨ kvss °ªq®ªp tl显著减少高脂大鼠血
浆 ⁄的氧化修饰 ~°¤¨ kt sss ouss ows Λªq°¯ p tl对健康人血清 ⁄的体外氧化反应有极显著抑制效应 ∀结论 }
°¤¨ 降低高脂血症大鼠  ⁄„及 ²¬2⁄水平 o抑制健康人血清 ⁄的体外氧化修饰反应 ∀
≈关键词  丹皮酚 ~脂质 ~低密度脂蛋白 ~氧化作用
≈中图分类号 • u{x qx ≈文献标识码 … ≈文章编号 tsst2xvsukussslts2syux2sv
近期研究资料≈t 表明 }动脉粥样硬化k„≥l患者
脂质过氧化反应增强 o血浆脂质过氧化物含量的增
加与血浆胆固醇和甘油三酯含量的升高呈正相关 ~
低密度脂蛋白k⁄l通过氧化修饰而损伤血管内皮
致 „≥ o已为目前研究该疾病热点 ∀丹皮酚k°¤¨ l作
为中药牡丹皮的主要活性成分列入5中华人民共和
国药典6 o其药理活性广泛 o抗 „≥作用已被证实≈u  o
本实验通过观察 °¤¨ 抗脂质过氧化作用及对 ⁄
的氧化修饰反应的抑制 o进一步探讨其防治 „≥ 作
用机理 ∀
1 材料和方法
111 动物分组与模型的建立 健康雄性 • ¬¶·¤µ种
大鼠 o体重ktss ? tsl ªo随机分为正常对照组 !高脂
模型对照组和 °¤¨ 大 !小剂量组 o每组 y只 ∀正常对
照组灌胃生理盐水 ~高脂模型组灌胃按文献≈v 方法
制备的含 ts h胆固醇 !us h猪油 !u h胆酸钠 !t h丙
基硫氧嘧啶的高脂乳剂 ~°¤¨ 大 !小剂量组分别灌胃
含 °¤¨ k安徽铜陵第二制药厂提供 ovss otxs °ª#
®ªp tl的高脂乳剂 o每天 t次 ot °¯ #tssªp t o在给药第
z天除正常对照组外 o各大鼠静脉注射小牛血清白
蛋白 uxs °ª#®ªp t ∀每周称体重 t次 o按体重变化
调整药量 o实验全程 y周 ∀于第 y 周末禁食k不禁
水ltu «o未次给药后 t «测定以下各项指标 ∀
≈收稿日期  t|||2tu2sz
112 血清 !主动脉及肝脏丙二醛k  ⁄„l含量测定
采用硫代巴比妥酸kׅ„l比色法 ∀取大鼠血清
vss Λ¯ 加 us ª#§¯ p t三氯乙酸 u1x °¯ 混匀 o再加入
s1yz ª#§¯ p t ׅ„t1s °¯ 混匀 o沸水浴 vs °¬±o流水冷
却至室温 o离心kv sss µ# °¬±p t ots °¬±l后 o取上清
液在 zut分光光度计 xvx ±°波长处测吸光度 o计算
 ⁄„含量 o以其代表脂质过氧化反应程度 ∀另取大
鼠相同部位主动脉 xs °ª!肝脏 t ªo以生理盐水制
成 ts h匀浆 o离心kv xss µ#°¬±p t ots °¬±l后取上清
液 vssΛ¯ 同上法测  ⁄„含量 ∀
113 血浆氧化低密度脂蛋白k²¬2⁄l含量测定
取大鼠血浆按 ²¬2⁄∞Œ≥„ 测定试剂盒k上海荣
盛生物试剂厂提供l说明书 o采用酶标多克隆抗体夹
心法 o在酶联免疫检测仪k南京华东电子管厂生产l
上测定 ∀
114 健康人血清 ⁄体外氧化物测定 取健康人
血清 x °¯ o按改良沉淀法≈w 分离 ⁄o获得 ⁄应
用液 o实验分为 x组 }空白组 o模型组 o°¤¨ 高 !中 !低
浓度组 o每组取 y支试管 o空白组与模型组分别加磷
酸缓冲液k°…≥l t °¯ 于试管中 o用药组分别加入不
同浓度 °¤¨ 溶液kt sss ouss ows Λ¯ # °¯ p tl t °¯ ∀除
空白组再加入等容量 °…≥外 o其余各试管均加 s1u
°¯ 硫酸铜溶液进行 ⁄的氧化 ovz ε 孵育 v «o再
加 s1t °¯ ∞⁄× „2‘¤u 终止反应 ∀取各反应混悬液
s1y °¯ 按 ׅ„比色法测定 ⁄体外氧化反应产物
#xuy#
第 ux卷第 ts期
usss年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qts
’¦·qousss
 ⁄„含量可反映 ⁄的氧化程度 ∀
115 病理学检查 各大鼠主动脉弓至髂动脉分叉
处离断取出 o剥离外膜附着组织 o纵向剖开 o肉眼观
察 o苏丹 ¶染色后光镜检查 ∀
2 实验结果
211 对高脂血症大鼠血清 !主动脉及肝脏脂质过氧
化反应的影响 如表 t所示 o与正常对照组比较 o模
型组大鼠血清 !主动脉及肝脏  ⁄„ 含量明显升高 o
°¤¨ 大 !小剂量组血清及主动脉  ⁄„ !大剂量组肝
脏  ⁄„均较模型组显著降低 o表明 °¤¨ 对脂质过氧
化反应有明显抑制作用 ∀
表 t °¤¨ 对高脂血症大鼠血清 !主动脉及肝脏  ⁄„含量的影响
组别
剂量
r°ª#®ªp t
 ⁄„含量r±°²¯# °¯ p t
血清 主动脉 肝脏
正常对照组 w1tx ? u1tu v1sy ? u1|{ x1{z ? t1uy
高脂模型组 z1xz ? t1wzul y1wx ? u1svtl z1|w ? t1zstl
°¤¨ 组 vss w1xu ? t1ytwl w1ts ? t1xyvl y1sw ? t1syvl
txs w1wv ? u1zyvl w1uv ? t1uuvl y1ux ? u1tv
注 }≠ ξ ? σ  ν € y ≈与正常组比 t) Π s1sx u) Π s1st …与模型组比 v) Π s1sx w) Π s1stk下同l
212 对高脂血症大鼠血浆 ²¬2⁄氧化修饰的影响
如表 u所示 o模型组大鼠血浆 ²¬2⁄含量较正常
组显著升高 o°¤¨ 大剂量组则可明显降低高脂血症大
鼠血浆 ²¬2⁄o显示出对 ⁄体内氧化修饰过程
的抑制效应 ∀
表 u °¤¨ 对高脂血症大鼠 ²¬2⁄含量的影响
组别 剂量r°ª#®ªp t ²¬2⁄含量rΛª#§¯ p t
正常对照组 ut1uu ? tt1|z
高脂模型组 ws1xu ? tu1sutl
°¤¨ 组 vss uw1yz ? tu1tvvl
txs u|1ut ? ut1us
213 对健康人血清 ⁄的体外氧化反应的影响
如表 v所示 o健康人血清 ⁄在体外对 ≤∏u n诱导的
氧化反应k模型组l明显 o氧化产物  ⁄„含量显著升
高 ~°¤¨ v种浓度对此氧化过程呈非常显著性抑制 o
说明 °¤¨ 体外可直接作用于 ⁄的氧化反应过程 ∀
表 v °¤¨ 对健康人血清 ⁄氧化反应的影响
组别
浓度
rΛª# °¯ p t
⁄体外氧化产物  ⁄„含量
r±°²¯# °¯ p t
空白组 s1t| ? s1tw
模型组 t1ux ? s1tuul
°¤¨ tsss s1w| ? s1tuwl
uss s1ys ? s1tvwl
ws s1xz ? s1uswl
214 病理形态学观察 肉眼观察可见 }正常组大鼠
主动脉内膜光滑 !平整 !有光泽 ~模型组大鼠动脉壁
部分粗糙 o有散在点状病变 ~°¤¨ 组各大鼠主动脉壁
较平整 o个别光泽度稍差 ∀光镜下观察 }正常组大鼠
动脉内膜较薄 o结构完整 o中膜平滑肌排列规则整
齐 o内皮下无脂质沉积或斑块形成 ~模型组大鼠可见
主动脉内膜增厚 !隆起 o内皮细胞部分脱落 o内皮下
间隙增宽 o有泡沫细胞 o平滑肌细胞k≥  ≤l穿过内弹
力膜窗孔迁移入内皮下 o中膜明显增厚 o≥  ≤ 增生
并排列紊乱而垂直于内膜生长 o向内膜迁移 o细胞形
态改变 o细胞增大似纤维母细胞 o°¤¨ 组内膜较薄 o未
见隆起 o内皮细胞基本完好 o未见脱落 o内皮下间隙
未见明显增宽 o未见 ≥  ≤ 迁移至其中 o中膜无明显
增厚 o≥  ≤ 增生不明显 o细胞数目接近正常 o排列规
则 o部分细胞形态改变似纤维母细胞 ∀以上结果提
示 }以高脂乳剂喂养大鼠 y周已形成早期 „≥病变 o
°¤¨ 可延缓或抑制该病变的发生和发展 ∀
3 讨论
许多研究资料≈x 指出 o高脂血症与血浆脂质过
氧化物含量密切相关 o而脂质过氧化又是细胞损伤
的重要环节 ∀高脂血症时 o脂质过氧化反应增强 o产
生大量脂质过氧化物是损伤生物膜双层结构的表
现 o血管壁遭受刺激和损伤 o内膜屏障作用减弱 !血
脂浸润 o前列环素产量减少 o血小板聚集释放生长因
子 o平滑肌细胞迁移增生形成泡沫细胞 !变性坏死构
成 „≥病变 ∀
高脂血症患者由于脂质过氧化反应增强 o尤其
动脉壁内皮细胞 !平滑肌细胞和单核细胞对 ⁄的
氧化修饰 o而被氧化 ⁄可导致单核细胞进入血管
壁转化为巨噬细胞留滞于血管壁内 o后者通过清道
夫受体大量吞噬 ²¬2⁄形成泡沫细胞并积存于内
膜 ∀同时 ²¬2⁄具有高度细胞毒性 o破坏内皮细胞
#yuy#
第 ux卷第 ts期
usss年 ts月
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∂ ²¯ qux o‘²qts
’¦·qousss
而加速血小板粘附和聚集 o并释放生长因子 o促使纤
维母细胞及组织增生 o加速 „≥的发展 ∀因此 o清除
氧自由基 !减轻脂质过氧化反应及 ⁄的氧化修饰
亦成为防治 „≥的重要方面 ∀已有实验表明 o°¤¨ 对
ƒ ±¨·²±反应生成的#’ ‹ 有明显清除作用 o其清除活
性高于#’ ‹ 特异性清除剂甘露醇≈y  ~在 ’ pu 鲁米诺
发光体系中加入 °¤¨ o则其发光强度显著降低≈z  o提
示 °¤¨ 对氧自由基有直接清除作用 ∀以 °¤¨ 的化学
结构分析 o因其含有酚性羟基 o易与氧原子不成对的
单电子相互作用氧化形成醌类物质 o使自由基能量
下降 o因而有效地保护细胞膜和线粒体膜中不饱和
脂肪酸的过氧化 o维持膜完整性和功能 ∀本实验结
果显示 }°¤¨ 可减轻高脂血症大鼠血清 !主动脉及肝
脏脂质过氧化反应 o降低血浆 ²¬2⁄生成量 o抑制
⁄的体外氧化反应 o从而保护血管内皮细胞 o是其
抗 „≥的重要环节之一 ∀
病理观察可见 °¤¨ 组大鼠主动脉病变程度明显
减轻 o可能是 °¤¨ 通过调理血脂 o改善血液流变学≈u 
及抗氧化等多条途径共同作用的结果 ∀
≈参考文献 
≈t  陈 瑗 o周 玫 q脂质过氧化作用与动脉粥样硬化 q生物化学与生
物物理进展 ot|{| otykwl }uz{ q
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性与动脉粥样硬化的关系 q中国病理生理杂志 ot||v o|kvl }v|t q
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药学杂志 ot||y ottktl }vs q
≈z  孟 中 o张之南 q中药有效成分抗氧化作用的实验研究 q中国药理
学通报 ot||u o{kxl }vuy q
Ινηιβιτορψ Εφφεχτ οφ Παεονολ ον Λιπιδ Περοξιδατιοναλ Ρεαχτιον
ανδ Οξιδατιοναλ ∆εχορατε οφ Λοω ∆ενσιτψ Λιποπροτειν
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⁄²© ³¯¤¶°¤~°¤¨ kt sss ouss ows Λª# °¯ p tlµ¨©µ¤¬±¨ § °¤µ®¤§¯¼ ·«¨ ¦²∏µ¶¨ ²©²¬¬§¤·¬²±¤¯ §¨¦²µ¤·¨ ²© ⁄²©
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≈责任编辑 方文贤 
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