全 文 ：连糖 ∀比较 ∏中糖与 Α2 Λ2鼠李糖 !Β2 ∆2木糖的碳信
号 o可见 ∏中木糖的 ≤2uχ信号向低场移动 v qz o其它
位糖信号的化学位移值变化不明显 o由此推断 ≤2uχ
位连糖 ∀综上所述 o推定为齐墩果酸2v2 Ο2Α2 Λ2吡喃
鼠李糖2kt ψul2Β2 ∆2吡喃木糖苷≈v2Α2 Λ2µ«¤°±²³¼µ¤2
±²¶¼¯2kt ψul2Β2 ∆2¬¼¯ ²³¼µ¤±²¶¼¯2²¯ ¤¨±²¯¬¦¤¦¬§  ∀
致谢 化合物鉴定得到北京医科大学药学院赵玉英教
授的指导 ∀
参考文献
≈t  吉林省中医中药研究所 1 长白山植物志 1 长春 }吉林人民出版
社 ot|{s qtsy||
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≈v  陈德昌 1 碳谱及其在中草药中的应用 1 北京 }人民出版社 o
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Στυδιεσ ον τηε Χηεµιχαλ Χονστιτυεντσ οφ Πατρινια σχαβιασαεφολια Φισχη .
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Αβστραχτ Οβϕεχτιϖε:ײ¶·∏§¼·«¨ ¦«¨ °¬¦¤¯ ¦²°³²¶¬·¬²±¶²©·«¨ µ²²·¤±§¶·¨° ²© Πατρινια σχαβιασαεφολιαq
Μετηοδ :ƒ¬√¨¦²°³²∏±§¶º µ¨¨ ²¥·¤¬±¨ §©µ²° ·«¨ ·¨«¼ ¤¦¨·¤·¨ ¬¨·µ¤¦·²©·«¨ µ²²·¤±§¶·¨° ²© Π. σχαβιασαεφολια
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Κεψ ωορδσ Πατρινια σχαβιοσαεφολια ~¶¤³²±¬±~¶¬¯¬¦¤¦²¯∏°± ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼
≈责任编辑 徐美珍 
灵芝多糖对小鼠巨噬细胞¦„  °含量的影响
李明春t o梁东升t o许自明t o雷林生u o杨淑琴u
kt q青岛海军 wst医院 药剂科 o山东 青岛 uyyszt ~
u q第一军医大学 药理教研室 o广东 广州 xtsxtxl
摘要 目的 }研究灵芝多糖kŠ…zl对小鼠巨噬细胞k  yl内 ¦„  °含量的影响 o为其免疫增强作用机制提供
依据 ∀方法 }采用细胞培养和竞争性蛋白结合分析法测定小鼠腹腔  y 中 ¦„  °含量 ∀结果 }Š…z 能剂量依赖性
引起小鼠腹腔  y 中 ¦„  °浓度快速升高 ox °¬±达峰值 o之后缓慢下降 o至 vs °¬±时基本恢复原来水平 ∀结论 }
Š…z引起小鼠  y¦„  °浓度快速升高 o可能与其增强小鼠免疫功能有关 ∀
关键词 灵芝多糖 ~¦„  ° ~巨噬细胞
灵芝多糖被公认为是灵芝的主要活性成分 ∀zs
收稿日期 }t||{2tu2sz
基金项目 }国家自然科学基金资助项目kv|wsstyxl
年代日本学者率先报道灵芝多糖具有抗肿瘤作
用≈t  o国内学者研究灵芝/扶正固本0的作用机制时 o
发现灵芝多糖具有免疫增强作用 o认为灵芝多糖的
抗肿瘤作用是通过提高动物的免疫功能而介导
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第 ux卷第 t期
usss年 t月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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的≈u  ∀目前的研究证实灵芝多糖能促进混合淋巴细
胞培养反应 o促进未经纯化的脾细胞在体外的增殖 o
增强 ⁄‘„多聚酶 Α的活性以及促进白细胞介素 u
的分泌等≈v ∗ x  o但灵芝多糖免疫调节作用的确切机
制仍不明确 ∀本文利用放射免疫测定技术 o研究灵
芝多糖对小鼠腹腔巨噬细胞k  yl¦„  °的影响 o以
探讨灵芝多糖的作用机制 ∀
1 材料和方法
1 q1 药品与试剂 灵芝多糖kŠ…zl }按文献方法
提取≈y oz  o化学组成是以葡萄糖 !半乳糖为主的杂多
糖 o糖苷键连接方式以 Βkt ψwl为主 o稍多 Αkt ψ yl o
分子量 |sss ∀实验时以 • ° Œ2tyws培养基或 ‹ ³¨2
¶¨缓冲液配成所需浓度 oy s quu Λ° 滤膜过滤 o消
毒 ow ε 保存 ~• ° Œ2tyws培养基 }Š¬¥¦²生命技术公
司产品 o使用时配成 • ° Œ2tyws完全培养基 o内含 }
ux °°²¯#pt ‹ ³¨¨¶ou °°²¯#pt Λ2谷胺酰胺 !tss ˜
# °¯ p t青霉素 !tss Λª# °¯ p t链霉素 !s qu h ‘¤‹≤ ’v o
ts h胎牛血清kƒ≤≥l ~ƒ≤≥ }杭州四季青牛场 ~环磷酸
腺苷测定药盒 }中国原子能科学研究院产品 ~‹ ³¨¨¶
缓冲液 }³‹ z qu ∗ z qw o内含 twx °°²¯ #pt ‘¤≤¯ox
°°²¯#ptŽ≤¯ot °°²¯#p t≤¤≤ u¯#u‹u ’ os qx °°²¯#
pt  ª≥’w#z‹u ’ ox °°²¯ #pt Š¯ ∏¦²¶¨ ots °°²¯ #
pt‹ ³¨¨¶~‹¤±®. ¶液 }³‹ z qu ∗ z qw o内含 ‘¤≤¯o
Ž≤¯o ª≤ u¯ o ª≥’w o≤¤≤ u¯ o‘¤u ‹°’w oŽ‹u°’w oŠ¯ ∏2
¦²¶¨ ~×µ¬¶2‹≤¯缓冲液 }³‹ z qu ∗ z qw ∀
1 q2 实验动物 …„…r¦纯系小鼠 oα ‘不限 o{周
龄 o体重kt| qy ? t qwl ªo由第一军医大学实验动物
中心提供 ∀
1 q3 巨噬细胞k  yl的培养 按文献≈{ 方法无菌
取小鼠腹腔  y o经苔盼蓝染色细胞活率 |x h以上 o
调整细胞浓度为 tsx ∗ tsz个r °¯ o接种于多孔培养板
中 o置含 x h ≤ ’u o|x h空气孵箱中 ovz ε 孵育 uw «∀
对照组皆以 • ° Œ2tyws完全培养基替代 o实验组中
加测试药物等处理因素皆以 • ° Œ2tyws完全培养
基溶解和稀释 ∀
1 q4  y 中环磷酸腺苷k¦„  °l的测定≈| 
1 q4 q1 样品提取 取和 Š…z 培养一定时间的
 y o冰浴下超声粉碎 ov sss µ# °¬±p t离心 ts °¬±o
去除沉淀 o上清液在 zs ∗ zx ε 水浴下蒸干 o测定时
干渣重溶于适量的 ×∞缓冲液k³‹ z qxl ∀
1 q4 q2 ¦„  °的测定 采用竞争性蛋白结合分析
法 ∀整个反应都在冰浴下进行 o反应总体积为 t{s
Λ¯ ∀按顺序向编号试管内加入试剂 o加入结合蛋白
后轻轻摇匀 ~培养 u «后 o除 ≤ × 管外 o每管加入吸附
剂 xs Λ¯ o摇匀 o立即在 tsss µ#°¬±p t离心 y ∗ z °¬±~
吸取上清 tus Λ¯ o置测量杯中 o加 t qx °¯ 无水乙醇 o
摇匀 o再加入闪烁液 v qx °¯ o盖严 !摇匀 o在液体闪烁
仪上测定放射性活度 ∀测得的结果按要求作标准曲
线并求算样品中 ¦„  °含量 ∀
2 结果
分别以 x ots ous ows Λª# °¯ p t Š…z 按一定时间
作用于小鼠  y o测得其中 ¦„  ° 含量 o结果见表
t ∀实验测得  y中¦„  °基础水平为 kt q{w ?
s quul ³°²¯#ws Λ¯ p tk ν € v , ξ ? σl ∀
表 t Š…z对小鼠腹腔巨噬细胞 ¦„  °含量的影响
组别
剂量r
Λª# °¯ p t
¦„  °r³°²¯#wsΛ¯ p t
u qx °¬± x °¬± ts °¬± tx °¬± vs °¬± ys °¬±
对照 t q{{ ? s qut t q|s ? s qtz t q{y ? s quw t qz| ? s quv t q{z ? s qvv t q{v ? s qt|
Š…z x { qtw ? s qwwtl { qzw ? s qyytl y quv ? s qwztl u qts ? s quzul t q{t ? s quv t q{y ? s quu
ts | qtv ? s qvytl ts qvw ? s qzutl y qxy ? s qvttl u qty ? s qwwul t q{{ ? s qv{ t q{w ? s qu{
us | q{{ ? s qwttl tt q{y ? s qyvtl y q|w ? s quwtl u qvu ? s qt|ul t qzw ? s qu{ t qz{ ? s quw
ws ts quv ? s qxytl tv q|t ? s qwztl z qt{ ? s qwttl u qvv ? s qvtul t q{{ ? s qu{ t qzw ? s qut
注 }≠ ξ ? σ  ν € v ≈与对照组比 t) Π s .st u) Π s qsx
从以上结果可以看出 }Š…z 在 u qx °¬±以内可
引起小鼠腹腔  y 中¦„  °浓度快速升高 ox °¬±时
达到峰值 o之后缓慢下降 o至 vs °¬±时基本恢复原
来水平 ∀在 x °¬±时考察 Š…z 与 ¦„  °之间的量
效关系 o可见随着 Š…z 浓度的升高 o¦„  °浓度也
随之升高 o二者的相关系数 ρ € s q|zw| o表明 Š…z
引起  y 中¦„  °含量的变化具有剂量相关性 ∀
3 讨论
3 q1 细胞孵育至 u «左右时 o以 °…≥或 ‹ ³¨¨¶缓冲
液冲洗 u 遍 o冲洗掉未贴壁细胞 o加入 • ° Œ2tyws
完全培养基继续培养至 uw «∀经此方法处理后可获
得 |x h以上  y o细胞浓度可保持在 tsx ∗ tsy个#
°¯ p t ∀
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中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
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3 q2 在 ¦„  °系统中 oŠ蛋白起核心作用≈ts  ∀受
体活化通过 Š蛋白偶联到腺苷酸环化酶上 o由 Š蛋
白决定该酶活性的兴奋或抑制 o从而决定了 ¦„  °
浓度的升降而制约细胞的各种效应 ∀¦„  °的信使
作用则通过对依赖 ¦„  °蛋白激酶k°Ž„l所调控 ∀
我们在实验中观察到 oŠ…z可剂量依赖性引起小鼠
腹腔  y 内 ¦„  °浓度快速升高 o从其作用表达的
时间上看 o这应该是 Š…z 产生效用的上游事件 ∀
推断这是 Š…z激活兴奋性 Š蛋白 o在 „×°的作用
下活化腺苷酸环化酶 o从而引起 ¦„  °浓度的升高 o
而¦„  °的全部效应都是通过 °Ž„ 使其底物发生
特异性磷酸化而实现的 ∀由此我们可以得出 oŠ…z
通过引起小鼠腹腔  y 中 ¦„  °浓度的升高 o从而
引起 °Ž„的活化 o激活  y ∀这很可能是 Š…z 增
强小鼠免疫功能的重要途径 ∀
参考文献
≈t  ≥¤¶¤®¬ × q„±·¬·∏°²µ °²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨¶©µ²° ≥²°¨ °²¯¼³²µ¤¦¨¤¨ o
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学学报 ot||u ouwkwl }uzt
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医学与临床 ot||u otukul }x|
≈w  ¨¬≥ o¬±  ‹ …q∞©©¨ ¦·²© Š¤±²§¨µ°¤°²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨¶²± × ≤¨¯¯
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≈ts  Œ¼ ±¨ª¤µ• q ²¯ ¦¨∏¯¤µ¤±§ƒ∏±¦·¬²±¤¯ ⁄¬√ µ¨¶¬·¼ ²© ¤°°¤¯¬¤± Š¶p
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Κεψ ωορδ󊤱²§¨µ°¤³²¯¼¶¤¦¦«¤µ¬§¨ ~¦„  ° ~ °¤¦µ²³«¤ª¨
≈责任编辑 方文贤 
封面图片简介
桔梗 πλατψχοδον γρανδιφλορυ µ k¤¦´ ql„ q⁄q≤ q系桔梗科多年生草本植物 ∀株高 vs ∗ tus ¦° o有乳汁 ~根肥大肉质 o长圆锥
形 ~茎直立 o叶轮生至互生 o花冠蓝紫色 o宽漏斗状钟形 ∀花期 z ∗ |月 ∀分布我国东北 !华北 !华东 !华中 !西北等省区 o并有栽
培 ∀朝鲜 !日本 !原苏联的远东和东西伯利亚地区的南部也有 ∀常生于海拔 u sss °以下的阳处草丛和灌丛中 ∀桔梗为我国
常用中药 ∀其根药用 o含多种皂甙 ∀味苦 !辛 ∀有宣肺祛痰 !利咽排脓的作用 ∀用于咳嗽痰多 !胸隔满闷 !咽痛音哑 !肺痈吐脓
等症 ∀药材桔梗有北桔梗与南桔梗之分 ∀北桔梗产量大 o产于东北 !华北等地 o其根粗壮 o略呈纺锤形而稍扭曲 o顶端有芦头 o
上生多数半月形的芦碗 o外表灰白或浅黄色 o具微横纹及丝毫绞纹 o质脆易断 o味先甜而后苦 ∀南桔梗产于华东 o较北桔梗为
细尖 o坚实 o洁白 o味先苦而后微甜 o质量较好 ∀ k陈虎彪l
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第 ux卷第 t期
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