全 文 ：#炮制#
关白附新工艺最佳技术参数优选
毛淑杰 李先端 程丽萍 章春宜 傅梅红 柯青 吴连英
k中国中医研究院中药研究所 北京 tsszssl
吕宗星 朱大力 叶正礼 王均
k上海市杨浦中药饮片厂 上海 usss|vl
摘要 通过对关白附不同炮制品有效成分总生物碱 !关附甲素及有毒成分次乌头碱含量测定 o急性
毒性实验 o结合药典对关白附炮制品的法定标准要求k饮片表面特征 !断面色泽 !气味l及饮片收得率等
指标考查 o确定关白附新工艺技术参数为清蒸 w小时为佳 ∀
关键词 关白附 新工艺 技术参数
关白附为常用中药之一 o具有祛寒湿 o止痛
等功能 ∀用于头痛 !腰膝关节冷痛等收到良好
疗效 ∀古文献及各版药典都记载关白附有毒 o
需经炮制后应用 ∀我们经古今文献研究及生产
实地调查 o总结出关白附古代炮制方法有 ts种
之多 o现在全国各地应用方法主要是 u种 ∀其
中炮制工艺 !辅料用量等没有明确统一规定 o质
量标准无客观内在可控制的指标 ∀ys年代开
始 o一些学者对关白附化学 !药理等方面的研究
进行一些报道 o但对炮制方面特别是炮制最佳
工艺及质量控制等研究几乎是空白 ∀本课题得
到国家科委资助 o对关白附进行较系统的综合
研究探讨 ∀根据我们对古 !今文献及炮制原理
探讨结果 o确证了关白附炮制理想的加热方式
为蒸制法≈t ou ∀因此本文首先对蒸制最佳条件
进行考察 ∀采用有效及有毒成分与传统指标
k性状 !外观l鉴别相结合 o优选关白附蒸制新工
艺最佳技术参数 ∀
1 材料 !仪器
111 药材来源
关白附产自辽宁营口 o购自营口市药材公
司 o经谢宗万研究员鉴定为毛茛科植物黄花乌
头 Αχονιτυ µ χορεανυ µ k¶√¯ ql ¤³¤¬¦¶q的块根 ∀
112 炮制品制备
11211 姜矾煮制品k老法制品l }按全国中药饮
片炮制规范kt|{{年l方法制做 ∀
取生关白附加水浸泡 o每日换水 u ∗ v次 o
浸 w天起泡沫换水后加入白矾ktssΒul o又浸 w
天后 o第 {天取出 o将生姜片及白矾粉置锅内 o
加适量水煮沸后 o倒入关白附 o共煮沸 u«至无
白心 o捞出 o除去生姜片 o晾干切厚片 o干燥k药
材Β生姜Β白矾为 tssΒtu qxΒtu qxl ∀
11212 豆腐煮制品k老法制品l }按上海市中药
饮片炮制规范方法制做 ∀取净关白附浸漂 y
天 o每天换水 u ∗ v次捞起 o置锅内 o加豆腐同煮
至内无白心k大约煮沸 w«l o口尝无麻感 o取出 o
除去豆腐 o晒至半干 o切薄片 o干燥筛去灰屑k药
材Β豆腐为 tssΒuxl ∀
113 仪器 !试剂
岛津 ≤≥2|ts 双波长薄层扫描仪 ~岛津
≥°2t型自动喷雾显色器 ~微量定量毛细管
kxΛ¯ o美国l ~高压液相色谱仪 o• ¤·¨µ¶2xts 型
k美国沃特斯公司l ~zvs型数字处理机k美国沃
特斯公司l ~色谱柱 v1|°° ²√¤2³¤® ≤t{ yΛ° ~
紫外检测器 w{t型k美国沃特斯公司l ~硅胶
k薄层层析用 ~青岛海洋化工厂l ∀次乌头碱标
准品 }购于中国药品生物制品检定所 ~试剂为分
析纯 !优级纯 ∀
2 实验方法与结果
211 根据药典法定标准k外观 !性状等l鉴别优
#x|x# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 ts期
选最佳技术参数
本实验是在实验室试制基础上 o又到上海
杨浦饮片厂质检室在老师傅指导下进行 ∀取关
白附适量 o去掉残茎及杂质 o分 w等份 o加 v倍
水浸泡 w{«左右k每天换水 u次l ∀取出放入蒸
锅内 o分别清蒸 t ou ov ow«o取出晾至半干 o切厚
片ku ∗ v°°l o干燥 o筛去灰屑 ∀制品经饮片厂
质检科长 !炮制老师傅组成 x人小组鉴定 o性状
如表 t ∀老师傅鉴定结果表明 o蒸 w«制品从饮
片外观k包括表面 !断面 !色泽l及气味等指标均
与老法制品接近 ∀为符合药典法定标准要求合
格的炮制品 o蒸 v«样品为基本合格 ∀
表 t 不同的炮制品性状鉴定比较
样品 性状鉴定k表面特征 !断面色泽 !气味l 得率 h 结果
清蒸 t«
半数未蒸透 o有干心 o子根表面灰黑色 o断面灰白色 ∀母
根表面断面均为暗褐色 o可见白色导管束 ∀味极苦 o麻舌感
|t
不合格
清蒸 u« 少数未蒸透 o有干心 o颜色与气味基本与蒸 t«同 |t 不合格
清蒸 v«
基本蒸透 o有小干心 o子根表面黑色 o断面灰白色 ∀母
根表面暗褐色 o断面黑色可见导管束 ∀味苦 o麻舌感减轻
|s
基本合格
清蒸 w«
全部蒸透 ∀子根表面黑色 o断面棕褐色 ∀母根表
面黑棕色 o断面黑色 o可见导管束 ∀味稍苦 o微麻舌感
|s
基本合格
姜矾煮制
大部分灰白色饮片 o侧根灰白色 o主根外灰
色 o内可见白色纹理k维管束l o味稍苦 o微麻感
zt1w
合格
豆腐煮制 子根黑色 o黑褐色 ∀母根表面灰色 o断面灰色 o可见白色纹理 ∀味稍苦 o微麻感 {s
合格
212 根据有效成分含量比较优选最佳技术参
数
21211 关附甲素含量比较≈v
2121111 供试品溶液制备 准确称取关白附
生品及蒸 v ow«炮制品约 uwss°ªo于磨口锥形
瓶中 o加入 tss h氨水 u1w °¯ 碱化 o搅匀 o加入
xs °¯ 乙醚冷浸 tx«o过滤 o滤渣用乙醚洗涤两
次 o每次 ts °¯ o合并滤液 o浓缩乙醚至干 o残渣
加二氯甲烷溶解并稀释至刻度kt °¯ l备用 ∀
2121112 对照品溶液制备 精密称取关附甲
素 t1ss°ª于 t °¯ 容量瓶中 o加二氯甲烷溶解
并稀释至刻度备用 ∀
2121113 薄层扫描条件 双波长线性扫描 oΚ≥
xsx±° oΚ zss±° o灵敏度 ≅ t ~计算机方法 ws ~
展开剂甲苯2乙酸乙酯2甲醇2水kuΒwΒuΒtl o展开
两次 o显色剂改良碘化铋钾 ~吸附剂 s1x h碱性
硅胶 ≤ ≤2¤∀
2121114 标准曲线制备 准确吸取关附甲素
对照品溶液 6 o| otu otx ousΛ¯ o点样于同一碱性
硅胶 板上 o用上述展开剂展开两次 o取出晾
干 o用改良碘化铋钾试剂显色 ∀再将显色的层
析板放入 ≤≥2|ts薄层扫描仪样品室内进行扫
描 o测定其峰面积 o以横坐标为关附甲素浓度 o
纵坐标为峰面积 o绘制标准曲线 o结果在 y1sw{
∗ us1tysΛª得到一条直线 o经计算回归方程为
Ψ p twvyt1zx n wv{w1{ Ξ , ρ s1|||{ ∀
2121115 炮制不同时间样品中关附甲素比较
精密吸取样品溶液 !关附甲素对照品溶液 o点
样于同一碱性硅胶 层析板上 o展开 o显色和
扫描条件同上 o测定样品与对照品斑点的峰面
积 o经计算各样品关附甲素含量结果见表 u ∀
21212 总生物碱含量比较
取关白附生品及蒸 v ow«样品粉末k过 ys
#y|x# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 ts期
表 u 蒸制品中关附甲素含量
样品
称样量
°ª
峰面积
关附甲素
h
ΡΣ∆
h
与生品比
下降率 h
生品 uwss1| tts|zx1x s1tww t1vu s
蒸 v« uwss1{ wwyv|1x s1tut t quu ty
蒸 w« uwss1| wv{vu qs s1tsy t1vv uy
注 }ν w
目筛l约 wªo精密称定 o置具塞锥形瓶中 o加氨
试液 u °¯ 使湿润 o加氯仿2乙醚kvΒtl混合液
ws °¯ o密塞 o摇匀 o放置过夜 o过滤 o残渣加混合
液 ws °¯ o连续振摇 t«o过滤 o残渣再用混合液洗
w次 o每次 x °¯ o过滤 o合并滤液 o低温蒸干 o残渣
加混合液 x °¯ o使溶解并蒸干 o再加乙醇 x °¯ 使
溶解 ∀精密加入硫酸ks1st°²¯rl o水 tx °¯ 与
甲基红指示剂 v 滴 o用氢氧化钠ks1su°²¯rl
滴定至黄色 ∀每 t °¯ 硫酸液ks1sst°²¯rl相
当于 tu1|°ª的乌头碱k≤vw wz ttl ∀含量结
果见表 v ∀
表 v 蒸制品中总生物碱含量 h
样品 t u v 平均含量 ΡΣ∆
与生品比
下降率
生品 t1wx t1w{ t1wz t1wz t1sw s
蒸 v« t1ty t1tt t1us t1ty v1{| ut
蒸 w« t1tv t1t| t1tw t1tx u1{s ut1{
213 根据毒性成分次乌头碱含量比较选择最
佳技术参数
高效液相色谱条件 }流动相甲醇2水2氯仿2
三乙胺kzsΒvsΒuΒs1tl ~紫外检测波长 uxw±° ~
流速 s1| °¯ r°¬±~灵敏度 s1sx ƒ≥ ∀
精密称取样品粉末kws 目luwss1s°ª左
右 o置三角瓶中 o加 ts h氨溶液 u1s °¯ o搅拌 o再
分别加入 xs °¯ 乙醚冷浸 tu«o过滤 o残渣用
ts °¯ 乙醚洗涤 v 次 o过滤 o合并滤液 o挥干乙
醚 o残渣加二氯甲烷溶解 o转移于 u °¯ 容量瓶
中 o冷藏备用 ∀
参照文献≈w 方法进行 ∀配制不同浓度次
乌头碱标准液 o制备标准曲线 o计算回归直线方
程为 Ψ wwtvu1yw Ξ p v|vw1sx oρ s q|||y ∀
吸取 tsΛ¯ 样品提取液进行测定峰面积 o计算样
品百分含量 o结果见表 w ∀
表 w 关白附蒸制品中次乌头碱含量 h
样品 含量 ΡΣ∆ 与生品比下降率
生品 s1swv t1ut
蒸 t« s1sst t1vt |z
蒸 u« s1sst t1vv |{
蒸 v« s1sst t1u| |{
蒸 w« ) Υ tss
注 }ν v
214 根据急性毒性测定结果比较优选最佳技
术参数
取关白附生品 !蒸制品粗粉kus目l o精密
加 w倍蒸馏水浸 w{«o时时振摇 o离心kvsssµr
°¬±ltx°¬±o制备成浓度为 ux h o³ y ∗ z液
体 o冰箱放置备用 ∀
昆明种小白鼠 o由本院动物室提供 ∀
取体重kus ? ulª健康小白鼠 o按体重和性
别分组 o雌雄各半 o分别一次腹腔注射关白附
生 !制品冷浸液k³ zlz1xªr®ªo观察 z天内
小鼠死亡只数及毒副反应 ∀结果见表 x ∀
表 x 蒸制品冷浸液毒性比较
样品 动物数
剂量
ªr®ª
死亡数
给药前体重
ª
药后 z天体重
ª
体重增值
ª
Π
对照组 tw 等体积水 s t|1uv ? s1z| uz1y| ? u1sv {1wy ? t1ys
生品组 tw z1x tvrtw t|1uu ? s1y| uw1yy w1xz
蒸 v« tv z1x s t|1uu ? s1yu ux1zu ? t1zz y1xs ? t1xt s1st
蒸 w« tw z1x s t|1s| ? s1zy uz1st ? t1xw z1|s ? t1y{ s1sx
注 }ξ ? σ
#z|x# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 ts期
实验结果表明 }关白附冷浸液腹腔给药生
品死亡 |u h o炮制品未见死亡 ∀但蒸 v«第 z天
体重与对照组比较有显著降低k Π s1stl o蒸
w«样品对小鼠体重等未见有毒副反应 ∀
3 讨论与小结
311 本研究采用成分含量测定和毒性比较 o结
合传统指标鉴别 o对关白附炮制新工艺技术参
数进行优选 ∀为使本研究不光依据实验工作 o
我们摆脱以往炮制小样只是在实验室模拟工厂
条件下进行的常规 o而是首先在实验室筛选出
几个新工艺小样试制品 o然后在上海杨浦饮片
厂质检室又进行关白附炮制新工艺小样品试制
工作 ∀由质检科负责人 o有经验的炮制老中药
师参加 o组成 x人小组 o参加小样品试制研究及
对小样试制品进行传统质量把关 ∀依据药典对
关白附炮制品要求煮至透心k煮至无白心l o口
尝无麻辣感这一法定标准 o对小样试制品进行
严格检验 o首先将试制品进行性状外观 !断面色
泽 !质地 !气味及收得率等方面与老法制品作了
比较 ∀最后一致认为蒸 t ou«为不符合传统标
准 o蒸 v«为基本符合 o蒸 w«样品为完全符合药
典法定标准 ∀然后将样品再拿到实验室
进行实验筛选 ∀
312 含量测定结果显示 o新工艺蒸 v ow«有效
成分总生物碱含量接近 ∀关附甲素含量蒸 w«
略低于蒸 v«样品 ∀有毒成分次乌头碱在生药
量为 w{ss°ª下 o蒸 w«样品未被检出 o说明蒸
w«样品在毒性成分基本破坏的同时 o尽量保留
了有效成分 ∀
313 毒性比较研究 经关白附冷浸液腹腔给
药 o结果显示蒸 v«样品给药 z天后 o小鼠体重
与对照组比显著降低k Π s1stl o而蒸 w«样品
小鼠体重与对照组无显著差异k Π s1sxl o说
明蒸 v«比蒸 w«样品毒性为大 ∀
综合以上几个测定结果 o蒸制 w«为既保持
有效成分 !又降低毒性的最佳炮制时间 ∀本参
数优选既尊重古本草方书/辨状论质0的传统经
验鉴别方法 o又结合现代研究结果 o因此为比较
理想的优选结果 ∀
4 参考文献
t 毛淑杰等 1 基层中药杂志 ot||x ~|kul }vv
u 李先端等 1 中药材 ot||z ~uskul }zw
v 傅梅红等 1 中国中药杂志 ot||y }utktsl }yst
w 傅梅红等 1 中国中药杂志 ot||z ~uukxl }u{s
t||y ) tt ) uz收稿
杜仲不同炮制品增强免疫作用比较
朱宇红 郝武常 3 李兴华
k西安医科大学第二临床医学院 西安 ztssswl
摘要 比较了杜仲及其不同炮制品增强免疫的作用 o结果表明 }杜仲炮制后作用明显增强 o不同炮
制品之间作用强度无明显差异 ∀
关键词 杜仲 炮制 增强免疫作用
杜仲具有补肝肾等作用 ∀现代研究表明 }
杜仲具有增强免疫的作用 o表现为增强机体非
特异性免疫功能 o对细胞免疫显示双相调节作
用≈t ou ∀本实验比较了杜仲及其不同炮制品增
强免疫的作用 ∀
1 实验材料
111 实验动物 小鼠 o体重kus ? ulªo购
自第四军医大学实验动物中心 ∀
3 陕西省药品检验所 西安 ztssyt
#{|x# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 ts期