全 文 ：高效液相色谱法测定丹参中丹酚酸 …
张启伟 o张 颖 o李计萍 o马 华
k中国中医研究院 中药研究所 o北京 tsszssl
≈摘要  目的 }建立丹参中丹酚酸 …高效液相色谱测定方法 ∀方法 }zx h甲醇回流提取 o色谱柱 ≠ • Š ≤t{ o流
动相甲醇2x h乙酸kvxΒyxl o检测波长 u{t ±° ∀结果 }丹酚酸 … s qtz ∗ t qzs Λª线性关系良好kρ € s q|||zl o回收率
|{ q| h oΡΣ∆t q{u h ∀结论 }为丹参及其制剂的质量控制提供了分析方法 ∀
≈关键词  丹参 ~丹酚酸 …~含量测定 ~高效液相色谱法
≈中图分类号  • u{w qt ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstltu2s{w{2su
丹参为常用中药 o具有祛瘀活血的功效 o是治疗
冠心病的要药 ∀丹参的多种水溶性酚酸成分中以丹
酚酸 …的药理作用强 o且在药材中含量最高 ∀有报
道采用薄层扫描法≈t 和高效液相色谱法≈u 测定丹参
中多种水溶性酚酸类成分 ∀在文献报道的基础上 o
我们建立了丹酚酸 …的高效液相色谱测定方法 o为
药材质量控制提供了可借鉴的方法 ∀
1 仪器与试药
高效液相色谱仪 }• ¤·¨µ¶yss型四元液相色谱
泵 o||y型光电二极管阵列检测器 o¬¯¯ ±¨±¬∏° usts
色谱工作站 ∀丹参药材经生药室王 副研究员鉴定
为丹参 Σαλϖια µιλτιορρηιζα …ª¨ q的根及根茎 ∀丹酚
酸 …由化学室王智民研究员提供 o其 „…2  ≥ oŒ• o
˜ ∂ ot ‹‘ • 和tv ≤ ‘ • 数据与文献相符 o含量为
|| qs h ∀试剂均为分析纯 ∀
2 方法与结果
2 q1 色谱条件
色谱柱 ≠ • Š2≤t{ ots Λ° ow qy °° ≅ uxs °° o柱
温 室温 ~流动相 甲醇2x h乙酸kvxΒyxl o流速 t °¯ #
°¬±p t o检测波长 u{t ±° ∀色谱图见图 t o经检查峰
纯度达到要求 ∀
2 q2 样品测定
丹酚酸 …对照品加 xs h甲醇溶解 o制成每毫升
ux Λªktl和 {x Λªkul的对照品溶液 ∀
精密称定样品粉末k过 ws目筛l约 s qt ªo置 xs
°¯ 磨口锥形瓶中 o加 zx h甲醇 us °¯ o称重 ∀水浴加
热回流 s qx «o放至室温 o补至原重 o滤过 o取续
≈收稿日期  usss2sz2sv
≈基金项目  国家重点科技项目专题k|y2|sv2st2sul
图 t 对照品及样品的 ‹°≤
„ q对照品 …q样品 t q丹酚酸 …
滤液 u °¯ 置 ts °¯ 量瓶中 oxs h甲醇稀释定容为样
品溶液 ∀对照品及样品溶液均需避光保存 ∀
样品测定结果 o不同产地丹参药材中丹酚酸 …
含量为 }山东 { qyu h oΡΣ∆ s q{{ h ~湖北 w q|y h o
ΡΣ∆ t qt{ h ~四川 x qvt h oΡΣ∆ s q|z ∀ ν € v ∀
3 方法学考察
3 q1 精密度试验
对照品溶液重复进样 y次 o丹酚酸 …峰面积的
ΡΣ∆为 s qvy h ∀
3 q2 线性范围
x个不同浓度的对照品溶液 o进样 us Λ¯ o测定峰
面积 o以峰面积积分值为纵坐标 o丹酚酸 …进样量为
横坐标绘制标准曲线 o回归方程 Ψ € {t{|ss Ξ p
|zss , ρ€ s q|||z ∀丹酚酸 …在 s qtz ∗ t qzs Λª具有
良好的线性关系 ∀采用外标两点法定量 ∀
3 q3 稳定性试验
样品溶液间隔一定时间测定 o结果样品溶液避
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第 uy卷第 tu期
usst年 tu月
中 国 中 药 杂 志
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光保存 o在 w{ «时内基本稳定k ΡΣ∆ s q|w h l ∀
3 q4 加样回收试验
精密称取已知含量的样品共 v份 o分别加入丹
酚酸 …对照品 o测定含量 o结果见表 t ∀
表 t …加样回收率试验结果
药材量
r°ª
样品量
r°ª
测得量
r°ª
回收率
r h
ξ
r h
ΡΣ∆
r h
w{ qwu w qtzw z qwus tss qu
ys qw| x qutw { qvxx |z qs |{ q| t qzs
x{ q|u x qsz| { qvss || qx
注 }丹酚酸 …加入量为 v quv{ °ª
3 q5 重现性试验
同一批样品分别称取 y份 o测定含量 oΡΣ∆ 为
t q{u h ∀
4 讨论
4 q1 色谱条件的确定
文献≈u 为了分离多种水溶性成分 o采用甲醇2
乙腈2水kwt qxΒtΒxz qxl流动相 o并用甲酸调 ³‹ 至
u qus ∀本文仅分离测定丹酚酸 … o因此简化了流动
相的组成 o使用甲醇2乙酸水溶液配比 o即将丹酚酸
…很好的分离 ∀
在实验中考察了在甲醇2乙酸水kvyΒywl条件下
不同乙酸浓度ky h ox h ow h l以及在甲醇2x h乙酸
条件下不同比例kvyΒyw ovxΒyx ovwΒyyl 对丹酚酸 …
峰的影响 ∀结果表明酸浓度及流动相比例在上述范
围的变化除对保留时间有一定影响外 o对丹酚酸 …
峰的分离和峰纯度无影响 ∀
丹酚酸 …保留时间受柱温影响较大 ∀随柱温升
高 o保留时间缩短 o故建议柱温控制在 uu ∗ uw ε ∀
4 q2 提取条件的选择
文献≈t  采用水浸泡过夜 o煮提 vs °¬±o酸化 o
萃取的方法 ∀但限于薄层色谱分离能力及要兼顾多
种成分 o未能采用对丹酚酸 …最佳的提取条件 ∀我
们首先用回流法对提取溶剂种类进行了比较 o所选
溶剂为 u h甲酸甲醇 o甲醇 ozx h甲醇 oxs h甲醇 o并
和文献报道的方法比较 o结果 zx h甲醇提取最好 ∀
然后考察回流提取时间的影响 o结果回流 s qx «即
达峰值 ∀同时测定了超声处理 s qx «的数据 o后者提
取率低 ∀
≈参考文献 
≈t  李 静 o何丽一 o宋万志 q丹参中水溶性酚酸类成分的薄层扫
描测定法 q药学学报 ot||v ou{kzl }xwv q
≈u  孙 丕 o何丽一 q测定鼠尾草属植物中酚酸类成分 q中国药学
杂志 ot||z ovuk增刊l }uy q
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[ Κεψ ωορδσ] µ¤§¬¬²© Σαλϖια µιλτιορρηιζα ~¶¤¯√¬¤±²¯¬¦¤¦¬§… ~´ ∏¤±·¬·¤·¬√¨§¨·¨µ°¬±¤·¬²±~‹°≤
≈责任编辑 刘  
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