全 文 ：[ Αβστραχτ] Οβϕεχτ : ײ ²¥¶¨µ√¨·«¨ ¬±­∏µ¼¬±§∏¦¨§¥¼ Œ¶²³µ²·¨µ¨±²¯ kŒ≥’l ²±·«¨ ¶·µ∏¦·∏µ¨ ¤±§©∏±¦·¬²±
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≈责任编辑 方文贤 
茶儿茶素对大鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用
方 芳t o韩永晶u o崔志清u
kt q天津大学 药物科学与技术学院 o天津 vssszu ~u q天津医科大学 药理教研室 o天津 vssszs l
≈摘要  目的 }观察茶儿茶素对脑缺血再灌注损伤的保护作用 ∀方法 }本实验采用钳夹双侧颈总动脉和迷走
神经 ys °¬±再灌注 vs °¬±的大鼠模型 o分为正常组 !模型组及茶儿茶素组k分别是 vs °ª#®ªp t和 xs °ª#®ªp t o¬³q
§´≅ zl ∀用荧光分光光度计法检测脑组织中  ⁄„ o‘’ 的浓度变化 o同时观察脑组织超微病理的变化 ∀结果 }模型
组大鼠血清和脑组织中  ⁄„浓度显著高于正常组k Π s qstl o超微结构严重受损 ~茶儿茶素组均能降低脑缺血再
灌注后血清和脑组织中  ⁄„浓度 o电镜结果显示茶儿茶素kxs °ª#®ªp t o¬³q §´≅ zl能改善脑缺血再灌注对血脑
屏障的损害 ∀结论 }提示茶儿茶素对大鼠脑缺血再灌注损伤有保护作用 ∀
≈关键词  茶儿茶素 ~脑缺血再灌注 ~丙二醛
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukusstltt2szzx2sw
临床和动物实验资料证实脑缺血达一定时间
再灌注 o反而加重损伤≈t  ∀有关脑缺血再灌注损伤
的机理目前已提出若干学说 ∀在这些学说中 o氧自
由基学说具有重要的地位 o其他学说与之均有不同
的联系 ∀已有研究表明自由基清除剂能够防治缺血
性脑损伤 ∀茶儿茶素是从茶叶中提取的含有多酚性
羟基的化合物 o研究发现其有显著的抗氧化特
性≈u ov  o具有抗肿瘤 !抗突变 !降血脂 !降压及抗菌消
炎等多种生物学特性≈w ∗ y  ∀但其对脑缺血再灌注损
≈收稿日期  usss2ts2ty
伤作用的报道较少 ∀本研究主要采用急性脑缺血再
灌注模型 o通过测定相关的生化指标和观察病理形
态的变化 o来确定茶儿茶素是否对脑缺血再灌注损
伤大鼠具有保护作用 ∀
1 材料与方法
1 q1 材料
1 q1 q1 动物 • ¬¶·¤µ大鼠 o雄性 o体重 uxs ∗ vxs ªo
由军事医学科学院动物室提供 ∀
1 q1 q2 药物 茶儿茶素 o天津药物研究院植化室
提供 ∀
1 q1 q3 试剂 u2硫代巴比妥酸 o纯度  |{ h k≥l ~
zzz
第 uy卷第 tt期
usst年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o‘²qtt
‘²√ qousst
t ot ov ov2四乙氧基丙烷 o纯度  |x h kŠ≤l ~u ov二氨
基萘 o纯度  |x h o均购于瑞士 ƒ ∏¯®¤¦«¨ °¬®¤公司 ∀
1 q1 q4 仪器 荧光分光光度计 }日本岛津 • ƒ2xts
型 o透射电镜 }日本 ∞’2tss≤ ÷ 型 ∀
1 q2 方法
1 q2 q1 动物分组 将大白鼠随机分为 w组 }正常
组k ν € tsl !模型组k ν € |l !茶儿茶素一组k ν € |l和
二组k ν € |l ∀
1 q2 q2 脑缺血再灌注动物模型≈z o{  给模型组大
鼠连续 y §腹腔注射生理盐水ku °¯ #®ªp t o´ §l o茶儿
茶素一组和二组则分别注射茶儿茶素kvs °ª#®ªp t
和 xs °ª#®ªp t o´ §l o第 z 天称重后用乌拉坦ktª#
®ªp tl腹腔注射麻醉 o仰卧于手术台上 o颈正中切开 o
分离颈总动脉和迷走神经 o气管插管后用小动脉夹
将颈总动脉连同迷走神经一起钳夹 ∀于缺血前 vs
°¬±腹腔注射生理盐水和相应剂量的茶儿茶素 ∀缺
血 ys °¬±后撤除动脉夹恢复血供 vs °¬±o随即将动
物处死 o造成脑缺血再灌注模型 ∀正常组大鼠除不
钳夹连同迷走神经的颈总动脉外 o操作与上述相同 ∀
1 q2 q3 脑组织匀浆和血清中  ⁄„测定
1 q2 q3 q1 脑组织匀浆的制备 将各组动物按规定
时间断头处死 o在冰浴中取出大脑 o用 w ε 生理盐水
冲洗干净 o滤纸吸干水分后称重 o用 w ε 生理盐水制
成 ts h的匀浆 ov sss µ#°¬±p t离心 ts °¬±o取上清
液于 p us ε 冰箱快速冰冻备用 ∀
1 q2 q3 q2 血清  ⁄„ 的制备 将上述各组大鼠按
规定时间断头处死 o取血 o静置 ts °¬±后 ov sss µ#
°¬±p t离心 ts °¬±o取血清于 p us ε 冰箱快速冰冻
备用 ∀
1 q2 q3 q3 脑组织和血清中  ⁄„ 的测定 采用硫
代巴比妥酸法测定≈|  ∀
1 q2 q3 q4 统计学处理 所得结果采用 ≥°≥≥统计
软件进行处理 ∀各组实验数据采用 ξ ? σ表示 o各
组数据平均数之间的差异采用单因素方差分析 ∀
1 q2 q4 病理切片 将正常组 !模型组和茶儿茶素
kxs °ª#®ªp t ≅ zl组动物于规定时间断头处死 o在冰
浴中取大鼠脑海马回 „±±°²±氏角组织 o立刻用
u qx h的戊二醛多聚甲醛固定 ot h四氧化锇后固定 o
乙醇逐级脱水 o∞³²±{tu环氧树脂包埋 oxs ∗ zs ±°
切片 o醋酸铀 !柠檬酸铅染色 o观察血脑屏障的结构
变化 ∀
2 结果
2 q1 茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑组织中
 ⁄„的影响
模型组与正常组比较 o脑组织中  ⁄„ 浓度的
差别有统计学意义k Π s qstl o脑组织中  ⁄„浓度
高于正常对照组 ~茶儿茶素kvs °ª#®ªp t ≅ z §和 xs
°ª#®ªp t ≅ z §l组与模型组比较 o脑组织中  ⁄„ 浓
度的差别有统计学意义k Π s qstl o茶儿茶素组脑
组织中  ⁄„浓度低于模型组 o且茶儿茶素kxs °ª#
®ªp t ≅ z §l组与正常对照组比较无统计学差异k表
tl ∀
表 t 茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠脑组织中  ⁄„的影响
分组
剂量
r°ª#®ªp t ≅ §
例数
 ⁄„浓度r
±°²¯#ªp t
正常组 ts zu qw{ ? tw qxy
模型组 | tty q|| ? tz qxtul
茶儿茶素 vs ≅ z | {z q|y ? tu qsvt owl
茶儿茶素 xs ≅ z | {v qtv ? | qzywl
注 }≠ ξ ? σ 与正常组比较 t) Π s .sx u) Π s .st ≈ 与
模型组比较 v) Π s .sx w) Π s qstk表 u同l
2 q2 茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠血清中  ⁄„
的影响
模型组与正常组比较 o血清  ⁄„ 浓度的差别
有统计学意义k Π s qstl o模型组血清中  ⁄„浓度
高于正常组 ∀茶儿茶素kvs °ª#®ªp t ≅ z §和 xs °ª
#®ªp t ≅ z §l组与模型组比较 o血清  ⁄„ 浓度的差
别均有统计学意义k Π s .sx和 Π s qstl茶儿茶素
组血清  ⁄„ 浓度低于模型组 ∀茶儿茶素kxs °ª#
®ªp t ≅ z §l组血清  ⁄„ 浓度与正常组比较无统计
学意义k表 ul ∀
表 u 茶儿茶素对脑缺血再灌注大鼠血清中  ⁄„的影响
分组
剂量
r°ª#®ªp t ≅ §
例数
 ⁄„浓度r
±°²¯#ªp t
正常组 ts v qwu ? s qz|
模型组 | x qzt ? t qswul
茶儿茶素 vs ≅ z | w qyz ? s qyxt ovl
茶儿茶素 xs ≅ z | v qy| ? s q{{wl
2 q3 茶儿茶素对脑缺血再灌注后脑组织超微结构
的影响
正常组血脑屏障未见异常 o未见星形胶质细胞
足突水肿 o血管基底膜未见增厚及溶解k图 tl ~模型
组血脑屏障 !星形胶质细胞的足突高度水肿 o有浆膜
破裂 o形成大间隙 o膜降解介质形成泡状结构 ~k图
ul茶儿茶素kxs °ª#®ªp t ≅ z §l组血脑屏障 !树突间
水肿均较模型组轻k图 vl ∀
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∂ ²¯ quy o‘²qtt
‘²√ qousst
图 t 正常组血脑屏障结构 ≅ tu wxs
图 u 模型组细胞屏障结构 ≅ tu wxs
图 v 绿茶儿茶素组kxs °ª#®ªp t¬³≅ z§血脑屏障结构 ≅ tu wxsl
3 讨论
研究急性脑缺血再灌注动物模型的文献较多 o
各家所得结果不尽相同 o可能与选择的动物或实验
条件不同有关 ∀本文采用同时钳夹迷走神经和双侧
颈总动脉 o目的在于刺激迷走神经引起血压下降 o加
重脑组织的缺血状态 ∀通过比较生化指标和超微结
构的变化 o发现缺血 ys °¬±再灌注 vs °¬±组血清和
脑组织的  ⁄„ 浓度明显高于正常对照组  ⁄„ 浓
度 o且观察到缺血 ys °¬± 再灌注 vs °¬±组海马区
„±±°²°氏角脑组织的血脑屏障的超微结构与正常
对照组比较发生明显改变 ∀这些结果表明该模型脑
缺血再灌注损伤明显 ∀
脑缺血缺氧 o引起高能磷酸化合物耗竭 o依赖能
量的离子泵受损 o造成细胞内 ≤¤u n超载 o可通过游
离脂肪酸 !嘌呤代谢 !‘’ 及多形核白细胞等多种途
径产生氧自由基 o并主要发生在再灌注期≈ts  ∀自由
基可导致体内活性细胞中多种分子氧化 !交联 !变性
或降解 o更主要的是作用于生物膜上的不饱和脂肪
酸 o引发脂质过氧化反应 ∀中枢神经系统内含大量
的膜相结构 o膜磷脂过氧化破坏了膜结构的完整性 o
改变了膜结合酶 o膜通透性增加 !流动性改变 o加之
亚细胞结构的破坏 o使细胞内环境紊乱 o能量衰竭 o
膜功能丧失≈tt  ∀茶儿茶素kvs °ª#®ªp t ≅ z §和 xs
°ª#®ªp t ≅ z §l组均能降低脑缺血再灌注后血清和
脑组织中  ⁄„ 浓度 o电镜结果可以看出茶儿茶素
kxs °ª#®ªp t ≅ z §l组血脑屏障的损伤程度较模型
组轻 o表明其对脑缺血再灌注损伤有改善作用 ∀
我们认为 o茶儿茶素的这种保护作用与其特有
的化学性质和药理作用有关 ∀许多研究表明茶儿茶
素有强的抗氧化性 o对单线态氧 !烷基过氧化自由基
及多种物质产生的羟自由基有强的清除作用 o可对
抗自由基引发的脂质过氧化作用≈tu ∗ ty  ∀另研究表
明茶儿茶素能抑制黄嘌呤氧化酶≈tz  ∀也可通过此
途径减少自由基的生成而保护脑组织 ∀
本实验结果表明 o茶儿茶素对脑缺血再灌注损
伤有保护作用 o与其强的抗氧化性有密切关系 ∀但
脑缺血再灌注损伤的机理较为复杂 o关于茶儿茶素
抗脑缺血再灌注损伤的机理还有待进一步研究 ∀
≈参考文献 
≈t  姜 淘 o戴黎萌 o戴钦舜 q白细胞 !巨噬细胞与缺血再灌注后继
发脑损伤 q基础医学与临床 ot||{ ot{kul }tu q
≈u  陈卫军 q茶多酚药效研究概况 q中草药 ot||v ouwk|l }w|y q
≈v  童小麟 q儿茶素的理化性质 !生物学作用及其开发应用研究进
展 q茶叶通讯 ot|{| ow }vz q
≈w  ¤·¶∏°²·² ‘oŽ²«µ¬× o’®∏¶«¬² Žo¨·¤¯ qŒ±«¬¥¬·²µ¼ ∞©©¨ ¦·¶²©
× ¤¨ ≤¤·¨¦«¬±¶o …¯¤¦® × ¤¨ ∞¬·µ¤¦·¤±§ ’²¯²±ª × ¤¨ ∞¬·µ¤¦·²±
‹ ³¨¤·²¦¤µ¦¬±²ª¨ ±¶¬¶¬± • ¤·¶q³±  ≤¤±¦¨µot||y o{zktsl }tsvw q
≈x  Ž²±² ≥ o≥«¬±¦«¬Žo• ¤®¤¥¤¼¤¶«¬Žo¨·¤¯ q• ¨¯¤·¬²± ²© Šµ¨ ±¨ × ¤¨
≤²±¶∏°³·¬²± ·² ≥ µ¨∏° ¬³¬§¶ ¤±§ ¬³²³µ²·¨¬±¶ ¬± ¤³¤±¨ ¤¶¨
 ±¨ q ∞³¬§¨ °¬²¯ ot||y oykvl }tu{ q
≈y  ¤µ·¶∏² ‘o≠¤±¤§¤Žo≠¤±¤¶«¬·¤Žo¨·¤¯ qŒ±«¬¥¬·²µ¼ ∞©©¨ ¦·²© × ¤¨
°²¯¼³«¨ ±²¯²± ‹¬¶·¤°¬±¨ ¤±§ ¨∏®²·µ¬¨±¨ …w • ¨¯ ¤¨¶¨ ƒµ²° • ¤·
° µ¨¬·²±¨ ¤¯ ∞¬∏§¤·¨¶≤¨¯ ¶¯qŒ± ∂¬·µ² ≤¨¯¯ ⁄¨ √ …¬²¯ „±¬° ot||y ovu
kyl }vws q
≈z  郭玉璞 o严微瑾 o杨蜀莲 o等 q急性脑缺血超微结构观察大鼠颈
动脉结扎后病理改变 q中国科学院学报 ot||s otukul }txs q
≈{  曹秉振 o张福州 o郭述苏 o等 q血糖水平对大鼠急性脑缺血电镜
酶细胞化学及超微结构的影响 q中国神经精神疾病杂志 o
t||u ot{kwl }t|v q
≈|  徐叔云 o卞如濂 o陈 修 q药理学实验方法 q第二版 q北京 }人民
卫生出版社 ot||t q|vy q
≈ts  •¬¦«¤µ§ ×µ¤¼¶·°¤±o¨©©µ¨¼ • Ž¬µ¶¦«o• ¤¼°²±§ ≤ Ž²¨ «¯ µ¨q
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¤±§ • ³¨¨ µ©∏¶¬²±q „³³¯ °«¼¶¬²¯ ot||t oztkwl }tt{x q
≈tt  李 叶 o潘延甫 q自由基及其在脑缺血时的损害作用 q临床医
学 ot||x otxkwl }v{ q
≈tu  韩永晶 o吴小岚 o钱 进 o等 q茶儿茶素抗小鼠脑 !肝及肾脂质
过氧化作用 q中草药 ot||u ouvk|l }wzz q
≈tv  何 冰 o陈小夏 q茶多酚清除氧自由基及抑制脂质过氧化反
应的体外实验 q中国药理学通报 ot||{ otwkvl }uzs q
≈tw  Š∏² ± o«¤² …o≥«¨ ± ≥ o¨·¤¯ q∞≥• ≥·∏§¼ ²± ·«¨ ≥·µ∏¦·∏µ¨2„±2
·¬²¬¬§¤±· „¦·¬√¬·¼ • ¨¯¤·¬²±¶«¬³ ²© × ¤¨ ≤¤·¨¦«¬±¶ ¤±§
׫¨¬µ¨³¬° µ¨¶q…¬²¦«¨ ° …¬²³«¼¶„¦·¤ot||| otwuzktl }tv q
≈tx  ¤®¤²  oפ®¬² ≥ o’±² Žq„ ®¯·¯° µ¨²¬¼¯ • ¤§¬¦¤¯2≥¦¤√ ±¨ª¬±ª „¦2
·¬√¬·¼ ²© ≤¤·¨¦«¬±¶q°«¼·²¦«¨ °¬¶·µ¼ ot||{ ow|k{l }uvz| q
≈ty  吴元德 o邱 琦 o俞志宏 o等 q绿茶提取物及其他抗氧化剂清除
单线态氧作用比较 q基础医学与临床 ot||v otvktl }yv q
≈tz  „∏¦¤°³oŠ¤¶³¤µ„ o‹¤µ¤ ≠ o¨·¤¯ qŒ±«¬¥¬·¬²± ²© ÷¤±·«¬±¨ ’¬¬2
§¤¶¨ ¥¼ ≤¤·¨¦«¬±¶©µ²° × ¤¨q„±·¬¦¤±¦¨µ • ¶¨ot||z otz ky⁄l }
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Τηε Προτεχτιϖε Εφφεχτσ οφ Τεα Χατεχηινσ ον τηεΙνϕυρψ
οφ Χερεβραλ Ισχηεµια ανδ Ρεπερφυσιον ιν Ρατσ
ƒ„‘Š ƒ¤±ªt o ‹ „‘ ≠²±ª2­¬±ªu o≤ ˜Œ «¬2 ¬´±ªu
kt q≥¦«²²¯ ²© ≤«¨ °¬¦¤¯ ∞±ª¬±¨ µ¨¬±ª ׬¤±­¬± ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ׬¤±­¬± vssszu o≤«¬±¤~
u q°«¤µ°¤¦²¯²ª¬¦¤¯ ⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© ׬¤±­¬±  §¨¬¦¤¯ ˜±¬√ µ¨¶¬·¼ o ׬¤±­¬± vssszs o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] οβϕεχτ : × «¨ ³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨ ¦·¶²©·¨¤¦¤·¨¦«¬±¶²±·«¨ ¬±­∏µ¼ ²©¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏2
¶¬²±¬±µ¤·¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨ º¬·«µ¤·¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏¶¬²± °²§¨¯³µ²§∏¦¨§¥¼ ¥¬¯¤·¨µ¤¯ ¼¯ ¦¯¤°³¬±ª·«¨
¦²°°²± ¦¤µ²·¬§¤µ·¨µ¬¨¶¤±§√¤ª∏¶±¨ µ√ ¶¨©²µys °¬± ¤±§·«¨ ± µ¨ °²√¬±ª·«¨ ²¦¦¯∏¶¬²±©²µvs °¬±qΜετηοδ : • ¬¶2
·¤µµ¤·¶º µ¨¨ §¬√¬§¨§¬±·²±²µ°¤¯ ¦²±·µ²¯ ªµ²∏³o°²§¨¯ªµ²∏³¤±§¦¤·¨¦«¬± ªµ²∏³kvs °ª#®ªp t ¤±§xs °ª#®ªp t
¬³q §´≅ z §l q׫¨ ¦«¤±ª¨¶²©¥¬²¦«¨ °¬¦¤¯ ¬±§¬¦¤·¬²±¶¤±§³¤·«²¯²ª¼ º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨qΡεσυλτ : ׫¨ µ¨¶∏¯·¶³µ¨¶¨±·2
§¨·«¤··«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©  ⁄„ ¬± ¥µ¤¬±·¬¶¶∏¨ ¤±§¶¨µ∏° ²© °²§¨¯µ¤·¶º µ¨¨ «¬ª«¨µ·«¤±·«¤·²©¦²±·µ²¯ µ¤·¶k Π
 s qstl q≤²°³¤µ¨§ º¬·« °²§¨¯ ªµ²∏³o·¨¤¦¤·¨¦«¬± ªµ²∏³¶¦²∏¯§ §¨¦µ¨¤¶¨ ·«¨ ¦²±¦¨±·µ¤·¬²± ²©  ⁄„ ¬± ¥µ¤¬±
·¬¶¶∏¨ ¤±§¶¨µ∏° o¤±§·¨¤¦¤·¨¦«¬± ªµ²∏³kxs °ª#®ªp t¬³q §´≅ z §l ¦²∏¯§¬°³µ²√¨·«¨ ¬±­∏µ¼ ²©¥¯²²§¥µ¤¬± ¥¤µ2
µ¬¨µqΧονχλυσιον : × ¤¨¦¤·¨¦«¬±¶«¤√¨³µ²·¨¦·¬√¨ ©¨©¨ ¦·¶²±·«¨ ¬±­∏µ¼ ²©¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏¶¬²±¬±µ¤·¶q
[ Κεψ ωορδσ] ·¨¤¦¤·¨¦«¬±¶~¦¨µ¨¥µ¤¯ ¬¶¦«¨ °¬¤¤±§µ¨³¨µ©∏¶¬²±~°¤¯²±§¬¤¯§¨ «¼§¨
≈责任编辑 方文贤 
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∆ετερµινατιον οφ Χοντεντ οφ Νοδακενιν ιν
Νοτοπτερψγιυµ ινχισυµ Τινγ φροµ ∆ιφφερεντ Σουρχε βψ ΗΠΛΧ
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ §¨ √¨¯²³¤ ° ·¨«²§©²µ·«¨ §¨·¨µ°¬±¤·¬²± ²©±²§¤®¨ ±¬±¬± Ν . ινχισυ µ . Μετηοδ :
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µ¤±ª¨ ²©s qty ∗ s qywΛªq׫¨ ¤√ µ¨¤ª¨ µ¨¦²√ µ¨¼ º¤¶|| qz h oΡΣ∆ t qt h qΧονχλυσιον : ׫¨ ° ·¨«²§¬¶¤³³µ²³µ¬¤·¨
©²µ·«¨ §¨·¨°¬±¤·¬²± ²©±²§¤®¨ ±¬±q
[ Κεψ ωορδσ] Νοτοπτερψγιυ µ ινχισυ µ ~ ‹°≤ ~±²§¤®¨ ±¬±~¦²±·¨±·²©±²§¤®¨ ±¬±
≈责任编辑 袁桂京 
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