全 文 ：去头水蛭醇提物抗血栓作用的研究 3
谭毓治 k广东药学院药理教研室 广州 xtsuuwl
徐彭 k江西中医学院药理教研室 南昌 vvsssyl
张孝友 赵诗云 k江西省中医药研究所 南昌 vvsszzl
摘要 目的 }研究去头水蛭醇提物的抗血栓作用及可能机理 ∀方法 }采用胶原蛋白2肾上腺素诱导
的小鼠体内血栓和大鼠动2静脉旁路血栓形成的方法 o观察去头水蛭醇提物的抗血栓作用 ~采用荧光偏
振技术观察去头水蛭醇提物对红细细胞膜脂和血小板膜脂流动性的影响 ∀结果 }去头水蛭醇提物对胶
原蛋白2肾上腺素诱导的小鼠体内血栓和大鼠动2静脉旁路血栓形成有显著抑制作用 o并能提高红细胞膜
和血小板膜流动性 ∀结论 }去头水蛭醇提物有抗血栓作用 o其机理可能与其提高红细胞膜脂和血小板膜
脂流动性有关 ∀去头水蛭体部存在抗血栓成分 ∀
关键词 去头水蛭醇提物 抗血栓 红细胞膜流动性 血小板膜流动性
水蛭为常用活血化瘀中药 o具有破血 !逐
瘀 !通经之功能 o在中医临床广泛用于脑血栓形
成 !冠心病 !脑水肿等的治疗 ∀关于水蛭活血化
瘀作用的物质基础 o研究较多的且较深入的是
水蛭素 ∀如它的抗血栓 !抗凝血活性 !化学结构
及采用基因工程生产水蛭素等都有大量的研
究 ∀Œq° q…¤¶®²√¤等比较研究了从水蛭头部和
去头后体部及整体水蛭中提取水蛭素 o他们发
现去头后的体部得到的是伪水蛭素 o其化学行
为与水蛭素相同 o但无抗凝活性≈t  ∀本文研究
了去头水蛭醇提物的抗血栓作用 o目的在于探
寻水蛭中新的抗血栓物质 o从而更全面 !更深刻
地认识水蛭活血化瘀作用 o为更合理地开发利
用水蛭这一传统中药奠定基础 ∀
1 实验材料
1 q1 去头水蛭醇提物的制备k以下称 / 醇提
物0l取鲜活水蛭 o购于江西九江湖滨地区 o经鉴
定k江西省中医药研究所周光雄助理研究员l为
宽体金线蛭 Ωηιτµ ανια πιγρα • «¬·°¤±q∀去
头 o湿重 xssªo加生理盐水 xss °¯ o用组织捣碎
机匀浆 oxsssµ#°¬±p t离心 us°¬±o取上清液 o加
乙醇至含醇量为 zx h o冷置沉淀 o滤过 o取滤液
减压浓缩k  ys ε l ∀浓缩液冷冻干燥 ∀实验时
用生理盐水配成适当浓度 ∀备用 ∀
1 q2 实验动物 家兔 ! • ¬¶·¤µ大鼠 !昆明种小
鼠均购自江西省医学实验动物中心 ∀
1 q3 仪器 • ƒ2xws荧光分光光度计 o日本岛
津制作所产品 ∀
1 q4 试剂 胶原蛋白 o≥¬ª°¤产品 ~⁄°‹kt oy2
二苯基2t ov ox己三烯l oƒ ¤¯¦®产品 ∀
2 方法和结果
2 q1 醇提物对小鼠体内血栓形成的抑制作用
取 us ∗ uxª雄性小鼠 ys只 o随机分成 v组 o
对照组¬³同体积的生理盐水 o实验组分别¬³醇
提物 ux otu qx°ª#®ªp t o给药 s qx«后 o尾静脉注
射胶原蛋白kuuxΛªr只l与肾上腺素k|Λªr只l的
混合诱导剂 o注射后观察 x°¬±小鼠死亡数 o并
计算药物对小鼠脑血栓的保护率≈u  ∀结果见表
t ∀
表 t 醇提物对胶原蛋白2
肾上腺素诱导的小鼠体内血栓形成的影响
组别 剂量 °ª#®ªp t x°¬±死亡数 保护率 h
生理盐水 t{
醇提物 tu qx tstl ww qw
ux qs zul yt qt
注 }ν € us 与生理盐水比较 tl Π s .sx u) Π s qst
表 t结果表明 }醇提物对胶原蛋白2肾上腺
素诱导的小鼠体内血栓所致死亡有显著的保护
作用 ∀
2 q2 醇提物对大鼠动2静脉旁路形成血栓的影
响 取 vxs ∗ vzsª • ¬¶·¤µ大鼠 o雌雄各半 o随机
3 国家自然科学基金资助项目 ‘²qv|vzs{vv
#uuy# 中国中药杂志 t|||年第 uw卷第 ts期
分为 v组 o对照组¬³生理盐水 o实验组分别 ¬³
醇提物 ux otu qx°ª#®ªp t ovs°¬±后 o¬³戊巴比
妥钠 s qsxª#®ªp t麻醉 o分离右颈总动脉和左颈
外静脉 ∀在构成旁路的三段聚乙烯管腔的中段
放入一根 x¦°长的 w号手术线 ~将肝素生理盐
水kxs˜# °¯ p tl充满聚乙烯管 o分别插入左颈外
静脉和右颈总动脉 o放开血流 otx°¬±后 o中断
血流 o迅速取出丝线称重 o总重量减去丝线重即
为血栓湿重≈u  ∀结果见表 u ∀
表 u 醇提物对大鼠动2静脉旁路血栓形成的影响
组别 剂量 °ª#®ªp t 血栓湿重 °ª 血栓形成抑制率 h
生理盐水 uy qs ? u qu
醇提物 tu qx ut qu ? v qstl t{ qx
ux qs t{ qv ? v qxul u| qy
注 }≠ ξ ? σ  ν € ts k表 v o表 w同l
表 u说明 o醇提物对大鼠颈总动脉2颈外静
脉旁路血流血栓形成有显著抑制作用 ∀
2 q3 醇提物对兔红细胞膜脂流动性的影响
红细胞膜脂流动性采用荧光偏振技术测
定≈v ow  o以 ⁄°‹ 为荧光探剂 o红细胞膜保温标
记前 o各管分别加入生理盐水和醇提物 o加
⁄°‹标记液后 ovz ε 保温 vs°¬±o保温毕 o离心
弃去标记残液 o用磷酸盐缓冲液洗涤红细胞两
次 o最后用磷酸盐缓冲液悬浮红细胞 o测定其荧
光偏振度k³l o计算微粘度kΓl o结果见表 v ∀
表 v 醇提物对兔红细胞膜脂流动性的影响
组别
醇提物终浓度
°ª# °¯ p t
荧光偏振度
π
微粘度
Γ
生理盐水 s quyx ? s qstx u qzwv ? s qvxw
醇提物 t qs s quw{ ? s qstwul u qvxy ? s qu{tul
t qx s quwt ? s qstyul u quut ? s qvszul
表 v说明 o醇提物在 t qs ot qx°ª# °¯ p t的体
外实验中 o能显著降低兔红细胞膜脂荧光偏振
度和微粘度 o即能显著增加红细胞膜脂的流动
性 ∀
2 q4 醇提物对兔血小板膜脂流动性的影响
参照文献方法≈x 研究醇提物对兔血小板膜脂流
动性的影响 o结果见表 w ∀
表 w说明 o醇提物在 t qs ot qx°ª# °¯ p t时 o
体外实验表明对兔血小板膜脂的荧光偏振度和
微粘度有显著降低作用 ∀即能显著增大血小板
膜脂流动性 ∀
表 w 醇提物对兔血小板膜脂流动性的影响
组别
醇提物终浓度
°ª# °¯ p t
荧光偏振度
π
微粘度
Γ
生理盐水 s qt|{ ? s qstv t qxt| ? s qty{
醇提物 t qs s qtus ? s qstsul s qzs{ ? s qszxul
t qx s qtty ? s qsttul s qyzz ? s qs{tul
3 讨论
实验结果表明 o去头水蛭醇提物在实验所
用剂量范围内 o对胶原蛋白2肾上腺素诱导的小
鼠体内血栓和大鼠动2静脉旁路血栓形成有显
著抑制作用 ∀它的抗血栓作用可能与提高红细
胞膜脂和血小板膜脂流动性有关 ∀
有关文献资料表明≈y  o血瘀证动物模型和
血瘀证患者红细胞膜脂流动性下降 ~当血瘀证
改善时 o红细胞膜脂流动性增大 o趋向正常 ∀血
小板的粘附 !聚集与释放反应 o与血小板膜脂流
动性密切相关 ∀去头水蛭醇提物提高红细胞膜
脂和血小板膜脂流动性 o可能是其活血化瘀作
用的部分机理 ∀
去头水蛭醇提物的抗血栓作用 o表明在水
蛭中 o除唾液中所含水蛭素等活性成分外 o尚含
有其他的抗血栓成分有待进一步认识 ∀水蛭在
炮制过程中 o根据其化学性质 o水蛭素破坏殆
尽 o而临床应用中却有较好的活血化瘀作用 o这
一现象也与我们的研究相吻合 ∀对去头水蛭醇
提物中的具体化学成分有待进一步阐明 ∀
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