全 文 :川乌配伍白芍对炎症因子及自由基的影响
秦 林t o彭 欣t o张少华t o王 玲t o刘 峰u
kt q山东中医药大学 o山东 济南 uxsstw ~ u q山东大学 o山东 济南 uxstssl
≈摘要 目的 }研究川乌与白芍配伍前后对炎症因子和自由基的作用 ∀方法 }制备乌2芍配伍前后水煎液 o采用
大 !小鼠炎症模型和 ≥⁄以及 ° 检测方法进行观察比较 ∀结果 }乌2芍配伍能增强各单味药尤其是川乌 的抗炎
作用 o降低炎症过程中毛细血管通透性和炎症介质 °∞u的含量 ~减少川乌所致的血浆及肝组织 ° 过量 ∀结论 }
本实验所显示的抑制炎症因子和清除自由基的结果 o可能是二药配伍能增强单味药尤其是川乌抗炎祛风湿的重要
机理之一 ∀
≈关键词 川乌 ~白芍 ~配伍 ~炎症因子 ~自由基
≈中图分类号 u{| qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukussslsy2svzs2sw
川乌与白芍k以下简称乌2芍l是中医治疗风湿
痹证常用的传统药对 o也是现代治疗风湿性关节炎 !
类风湿性关节炎等疾病的常用配伍药对≈t ∀笔者在
研究了二药配伍能增强镇痛作用 !延长镇痛持续时
间和提高对大鼠佐剂关节炎抑制作用的基础上≈u o
通过观察二药配伍前后对炎症因子和自由基的影
响 o进一步分析乌2芍配伍的抗炎作用机理 ∀
1 材料≈u
消炎痛 o山东省潍坊制药二厂 ~联大茴香胺 o上
海试剂厂 ~标准 ≥⁄o长沙生物化学制品厂 ~标准
° o德国 ƒ¬∏®¤公司 ~硫代巴比妥酸 o上海试剂二
厂 ∀
动物 小白鼠 o昆明种 o体重 t{ ∗ uu ª∀大白鼠
为体重ktys ? usl ª的 • ¬¶·¤µ系 ∀均由山东省医学
科学院动物中心提供 ∀
2 方法和结果
2 q1 抑制大鼠角叉菜胶性足跖肿胀 取雄性大鼠
zs只 o随机分为 z组 o即 }≠ 生理盐水组 ~ 消炎痛
组 ~≈川乌组 ~…白芍组 ~ 乌2芍 tΒt组 ~¡乌2芍 tΒ
u组 ~¢乌2芍 uΒt组 ∀分别每天以 u °¯ #kuss ªlp t
等容量灌胃 t次 o连续给药 x §o于末次给药后 vs
°¬±o每鼠左后足跖皮下注射 t h角叉菜胶 s qt °¯ o
分别于注射后不同时间测量左后足跖周长 o并根据
大鼠注射前后足跖周长差值计算足跖肿胀率k见表
tl ∀
≈基金项目 国家自然科学基金资助项目kv|yzs{y{l
≈收稿日期 t|||2sw2uz
实验结果显示 o白芍组和乌2芍 tΒt otΒu组均有
明显的抑制作用 o并明显强于川乌组 ∀而且 o乌2芍
tΒt otΒu配伍组在致炎后 y «o抗炎作用较白芍组 !
川乌组显著增强 ∀另外配伍组的协同作用与配伍比
例有一定的关系 ∀
2 q2 抑制大鼠甲醛性足跖肿胀 取大鼠 yw只 o雌
雄各半 o随机分为 y组 ∀即 }≠ 生理盐水组 ~ 消炎
痛组 ~≈川乌组 ~…白芍组 ~ 乌2芍 tΒt组 ~¡乌2芍
tΒu组 ∀分别每天以 u °¯ #kuss ªlp t等容量灌胃 t
次 o连续给药 z §∀第 v天给药后 vs °¬±o于每鼠左
足跖皮下注射 u qx h甲醛 s qt °¯ o检测处理方法同
上k见表 ul ∀
结果表明 }在本实验剂量条件下 o各单味给药组
的肿胀抑制作用较弱 o白芍仅在致炎 w{ «后有显著
抑制作用 o并明显强于川乌组 ~川乌也仅在 |y «有
明显作用 ∀而各配伍组于致炎后各个时段均有明显
和非常明显的抑制作用 o并且明显强于各单味药物
组 o尤其是明显强于川乌组 ∀提示二药配伍前后对
甲醛性足跖肿胀的抑制作用有明显差异 ∀
以上大鼠足跖肿胀率按下列公式进行计算 o并
以方差分析 τ检验方法进行统计学处理 ∀
大鼠足跖肿胀率 炎后肿胀值 p炎前肿胀值炎前肿胀值 ≅ tss h
2 q3 抑制大鼠足跖炎症组织释放的 °∞u 量 取
雄性大鼠 zs只 o随机分为 z组 o即 }≠ 生理盐水组 ~
消炎痛组 ~≈ 川乌组 ~…白芍组 ~ 乌2芍 tΒt组 ~
¡乌2芍 tΒu组 ~¢乌2芍 uΒt组 ∀分别每天以 u °¯ #
kuss ªlp t等容量灌胃 t次 o连续给药 x §∀于末次
#szv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
≤«¬±¤²∏µ±¤¯ ²© ≤«¬±¨ ¶¨ ¤·¨µ¬¤ §¨¬¦¤
∂ ²¯ qux o²qy
∏±¨ ousss
给药后 vs °¬±o每鼠左后足跖皮下注射 t h角叉菜
胶 s qt °¯ o致炎 w «后处死大鼠 o在踝关节上 s qx ¦°
处剪下炎性肿胀足 o称重 o生理盐水 x °¯ 浸泡 t «o
取出足爪 o离心浸泡液 o吸取上清液 s qt °¯ o加 s qx
°²¯#pt 2甲醛溶液 u °¯ o在 xs ε 水浴下异构
化 us °¬±o加甲醛溶液 x °¯ o用 ∂2zxw紫外可见分
光光度计于 uz{ ±°处测定其吸收度k⁄l值 ∀以每
克炎性组织相当的吸收度值表示 °∞u 的含量k见
表 vl ∀
表 t 川乌与白芍配伍前后对大鼠角叉菜角足跖肿胀的影响
组别
剂量r
ª#®ª2t
致炎后不同时间足跖肿胀率r h
s qx« u« w« y«
生理盐水 等量 tx qv ? x qy t| qz ? y qt us qv ? z qs uv qz ? | qx
消炎痛 s qt y q| ? v qtul ts qz ? x qsul tu qt ? z qwtl tt qu ? z qtul
川乌 us tt qv ? z qv tz qu ? w q|yl ty qw ? v q|yl ty qu ? x qwtl
白芍 us { qt ? v q{ul x qz ? x qxu owl { qv ? v qsu owl tx qs ? v qwtl
乌2芍 tΒt us w qv ? v qvu ov oxl v q| ? u qvu owl x qz ? w q{u owl | q| ? y q|u ov oxl
乌2芍 tΒu us x qy ? v q|ul y qx ? x qsu owl z qw ? x qvu owl z qx ? x qwu ow oyl
乌2芍 uΒt us ts qz ? z qv ty qv ? x quyl tw qt ? v qyyl tv qt ? z qxtl
注 }≠ ν ts , ξ ? σ;剂量为药物水煎液中川乌用量 (表 u ∗ w同) 与生理盐水组比较 t) Π s .sx u) Π s .st ≈与川乌组比较 v) Π
s .sx w) Π s .st …与白芍组比较 x) Π s .sx y) Π s .stk下表同l
表 u 川乌与白芍配伍前后对大鼠甲醛性足跖肿胀的影响
组别
剂量r
ª#®ª2t
ν
致炎后不同时间足跖肿胀率r h
u« w« y« uw« w{« zu« |y«
生理盐水 等量 tw t| q{ ? w qy ut qw ? w qv uu qx ? x qv uz qv ? | qv uu q| ? w qz tz qz ? w qw us q{ ? x qx
消炎痛 s qt ts tu qx ? z q{tl tx q{ ? v q|ul tz q| ? z qu tz qv ? y qxtl tz qt ? x qw tv qw ? w qytl tt q| ? y qzul
川乌 us tu ut qs ? w qx uv qy ? z qu ux q{ ? y qs uv qz ? y qv ut qx ? v qz tx q{ ? z qw tx qx ? x qstl
白芍 us ts t{ q| ? w qt uu q| ? w q| uw qt ? w qw us q{ ? x qxt tz qv ? w qyt ovl tw qv ? w qz tu qv ? x qsul
乌2芍 tΒt us ts tx qw ? w qxt ovl tx qw ? w qxu ow oyl tx qy ? x qyu ow oyl tz qw ? z q{tl ty qu ? y qvu ovl tt q{ ? x qxtl { q| ? y qzu ovl
乌2芍 tΒu us { ts qv ? v qsu ow oyl t{ qz ? v q{ tt qx ? w qyu ow oyl ty qw ? w q|u ovl ty qy ? x qsu ovl tt qu ? x qsul ts qw ? x qtu ovl
表 v 川乌与白芍配伍前后对大鼠炎性组织中
°∞u含量的影响
组别
剂量r
ª#®ª2t
°∞u含量tl
生理盐水 等量 s quxt ? s qsvv
消炎痛 s qt s qt|w ? s qswtul
川乌 us s quuv ? s qsw{
白芍 us s qus| ? s qsvsul
乌2芍 tΒt us s qt|t ? s qsw{ul
乌2芍 tΒu us s qtzs ? s qswvu ov oxl
乌2芍 uΒt us s quus ? s qsxw
注 }tl吸收度
结果显示 }白芍有明显抑制作用 o川乌未见明显
作用 ∀而配伍后均可提高各单味药的抑制作用 o尤
其是乌2芍 tΒu配伍组有显著意义 ∀另外 o乌2芍配伍
的增效作用也与配伍比例有关 ∀
2 q4 抑制小鼠耳壳二甲苯致肿 取小白鼠 x{只 o
雌雄各半 o随机分为 y组 o分组同 2 q2 ∀分别每天以
s qu °¯ #kus ªlp t等容量灌胃 t次 o连续 w §∀于末次
给药 t «后 o于每鼠右侧耳壳均匀滴二甲苯 s qsx
°¯ o左侧耳壳作对照 o滴药后 w «o剪下耳壳 o用直径 {
°°打孔器取下耳片称重 o左右耳片重量差为肿胀
值 ∀
结果表明 }川乌组无明显作用 o白芍组和乌2芍
tΒt otΒu组均有显著抑制作用k Π s .sx ,s .st) ∀但
配伍前后无明显差异( Π s qsx o表略l ∀
2 q5 抑制小鼠腹腔毛细血管通透性 取雌性小鼠
ys只 o随机分为 y组 o分组同 2 q2 ∀分别每天以 s qv
°¯ #kus ªlp t等容量灌胃 o连续 w §o末次给药后 t «o
静注 t h伊文思蓝 s qt °¯ #tsªp t o同时¬³s qy h醋酸
s qt °¯ #tsªp t ovs °¬±后处死 ∀用 y °¯ 生理盐水冲
洗腹腔 o洗液放置 t «后离心 tx °¬±kvsss µ#
°¬±p tl o于 xws ±°比色 o以吸收度 ⁄值表示伊文
思蓝含量 ∀
#tzv#
第 ux卷第 y期
usss年 y月
中 国 中 药 杂 志
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∂ ²¯ qux o²qy
∏±¨ ousss
结果表明 o乌2芍配伍前后均有明显抑制作用k Π
s .st) ,配伍后也能明显增强各单味药的抑制作用
( Π s qsx os qst o表略l ∀
2 q6 大鼠血浆和肝组织 ° 含量测定 采用莫简
丙二醛 ×
比色法≈v ∀取雄性大鼠 ys只 o按体重
随机分为 y组 o每组 ts只 o分别灌胃给药 o连续 x §o
末次给药后 t «o腹主动脉抽血制备血浆 ~处死大鼠 o
迅速取出肝组织 o置 w ε 生理盐水洗去残血 o滤纸吸
干 ∀取部分组织称重 o制成 ts h 肝匀浆生理盐水
液 o进行 °检测k见表 wl ∀
结果表明 o川乌组血浆和肝组织的 ° 含量均
明显升高 o白芍 ° 无明显变化 ∀而乌2芍配伍后 o
却能明显抑制川乌所造成的 ° 含量的增高 o使之
恢复至正常水平 ∀
2 q7 大鼠红细胞 ≥⁄活性测定 检测方法参照文
献≈w ∀大鼠给药同上 o末次给药后 t«oo腹主动脉取
血 o肝素生理盐水抗凝 ovsssµ#°¬±2t离心 ts°¬±∀用
细胞分离液分离红细胞 o生理盐水洗涤 v次后 o双蒸
馏水定量溶血 o以光学扩散法测定 ≥⁄活性k见表
wl ∀
表 w 川乌配伍白芍对大鼠 ° 含量和 ≥⁄活性的影响
组别
剂量r
ª#®ªp t
血浆 °r
±°²¯# °¯ p t
肝组织 °k湿重lr
±°²¯#ªp t
红细胞 ≥⁄r
∏#ªp t
生理盐水组 等容量 v quyv ? s q|uw t{| q| ? us q| yu qtz ? | qyw
消炎痛组 s qt v qsvv ? s qyu| tzv qs ? u| qs xu qyy ? ts q|y
川乌组 us w qx|{ ? t qs{wul utu q| ? uw qttl |x qwv ? ts qz{ul
白芍组 us v qxsv ? t quuu ust qx ? vw qw |y qxt ? { q{sul
乌2芍ktΒtl us v qwyv ? s qzs|vl t|s qy ? uy qu || qy| ? z q{{ul
乌2芍ktΒul us v qs{t ? s qystwl t{y qs ? u| qsvl |z quu ? y qwyul
结果表明 o给药各组均能明显提高红细胞 ≥⁄
活性 o药物配伍前后无明显差异 ∀
3 讨论
3 q1 抗炎作用 在本文实验条件下 o川乌 !白芍各
单味药均有不同程度的抗炎作用 o与以往文献实验
研究基本一致≈x ∗ z ∀本实验结果提示 o白芍的抗炎
作用强于川乌 ~乌2芍配伍能显著增强各单味药 !尤
其是川乌的抗炎作用 o表明二药配伍有协同作用 ∀
3 q2 对 °∞u 的影响 对于角叉菜胶所致的大鼠
足跖炎症组织释放的 °∞u o白芍有明显的抑制作
用 o川乌未见明显作用 o而配伍后均可提高各单味药
的抑制作用 ∀尤其是乌2芍 tΒu配伍组与白芍组 !川
乌组相比 o有显著性差异 ∀此结果与本文中乌2芍配
伍前后 o抑制大鼠角叉菜胶足跖肿胀的实验结果是
相吻合的 ∀以上结果也说明 o白芍的抗炎作用强于
川乌 o乌2芍配伍组抗炎作用强于单味白芍 !川乌 o与
抑制 °∞u有关 ∀
3 q3 对 °含量的影响 自由基与炎症有极其密
切的关系 o它可以加重和延长炎症过程 ∀本文研究
发现 o对大鼠血浆和肝组织脂质过氧化物k°l含
量的影响 o白芍未见明显作用 o川乌则能显著增加其
含量 ∀与之相反 o乌2芍配伍后能明显降低单味川乌
造成的 ° 含量增加 o使之恢复至正常水平 o与生
理盐水组含量相近 ∀超氧化物歧化酶k≥⁄l可以清
除自由基 o抑制过氧化反应 o参与机体的抗感染免疫
机制 o抑制炎症反应 ∀不仅如此 o有研究报道 ≥⁄
本身即有抗炎作用≈{ o| ∀本文研究中 o乌2芍配伍前
后均能明显增加 ≥⁄活性 o说明配伍前后的抗炎作
用与提高 ≥⁄活性有一定的关系 ∀值得注意的是 o
单味川乌组的血浆 !肝组织 ° 增多 o而红细胞
≥⁄活性增加 o即 ° 含量并未随着 ≥⁄活性的
增高而降低 ∀说明 °增多 o能刺激红细胞 ≥⁄活
性呈代偿性增高 o而脂质过氧化反应并未受到有效
的控制 ∀因此 o川乌虽有一定的抗炎效应 o但作用较
弱 ∀与之相反 o乌2芍配伍组血浆和肝组织的 °含
量与川乌组相比均明显下降 o接近于生理盐水组 o而
其红细胞 ≥⁄活性明显增高 o强于生理盐水组 o说
明乌2芍配伍后 o脂质过氧化反应受到明显的抑制 ∀
因此 o抗炎作用较川乌组明显增强 ∀
综上所述 o乌2芍配伍后能增强各单味药抑制
°∞u的合成 o减少川乌所致的血浆及肝组织中 °
含量增多 o是二药配伍能增强单味药尤其是川乌抗
炎祛风湿作用的重要机理之一 ∀
≈参考文献
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#uzv#
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Ινφλυενχε οφ Μονκσηοοδ Ροοτ2Πεονψ Ροοτ Χοµ βινατιον
ον Ινφλαµ ατιον2ινδυχεδ Αγεντσ ανδ Φρεε Ραδιχαλσ
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©¯¤°°¤·²µ¼ ¤¦·¬²±¶º µ¨¨ ²¥¶¨µ√ §¨qΡεσυλτσ:± ¤± ¬¨³¨µ¬° ±¨·¤¯ µ¤·°²§¨¯ º¬·«¬±©¯¤° §¨³¤º §¨¨ °¤¬±§∏¦¨§¥¼
¦¤µµ¤ª¨ ±¨¬± ²µ©²µ°¤¯§¨ «¼§¨ ¤±§¬±¤ °²∏¶¨ °²§¨¯ º¬·« ¤¨µ¶º¨¯ ¬¯±ª¬±§∏¦¨§¥¼ ¬¼¯ ±¨¨ o·«¨ ¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ©¨2
©¨ ¦·¤³³¨ ¤µ¨§¶·µ²±ª¨µº«¨ ± ·«¨ ·º² §µ∏ª¶º µ¨¨ ∏¶¨§¬± ¦²°¥¬±¤·¬²± o¨¶³¨¦¬¤¯ ¼¯ ¬± ¦²°³¤µ¬¶²± º¬·«·«¨ ∏¶¨ ²©
°²±®¶«²²§µ²²·¤¯²±¨ q׫¨ ¬¨∏§¤·¬²± ²© ¥¯²²§¦¤³¬¯¯¤µ¬¨¶¤±§·«¨ ¦²±·¨±·¶²©¬±©¯¤°°¤·²µ¼ ° §¨¬∏° °∞u º µ¨¨
²¯º µ¨¨§~׫¨ ¤¦·¬√¬·¼ ²© ≥⁄ ¬¨·µ¤¦·¨§©µ²° µ¤·²µ°²∏¶¨ µ¨§ ¥¯²²§¦¨¯¯¶ º¤¶ ±¨«¤±¦¨§o¤±§·«¨ ¶¨µ∏° ° o
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¬± ¦²°¥¬±¤·¬²±qΧονχλυσιον : ׫¨ §µ∏ª¦²°¥¬±¤·¬²± ¬¶ °²µ¨ ©¨©¨ ¦·¬√¨¬± ¬±«¬¥¬·¬±ª¬±©¯¤°°¤·¬²± ¤±§¶¦¤√ ±¨ª¬±ª
©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯¶q
[ Κεψ ωορδσ] °²±®¶«²²§µ²²·~³¨ ²±¼ µ²²·~¦²°¥¬±¤·¬²±~¤±·¬2¬±©¯¤°°¤·¬²±~©µ¨¨µ¤§¬¦¤¯¶
≈责任编辑 古云霞
5中国中药杂志6社主办/首届全国中药材基地建设与中药现代化专题研讨会0在成都举行
由中国中医研究院中药研究所5中国中药杂志6社主办 o四川天乐药业集团 !重庆市中药研究院 !成都中医药大学以及北
京大兴时珍中草药技术研究所 !湖南宏生堂制药有限公司协办的 / 首届全国中药材基地建设与中药现代化专题研讨会0于
usss年 x月 ts ∗ tu日在成都举行 ∀出席这次会议的有科技部农社司邹健强处长 o科技部生命科学技术发展中心肖诗鹰博
士 o国家中医药管理局基础处赵明调研员等国家有关主管部门领导 ∀四川省李进副省长以及四川省科委 !省中医药局等当地
有关部门领导也应邀出席了会议开幕式 ∀参加会议的有来自全国各地科研院所 !大专院校 !制药企业 !药材基地及其有关的
行政管理部门的领导等各方面代表 tws余名 ∀参会论文 {s余篇 o大会交流论文 vs篇 ∀本次会议的特点是抓住了中药材生产
基地建设这一热门问题 o首次以学术探讨和经验交流的形式进行了有益的尝试 o为中药学术界 !制药企业以及有关的行政管
理部门提供了一个很好的交流经验成果 !提出存在问题与共同探讨发展的机会 o因而受到上述各方的高度关注与重视 o收到
了热烈的反响 ∀ 5中国中药杂志6社为配合此次会议 o将在 usss年下半年分别在正刊及增刊上刊登这次会议的优秀论文及入
选参会论文 ∀ k本刊l
#vzv#
第 ux卷第 y期
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中 国 中 药 杂 志
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