全 文 ：1 300～1 000 cm - 1存在一个大的宽高吸收 ,30 %乙
醇洗脱物在此吸收峰形和吸收强度与其他 3 个洗脱
物有明显不同 ,后 3 个乙醇洗脱物吸收峰形和吸收
强度基本相同。在 1 000～400 cm - 1 ,仍然是 30 %
乙醇洗脱物在此吸收峰形和波数上有明显的不同之
处 ,后面 3 个乙醇洗脱物吸收峰形上近乎相同。以
上分析多处表明 ,30 %乙醇洗脱物无论在官能区还
是在指纹区其吸收有明显不同之处 ,表明其成分与
3 个乙醇洗脱物成分上有大的区别。同时 3 个乙醇
洗脱物的整体峰形、吸收峰波数及强度上都近乎相
同 ,说明在成分及其各成分上没有大的区别 ,只是在
颜色上逐渐变深但是差别不大。由此采用 50 %乙
醇作为洗脱剂较好。由此表明 ,通过用不同体积分
数乙醇所得提取物红外谱图的官能区和指纹区以及
整体分析 ,洗脱剂体积分数对提取物有影响 ,其能在
红处谱图上能够得到相应的体现。
3 　结论
不同提取和精制方法提取物中薯蓣皂苷元的量
比较 ,表明采用乙醇回流法提取 ,D2101 大孔吸附树
脂精制产物中薯蓣皂苷元的量最高 ,能够达到很好
的效果。
采用不同体积分数乙醇洗脱 ,50 %乙醇洗脱物
中薯蓣皂苷元的量高、色素少 ,洗脱效果好。
波数/ cm - 1
图 3 　不同洗脱物红外谱图
Fig13 　Infrared spectrum of different eluting substance
　　通过 F TIR 对不同提取方法、精制方法和不同
体积分数乙醇洗脱所得提取物红外图谱分析 ,说明
不同工艺所得产物的差异能够在红外图谱上得到很
好的呈现。
参考文献 :
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HPLC法测定降酶片中白藜芦醇和虎杖苷
刘德茂1 ,史德胜2 3
(11 大连公安医院 ,辽宁 大连 　116011 ; 21 天津丹溪国药研究所 ,天津 　300061)
　　降酶片由虎杖、白花舌蛇草等中药组成。虎杖
为蓼科属多年生草本植物 ,药用部位为根及根茎。
虎杖始载于《名医别录》,列为中品 ,具有祛风利湿、
散瘀定痛、止咳化痰等功效 ;用于关节痹痛 ,湿热黄
疸 ,经闭 ,徵瘕 ,水火烫伤 ,跌扑损伤 ,痈肿疮毒 ,咳嗽
痰多。虎杖中主要含蒽醌类、二苯乙烯苷类、黄酮类
等多酚性化合物。本实验采用 HPL C 法测定其中
的白藜芦醇和虎杖苷 ,方法专属性强 ,操作简便 ,精
密度高 ,重现性好 ,能更好地控制降酶片的质量 ,为
降酶片的质量标准的制定提供依据。
1 　仪器与试剂
　　UV2000 高效液相色谱仪 ; SP8800ternary
HPL C Pump ( Spect ra2Physics ) ; 虎 杖 苷 ( 批 号
115752200301) 、白藜芦醇对照品 (批号 1115352
200301)由中国药品生物制品检定所提供。降酶片
由大 连 公 安 医 院 制 剂 室 提 供 , 批 号 060820、
060821、060822。
2 　方法与结果
211 　色谱条件 : Irregular C18 柱 ( 250 mm ×416
mm ,5μm) ;流动相 :乙腈2水 (25 ∶75) ;体积流量 :
110 mL/ min ;柱温 :35 ℃;检测波长 :306 nm ;进样
量 :20μL 。理论塔板数以虎杖苷峰计不低于 3 000 ,
以白藜芦醇峰计不低于 3 000。
212 　溶液的制备
·6141· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 9 期 2009 年 9 月
3 收稿日期 :2008210208　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
21211 　对照品溶液的制备 :精密称取虎杖苷对照品
8104 mg 置 100 mL 量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至
刻度 ,摇匀 ,即得质量浓度为 8014μg/ mL 虎杖苷对
照品溶液。精密称取白藜芦醇对照品 6112 mg 置
100 mL 量瓶中 ,加甲醇溶解并稀释至刻度 ,摇匀 ,即
得质量浓度为 6112μg/ mL 白藜芦醇对照品溶液。
21212 　供试品溶液的制备 :取降酶片 20 片 ,研匀 ,
取 50 mg ,精密称定 ,置 50 mL 量瓶中 ,加甲醇适量 ,
超声 30 min ,加甲醇稀释至刻度 ,摇匀。精密量取
110 mL 置 10 mL 量瓶中 ,加甲醇稀释至刻度 ,摇
匀 ,0145μm 微孔滤膜滤过 ,取续滤液 ,备用。
213 　标准曲线的制备 :精密量取 8014μg/ mL 虎杖
苷对照品溶液 110、210、310、410、510 mL 于 10 mL
量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,0145μm 微孔滤膜滤
过 ,取续滤液 ,按上述色谱条件测定峰面积。以虎杖
苷的质量浓度为横坐标 ,其峰面积为纵坐标 ,绘制标
准曲线 ,计算得其回归方程 Y = 38 364 300 X -
5 19411 , r = 01999 9。结果表明虎杖苷在8105～
40120μg/ mL 与峰面积呈良好的线性关系。
　　精密量取 6112 μg/ mL 白藜芦醇对照品溶液
110、210、310、410、510 mL 于 10 mL 量瓶中 ,加甲
醇至刻度 ,摇匀 ,0145μm 微孔滤膜滤过 ,取续滤液 ,
按上述色谱条件测定峰面积值。以白藜芦醇的质量
浓度为横坐标 ,其峰面积为纵坐标 ,绘制标准曲线。
计算得其回归方程 Y = 85 777 166 X - 2 272148 ,
r = 01999 9。结果表明白藜芦醇在 6112～30160
μg/ mL与峰面积呈良好的线性关系。
214 　干扰试验 :精密称取按制备工艺制备的缺虎杖
的阴性样品 1617 mg ,制备供试品溶液 ,进样测定 ,
结果阴性样品的色谱中 ,在虎杖苷、白藜芦醇峰处无
峰 ,表明阴性样品不干扰测定。见图 1。
图 1 　虎杖苷对照品( A) 、白藜芦醇对照品( B) 、降酶片
( C)和阴性对照( D)的色谱图
Fig11 　HPLC Chromatograms of peceid reference sub2
stance ( A) , resveratol reference substance ( B) ,
Jiangmei Tablets ( C) , and negative sample ( D)
21 5 　精密度试验 :取241 12μg/ mL虎杖苷对照品
溶液 ,按上述色谱条件 ,重复进样6次 ,测定峰面积
值 ,计算得其 RSD 为 0136 %。取 18136μg/ mL 白
藜芦醇对照品溶液 ,按上述色谱条件 ,重复进样 6
次 ,测定峰面积值 ,计算得其 RSD 为 0187 %。
216 　稳定性试验 :取批号为 060820 样品 ,制备供试
品溶液 ,按上述色谱条件分别于 0、2、4、6、8 h 进样 ,
测定 ,结果虎杖苷峰面积的 RSD 为 0107 % ,白藜芦
醇峰面积的 RSD 为 0156 % ,表明本品在 8 h 内测得
的结果是稳定的。
217 　重现性试验 :取批号为 060820 样品 ,制备供试
品溶液 ,按上述色谱条件测定 ,计算虎杖苷、白藜芦
醇的质量分数 ,计算得虎杖苷质量分数的 RSD 为
1105 % ,白藜芦醇质量分数的 RSD 为 1142 %。
218 　回收率试验 :取批号为 060821 样品 ,精密称取
25 mg ,重复 5 份 ,分别加虎杖苷对照品 6105 mg ,白
藜芦醇对照品 4165 mg ,制备供试品溶液 ,按上述色
谱条件测定 ,计算回收率。结果虎杖苷的平均回收
率为 100144 % ,RSD 为 1167 % ;白藜芦醇的平均回
收率为 101102 % ,RSD 为 1186 %。
219 　样品测定 :取 3 批样品 ,每批平行 3 份 ,制备供
试品溶液 ,按上述色谱条件测定。外标法计算 ,结果
见表 1。
表 1 　降酶片中虎杖苷和白藜芦醇的测定结果( n = 3)
Table 1 　Determination of peceid and resveratol
in Jiangmei Tablets ( n = 3)
批　号
虎杖苷
质量分数/
(mg ·g - 1)
RSD/ %
白藜芦醇
质量分数/
(mg ·g - 1)
RSD/ %
060820 241 25 01 49 18162 1118
060821 241 48 01 32 18157 0154
060822 241 23 01 30 19108 0136
3 　讨论
　　一般白藜芦醇和虎杖苷都能同时存在于植物
中 ,两者在一定外界条件下会相互转化。目前的研
究表明反式异构体是其活性成分 ,现一般测定反式
白藜芦醇和虎杖苷的总量作为评价标准。在葡萄及
葡萄酒中同时发现了 4 种异构体 ,而目前虎杖中的
顺式白藜芦醇及其苷鲜见报道。因此用反式白藜芦
醇及虎杖苷为指标性成分评价虎杖质量是很有必要
且合理的。
　　本实验选用甲醇超声提取 30 min 为最佳提取方
式 ,流动相为乙腈2水 (25 ∶75) ,检测波长 306 nm ,体
积流量为 110 mL/ min ,柱温 35 ℃,同时测定虎杖中
白藜芦醇和虎杖苷 ,分离度好 ,杂质峰干扰少 ,完全出
峰时间在 25 min 内。该方法快速、准确、可靠。
·7141·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 9 期 2009 年 9 月