全 文 ：© 1994-2010 China Academic Journal Electronic Publishing House. All rights reserved. http://www.cnki.net
参考文献:
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川芎油的气相色谱指纹图谱研究①
李秋怡, 宋 恬, 干国平, 王光忠, 刘焱文
(湖北中医学院, 湖北 武汉 430061)
摘 要: 目的 建立川芎油气相色谱指纹图谱的研究方法, 以控制其质量。方法 进样口温度为 250 ℃, 检测器温
度为 250 ℃, 载气为氮气, 体积流量为 2 mL öm in, 采用程序升温对 10 批川芎油的气相色谱进行分析, 并采用 GC2
M S 联用技术鉴定其指纹特征峰, 并对指纹图谱进行相似度分析。结果 60 m in 内川芎油成分出峰完全。建立的川
芎油指纹图谱共标定了 13 个特征峰, 相似度高。结论 本方法精密度、重现性、稳定性好, 油中各成分分离较好, 所
建立的指纹图谱可作为川芎油的质量控制依据。
关键词: 川芎油; 气相色谱; 指纹图谱
中图分类号: R 286102 文献标识码: A 文章编号: 0253- 2670 (2008) 02- 0206- 03
GC F ingerpr in ts of L igus ticum chuanx iong essen tia l o il
L I Q iu2yi, SON G T ian, GAN Guo2p ing, W AN G Guang2zhong, L IU Yan2w en
(H ubei Co llege of T radit ional Ch inese M edicine, W uhan 430061, Ch ina)
Abstract: Objective To estab lish the m ethod of the GC fingerp rin ts fo r L ig usticum chuanx iong es2
sen t ia l o il and its quality con tro l1 M ethods T he temperatu re a t bo th feed in let and detecto r w as 250℃,
the carrier gas w as n it rogen, and the flow rate w as 2 mL öm in. GC of the essen t ia l o il in ten batches of L 1
chuanx iong w as analyzed by adop t ing temp ratu re p rogramm er and the fingerp rin t peak s w ere iden t if ied by
GC2M S1 Results To set up the GC fingerp rin ts fo r L 1 chuanx iong essen t ia l o il, 13 peak s w ere m arked
ou t a ltogether and the GC fingerp rin ts w ere analyzed by sim ilarity analysis1 Conclusion T he m ethod is of
h igh degree of p resion, rep roducib ility, and stab ility1 T he reso lving of each componen t in the essen t ia l o il
is good1 T he estab lished fingerp rin ts cou ld be u sed as one of the quality con tro l index fo r L 1 chuanx iong
essen t ia l o il1
Key words: L ig usticum chuanx iong Ho rt1 essen t ia l o il; GC; fingerp rin t
川芎为伞形科藁本属植物川芎 L ig usticum
chuanx iong Ho rt1 的干燥根茎, 具有行气活血, 祛风
止痛之功效。川芎油为川芎的主要有效部位, 含有藁本
内酯、阿魏酸、苯酞类等, 具有抑制血小板聚集, 降低血
小板表面活性, 增加冠状动脉流量等作用[1, 2 ]。在对不
同来源川芎样品的主要化学成分比较分析的基础上,
本实验采用 GC 法对其指纹图谱进行研究, 以期为川
芎油的质量标准的建立及其质量控制提供依据。
1 仪器与试药
HA —221—40—11—C 型超临界 CO 2 萃取装
置 (江苏南通华安公司) , 日本岛津 GC 14C 型气相
色谱仪, 氢焰离离子化检测器 (F ID ) , CLA SS GC10
色谱工作站。
阿魏酸对照品 (批号 073329910) 由中国药品生
物制品检定所提供, 试剂均为分析纯。
川芎药材共 10 批, 分别购自全国各地, 经湖北
中医学院中药鉴定教研室吴和珍博士鉴定均为川芎
L 1 chuanx iong Ho rt1 的干燥根茎。
·602· 中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
① 收稿日期: 2007206204
基金项目: 武汉市科技局专项资金资助项目 (20056005130001)
作者简介: 李秋怡 (1982—) , 男, 湖北随州人, 湖北中医学院硕士研究生在读, 研究方向为中药及其制剂有效成分的研究。
T el: (027) 61044945 E2m ail: lqyxyx2001@ 1631com
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2 方法与结果
211 供试品溶液的制备: 取川芎饮片, 粉碎, 过 20
目筛, 称取药粉 300 g, 置于超临界CO 2 萃取装置中
进行萃取, 压力 35 M Pa, 温度 50 ℃, 时间 2 h, 收集
萃取物, 得红棕色透明川芎油。精密称取 015 g 置 10
mL 量瓶中, 加醋酸乙酯至刻度, 摇匀, 即得。
212 气相色谱条件: DB W A X 石英毛细管色谱柱
(30 m ×0132 mm ×0125 Λm ) ; 柱温升温程序: 80 ℃以
10 ℃öm in 升至200 ℃, 再以2 ℃öm in 升至220 ℃, 保
持 40 m in; 进样口温度: 250 ℃; F ID 温度 250 ℃; 载
气为高纯度氮气, 体积流量: 2 mL öm in; 柱前压为 50
kPa; 分流比为 10∶1; 进样量为 1 ΛL ; 记录 120 m in
色谱图, 其中 60 m in 以后没有出峰, 提示 60 m in 内
川芎油成分出峰完全。
213 方法学考察
21311 精密度试验: 取同一供试品溶液, 连续进样 5
次, 测定, 记录其色谱图, 以阿魏酸为参照峰, 计算各共
有峰相对保留时间和相对峰面积。结果表明: 各峰相对
保留时间R SD < 3% , 各峰相对峰面积R SD < 5%。
21312 稳定性试验: 取同一供试品溶液, 分别于 0、
2、4、8、16、24 h 进样, 测定, 记录其色谱图, 以阿魏
酸为参照峰, 计算各共有峰相对保留时间和相对峰
面积。结果表明: 各峰相对保留时间R SD < 3% , 各
峰相对峰面积R SD < 5%。
21313 重现性试验: 取同一批川芎油 5 份, 平行制
备供试品溶液, 进样, 测定, 记录其色谱图, 以阿魏酸
为参照峰, 计算各共有峰相对保留时间和相对峰面
积。结果表明: 各峰相对保留时间R SD < 3% , 各峰
相对峰面积R SD < 5%。
214 川芎油指纹图谱的建立及共有峰的确认[3 ]: 按
测定条件记录各批川芎油样品的气相色谱图, 从中
选取了 13 个共有峰作为指纹图谱的特征峰, 并利用
GC2M S 联用仪进行确认, 1 号峰为匙叶桉油烯醇
(spathu leno l) , 2 号峰为 22甲氧基242乙烯基苯酚 (22
m ethoxy242vinylpheno l) , S 号峰为阿魏酸 ( feru lic
acid) , 3 号峰为正十四烷 ( tet radecane) , 4 号峰为 32
丁烯基苯酞 (32bu tylidene ph thalide) , 5 号峰为 32丁
基苯酞 ( 32bu tylph thalide ) , 6 号峰为新蛇床内酯
(neocn id ilide) , 7 号峰为藁本内酯 ( ligu st ilide) , 8 号
峰为洋川芎内酯 (senkyuno lide) , 9 号峰为 Β2榄香烯
(Β2elem ene) , 10 号峰为棕榈酸 (palm it ic acid) , 11
号峰为油酸 (o leic acid) , 12 号峰为亚油酸 ( lino leic
acid) , 共有指纹峰的峰面积占总峰面积的 90% 以
上, 其共有峰指纹图谱见图 1。
töm in
图 1 川芎油共有峰指纹图谱
F ig11 F ingerpr in t of common pesks of L 1 chuanx iong
essen tia l o il
215 共有指纹峰的保留时间和峰面积比较: 分别取
不同来源的川芎油样品, 检测其指纹图谱, 记录各共
有峰的保留时间和峰面积。以阿魏酸色谱峰的保留
时间和峰面积为参照, 计算各共有峰的相对保留时
间和相对峰面积。结果见表 1, 2。
表 1 各共有峰的相对保留时间
Table 1 Relative reten tion time for common peakes
样 品
各峰相对保留时间
1 2 S 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1 01709 01972 11000 11162 11256 11262 11287 11319 11363 11504 11750 21318 21449
2 01710 01972 11000 11162 11256 11263 11288 11319 11364 11504 11751 21320 21502
3 01710 01972 11000 11163 11257 11265 11290 11324 11368 11508 11755 21330 21513
4 01710 01972 11000 11162 11256 11263 11288 11320 11365 11504 11751 21320 21502
5 01710 01972 11000 11162 11256 11263 11287 11318 11363 11503 11751 21320 21505
6 01710 01972 11000 11161 11255 11262 11287 11320 11363 11503 11750 21316 21449
7 01711 01973 11000 11162 11255 11262 11288 11320 11364 11503 11749 21316 21449
8 01711 01973 11000 11162 11256 11263 11288 11320 11365 11504 11751 21319 21500
9 01711 01972 11000 11162 11255 11262 11287 11318 11365 11503 11750 21318 21501
10 01711 01973 11000 11161 11255 11262 11287 11318 11363 11502 11752 21319 21504
平均值 01710 01972 11000 11162 11256 11263 11288 11320 11364 11504 11751 21320 21487
RSD ö% 011 0 0 0 011 011 011 011 011 011 011 012 111
·702·中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月
表 2 各共有峰的相对峰面积
Table 2 Relative peak area for common peakes
样 品
各峰相对峰面积
1 2 S 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
1 01724 01213 11000 01378 11708 21489 11697 151887 71962 01286 31737 11517 71621
2 01675 01187 11000 01318 11776 21660 11722 121552 71523 01232 31969 21331 81726
3 01544 01122 11000 01270 01949 11354 11281 151660 61492 01246 21013 11389 41899
4 01635 01145 11000 01317 11397 21112 11434 131626 71582 01224 21795 11495 61114
5 11122 01315 11000 01561 21950 41421 21737 171324 101689 01277 71751 51065 191351
6 01604 01160 11000 01342 11369 11935 11290 151008 71010 01229 31119 11884 71243
7 01564 01170 11000 01370 11265 11983 11270 141844 71540 01233 21860 11460 61335
8 01636 01154 11000 01355 11424 11813 11359 121833 71479 01209 21925 11599 61463
9 01734 01172 11000 01373 11497 21535 11446 131596 81216 01237 41585 21703 101918
10 01885 01232 11000 01399 21271 31538 11638 131045 81429 01253 71484 31875 161750
平均值 01712 01187 11000 01368 11661 21484 11587 141438 71892 01243 41124 21332 91442
RSD ö% 2415 2915 0 2110 3415 3613 2716 1018 1413 918 4719 5310 5115
216 色谱指纹图谱的评价[4 ]: 相似度可以量化描述
指纹图谱相似性, 体现指纹图谱的整体相关性。本实
验采用中国药典委员会推荐中药色谱指纹图谱相似
度软件计算 10 批川芎油样品的指纹图谱与它们共
有模式图谱 (共有模式图谱的建立采用中位数法)的
重叠率和相关系数, 结果见表 3。结果表明: 10 批样
品中大部分样品指纹图谱相似度高, 符合指纹图谱
相似度要求。
表 3 10 批样品的重叠率和相关系数
Table 3 Repeatabil ity and correla tion coeff ic ien t
of ten batches of samples
批号 样品来源 重叠率ö% 相关系数
1 蕲春药市 94125 0199
2 杭州大红鹰宝丰医药连锁有限公司 90191 0198
3 北京嘉事堂药业有限公司 84175 0195
4 北京同仁堂威海分店 87172 0199
5 桂林腾龙堂药店 92159 0183
6 石家庄新兴药房水源店 88114 0199
7 上海浦西城隍庙童涵春堂大药店 86182 0199
8 北京同仁堂潍坊药店 87110 0199
9 新乡市佐今明大药房 80188 0194
10 临沂郯城县仁和堂大药房 89166 0178
3 讨论
311 色谱柱的选择: 选用了DB 21、ZB 25、DB 217、DB 2
W A X 4 种不同极性的毛细管柱进行比较, 结果以DB 2
W A X 色谱柱得到的色谱峰个数较多, 峰形较好, 因此
选用此作为川芎油指纹图谱检测的色谱柱。
312 升温方式的选择: 比较了单一速率升温和程序
升温两种升温方式, 发现程序升温所得到的色谱峰
分离度较好, 保留时间适中, 故选择程序升温方式。
313 参照峰的选择: 在指纹图谱中一般选择大小、
位置适中, 分离度好且稳定的峰作为参照峰, 其中阿
魏酸为川芎油中主要有效成分, 且其色谱峰符合上
述要求, 故选择此峰为参照峰。
致谢: 本研究在湖北中医学院中药资源与中药
化学省级重点实验室完成。
参考文献:
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·802· 中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 2 期 2008 年 2 月