全 文 :中检测到 N up 88 高表达, 并呈弥漫分布, 而并未检
测到其他核孔蛋白 (如 N up 214 和 N up 153) 的表
达异常; 相比之下, 在对应的正常组织、良性肿瘤或
增殖性病变中,N up 88 呈弱表达和散在分布, 因此,
Gou ld 等[7 ]认为 N up 88 可以作为肿瘤诊断的检测
指标之一。此外, 大量研究还显示, 肿瘤细胞内
N up 88 的高表达, 无论是在生物学特性方面, 还是
生化指标上, 都预测着肿瘤的高度侵袭性和转移倾
向, 而其他核孔蛋白并无此特性[8 ]。在之前的研究
中, 也发现N up 88 在白血病细胞系U 937 中呈现高
表达, 并弥漫分布于细胞的核浆之间, 诱导 N up 88
蛋白表达下调后可能抑制了白血病细胞的增殖[9 ]。
而 Ro th 等[10 ]推测 N up 88 蛋白表达量的异常或基
因的突变均将影响其他蛋白的异常定位, 从而导致
物质输出障碍。本实验的初步结果表明, 在U 937 细
胞中N up 88 蛋白呈高表达, 经不同质量浓度的藤黄
酸处理后, 其蛋白和基因表达水平均以质量浓度依
赖性的方式逐渐递减, 在藤黄酸质量浓度达到 210
m göL 时, N up 88 蛋白和基因转录水平也降至最低
值。正常情况下, N up 88 蛋白主要定位于核膜的胞
浆面, 而在U 937 细胞中, N up 88 蛋白弥漫分布于细
胞的核浆之间, 以细胞浆和核膜为主, 经藤黄酸干预
后, N up 88 的荧光强度明显减弱, 其细胞定位也主
要集中于核膜的胞浆面, 偶见于胞浆中, 这和之前的
研究结果相类似。由此可见, 藤黄酸极有可能通过调
控核孔蛋白 (N up 88) 的表达以及分布来影响某些
关键分子的核浆穿梭, 从而调控白血病细胞的生物
学活性, 诱导细胞发生凋亡。然而,N up 88 究竟是如
何影响核浆穿梭异常的, 它又改变了哪些重要分子
的穿梭仍不得而知, 有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ] 雷秋模, 刘金妹1 藤黄抗癌作用研究的回顾与展望 [J ]1 肿瘤
防治杂志, 2003, 10 (2) : 21622191
[ 2 ] Guo Q L , Q i Q , You Q D , et a l. Tox ico logical studies of
gam bogic acid and its po ten tial targets in experim en tal an i2
m als [J ]1 B asic C lin P harm acol T ox icol, 2006, 99 (2) : 1782
1841
[ 3 ] Yu J , Guo Q L , You Q D , et a l. Rep ression of telom erase
reverse transcrip tase mRNA and hT ERT p romo ter by in2
h ib ito ry effects of oncogene C2m yc in gam bogic acid treated2
hum an gastric carcinom a cells [J ]1 Cancer Chem oth P harm a2
col, 2006, 58 (6) : 43424431
[ 4 ] Zhao L , Guo Q L , You Q D , et a l. Gam bogic acid induces
apop to sis and regu lates exp ressions of Bax and Bcl22 p ro tein
in hum an gastric carcinom a M GC2803 cells [J ]1 B iol P harm
B u ll, 2004, 27 (7) : 998210031
[ 5 ] Kasibhatla S, Jessen K A , M aliartchouk S, et a l. A ro le fo r
transferring recep to r in triggering apop to sis w hen targeted
w ith gam bogic acid [J ]1 P roc N a tl A cad S ci U SA , 2005,
102 (34) : 120952121001
[ 6 ] 郭青龙, 赵 丽, 尤启冬, 等 1 藤黄酸诱导人胃腺癌 SGC2
7901 细胞的凋亡作用 [J ]1 中国天然药物, 2004, 2 (2) : 1062
1101
[ 7 ] Gould V E, O rucevic A , Zen tgraf H , et a l. N up88 (kary2
opo rin) in hum an m alignan t neop lasm s and dysp lasias: co rre2
lat ions of imm uno stain ing of tissue sections, cyto logic
sm ears, and imm unob lo t analysis [J ]1 H um P athol, 2002,
33 (5) : 53625441
[ 8 ] A gudo D , Gom ez E F, M artinez A F, et a l. N up88 mRNA
O verexp ression is associated w ith h igh aggressiveness of
b reast cancer [J ]1 In t J Cancer, 2004, 109 (5) : 71727201
[ 9 ] L iu H L , Chen Y, Cui G H , et a l. D eguelin regu lates nucle2
ar po re comp lex p ro teins N up98 and N up88 in U 937 cells in
v itro [J ]1 A cta P harm S in, 2005, 26 (10) : 1265212731
[ 10 ] Ro th P, XylourgidisN , SabriN 1 T he dro soph ila nucleopo rin
DN up88 localizes DN up214 and CRM 1 on the nuclear enve2
lope and attenuates N ES2m ediated nuclear expo rt [J ]1 J Cell
B iol, 2003, 163 (4) : 70127061
何首乌醋酸乙酯提取部位与二苯乙烯苷的调血脂作用
王春英, 张兰桐Ξ , 袁志芳, 金一宝, 张 峥
(河北医科大学药学院 药物分析教研室, 河北 石家庄 050017)
摘 要: 目的 研究何首乌醋酸乙酯提取部位 (EA FF2PM ) 与有效成分二苯乙烯苷的调血脂作用。方法 观察
EA EF2PM 和二苯乙烯苷对正常小鼠血脂及肝脏指数的影响; 小鼠 ip T riton 致急性高脂血症模型, 观察 EA EF2
PM 和二苯乙烯苷对模型小鼠血脂水平的影响; 以大鼠食饵性高脂血症为模型, 给予高脂饲料的同时给予 EA EF2
·87· 中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007205224
基金项目: 河北省自然科学基金资助项目 (C2006000791)
作者简介: 王春英 (1972—) , 女, 讲师, 在读博士, 研究方向为中药有效成分的提取分离与药效物质基础研究。
T el: (0311) 86265625 E2m ail: w angcy730301@ 163. com3 通讯作者 张兰桐 T el: (0311) 86266419 E2m ail: zhanglan tong@ 263. net
PM 和二苯乙烯苷, 连续 28 d, 测定血脂、丙二醛 (M DA )、一氧化氮 (NO ) 水平和超氧化物歧化酶 (SOD ) 活性, 肝
组织中总胆固醇 (TC) 和甘油三酯 (T G) 水平以及肝脏指数。结果 对正常小鼠, 二苯乙烯苷和 EA EF2PM 均有
升高血清高密度脂蛋白胆固醇 (HDL 2C) , 降低血清低密度脂蛋白胆固醇 (LDL 2C) 的作用。EA EF2PM 和二苯乙烯
苷对 ip T riton 致高脂血症小鼠的血清 TC、T G 和LDL 2C 均有降低作用, 对 HDL 2C 均有升高作用。EA EF2PM 60
m gökg 明显降低大鼠食饵性高脂血症模型的肝脏指数; EA EF2PM 30、60 m gökg 明显降低大鼠食饵性高脂血症模
型的血清 TC、T G、LDL 2C、M DA 水平和TCöHDL 2C 值, 明显升高血清 HDL 2C 和NO 水平以及 SOD 活性, 二苯乙
烯苷对各项指标的作用强度略低于 EA EF2PM , 但无显著性差异。结论 何首乌中 EA EF2PM 及二苯乙烯苷均具
有调血脂、抗氧化, 保护血管内皮的功能, 二苯乙烯苷为发挥药效作用的主要物质, 提示可用于预防高脂血症。
关键词: 何首乌; 何首乌醋酸乙酯提取部位; 二苯乙烯苷; 调血脂作用
中图分类号: R 28611 文献标识码: A 文章编号: 025322670 (2008) 0120078206
Blood l ip id regula tion of ethyl aceta te extracting fraction and stilbene glycoside
from tuber of P olygonum m u ltif lorum
W AN G Chun2ying, ZHAN G L an2tong, YUAN Zh i2fang, J IN Y i2bao, ZHAN G Zheng
(D epartm ent of Pharm aceu tical A nalysis, Schoo l of Pharm acy, H ebeiM edical U niversity, Sh ijiazhuang 050017, Ch ina)
Abstract: Objective To invest iga te the b lood lip id regu la t ion of ethyl aceta te ex tract ing fract ion from
the tube of P oly g onum m u ltif lorum (EA EF2PM ) and st ilbene glyco side from the tuber of P. m u ltif lorum .
M ethods T he effects of EA EF2PM and st ilbene glyco side on b lood lip id and liver index w ere studied in
no rm al m ice. A cu te hyperlip idem ic model m ice induced by ip T riton as m arkers w ere u sed to ob serve the
effects of EA EF2PM and st ilbene glyco side on the b lood lip id level. T he invest iga t ion w as also emp loyed in
the hyperlip idem ic model ra ts induced by feeding w ith the h igh2lip id diet accompan ied by ig EA EF2PM and
st ilbene glyco side fo r 28 d, respect ively. T he effects of EA EF2PM and st ilbene glyco side w ere studied by
m easu ring the concen tra t ion s of lip ids, m alondia ldehyde (M DA ) , n it ric ox ide (NO ) , and the act ivity of
superox ide dism u tase (SOD ) in serum of the hyperlip idem ic ra ts. T he levels of to ta l cho lestero l (TC) and
trig lyeride (T G) in liver as w ell as liver index w ere also sim u ltaneou sly determ ined. Results In the no r2
m al m ice, EA EF2PM and st ilbene glyco side no t on ly increased the level of serum h igh den sity lipop ro tein
cho lestero l (HDL 2C ) , a lso decreased the level of serum low den sity lipop ro tein cho lestero l (LDL 2C ).
EA EF2PM and st ilbene glyco side low ered serum TC, T G and LDL 2C, and increased serum HDL 2C in the
hyperlip idem ic m ice. A dm in ist ra t ion of EA EF2PM (60 m gökg) cou ld sign i2f ican t ly reduce the liver index
in hyperlip idem ic ra ts. A dm in ist ra t ion of EA EF2PM (30 and 60 m gökg) cou ld rem arkab ly decrease the
levels of serum TC, T G, LDL 2C as w ell as the ra t io of TCöHDL 2C, also rem arkab ly increase serum HDL 2
C, NO , and SOD. Compared w ith EA EF2PM , st ilbene glyco side had the som ew hat low er effect bu t no
sign if ican t d ifference. Conclusion EA EF2PM and st ilbene glyco side po ssess the obviou s effects of b lood
lip id2regu la t ion, an t iox idat ion and p ro tect ing vascu lar endo thelium. T he po ten t ia l con st ituen t is st ilbene
glyco side w h ich can be u sed to p reven t andöo r trea t hyperlip idem ia.
Key words: P oly g onum m u ltif lorum T hunb. ; ethyl aceta te ex tract ing fract ion from P oly g onum m u lti2
f lorum (EA EF2PM ) ; st ilbene glyco side; b lood lip id regu la t ion
何首乌为多年生蓼科植物何首乌 P oly g onum
m u ltif lorum T hunb. 的干燥块根, 含有多种化学成
分, 具有多种药理活性。现代中医临床上常用于治疗
高脂血症[1 ]。但是由于何首乌中含有的蒽醌类成分
有一定的毒性, 服用过量或长期服用可使人体产生
一定的不良反应[2 ]。文献报道[3 ]何首乌水溶性部分
有一定的调血脂作用。2, 3, 5, 4′2四羟基二苯乙烯222
O 2D 2葡萄糖苷 (二苯乙烯苷) 为何首乌的主要水溶
性成分, 具有抗氧化[4 ]、神经保护[5 ]等多种药理活
性, 但调血脂作用的药效物质研究国内外尚无文献
报道。本研究比较了何首乌醋酸乙酯提取部位
(EA EF2PM ) 及二苯乙烯苷单体成分 (SGM C) 的
调血脂作用, 为更深入探讨何首乌调血脂作用的药
效物质基础, 寻找到安全、有效的纯天然降血脂药物
奠定基础。
1 材料
111 药品与试剂: 何首乌饮片 (购于石家庄市乐仁
堂) ; 辛伐他汀片 (浙江京新药业股份有限公司) ; 丙
硫氧嘧啶片 (深圳市中联制药有限公司) ; 胆固醇和
牛胆盐 (北京奥博星生物技术责任有限公司) ; T ri2
ton W R 1339 试剂 (T riton, 美国 Sigm a 公司) ; 猪
油 (漯河双汇油脂工业有限公司) ; 高密度脂蛋白胆
·97·中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
固醇 (HDL 2C)、低密度脂蛋白胆固醇 (LDL 2C)、总
胆固醇 (TC) 和甘油三酯 (T G) 测定试剂盒 (长春
汇力生物技术有限公司) ; 丙二醛 (M DA )、超氧化
物歧化酶 (SOD ) 和一氧化氮 (NO ) 测定试剂盒
(南京建成生物工程研究所)。其他试剂均为市售分
析纯。
112 仪器: 752 型紫外分光光度计; LABORO TA —
4000 旋蒸仪; BP211D 型十万分之一天平; W aters
D et la600 型高效液相色谱仪; L G16—W 离心机;
KQ —100A 型超声波清洗器; 恒温水浴槽。
113 动物: 雄性 SD 大鼠, 190~ 220 g; 昆明种小
鼠, 18~ 22 g, 均由河北医科大学实验动物中心提
供, 合格证号: SCXK (冀) 2003212003。
2 方法
211 EA EF2PM 和二苯乙烯苷的制备: 取何首乌粗
粉, 用 50% 乙醇加热回流提取 3 次, 提取液减压浓
缩至无醇味, 所得溶液用乙醚萃取 3 次, 弃去醚层,
水层再用醋酸乙酯萃取, 合并萃取液, 回收醋酸乙酯
即得 EA EF2PM。EA EF2PM 上硅胶柱用三氯甲烷2
甲醇梯度洗脱, 用薄层色谱法[6 ]监测, 收集二苯乙烯
苷流份, 回收溶剂, 得到二苯乙烯苷单体。经高效液
相色谱法测定[7 ] , EA EF2PM 中二苯乙烯苷的质量
分数为 70% , 二苯乙烯苷单体质量分数为 98%。
212 对正常小鼠血脂水平的影响: 取正常小鼠 80
只, 雌雄各半, 体重 (20±2) g, 正常饲养 3 d 后, 随
机分为 8 组, 每组 10 只, 各组每日分别 ig 给予辛伐
他汀 (6 m gökg) ; 二苯乙烯苷 (剂量分别为 30、60、
120 m gökg) ; EA EF2PM (剂量按二苯乙烯苷计分
别为 30、60、120 m gökg ) ; 对照组给予空白溶媒
(015% 羧甲基纤维素钠)。连续给药 28 d。末次给药
后称体重, 摘眼球取血, 解剖, 取肝脏称质量, 计算肝
脏指数 (肝脏指数= 肝脏质量ö小鼠体重×100% ) ;
分离血清测定 TC、T G、HDL 2C 和LDL 2C 水平。
213 对 T riton 致高血脂小鼠的调血脂作用: 取正
常小鼠 70 只, 雌雄各半, 正常喂养 3 d 后, 随机分为
7 组, 即正常组、高血脂模型组、辛伐他汀组 (6 m gö
kg)、二苯乙烯苷组 (剂量分别为 30、60 m gökg) ,
EA EF2PM 组 (剂量按二苯乙烯苷计分别为 30、60
m gökg)。各组分别按 10 mL ökg 体积 ig 给予相应
的药物, 对照组和模型组给予等体积的溶媒, 连续 6
d。第7 天除正常组的小鼠 ip 等量生理盐水外, 其他
6 组小鼠分别按 10 mL ökg 体积 ip 4% T riton 溶
液, 注射 0、3、6、9 h 后分别给药1 次。于末次给药后
3 h, 小鼠摘眼球取血, 分离血清, 按试剂盒说明分别
测定 TC、T G、HDL 2C 和 LDL 2C。
214 对食饵性高脂血症大鼠的调血脂作用: 雄性大
鼠 70 只, 禁食不禁水 12 h 后, 眼眶后静脉丛取血,
分离血清, 按试剂盒说明测定 TC。根据 TC 值随机
分为7 组, 每组10 只。对照组用普通饲料喂养, 其余
6 组用高脂饲料[8 ] (2% 胆固醇、015% 牛胆盐、10%
猪油、011% 丙基硫氧嘧啶, 基础饲料 8713% ) 喂
养, 高脂饲料喂养的同时分别按 10 mL ökg 体积 ig
给予辛伐他汀 (6 m gökg)、二苯乙烯苷 (剂量分别
为 30、60 m gökg) , EA EF2PM (剂量按二苯乙烯苷
计分别为 30、60 m gökg) , 正常组和高脂模型组给予
等量溶媒, 连续 28 d, 末次给药后 12 h 称体重, 断头
取血, 解剖, 取肝脏秤质量, 计算肝脏脂数; 分离血清
测定 TC、T G、HDL 2C、LDL 2C、SOD、M DA 和 NO ,
并计算 TCöHDL 2C 的值; 取新鲜肝脏左叶前缘部
分 (约 300 m g) , 加入异丙醇制成 10% 肝组织匀
浆, 匀浆液 4 ℃ 放置 48 h 后, 3 500 röm in 离心, 取
上清液按试剂盒说明测定 TC 和 T G。
3 结果
311 对正常小鼠血脂水平的影响: 由表 1 可知, 与
对照组相比, 其他各组小鼠血清 TC、T G 及肝脏指
数均无明显变化; 辛伐他汀 6 m gökg 显著升高
HDL 2C, 降低 LDL 2C (P < 0101) ; 二苯乙烯苷 30
m gökg 显著升高 HDL 2C, 降低LDL 2C (P < 0105) ;
二苯乙烯苷 60 m gökg 非常显著升高 HDL 2C, 降低
LDL 2C (P < 0101) ; 但二苯乙烯苷 120 m gökg 对
HDL 2C、LDL 2C 无明显影响 (P > 0105) ; EA EF2
PM 30、60 m gökg 均能非常显著升高 HDL 2C, 降低
LDL 2C (P < 0101) , 120 m gökg 对 HDL 2C、L CL 2C
无明显影响 (P > 0105)。相同剂量的二苯乙烯苷和
EA EF2PM 组间比较各测定指标无显著性差异。由
结果可知, 何首乌有效部位和有效成分均有升高
HDL 2C, 降低 LDL 2C 的作用, 在较低剂量时, 呈剂
量依赖性, 但随着剂量的增加, 达 120 m gökg 时, 对
HDL 2C 和 LDL 2C 的作用反而不显著。
312 对 T riton 致高血脂小鼠血脂的影响: 如表 2
所示, 与对照组相比, 模型组小鼠血清中 TC、T G、
LDL 2C 和 HDL 2C 的水平均极明显升高 ( P <
0101)。与模型组相比, 辛伐他汀 6 m gökg 极明显降
低 T G、LDL 2C (P < 0101)。二苯乙烯苷 30 m gökg
极明显降低 LDL 2C (P < 0101) , 显著升高 HDL 2C
(P < 0105) ; 60 m gökg 明显降低 T G (P < 0105) , 非
常显著降低 LDL 2C, 升高 HDL 2C (P < 0101)。
EA EF 2PM 3 0m g ökg 和6 0m g ökg 都非常显著的
·08· 中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
表 1 二苯乙烯苷和 EAEF-PM 对正常小鼠血脂及肝脏指数的影响 (x±s, n= 10)
Table 1 Effects of stilbene glycoside and EAEF-PM on l ip ids of serum and l iver index in normal m ice (x±s, n= 10)
组 别 剂量ö(m g·kg- 1) TCö(mmo l·L - 1) T Gö(mmo l·L - 1) HDL 2Cö(mmo l·L - 1) LDL 2Cö(mmo l·L - 1) 肝脏指数ö%
对照 - 2162±0178 2102±0136 0131±0114 1135±0137 4166±0194
辛伐他汀 6 2186±0156 2138±0159 0198±01303 3 0190±01213 3 5124±0164
二苯乙烯苷 30 2168±0147 2157±0151 0148±01143 1101±01213 4167±0133
60 2167±0134 2104±0163 0164±01183 3 0192±01183 3 4141±0120
120 2192±0167 2181±0167 0129±0107 1121±0125 5131±0136
EA EF2PM 30 2199±0147 1193±0150 0158±01263 3 0192±01193 3 4169±0149
60 2154±0154 1181±0164 0179±01163 3 0191±01193 3 4145±0141
120 3109±0165 1196±0187 0131±0110 1118±0120 4171±0134
与对照组比较: 3 P < 0105 3 3 P < 0101
3 P < 0105 3 3 P < 0101 vs con tro l group
降低 LDL 2C, 升高 HDL 2C (P < 0101) ; 只有 60
m gökg 非常显著的降低 T G (P < 0101) 和 TC
(P < 0105)。相同剂量的二苯乙烯苷和 EA EF2PM
组间比较各测定指标无显著性差异。由此可知, 二苯
乙烯苷和 EA EF2PM 有降低血脂的作用。
313 对食饵性高脂血症大鼠血脂的影响: 如表3 所
示, 与对照组相比, 模型组大鼠血清中 TC、T G、
LDL 2C 和 TCöHDL 2C 的水平均极明显升高 (P <
0101)。与模型组相比, 辛伐他汀对血脂各项指标均
有非常明显的改善作用 (P < 0101) ; 二苯乙烯苷和
EA EF2PM , 除 30 m gökg 的剂量对 T G 影响不明显
外, 对 TC、T G、LDL 2C、HDL 2C 和 TCöHDL 2C 的 水平均能显著改善 (P < 0105、0101)。相同剂量的二苯乙烯苷和 EA EF2PM 组间比较各测定指标无显著性差异。314 对食饵性高脂血症大鼠血清 SOD、M DA 和NO 的影响: 如表 4 所示, 与对照组相比, 模型组大鼠血清 SOD 和 NO 水平极明显降低 (P < 0101) ,M DA 水平明显升高 (P < 0101)。与模型组相比, 辛伐他汀对M DA 和 NO 有明显的改善 (P < 0105、0101) , 但对 SOD 无显著影响; 二苯乙烯苷和EA EF2PM 各剂量组对各项指标均有明显的改善作用 (P < 0105、0101) ; 相同剂量的二苯乙烯苷和EA EF2PM 组间比较各测定指标无显著性差异。
表 2 二苯乙烯苷和 EAEF-PM 对 Tr iton 致高血脂小鼠血脂的影响 (x±s, n= 10)
Table 2 Effects of stilbene glycoside and EAEF-PM on l ip ids of serum
in hyperl ipo idem ic m ice induced by Tr iton (x±s, n= 10)
组 别 剂量ö(m g·kg- 1) TCö(mmo l·L - 1) T Gö(mmo l·L - 1) LDL 2Cö(mmo l·L - 1) HDL 2Cö(mmo l·L - 1)
对照 - 2157±0149 1131±0138 0163±0109 0121±0106
模型 - 11105±2127# # 8165±1118# # 7105±0192# # 3115±0183# #
辛伐他汀 6 9193±2100 6124±11493 3 5178±01953 3 3151±0183
二苯乙烯苷 30 10196±2113 8150±0157 5129±11613 3 4139±11093
60 9110±2120 7139±01833 5123±11443 3 4193±01913 3
EA EF2PM 30 9148±2155 8110±1119 6140±11243 3 6128±01823 3
60 8133±21073 6180±01983 3 5124±11743 3 5152±11233 3
与对照组比较: # # P < 0101; 与模型组比较: 3 P < 0105 3 3 P < 0101
# # P < 0101 vs con tro l group; 3 P < 0105 3 3 P < 0101vs model group
表 3 二苯乙烯苷和 EAEF-PM 对食饵性高脂血症大鼠血脂的影响 (x±s, n= 10)
Table 3 Effects of stilbene glycoside and EAEF-PM on l ip ids of serum
in hyperl ipo idem ic rats fed with h igh- l ip id d iet (x±s, n= 10)
组 别 剂量ö(m g·kg- 1) TCö(mmo l·L - 1) T Gö(mmo l·L - 1) LDL 2Cö(mmo l·L - 1) HDL 2Cö(mmo l·L - 1) TCöHDL 2C
对照 - 2108±0149 0169±0118 1112±0131 0147±0108 4118±0186
模型 - 7179±1191# # 1153±0142# # 5186±1132# # 0152±0111 14156±4121# #
辛伐他汀 6 4175±11323 3 0184±01313 3 3154±01893 3 1155±01463 3 3112±11023 3
二苯乙烯苷 30 5164±11533 1132±0136 4143±11123 0189±01093 3 6136±21233 3
60 5131±11423 3 1107±01293 4107±01753 3 1122±01343 3 3181±11533 3
EA EF2PM 30 5147±11323 3 1116±0124 3178±11023 3 0193±01143 3 5188±01873 3
60 4182±11183 3 0174±01213 3 3149±01713 3 1156±01393 3 3112±11163 3
与对照组比较: # # P < 0101 与模型组比较: 3 P < 0105 3 3 P < 0101
# # P < 0101 vs con tro l group; 3 P < 0105 3 3 P < 0101 vs model group
·18·中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
表 4 二苯乙烯苷和 EAEF-PM 对食饵性高脂血症大鼠
血清 SOD、MDA 和 NO 的影响 (x±s, n= 10)
Table 4 Effects of stilbene glycoside and EAEF-PM on SOD ,
MDA , and NO of serum in hyperl ipo idem ic rats
fed with h igh- l ip id d iet (x±s, n= 10)
组 别
剂量ö
(m g·kg- 1)
SOD ö
(U ·mL - 1)
M DA ö
(nmo l·mL - 1)
NO ö
(Λmo l·L - 1)
对照 - 28718±3012 8105±1160 90167±14123
模型 - 23112±3512# # 11124±1166# # 68122±12121# #
辛伐他汀 6 24211±3415 8165±11543 3 81143±131223
二苯乙烯苷 30 26512±35143 9155±11443 80176±131343
60 28917±37183 3 8174±11323 3 85165±121423 3
EA EF2PM 30 27416±40113 9128±11653 82188±141513
60 29013±45123 3 8153±11233 3 86132±131613 3
与对照组比较: # # P < 0101
与模型组比较: 3 P < 0105 3 3 P < 0101
# # P < 0101 vs con tro l group
3 P < 0105 3 3 P < 0101 vs model group
315 对食饵性高脂血症大鼠肝脏指数及肝组织脂
质的影响: 如表 5 所示, 与对照组相比, 模型组大鼠
肝组织 TC 和 T G 均极明显升高 (P < 0101) , 肝脏
指数明显升高 (P < 0105)。与模型组相比, 辛伐他汀
6 m gökg 能极明显降低肝组织中 TC 和 T G 水平
(P < 0101) , 明显降低肝脏脂数 (P < 0105)。EA EF2
PM 60 m gökg 对肝脏指数有明显降低作用 (P <
0105) , 其他各实验组对 TC、T G 和肝脏指数均有降
低趋势。
表 5 二苯乙烯苷和 EAEF-PM 对食饵性高脂血症大鼠肝脏
指数及肝组织 TC 和 TG 的影响 (x±s, n= 10)
Table 5 Effects of stilbene glycoside and EAEF-PM
on l iver- index and TC and TG of l iver tissue
in hyperl ipo idem ic rats fed with h igh- l ip id
d iet (x±s, n= 10)
组 别
剂量ö
(m g·kg- 1)
TCö
(Λmo l·m g- 1) T Gö(Λmo l·m g- 1) 肝脏指数ö%
对照 - 2145±0126 3114±0132 3125±0124
模型 - 6172±1121# # 5167±0169# # 3184±0164#
辛伐他汀 6 4189±11033 3 4131±01973 3 3117±01333 3
二苯乙烯苷 30 7111±1169 5152±0185 3161±0120
60 6132±1105 5138±0177 3174±0136
EA EF2PM 30 6116±0196 5146±0164 3149±0149
60 6103±0165 5129±0152 3131±01343
与对照组比较: # P < 0105 # # P < 0101
与模型组比较: 3 P < 0105 3 3 P < 0101
# P < 0105 # # P < 0101 vs con tro l group
3 P < 0105 3 3 P < 0101 vs model group
4 讨论
冠心病和动脉粥样硬化是严重危害人类健康的
常见病, 而高血脂主要是导致冠心病和动脉粥样硬
化的直接原因, 调节血脂, 尤其是降低LDL 2C, 可延
缓或减轻动脉粥样硬化的发生和发展。目前HDL 2C
是公认的抗动脉粥样硬化因子, 它是将肝外组织中
的 TC 运送到肝脏的主要运输工具。本研究结果表
明, 二苯乙烯苷和 EA EF2PM 均能降低血清中
LDL 2C 的量, 升高 HDL 2C 的量, 提示二苯乙烯苷
和 EA EF2PM 对高血脂有一定的预防和治疗作用。
T riton 是一种表面活性剂, 其可能通过抑制脂
蛋白酶和形成一种 T riton2脂蛋白复合物干扰组织
对血浆脂类的吸收, 从而迅速升高动物的血脂水平,
被广泛应用于降脂药物的筛选[9 ]。本实验结果表明,
T riton 对小鼠血清 TC、T G、LDL 2C、HDL 2C 水平
均有显著性的升高作用, 可作为一种急性高血脂动
物模型方法。二苯乙烯苷和 EA EF2PM 对 T riton
致高血脂小鼠的血清 TC 和 T G 有一定的降低作
用, 提示二苯乙烯苷和 EA EF2PM 降血脂的机制可
能与促进脂蛋白酶对脂蛋白的水解有关。
大鼠食饵性高脂血症模型结果显示 EA EF2PM
和二苯乙烯苷有明显降低 TC 和 T G 的作用, 提示
其可能通过抑制外源性 T G 和 TC 的消化吸收发挥
作用。另外, 模型大鼠肝脏体积增大, 颜色呈浅黄, 肝
脏指数明显升高。二苯乙烯苷和 EA EF2PM 对肝脏
指数有明显降低作用, 提示其具有保肝作用。
高脂血症中血管内皮功能受损, 内皮细胞释放
的 NO 减少, 抑制血管舒张, 促进血小板聚集, 增强
白细胞黏附和迁移, 促进血管平滑肌细胞的增
殖[10 ]。本研究结果表明, EA EF2PM 和二苯乙烯苷
均能明显升高大鼠食饵性高脂血症模型的血清NO
水平, 有效降低血清M DA , 升高 SOD 活性。可见,
EA EF2PM 和二苯乙烯苷在阻止血脂升高的同时亦
有减少脂质过氧化反应的作用, 从而降低高脂血症
时超氧自由基对血管内皮的损伤, 有利于过氧化脂
质的分解和代谢, 保护血管内皮, 这对降低动脉粥样
硬化发生的危险性具有重要的作用。
本实验结果表明, EA EF2PM 的作用比二苯乙
烯苷略强, 但无明显差异, 而 EA EF2PM 中主要成
分为二苯乙烯苷, 说明二苯乙烯苷可能为 EA EF2
PM 中发挥降血脂作用的主要物质。
综上所述, EA EF2PM 和二苯乙烯苷对 T riton
致高血脂小鼠的血脂有一定的作用, 且均能显著调
节大鼠食饵性高脂血症的脂质代谢, 改善自由基代
谢, 升高 NO 水平, 提示 EA EF2PM 和二苯乙烯苷
可用于防治高脂血症, 保护血管内皮, 预防动脉粥样
硬化, 具有良好的临床意义和应用前景。其作用机制
可能与抑制 T G 和 TC 的消化吸收, 促进脂蛋白酶
·28· 中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
对脂蛋白的水解, 及提高机体抗氧化能力有关, 其确
切机制有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ] 吴兆洪, 杨永华, 柳玉瑾, 等 1 首乌冲剂改善高脂血症与高凝
状态的临床观察 [J ]1 中成药, 2000, 22 (12) : 84428461
[ 2 ] 许评比, 李荣宗 1 人参、何首乌的毒性反应 [J ]1 海峡药学,
2001, 13 (3) : 1121
[ 3 ] Yang P Y, A lmofti M R , L u L , et a l. Reduction of
athero sclero sis in cho lestero l2fed rabb its and decrease of ex2
p ressions of in tracellu lar adhesion mo lecu le21 and vascu lar
endo thelial grow th facto r in foam cells by a w ater2so lu tion
fraction of P oly g onum m u ltif lorum [J ]1 J P harm acol S ci,
2005, 99 (3) : 29423001
[ 4 ] Ryu G, Ju J H , Park Y J , et a l. T he radical scavenging ef2
fects of stibene gluco sides from P oy g onum m u ltif lorum [J ]1 A rch P harm R es, 2002, 25 (5) : 63626391[ 5 ] 楚 晋, 叶翠飞, 李 林, 等1 二苯乙烯苷对D 2半乳糖致脑老化小鼠学习记忆及神经营养因子的影响 [J ]1 中国药房,2005, 16 (1) : 132161[ 6 ] 王春英, 张兰桐, 袁志芳, 等 1 血脂宁口服液中各药材的薄层色谱法鉴别 [J ]1 河北医科大学学报, 2003, 24 (1) : 102121[ 7 ] 王春英, 张兰桐, 袁志芳, 等 1 何首乌有效成分二苯乙烯苷的药代动力学研究 [J ]1 药学学报, 2002, 37 (12) : 95529581[ 8 ] 吴斐华, 梁敬钰, 陈 荣, 等 1 毛平车前活性部位调节血脂作用的研究 [J ]1 中国药科大学学报, 2005, 36 (5) : 44824521[ 9 ] 余艳辉, 文 军, 郭兆贵 1 T riton W R 21339 对小鼠血脂水平的影响 [J ]1 中国药理学通报, 2002, 18 (5) : 59926001[ 10 ] V ergnan i L , H atrik S, R icci F, et a l. Effect of native andox idized low 2density lipop ro tein on endo thelial n itric ox ideand superox ide p roduction: key ro le of L 2argin ine availab ility[J ]1 C ircu la tion, 2000, 101 (11) : 1261212661
二氢杨梅素对痤疮丙酸杆菌和脂多糖诱发小鼠肝损伤的保护作用
及对中性粒细胞释放白三烯的影响
梁 婷1, 吴春福13 , 吕艳青2, 李满妹2, 王璐璐2, 张 坤2, 栗原博2Ξ
(11 沈阳药科大学药学院, 辽宁 沈阳 110016; 21 暨南大学 中药及天然药物研究所, 广东 广州 510632)
摘 要: 目的 研究二氢杨梅素 (DM Y) 对痤疮丙酸杆菌与脂多糖 (P. acnes2L PS) 诱发小鼠肝损伤的保护作用及
对小鼠腹腔中性粒细胞释放白三烯的影响。方法 通过对 10 m gökg P. acnes 负荷 5 d 的小鼠 iv 3 Λgökg L PS 建
立 P. acnes2L PS 肝损伤模型, 用酶标仪测定血浆丙氨酸氨基转移酶 (AL T ) 活性, R P2H PL C 法测定小鼠腹腔中性
粒细胞释放白三烯 B 4 (L TB 4) 和白三烯 C4 (L TC4) 的水平。结果 与模型组相比, 125、250、500 m gökg DM Y 均能
显著抑制由 P. acnes2L PS 诱发的小鼠血浆 AL T 活性升高, 其抑制率分别为 3817%、4511%、4918% , 并对小鼠腹
腔中性粒细胞 L TB 4和L TC4的分泌呈剂量依赖性抑制作用。结论 DM Y 对 P. acnes2L PS 诱发小鼠肝损伤具有一
定的保护作用, 其部分作用机制可能与抑制白三烯释放有关。
关键词: 二氢杨梅素; 痤疮丙酸杆菌; 脂多糖; 肝损伤; 白三烯
中图分类号: R 28515 文献标识码: A 文章编号: 025322670 (2008) 0120083205
Protection of d ihydrom yr icetin on l iver in jured m ice induced by P rop ion ibacter ium acnes-
l ipopolysacchar ide and its effect on relea se of leukotr ienes from neutroph il
L IAN G T ing1, W U Chun2fu1, LU ¨Yan2qing2, L IM an2m ei2, W AN G L u2lu2,
ZHAN G Kun2, KU R IHA RA H iro sh i2
(11Schoo l of Pharm acy, Shenyang Pharm aceu tical U niversity, Shenyang 110016, Ch ina; 2. Inst itu te of T radit ional
Ch inese M edicine and N atural P roducts, J inan U niversity, Guangzhou 510632, Ch ina)
Abstract: Objective To ob serve the p ro tect ion of d ihydrom yricet in (DM Y) on liver in ju red m ice in2
duced by P rop ion ibacterium acnes2lipopo lysaccharide ( P. acnes2L PS ) and its effect on release of
leuko trienes from m u rine peritoneal neu troph il. M ethods T he liver in ju red model w as estab lished by iv 3Λgökg of L PS in to 5 d 10 Λgökg P. acnes2p rim ed m ice. H epat ic funct ion w as evaluated by assessing alan ine
am ino tran sferase (AL T ) level in p lasm a w ith EL ISA. H PL C M ethods w ere perfo rm ed to detect the release
levels of leuko triene B 4 (L TB 4) and leuko triene C4 (L TC4) in m u rine peritoneal neu troph il. Results Com 2
pared w ith the model group s, 125, 250, and 500 m gökg DM Y inh ib ited the act ivit ies of AL T at 38. 7% ,
45. 1% , and 49. 8% , respect ively. DM Y also inh ib ited the release of L TB 4 and L TC4 in m u rine peritoneal
·38·中草药 Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs 第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007205216
作者简介: 梁 婷 (1980—) , 女, 硕士生, 研究方向为中药药理学。T el: (020) 85227797 E2m ail: liangting818@ tom. com3 通讯作者 栗原博 T el: (020) 33033306 E2m ail: H iro sh i Kurihara@ 163. com
吴春福 T el: (024) 23843567 E2m ail: w ucf@ syphu. edu. cn w uchunf@ 21cn. com