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HPLC法测定快速溶剂萃取开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚



全 文 :中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·699·
喜树碱的敏感性随药物质量浓度的增加而增高口],
说明肝癌对羟基喜树碱具有药物浓度依赖性,因此
羟基喜树碱富集于肝脏有助于肝癌的治疗。羟基喜
树碱乳剂中羟基喜树碱在肝脏中的质量浓度比对照
提高了2~4倍,这可能受益于脂肪乳作为一种纳米
颗粒进入血液循环后容易被内皮网状系统(尤其是
肝脏的Kupffer细胞)当成异物所吞噬。本实验是采
用肝脏正常的家兔进行的,而肿瘤部位比其正常部
位具有更高的毛细血管通透性,因此该脂肪乳对癌
变肝脏的靶向性不仅有望进一步提高,而且还可能
同时降低羟基喜树碱对其他器官及肝脏未癌变部位
的不良反应。
参考文献:
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HPLC法测定快速溶剂萃取开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚
姜宁1’2,刘晓鹏卜
(1.生物资源保护与利用湖北省重点实验室,湖北恩施445000,
2.湖北民族学院生物科学与技术学院.湖北恩施445000)
摘 要:目的 采用加速溶剂萃取机快速提取,并采用HPLC法测定开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚。方法
ASE300型快速溶剂萃取系统进行快速萃取开胸顺气丸中有效成分。采用反相高效液相色谱法测定厚朴酚及和厚
朴酚。色谱柱:Diamonsil(TM)C18(250mm×4.6mm,um),流动相为甲醇一水一冰醋酸(79:21:0.25),体积流量
为1.0mL/min,检测波长:294llm,柱温:23℃,进样量:20弘L。结果快速提取的效率较高,提取率比《中国药典》
方法高。和厚朴酚的平均回收率为99.63%,RSD为0.97%;厚朴酚的平均回收率为98.23%,RSD为1.21%。结论
本方法简便、准确、专属性强,能有效地控制开胸顺气丸的质量。
关键词:开胸顺气丸;厚朴酚;和厚朴酚;高效液相色谱
中图分类号:R286.1 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)05—0699—02
开胸顺气丸是由厚朴(姜制)、槟榔、牵牛子
(炒)、陈皮、木香、三棱(醋制)、莪术(醋制)、猪牙皂
组成,为《中国药典>>2005年版一部收录品种,具有
理气和中,消积化滞,行气止痛。用于饮食内停,气郁
不舒导致的胸胁胀满,胃脘疼痛等。厚朴具有抗菌、
抗病毒、抗过敏、影响胃肠活动、肌肉松弛和中枢抑
制等作用[1]。其中厚朴酚及其异构体和厚朴酚是厚
朴中起主要药理作用的化合物。厚朴酚与和厚朴酚
有抑制癌细胞的潜能将会有更加广泛的医药用
途[2’3]。本实验采用ASE300型快速溶剂萃取系统进
行快速萃取开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚,采用
反相高效液相色谱法测定厚朴酚与和厚朴酚,结果
理想。
1材料与仪器
开胸顺气丸为本实验室按照标准自制的产品。
提取用无水乙醇、甲醇为分析纯,色谱条件使用的甲
醇为色谱纯,厚朴酚、和厚朴酚对照品由中国药品
生物制品检定所提供。
美国Dionex公司ASE300型加速溶剂萃取机,
66mL萃取池;美国Dionex公司P680LPG型高效
液相色谱仪。
2方法与结果
收稿日期:2007—07—18
基金项目:国家民委科研项目(07HB04)f湖北省自然科学基金资助项目(2007ABAl64)l湖北省教育厅科研项目(Q200729003)
作者简介:姜宁(1968一),女,江苏南通人。硕士.讲师,从事生物资源保护与利用、生物工艺学、药剂学的教学研究工作。
E—mail:jiangn888@163.corn
*通讯作者刘晓鹏E—mail:liuxp999@163.corn

万方数据
·700· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
2.1供试品溶液的制备:用ASE300型快速溶剂萃
取机进行,采用本课题组优选的方法提取。取干燥的
开胸顺气丸适量,粉碎,过60目筛,取3.0g,按质量
比4。1加入硅藻土混匀后装入萃取池,编程进行萃
取试验(萃取压力为i0.3MPa、乙醇体积分数为
60%、提取3次、提取温度71℃、提取时间为10
min/次),萃取结束后浓缩提取液,定容至25rnL,
即得。
2.2 色谱条件:色谱柱:Diamonsil(TM)C18(250
mm×4.6mlTl,5tlna),流动相为甲醇-水-冰醋酸(79l
21t 0.25),体积流量为1.0mL/min,检测波长:
294Rm,柱温:23℃,进样量:20pL。色谱图见图1。
0 4 8 12 0 4 8 12
t/min
l一和厚朴酚2一厚朴酚
1-honokiol2-magnolol
图1 混合对照品(A)和开胸顺气丸(B)的HPLC图谱
Fig.1HPLCChromatogramsfmixedreferencesubs-
tances(A)andKaixiongShunqiPills(B)
2.3线性范围考察:精密称取厚朴酚、和厚朴酚对
照品适量,加甲醇制成含厚朴酚与和厚朴酚为400、
200、100、50、25、12.5、6.25/19/mL对照品溶液。分
别吸取溶液20pL,进样测定。以质量浓度为横坐
标,峰面积为纵坐标,绘制标准曲线,进行线性回归,
得回归方程。厚朴酚:y一0.435991X+3.423161,
,.=0.999694;和厚朴酚:Y=0.6090 1X+
4.516839,r=0.999526。结果表明厚朴酚与和厚朴
酚在6.25--400I-g/mL与峰面积的线性关系良好。
2.4精密度试验:取供试品溶液,重复进样6次,记
录色谱峰面积,计算得厚朴酚与和厚朴酚的RSD分
别为1.11%、1.43%。
2.5重现性试验:取同一批样品制备5份供试品溶
液,测定厚朴酚与和厚朴酚的色谱峰面积,结果厚朴
酚与和厚朴酚质量分数的RSD分别为1.17%、
1.29%。
2.6稳定性试验:取供试品溶液每隔2h进样1
次,共进样5次,结果供试品溶液在10h内稳定,厚
朴酚与和厚朴酚峰面积的RSD分别为1.17%、
1.09%。
2.7 回收率试验:取批号为060216的开胸顺气丸
5份,各1.0g(含和厚朴酚约0.57mg/g、厚朴酚约
0.57mg/g),分别精密加入和厚朴酚对照品0.05、
0.10、0.15、0.20、0.25mg以及厚朴酚对照品
0.05、0.10、0.15、0.20、0.25nag,制备供试品溶液,
测定,计算其平均回收率。结果厚朴酚的平均回收率
为98.23%,RSD为1.21%;和厚朴酚的平均回收
率为99.63%,RSD为0.97%。
2.8样品测定:分别取不同批号的开胸顺气丸3.0g
制备供试品溶液,以及采用《中国药典>>2005年版项
下方法制备供试品溶液,测定厚朴酚与和厚朴酚的峰
面积,根据回归方程计算样品中厚朴酚与和厚朴酚的
质量分数。每批样品测定3份,以3次测定结果的平
均值作为测定值,结果见表1。可见本实验快速萃取
的方法可以快速而准确地提取开胸顺气丸中的厚朴
酚与和厚朴酚,其提取率比《中国药典》方法高。
表l 开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚的测定结果及
两种方法的比较
Table1 Determinationofmagnololandhonokiol
InKai—xiongShunqiPillsandcomparison
oftwomethods
批号
和厚朴酚/(mg·g一1)厚朴酚/(mg·g-1)总酚/(rag·g-1)
本法 药典法 本法 药典法 本法 药典法
0602160.571l 0.56l7 0.5665 0.553 1.1376 1.1150
0603230.5793 0.5677 0.5681 0.5612 1.1474 1.1289
0605170.5732 0.5624 0.5623 0.5518 1.1355 1.1142
3讨论
本实验采用美国Dionex公司ASE300型快速
溶剂萃取系统提取开胸顺气丸,效果理想,可以快速
而准确地提取其中的厚朴酚与和厚朴酚。《中国药
典>>2005年版收录的方法需要甲醇、盐酸溶液以及
三氯甲烷等试剂反复提取10次之多,过程复杂,人
为误差大。
实验考察了多种RP—HPLC色谱条件,以本实
验采用的色谱条件最优,比《中国药典>>2005年版收
录的方法理想;不仅分离效果、重复性、稳定性等指
标理想,而且省时经济,测定一个样品只需16~20
rain,药典方法则需要近35min。
参考文献:
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万方数据
HPLC法测定快速溶剂萃取开胸顺气丸中厚朴酚与和厚朴酚
作者: 姜宁, 刘晓鹏
作者单位: 姜宁(生物资源保护与利用湖北省重点实验室,湖北,恩施,445000;湖北民族学院生物科学与
技术学院,湖北,恩施,445000), 刘晓鹏(生物资源保护与利用湖北省重点实验室,湖北,恩施
,445000)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2008,39(5)
被引用次数: 1次

参考文献(3条)
1.沈映君 中药药理学 1997
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引证文献(1条)
1.刘翔 HPLC法测定麻仁丸中厚朴酚、和厚朴酚、大黄素和大黄酚[期刊论文]-中草药 2010(4)


本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200805021.aspx