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12虎杖苷　22白藜芦醇
12polydatin 　22resverat rol
图 1 　白藜芦醇对照品( A) 、虎杖苷对照品( B)和虎杖样品( C) HPLC色谱图
Fig. 1 　HPLC Chromatogram of resveratrol reference substance ( A) , polydatin reference substance ( B) , and sample ( C)
表 1 　不同方法处理后虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的量( n = 3)
Table 1 　Determination of resveratrol and polydatin 　　　
in P. cus pidatum after different treatments ( n = 3)
不同处理 白藜芦醇/ (μg ·g - 1) 虎杖苷/ (μg ·g - 1)
新鲜根皮　 158. 43 18 985. 74
新鲜根髓部 41. 49 12 672. 52
新鲜叶　　 22. 38 275. 65
晾干根皮　 86. 72 13 234. 27
晾干根髓部 122. 46 7 464. 37
晾干叶　　 44. 76 269. 37
烘干根皮　 79. 76 10 917. 5
烘干根髓部 47. 76 11 946. 54
烘干叶　　 54. 83 522. 58
3 　讨论
从上述结果可以看出白藜芦醇在新鲜根皮、根
髓部及叶中量都不高。晾干后叶和根髓部中白藜芦
醇量有所提高 ,而根皮中的量减少。烘干后除叶中
的量有所提高外 ,根皮、根髓部中的量降低。
虎杖根皮中虎杖苷的量很高 ,晾干后下降了
60 % ,烘干后则进一步降低。根髓部虎杖苷的量约
为根皮的三分之二 ,晾干后也大幅降低 ,烘干后又有
升高。这一结果显示虎杖苷以新鲜提取为宜 ,自然
放置条件下有效成分会不断降解 ,不宜存放过长
时间。
参考文献 :
[ 1 ] 　中国医学科学院药物研究所. 中药志[ M] . 第一册. 北京 :人民
卫生出版社 ,1978.
[ 2 ] 　舒仕瑜 ,卢仲毅 ,王兴勇. 白藜芦醇生物活性及药理作用 [J ] .
儿科药学杂志 ,2002 ,8 (1) :9211.
[3 ] 　巫志峰 ,赵瑞芝. 白藜芦醇的抗肿瘤药理作用研究新进展[J ] .
中南药学 ,2004 ,2 (3) :167.
HPLC2ELSD 法测定黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
覃红萍1 ,鲁 　静2 ,林瑞超2 3　
(1. 广西食品药品检验所 ,广西 南宁 　530021 ; 2. 中国药品生物制品检定所 ,北京 　100050)
摘 　要 :目的 　研究以 HPLC2EL SD 法测定不同产地的黄芪、红芪及梭果黄芪药材中黄芪皂苷 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(黄芪
甲苷)的量。方法 　色谱柱为 Alltima C18柱 (250 mm ×416 mm , 5μm) ,流动相为乙腈和 013 %甲酸溶液 ,梯度洗
脱 ,体积流量 :018 mL/ min ,柱温 :25 ℃,蒸发光散射检测器 ,EL SD 参数 :漂移管温度 110 ℃,氮气流速 310 L/ min。
结果 　黄芪皂苷 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的平均回收率分别为 10212 %、9915 %、10114 %、9917 % ,RSD 分别为 118 %、211 %、
118 %、119 %。结论 　本法简单易行 ,方法学验证符合要求 ,可作为黄芪药材中皂苷类成分定量的方法 ,也可作为
区别黄芪与红芪、梭果黄芪的依据。
关键词 : HPLC2EL SD ;黄芪 ;黄芪皂苷
中图分类号 :R28216 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0320471203
·174·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
3 收稿日期 :2008205205　　　
作者简介 :覃红萍 (1979 —) ,女 ,广西横县人 ,药师 ,硕士 ,药物分析专业。
Tel : 1397874072 　E2mail : afqhp @sina. com
　　黄芪含有多种化学成分 ,如皂苷类、黄酮类、多
糖类等 ,其中皂苷类是黄芪的主要活性成分 ,具有降
血压、镇静、镇痛等作用[ 1 ] 。目前 ,关于黄芪皂苷的
定量测定多采用比色法、薄层扫描法、HPL C2UV
法、HPL C2示差折光检测器法[2 ] 。但由于该类化合
物没有共轭结构 ,仅在 200 nm 左右有微弱的吸收 ,
易受杂质和溶剂背景吸收的影响。蒸发光散射检测
器 ( Evaporative Light2Scat tering Detector , EL SD)
作为一种新型通用型检测器 ,对黄芪皂苷类等化合
物有较好的响应。
本实验采用 HPL C2EL SD 法对黄芪药材中 4
种皂苷即黄芪皂苷 Ⅰ、黄芪皂苷 Ⅱ、黄芪皂苷 Ⅲ、黄
芪皂苷Ⅳ(黄芪甲苷) 的定量测定方法进行了研究 ;
测定了不同产地的黄芪、红芪及梭果黄芪药材中 4
种皂苷类成分的量。
1 　仪器与试药
AgiLent 1100 系列高效液相色谱仪 ,ChemSta2
tion 色谱工作站 ;美国 ALLtech 2000 型蒸发光散射
检测器 ;MiLLi2Q 纯水发生器。
乙腈为色谱纯 ;甲醇为分析纯 ;纯净水为 RO2
ZY230 型纯水机和 MiLLi2Q 纯水系统二次制备。
试验用黄芪药材样品经中国药品生物制品检定
所中药室张继副主任药师鉴定 ,分别为蒙古黄芪、膜
荚黄芪、梭果黄芪和红芪 ;黄芪皂苷 Ⅰ( E20129) 、黄
芪皂苷 Ⅱ( E20130) 、黄芪皂苷 Ⅲ( E20131) 对照品均
由上海同田生物技术有限公司提供 (峰面积归一化
法测定 ,质量分数 ≥98 %) ,黄芪皂苷 Ⅳ(黄芪甲苷)
对照品由中国药品生物制品检定所提供 (批号 :
1107812200512 ,供定量测定用) 。
2 　方法与结果
211 　色谱条件 :色谱柱为 Alltima C18柱 (250 mm ×
416 mm , 5μm) ;流动相 :A 相为乙腈 ,B 相为 013 %
甲酸溶液 ,梯度洗脱 ,0～15 min 10 %～25 %A ,15～
20 min 25 %A ,20～35 min 25 %～34 %A ,35～40
min 34 %～45 %A ,40～50 min 45 %A ,50～65 min
45 %～65 %A ,65～66 min 65 %～80 %A ,66～70
min 80 %A ;体积流量 :018 mL/ min ,柱温 :25 ℃,蒸
发光散射检测器 , EL SD 参数 :漂移管温度 110 ℃,
氮气体积流量 310 L/ min。色谱图见图 1。
212 　对照品溶液的制备 :分别精密称取经在五氧化
二磷中减压干燥至恒重的黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ对照品适
量 ,加甲醇溶解制成含黄芪皂苷 Ⅰ1125 mg/ mL 、黄
芪皂 苷 Ⅱ 01488 mg/ mL 、黄 芪 皂 苷 Ⅲ 01355
mg/ mL 、黄芪皂苷 Ⅳ01282 mg/ mL 的溶液 ,摇匀 ,
t/ min
图 1 　黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ对照品( A)和黄芪药材( B)
HPLC2ELSD 图
Fig. 1 　HPLC2ELSD Chromatograms of astragaloside
Ⅰ—Ⅳ( A) and Radix Ast ragali ( B)
即得。
213 　供试品溶液的制备 :取本品中粉约 4 g ,精密称
定 ,置索氏提取器中 ,加甲醇适量 ,冷浸过夜 ,加热回
流至无色 ,提取液回收溶剂至干 ,残渣加水 5 mL ,微
热使溶解 ,放冷 ,通过 AB28 树脂柱 ( 115 cm ×12
cm) ,以水 50 mL 洗脱 ,弃去水液 ,再用 20 %乙醇 50
mL 洗脱 ,弃去洗脱液 ,继用 85 %乙醇 100 mL 洗
脱 ,收集 85 %乙醇洗脱液 ,蒸干 ,残渣用甲醇溶解并
转移至 5 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,即得。
214 　线性关系考察 :分别精密吸取对照品溶液 1、
2、5、10、20μL ,注入液相色谱仪 ,测得峰面积积分
值。以峰面积积分值 ( Y) 的对数值为纵坐标 ,分别
以黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ对照品进样量 ( X) 的对数值为横
坐标 ,绘制标准曲线 ,计算回归方程。黄芪皂苷 Ⅰ:
lgY Ⅰ = 11651 2 L g X Ⅰ + 11771 5 , rⅠ = 01999 6 ;黄
芪皂苷 Ⅱ:lg Y Ⅱ = 11597 1 L g X Ⅱ + 21328 7 , rⅡ =
01999 6 ; 黄芪皂苷 Ⅲ: lgY Ⅲ = 11152 5 L g X Ⅲ +
21084 6 , rⅢ = 01999 7 ;黄芪皂苷 Ⅳ:lgY Ⅳ = 11527 1
L g X Ⅳ + 21175 7 , rⅣ = 01999 8。
黄芪皂苷 Ⅰ在 1125～25100μg、黄芪皂苷 Ⅱ在
0149～9176μg、黄芪皂苷 Ⅲ在 0136～7110μg、黄芪
皂苷 Ⅳ在 0128～5164μg 进样量与峰面积积分值呈
良好的线性关系。
215 　精密度试验 :取同一供试品溶液 ,按上述色谱
条件重复进样 5 次 ,测定峰面积积分值 ,结果表明 ,
黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ峰面积积分值 RSD 分别为 219 %、
217 %、210 %、310 %。
216 　稳定性试验 :取同一供试品溶液 ,按上述色谱
条件分别在 0、4、8、12、16、20、24 h 检测 ,测定黄芪
皂苷 Ⅰ～ Ⅳ峰面积积分值 ,结果表明 ,黄芪皂苷 Ⅰ～
Ⅳ峰面积积分值 RSD 分别为 210 %、217 %、214 %、
214 %。
·274· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
217 　重现性试验 :取同一批样品 6 份 ,按供试品溶
液制备方法制备 ,依上述测定条件测定 ,结果表明 ,
黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ的量 RSD 分别为 315 %、410 %、
414 %、413 %。
218 　加样回收试验 :精密称取本品 6 份 ,分别精密
加入对照品溶液 1 mL ,制备供试液 ,按上述测定条
件测定 ,计算回收率 ,结果表明 ,黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ的
平均回收率分别为 10212 %、9915 %、10114 %、
9917 % ,RSD 分别为 118 %、211 %、118 %、119 %。
219 　样品中皂苷类成分的定量测定 :取不同产地的
黄芪、红芪及梭果黄芪药材 ,按照上述方法提取和测
定黄芪皂苷 Ⅰ、黄芪皂苷 Ⅱ、黄芪皂苷 Ⅲ、黄芪皂苷
Ⅳ的量 ,测定结果见表 1。
　　从表 1 结果可知 ,蒙古黄芪和膜荚黄芪均含有
黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ4 种皂苷成分。其中蒙古黄芪的栽
培品与野生品之间差异不大 ,由于所收集的样品数
量较少 (均仅为 1 份野生品) ,上述结论是否正确还
有待进一步验证。梭果黄芪、红芪所含皂苷类成分
与蒙古黄芪和膜荚黄芪差异较大。
3 　讨论
本研究首次建立了同时测定黄芪药材中 4 种皂
苷类成分的方法 ,结果表明 ,所建的方法简单易行 ,
方法学验证符合要求 ,可作为黄芪药材中皂苷类成
分定量的测定方法 ,也可作为区别黄芪与红芪、梭果
黄芪的依据。本研究还系统考察了不同产地的黄
芪、红芪及梭果黄芪皂苷类成分的量情况。
《中国药典》收载的黄芪药材的 2 个品种 ———蒙
古黄芪和膜荚黄芪 ,含有的皂苷类成分及量均接近 ,
皂苷的量为黄芪皂苷 Ⅰ> 黄芪皂苷 Ⅱ> 黄芪皂苷
　　
表 1 　样品中黄芪皂苷 Ⅰ～ Ⅳ测定结果( n = 2)
Table 1 　Determination of astragaloside Ⅰ- Ⅳ
in different samples ( n = 2)
样品 产地或来源
黄芪皂苷
Ⅰ/ %
黄芪皂苷
Ⅱ/ %
黄芪皂苷
Ⅲ/ %
黄芪皂苷
Ⅳ/ %
蒙古黄芪 山西浑源 0. 085 1 0. 030 2 0. 017 1 0. 018 7
蒙古黄芪 山西浑源 0. 071 2 0. 030 1 0. 013 0 0. 019 0
蒙古黄芪 山西浑源 0. 007 7 0. 003 5 0. 003 5 0. 007 9
蒙古黄芪 黑龙江 0. 034 2 0. 011 0 0. 014 4 0. 011 7
蒙古黄芪 内蒙古 0. 034 9 0. 013 5 0. 012 0 0. 014 9
蒙古黄芪 北京同仁堂供 0. 014 7 0. 005 2 0. 004 4 0. 007 2
蒙古黄芪 河北张家口
(野生)
0. 013 2 0. 005 0 0. 002 5 0. 011 8
膜荚黄芪 山西大同 0. 056 8 0. 026 7 0. 020 9 0. 023 2
膜荚黄芪 黑龙江 0. 073 9 0. 024 5 0. 043 6 0. 016 0
梭果黄芪成都莲花池药市 - - 0. 262 0 0. 005 5
梭果黄芪 成都药市 - - 0. 106 4 0. 003 4
梭果黄芪四川康定 (野生) - - 0. 002 9 0. 002 8
红芪 成都 - - 0. 003 4 0. 008 8
红芪 成都 - - 0. 001 6 -
红芪 广西玉林 - - - 0. 009 6
红芪 成都 0. 002 7 0. 001 5 0. 018 9 0. 013 0
Ⅳ> 黄芪皂苷 Ⅲ。以原型存在于药材中的黄芪皂苷
Ⅰ的量较高 ,可作为指标性成分测定黄芪药材中的
皂苷类成分。而地方习用药材梭果黄芪与《中国药
典》品种有较大差别。
参考文献 :
[ 1 ] 　林　琦 ,陆　阳 ,陈泽乃. 黄芪属植物皂苷类成分研究进展
[J ] . 国外医药·植物药分册 ,2002 ,17 (4) :1432146.
[ 2 ] 　汪　红 ,王　强. HPL C2EL SD 法测定黄芪及其注射液中黄芪
甲苷Ⅳ, Ⅲ, Ⅰ的含量 [J ] . 中国药学杂志 ,2002 ,37 (4) : 2982
300.
HPLC2ELSD 法测定不同蜜源蜂王浆中 102HDA
张德东1 ,赵余庆2 3
(1. 辽宁中医药大学 ,辽宁 沈阳 　110032 ; 2. 沈阳药科大学 ,辽宁 沈阳 　110016)
摘 　要 :目的 　通过 HPL C2EL SD 法测定 8 种蜂王浆中 102HDA 的量 ,建立不同来源蜂王浆功效成分的检测和品
质的评价方法。方法 　采用高效液相色谱2蒸发光散射检测法 ( HPLC2EL SD) ,Nucleodur C18色谱柱 (250 mm ×416
mm , 5μm) ,流动相 :甲醇2水 (55 ∶45) ,体积流量 110 mL/ min ;蒸发光散射检测器参数 :漂移管温度 40 ℃,气压 315
kPa。结果 　102HDA 在 01004～01018 mg ( r = 01999 9) 线性关系良好 ,平均加样回收率为 9819 %( RSD = 112 % ,
n = 6) ,检测样品中 6 种蜂王浆的 102HDA 的量大于 114 % ,符合国家标准 ( GB9697288) 。结论 　HPLC2EL SD 法简
便、快速、灵敏、准确、重现性好 ,可作为蜂王浆的质量控制方法。
·374·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
3 收稿日期 :2008206205　　　
作者简介 :张德东 (1981 —) ,辽宁沈阳人 ,硕士 ,生药学专业 ,主要从事天然药物和保健食品开发和应用。3 通讯作者　赵余庆　Tel : (024) 23986522 　E2mail : zyq4885 @126. com