全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1251·
表3 13批自术药材与对照指纹图谱之间的相似度
Table3 Similaritiesof13batchesofsamples
comparedwithreferencefingerprint
样品编号 相似度 样品编号 相似度
S1 0．999 S8 0．997
SZ 0．999 S9 1
S3 l $10 o．996
S4 1 S11 0．999
S5 0．990 S12 0．999
S6 0．996 S13 1
S7 0．999 对照指纹图谱 1
要求。但各共有峰在不同产地中丰度差异较大，其中
只有参照物峰(S)的峰面积占总峰面积10％以上，
其余峰面积均小于10％，其比值范围不作要求。
3讨论 ，
3．1本实验在样品制备、测试条件方面经过大量实
验探索，通过对色谱图全貌(出峰数、分离度等)的反
复考察，认为目前所选用的测试条件较为理想。方法
学考察结果表明，仪器精密度良好，样品稳定性、重
现性亦较好，谱图中各组分的相似度极高，从而说明
该方法建立的指纹图谱准确可靠，特征指纹信息丰
富，专属实用，这对从挥发性成分角度判断白术药材
的质量有一定的参考价值。
3．2不同产地白术中均含有石竹烯等18种成分，
占挥发性总成分的90％以上，具有突出的代表性，故
以此18个特征性指标成分作为共有特征峰建立白
术GC—MS指纹图谱。苍术酮高达60％以上，为最
突出的指标，故以此作为参照峰分析指纹图谱。当然
以上18种成分是否能完全揭示白术挥发性成分的
特征，还有待进一步深入研究，还需要考虑栽培条
件、采收加工、储藏等多种因素的影响。
3．3 本实验初步建立了白术挥发性成分的GC—
MS指纹图谱的分析方法，为白术药材质量评价方
法和GAP实施提供参考依据。
参考文献：
E1]中国药典[s]．一部．2005．
[2]崔庆新，董岩，王怀生．白术挥发油化学成分的GC／MS
分析口]．药物分析杂志，2006，26(1)l124—126．
道地产区地黄不同品种间多糖量的比较
李晓琳1，王敏1，刘红彦2，黄璐琦p，王飞2，吴志刚1
(1．中国中医科学院中药研究所，北京100700；2．河南农业科学院植物保护研究所，河南郑州450002)
摘要：目的 比较道地产区不同品种地黄中多糖的量。方法苯酚一硫酸比色法，线性范围5．3～106．0／-g／mL
(r一0．9997)。结果 以葡萄糖计，北京1号、大红袍、红薯王、北京2号、9302、狮子头、金状元、85—5地黄中多糖质
量分数分别为：12．73％、10．04％、8．32％、7．10％、4．87％、4．11％、2．48％、1．58％。结论不同品种地黄中多糖的
量差异明显，其中以北京1号中多糖的量最高。
关键词：地黄；多糖；苯酚一硫酸法
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1251一03
I
地黄为玄参科植物地黄Rehmanniaglutinosa
Libosch．的新鲜或干燥块根[1]，是常用中药，具有
滋阴清热、补血止血等功效。地黄多糖作为地黄的重
要活性成分[2]，具有增强免疫力、抗肿瘤、抗衰老、促
进造血机能、降血糖等活性[3]。地黄主产于河南，以
旧称“怀庆府”的河南温县、武陵、博爱等地为道地产
区，称为“怀地黄”。目前地黄的栽培品种较多，仅从
温县境内收集到的地黄品种就多达十余种。这些栽
培品种是否存在品质上的差异，是需要深入探讨的
问题。本课题组曾比较了温县的8个栽培品种梓醇量
的差异[‘]，结果表明不同品种在梓醇量上表现出不同
的特性。本实验在此基础上采用苯酚一硫酸法考察上
述不同品种的地黄多糖量，从而研究其品质差异。
1仪器、试剂与材料
PGENERALT6紫外一可见分光光度计(北京
普析通用仪器有限公司)；5810R低温离心机(德国
Eppendorf公司)；KQ一100DE型超声仪(昆山市
超声仪器有限公司)。无水葡萄糖，分析纯(购自国
收稿日期：2007—12-24
基金项目：国家科技部基础性工作专项重点项目2001DEA20010
作者简介：李晓琳(1979一)，女，辽宁省鞍山市人，中国中医科学院中药研究所实习研究员，从事中药分析和生药学研究。
Tel：(010)6401441卜2956E—mailz waterinskykoala@yahoo．com．cll
*通讯作者黄璐琦Tel：(010)64014411-2853E—mail：huangluqi@263．net
万方数据
-1252· 中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
药集团化学试剂有限公司)，苯酚、硫酸、无水乙醇等
试剂均为分析纯。
8个地黄栽部品种分别为：北京1号、大红袍、红
薯王、北京2号、9302、狮子头、金状元、85—5，均于
2002年收集自河南省温县，由河南省温县农业科学
研究所王乾琚研究员鉴定后栽种在该研究所试验田
中，统一管理，同时采收，并置烘箱中于60℃干燥。
取不同品种地黄的完整、干燥块茎逐个称量，取其中
单株质量为10．0～16．7g的块茎进行粉碎(此质
量范围内符合地黄商品药材四等品的范畴)，过80
目筛，充分混匀，置干燥器中备用。
2方法与结果
2．1 供试品溶液的制备：精密称取地黄样品粉末
0．2g，加80％乙醇40mL，25℃超声提取2次，每
次超声时间60rain，以除去单糖、低聚糖、脂类等成
分。提取后在2000r／min下离心20rain，弃去溶
剂，残渣挥干溶剂后，加入40mL蒸馏水，50℃超
声30rain，重复提取2次，滤过，合并2次滤液，移至
100mL量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为供试品贮备
液。测量前取0．2mL供试品贮备溶液置于具塞试
管中，用蒸馏水稀释至2mL作为供试品溶液。
2．2标准葡萄糖溶液的制备：精密称取105℃干
燥至恒重的无水葡萄糖10．6mg，置100mL量瓶
中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，即得0．106rag／
mL的标准葡萄糖溶液。
2．3 5％苯酚试剂的制备：取苯酚100g，铝片0．1
g，碳酸氢钠0．05g，混合，常压蒸馏，收集180～182
℃的馏分，精密称取馏分5．0g，加100mL蒸馏水
溶解，摇匀，置棕色瓶内放冰箱备用。
2．4标准曲线的绘制：精密量取标准葡萄糖溶液
0．05、0．1、0．2、0．4、0．6、0．8、1．0mL分别置于具塞
试管中，加水至2mL，加5％苯酚溶液1mL，摇
匀，迅速加入浓硫酸5mL，置60℃水浴中加热10
rain，取出置冷水浴中冷却5rain。另以蒸馏水2mL
作空白，在490nm处测定吸光度，以浓度与吸光度
作线性回归，回归方程Y一7．8×10_3X+6．9×
10～，，．=0．9997。结果表明葡萄糖在5．3～106．0
弘g／mL线性关系良好。
2．5精密度试验：精密称取大红袍样品粉末0．2
g，按供试品溶液的制备方法和标准曲线的绘制项下
的测定方法，测定吸光度，连续测定5次，RSD为
0．22％，表明精密度良好。
2．6重现性试验：精密称取大红袍样品粉末5份，
各约0．2g，按样品溶液制备方法制备供试品，按标
准曲线绘制项下方法测定吸光度，RSD为2．64％，
表明重现性良好。
2．7稳定性试验：取同一供试品溶液，按标准曲线
绘制项下方法测定吸光度，每隔30rain测定1次，
重复5次，结果表明，供试品溶液在4h内稳定性良
好，RSD为2．64％。
2．8加样回收率实验：精密称取大红袍样品粉末5
份，每份约0．Ig，分别加入不同量的葡萄糖对照品
(加入葡萄糖标准品的量与样品中多糖量的比分别
为1：1、2：1和2：3)，按上述方法测定加样回收
率，结果平均回收率为95．58％，RSD为2．74％。
2．9样品测定：精密称取北京1号、大红袍、红薯
王、北京2号、9302、狮子头样品粉末各约0．2g，金
状元、85—5粉末各约0．4g，按供试品溶液制备方法
制备供试品，按标准曲线绘制项下方法测定吸光度，
测定结果见表1。
表I不同品种地黄多糖血一5)
Table1 PoIysaccharideindifferenteul ivars
ofR．glutinosa(席一5)
3讨论
目前有关地黄多糖质量分数测定的文献相对较
少，且文献报道的地黄多糖量差异较大[5~7]。如纪耀
华等[6]测定的生地黄多糖质量分数为16．95％，而
张留记等[7]测得不同品种的怀地黄多糖质量分数在
1．14％～2．21％[7]。分析这种差异的原因，可能是由
于地黄的不同生长状况、不同加工处理方法、不同的
量测定方法等造成的。为排除试验样品由于来源、状
态或加工处理方法等不同所产生的误差，本实验将
不同品种的地黄栽种在同一块试验田中统一管理和
采收，并采用相同的温度进行干燥，取样时选取大致
相同的块茎大小，尽量扩大取样量，并在粉碎后将粉
末充分混匀，以尽量保证各品种的客观条件基本平
行，使测定结果更客观、更真实地反映不同品种地黄
之间的多糖质量分数的差异。
测定结果表明，在所分析产区的8个主要品种
之间多糖质量分数差异较大，质量分数较高的有北
京l号(12．73％)、大红袍(10．04％)、红薯王
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1253·
(8．32％)、北京2号(7．10％)，质量分数较低的有
9302(4．87％)、狮子头(4．11％)、金状元
(2．48％)：85—5(1．58％)，最高质量分数与最低质
量分数之间有约8倍的差异。这提示即使同在道地
产区，不同品种仍然可能造成地黄质量的较大差异。
地黄不同品种间多糖质量分数与梓醇质量分数之间
并无对应规律。如同为梓醇质量分数较高的品种，北
京1号(梓醇质量分数3．9％)的多糖质量分数很
高，而9302(梓醇质量分数4．3％)所含多糖的质
量分数却较低。但已知具有亲缘关系的金状元和
85—5(金状元为85—5的父本)的多糖质量分数非常
相近，这与其梓醇量也非常相近的结果是一致的。从
多糖的质量分数上来看，北京1号和85—5表现出比
较明显的不同特性，可以作为品种选育的依据之一。
地黄多糖作为地黄的重要活性成分之一，化学
性质比较稳定，理论上是较为理想的地黄质量控制
指标。但由于多糖的提取和测定方法误差较大，所以
长期以来很少被用于地黄的质量控制中。本实验采
用80％乙醇除杂，超声水提获取地黄多糖，然后用
苯酚一硫酸比色法测定其质量分数，与提取粗多糖的
质量分数测定方法相比，方法简便可行，准确度有所
提高。但相对于其他的质量控制方法(如HPLC
等)，多糖提取和质量分数测定方法还需要进一步改
进和提高。
参考文献：
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科学，2007．3：101—102．
(上接第1183页)
排除样品带来的干扰。本实验中样品溶液在加入最后
一种显色剂NaOH溶液时显色，故以样品溶液缺
NaOH显色的溶液为空白溶液，不仅扣除了样品的干
扰，而且最大限度地排除了显色剂带来的干扰。
根据相似相溶原理，酸性溶剂应有利于总酚酸
的提取。由本实验所测的数据来看，提取溶液的pH
值为酸性时，测得丹参总酚酸的量由中性时的6％下
降至2％左右，可能与其离子相互作用有关。丹参总
酚酸通用的方法是在提取时用酸提或是提取完后调
pH值至2左右，其总酚酸的量一般都在2％～3％，
与本实验加酸处理的结果相近。文献报道丹参中丹
酚酸B的量一般都在5％左右[10 。本实验测得的总酚
酸在7％左右，HPLC法与比色法测得的结果一致，
故该实验方法可靠，结果可信。
本实验采用甲醇和水分别超声和回流提取，其
中甲醇对丹酚酸B的提取率较高，虽然回流对丹参
素钠的提取率高，但丹酚酸B不稳定不宜用回流，甲
醇超声时丹参总酚酸在比色法和HPLC法中测得的
提取率均最高，且超声方法简单、易行，综合评价甲
醇超声提取最佳。
本实验对丹参药材中总酚酸的前处理方法进行
了探讨，结果令人满意。从而为提高丹参总酚酸提取
率，减少样品前处理时间，降低实验成本提供了可行
性方法。
参考文献：
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万方数据
道地产区地黄不同品种间多糖量的比较
作者： 李晓琳， 王敏， 刘红彦， 黄璐琦， 王飞， 吴志刚
作者单位： 李晓琳,王敏,黄璐琦,吴志刚(中国中医科学院中药研究所,北京,100700)， 刘红彦,王飞(河
南农业科学院植物保护研究所,河南郑州,450002)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(8)

参考文献(7条)
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