全 文 ：中草蒋 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1129·
表1 MinaxinA的1H—NMR、13C—NMR、HMBC数据
(DMSO—d‘，TMS为内标)
Table1 1H—NMR，13C—NMR，andHMBCspectral
dataofminaxinA(DMSO—d‘withTMS
aSaninternaIstandard)
碳位 1H—NMR(‘，) 13C-NMRHMBC
4．1 细胞培养：人肝癌细胞HepG2(HB一8065，
AmericanTypeCultureCollection，Manassas，
VA，美国)。细胞单层接种在含10％胎牛血清，2
mmol／L谷氨酰胺的RPMI一1640培养液中，在饱和
湿度、37℃、5％CO：的培养箱中培养。
4．2细胞生长抑制：HepG2细胞5×10‘个／mL，接
种于96孔培养板，每孔100弘L。培养12h，分别加入
不同浓度的minaxinA。培养24h后，MTT法测定
细胞生长抑制率。
细胞生长抑制率一[A。(对照)一A。(化合物)]／A570
(对照)×100％
4．3 MinaxinA对人肝癌HepG2细胞的生长抑制
作用：据文献报道[3’‘]，二萜类化合物对多种肿瘤细
胞具有杀伤作用，因此检测化合物对人肝癌HepG2
细胞的生长抑制作用。不同浓度的化合物作用于细
胞24h后，化合物对HepG2细胞的生长表现出一定
的生长抑制作用，且其作用呈明显剂量依赖性，其半
数有效抑制浓度(IC50)为(56．8±1．2)／1mol／L。
参考文献：
[1]江苏新医学院．中药大辞典[M]．上海z上海科学技术出版
社，2005．
[23JiangRW，PaulPHB，MaSC．Furanoditerpenoidlacto ea
fromtheseedsofCaesalpiniam n xHance口]．Phytoche—
mistry，2001，57：517-521．
[83李学汤，林晨，李佩茵．冬凌草甲索体外杀伤细胞作用的
特点[J]．中国药理学报．1986，7(4)：361—363．
[4]冯长伟．潘祥林．邹俊晖，等．冬凌草甲索对人白血病系
K562细胞生长抑制作用[J]．山东中医药大学学报，2000，
24(3)o225—226．
五倍子化学成分研究
李春远1，丁唯嘉1，渠桂荣2
(1．华南农业大学理学院应用化学系，广东广州510642}2．河南师范大学化学与环境科学学院，河南新乡453002)
摘要：目的研究五倍子石油醚和氯仿部位化学成分。方法利用硅胶柱色谱及薄层色谱等进行分离纯化，并通
过1H—NMR、13C—NMR、ESI—MS等波谱技术进行结构鉴定。用二倍稀释法测定了化合物I对尖孢镰刀菌的抗菌活
性。结果共分离得到10个化合物，分别为2一羟基·6一十五烷基苯甲酸(I)、白果酚(I)、棕榈酸一1，3一二甘油酯
(I)、}谷甾醇(Ⅳ)、正二十五烷(V)、4-羟基一3一甲氧基一苯甲酸(V1)、棕榈酸(Ⅶ)、月桂酸(Vt)、肉豆蔻酸(IX)及没
食子酸(x)。结论化合物I～Ⅵ为首次从五倍子中分离得到。化合物I对尖孢镰刀菌显示中等的抗菌活性。
关键词：五倍子’化学成分，抗菌活性
中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1129—04
收稿日期：2007-11-19
基金项目：华南农业大学新学科扶持及大型仪器使用基金(2006XOl3，2007Y006)
作者简介：李春远，男，博士，讲师。主要从事天然产物化学研究． E-mail：chunyuanli@SCaR．edu．cn
万方数据
·1130· 中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8,El
ChemicalconstituentsofGallaChinensis
LIChun—yuanl，DINGWei—jial，QUGui—ron92
(1．DepartmentofAppliedChemistry，CollegeofSci nce。SouthChinaAgriculturalUniversity．Guangzhou510642，
China，2．CollegefCh micalandEnvironmentalScience，HenanNormalU iversity，Xinxiang453002，China)
Abstract：ObjectiveTostudythechemicalconstituentsofthepetroleumandchloroformext actsof
GallaChinensis．MethodsUsingchromatographyonsilicagelcolumnandthin—layerch omatographyto
isolatendpurifythecompounds，usingspectroscopymethodstOelucidateth irstructures；usingdo ble
dilutiontOscreenantibacterialact vitiesonFusaHumoxysporum．ResultsTencompoundswerei olated
andidentifiedas2一hydroxy一6一pentadecylbenzoica id(I)，4一(pentadec一8一enyl)phenol(I)，plamitie
acid一1，3一dipropylester(I)，psitosterol(Ⅳ)，pentacosane(V)，4一hydroxy一3一methoxy—benzoicacid
(VI)，plamitieacid(Ⅶ)，lauricacid(Ⅶ)，myristicacid(IX)，andgallica id(X)．Conclusion
CompoundsI一ⅥareobtainedfromGallaChinensisforthefirsttime．CompoundI showsmoderate
inhibitoryactivityonF．oxysporum．
Keywords：GallaChinensis；chemicalonstituents；antibacterialactivi y
五倍子GallaChinensis，别名文蛤、百虫仓等，始
载于《开宝本草》，为瘿绵蚜科的蚜虫在其寄主植物
漆树科盐肤木属的盐肤木RhuschinensisMill．等树
上的不同部位形成的虫瘿n]。作为中药和化工原料，
五倍子在国内外市场享有盛誉。五倍子对包括海洋
污损菌在内的多种微生物具有抑制作用，其活性成
分被认为主要是鞣质[2]，但无法排除五倍子低极性
部分有具抗菌活性的微量组分，因此笔者对五倍子
的石油醚和氯仿提取物做了分离，一共获得10个化
合物，分别为2一羟基一6一十五烷基苯甲酸(I)、白果
酚(I)、棕榈酸一1，3一二甘油酯(Ⅲ)、p谷甾醇(Ⅳ)、
正二十五烷(V)、3一甲氧基一4一羟基一苯甲酸(Ⅵ)、棕
榈酸(Ⅶ)、月桂酸(Ⅶ)、肉豆蔻酸(Ⅸ)、没食子酸
(x)。其中化合物I～Ⅵ为首次从五倍子中分离得
到。对化合物I的抗菌活性测试表明，其对尖孢镰刀
菌FusariumoxysporumSchlecht．有中等抗菌活性，
最小抑菌浓度(MIC)约为25pg／mL。
1实验部分
1．1 试剂、仪器与材料：VarianMercury2Plus
300(TMS内标)核磁共振波谱仪，VGZAB—HS质
谱仪，X4型显微熔点仪，BrukerEQUINOX55一
A590P3E红外光谱仪，薄层色谱和柱色谱用硅胶为
青岛海洋化工厂生产，所用溶剂均为AR级。五倍子
为市售肚倍，除去虫尸后共5kg。
1．2提取与分离：除去虫尸后的五倍子5kg，粉碎，
分数批放入3L圆底烧瓶中，每批用石油醚加热回
流3次，每次1h，抽滤，收集合并各批提取液，减压
浓缩，共得膏体约10g。将上述五倍子粉晾干后采用
同样方法用氯仿提取，得到膏体约3g，合并浓缩物，
用丙酮溶解后以体积比1：2拌硅胶进行柱色谱分
离，以石油醚一醋酸乙酯一甲醇进行梯度洗脱。收集各
组分后再反复柱色谱分离，制备薄层，反复重结晶，
分别得到化合物I(6mg)、I(3mg)、Ⅲ(3mg)、Ⅳ
(7mg)、V(8mg)、VI(1mg)、Yl(2mg)、Vl(50
mg)、IX(100mg)、X(10mg)。
1．3 抗菌活性测试：对尖孢镰刀菌MIC的测定采
用液体二倍释释法[3]。准确称量化合物I，用DMSO
溶解配成2mg／mL的母液。母液用无菌水作系列的
二倍释释，依次配成l000、500、250、125、62．5、
31．3、15．6、7．8、3．9pg／mL的稀释液。挑取一满环
尖孢镰刀菌新鲜孢子于Sabauraud培养液(葡萄糖
40g，蛋白胨10g，pH值自然)，剧烈振荡使孢子分
散，用无菌棉花过滤除菌丝，于显微镜下计算孢子悬
液中孢子浓度，再用新鲜的Sabauraud培养液作适
当稀释，使孢子悬液浓度为1×104个／mL左右。取
无菌带盖试管，每支中加入0．9mL菌悬液，再加O．1
mL不同浓度的测试液，另取1支加入0．1mL灭菌
水作为对照。28℃恒温箱中静置培养，2d后记录生
长情况，以在对照管中出现明显的菌丝球而含测试
样品试管培养液中无明显生长的菌丝体的最低样品
浓度为对该菌的MIC。
2结果与讨论
2．1 结构鉴定
化合物I：白色针状结晶，mp84～86℃。FAB—
MS349[M+1]+，331；元素分析C75．52％，H
10．28％(理论值C75．86％，H10．34％)；1H—NMR
(TMS，CDCl3)艿：12．3(1H，S)，11．0(1H，brs)，6．78
(】H，d，J=7．7Hz)，6．87(1H，d。J=7．4Hz)，7 37
万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
(1H，t，J一7．8Hz)，2．98(2H，t，J=‘7．6Hz)，1．60
(2H，ITI，重叠)，1．20～1．25(24H，ITI，重叠)，0．89
(3H，q，J=7．6Hz)。13C—NMR(TMS，CDCl3)艿：
110．38，162．63，115．87，135．34，122．76，147．83，
34．46，31．91，29．79，29．79，29．68，29．68，29．60，
29．56，29．56，29．50，29．47，29．35，29．35，22．67，
14．09，173．05。IR％KB。r(cm-1)：3444，2958，2919，
2852，1654，1605，1466，1447，829，815，733。由
FAB-MS和元素分析推出分子式为C：：H。。O。，不饱
和度为7，13C—NMR共有6个双键碳，结合IR雌
(cm_1)：1605，1466，1447的吸收，表明分子中有
一苯环，根据1H—NMRd6．78(1H，d，，=7．7Hz)，艿
6．87(1H，d，J=7．4Hz)，艿7．37(1H，t，J=7．8Hz)
等互为邻位的偶合情况初步判断分子是连三取代的
苯，而IRv2(cm-1)：815进一步证明苯环是连三取
代模式，1H—NMR艿：12．3(1H，s)，11．0(1H，brs)是
活泼H，IR雌(cm_1)：3444表明至少有一个是
一oH，由于此两活泼H化学位移向低场移动很大，因
此可能是苯环上的羟基由于与邻位羧基产生分子内
氢键，由此判断另一活泼H是羧基，与13C—NMR
173．05的C相对应。1H—NMR艿2．98(2H，t，J一7．6
Hz)，艿1．60(2H，In，重叠)，艿1．20～1．25(24H，m，
重叠)，艿0．89(3H，q，J=7．6Hz)；”C—NMR及IR
v—KBr．(cm-1)：733[(一CH：一)。，，z≥4时的摇摆振动]吸
收均表明分子中存在一个长的烷基链，根据
1H—NMR积分及分子式，推出该长链为15个C组成。
与文献数据基本一致[¨，故确定化合物I为2一羟基一
6一十五烷基苯甲酸。
化合物I：无色液体，13C—NMR(DMSo，d。)艿：
157．0，114．9，143．1，118．3，128．4，112．5，35．1，
30．5，28．5，28．4，28．1，28．7，31．3，129．1，30．9，
28．8，26．5，28．8，21．9，13．6。1H—NMR(CDCl3)艿：
0．86(3H，t)，1．25(16H，br)，1．56(2H，q)，2．01
(4H，q)，2．51(2H，t)，5．36(2H，m)，6．63(1H，d)，
6．60(1H，s)，6．92(1H，d)，7．12(1H，t)；FAB—MS：
303[M+1]+，277，207。与文献数据基本一致c5]，故
确定化合物I为白果酚。
化合物I：EI—MS：550[M—H20]+，354，331，
313．299，239，171，98，83，71，57，43。1H—NMR
(CDCl3)d：0．88(6H，t，，=6．0Hz 2×CH3)，1．60
(4H，121，2×CH2)，2．35(4H，t，J=7．4Hz 2×
CHz)，4．14(5H，m，CH，2XCH2)。13C—NMR
(CDCl3)艿：173．5，68．0，64．6，33．7，31．5，24．5，
22．3，13．7。质谱碎片表明分子具有长链结构。
1H—NMR(CDCl。)谱中艿0．88(6H，t，2×CH3)为脂
肪酸链的甲基氢信号；艿1．60(4H，ITl，2×CH2)为与
甲基相邻的亚甲基的氢信号；d2．35(4H，t，‘厂=7．4
Hz，2×CH。)为与羰基相邻的亚甲基的氢信号；艿
4 14(5H ITl)为甘油上5个氢(连羟基)信号。
”C—NMR(CDCl。)谱中艿173．5为酯羰基的碳信号；
其余分别为十六烷酸上的该信号。1H—NMR和
”C—NMR谱提示该化合物具有明显的对称性。其波
谱数据与文献对照基本一致[引，故鉴定化合物I为
棕榈酸一1，3一二甘油酯。
化合物Ⅳ：白色针状结晶，mp137～138℃，
1H—NMR和13C—NMR谱数据与文献中p谷甾醇数据
一致[7]，故确定化合物Ⅳ为p谷甾醇。
化合物V：白色粉末，mp54～56℃，MS、IR和
1H—NMR数据与正二十五烷标准光谱一致[引，结构
得到确认。
化合物VI：白色粉末，mp212～214℃。FAB-
MS(优屈)：169[M+1]+，120，107，89，77，65，51；
IRv2(cm叫)：3479，3100，2952，2650，1679，
1595，1525，1433，1384，1278，1236，1210，
1110，1025，920，885，758；1H—NMR(DMSO，
TMS)d：3．80(3H，s)，6．83(d，，=8Hz)，7．43(1H，
d，J一7．5Hz)，7．45(1H，s)，9．84(1H，s)，12．48
(1H，s)。”C—NMR(DMSO，TMS)艿：55．51(CH3)，
112．65(CH)，114．98(CH)，121．56(C)，123．44
(CH)，147．18(C)，151．07(C)，167．18(C)。与文献
对照[9]确定化合物vI为4一羟基一3一甲氧基一苯甲酸。
化合物Ⅶ：白色粉末，mp60．0--一62．0℃。其IR、
1H—NMR均与棕榈酸的Sadtler标准图谱相符，故鉴
定化合物Ⅶ为棕榈酸。
化合物Ⅶ：白色无定形粉末，GC—MSre／z(％)：
200[-M+]，73，60，57，55，43，41，29，27。经计算机检
索确定化合物Ⅷ为月桂酸。
化合物Ⅸ：白色颗粒状固体，mp55～56℃，IR
v2(cm-1) 3655～3251(br．C00H)，2924，
2870，1706(COO)，1475，937；EI—MSm屈：228
EM+，10．8]，199(3．6)，185，171，157，143，129，73，
60，41，27。与肉豆蔻酸混合熔点不下降，故确定化合
物Ⅸ为肉豆蔻酸。
化合物x：无色方晶，mp235～237℃，艿6．90
(2H，s)，10．13(brs)，13C—NMR(DMSO—d6)d：
121．4，109．1，145．6，138．1，168．3。碳谱数据与文献
值一致[1引，故鉴定化合物x为没食子酸。
2．2抑菌活性：尖孢镰刀菌(Fusariumoxysporum
万方数据
·1132· 中革黄 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第g期2008年8月
Schlechtend：Fr)是一种世界性分布的重要的植物
病原真菌，寄主范围广泛，可引起100多种植物维管
束萎蔫的病害[111。香蕉枯萎病又称黄叶病、巴拿马
病，即为尖孢镰刀菌引起的一种典型的维管束病
害[1纠，轻则引起香蕉减产，品质下降，重则是世界香
蕉生产的毁灭性灾害。香蕉是我国南方的重要农产
品之一，面临该病害蔓延的威胁。而目前生产上用于
防治此病的药物不多，效果也不甚理想，鉴于文献报
道化合物I有抗菌活性[1引，因此本实验测试了其对
尖孢镰刀菌的抗菌作用，结果见表1。由表1可以看
出，2一羟基一6一十五烷基苯甲酸对尖孢镰刀菌MIC约
为25pg／mL，对尖孢镰刀菌有中等强度的抑制活
性，可以作为防治香蕉枯萎病生物农药的先导化合
物进一步研究。
表1 2-羟基一6-十五烷基苯甲酸对尖孢镰刀菌的
最小抑菌浓度
Table1 MICof2-hydroxy--6--pentadecyl
benzoicacidforF．oxysporum
。+”表示有明显生长的菌丝体，“一”表示无明显生长的菌丝体
。+”indicatesobviousgrowthofmycelium．。一”indicateso
obviousgrowthofmyeelium
参考文献：
E13李秀萍，李春远，槊桂荣，等．五倍子的研究概况EJ]．中医
药学报，2002，30(3)：72—74．
E23李春远，郑纪勇，李秀萍，等．五倍子提取物对海洋污损菌
的抑制作用EJi．中药材，2003．26(2)。106—109．
[3]杨瑞云，李春远，林永成，等．Lasiodiplodin澳代衍生物的制
备及抗尖孢镰刀菌活性EJ-]．中山大学学报：自然科学版，
2006，45(4)：130—132．
[4]AnjanaB，MahendraS，AnilBR．Phenolicconstituentsof
Rhusseraialataeaves口]．P如缸Med。1985，51(5)l467—
468．
E53王杰，余碧玉，刘向龙，等．银杏外种皮化学成分的分离
和鉴定EJ3．中草药，1995．26(6)，290—292．
[6]卢立明，宋少江，武勇，等．哈士蟆卵油化学成分研究
(I)EJ]．沈阳药科大学学报，2002，19(1)：25—26．
E73崔益泠，穆青，胡昌奇．红花锦鸡儿化学成分的研究[J]．
中国药学杂志，2004，39(3)：172—174．
E83SadtlerR searchLaboratoriesNuclearM gneticResonance
SpectraEs-I．1973．
[9]YukihiroG，MasaakiS，UshioS．Inhibitorsofprostaglandin
biosynthesisfromMucunabirdu，00diana[J]．ChemP^4朋
BuU，1987，35(7)：2675—2677．
[10]黄帅，周先礼，王洪燕，等．万寿菊花的化学成分[J]．华
西药学杂志，2007，22(4)：371—373．
[113王政逸，李德葆．尖孢镰刀菌的遗传多态性EJ3．植物病理学
报，2000，30(3)：193—199．
[123林兰稳，奚伟鹏，黄赛．香蕉镰刀菌枯萎病防治药剂的筛
选I-J]．生态环境．2003，12(2)：182—183．
[13]宫霞，姚淑敏，卢元芳．银杏叶提取物抑菌作用的研究
EJ-I．食品科学，1999，20(9)：54—56．
猫儿刺叶的化学成分研究
谢光波1，赵明波1，王晓静2，屠鹏飞1’2。
(1．北京大学药学院天然药物学系，北京100083，2．北京大学中医药现代研究中心，北京100083)
摘 要：目的研究猫儿刺llexpernyi叶的化学成分。方法应用硅胶、SephadexLH一20凝胶柱色谱法及半制备
RP—HPLC对其化学成分进行分离，利用光谱数据并结合理化性质鉴定分离得到的化合物。结果从猫儿刺的干燥
叶中分离鉴定了9个化合物，分别为p谷甾醇(I)、(6RS)一(z)一2，6-dimethyl一2，7-octadiene—l，6-diol(I)、(6RS)一
(E)一2，6-dimethyl一2，7-octadiene一1，6-diol(I)、8-hydroxypinoresinol(Ⅳ)、(+)-fraxiresinol(V)、blumenolA(VI)、
胡萝卜苷(vI)、3，5一二咖啡酰奎宁酸丁酯(Ⅶ)、4、5-二咖啡酰奎宁酸丁酯(Ⅸ)。结论该9个化合物均为首次从猫
儿刺中分离得到。
关键词：猫儿刺；冬青属；冬青科
中图分类号：R284．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1132一04
收稿日期：2007—12—29
基金项目：国家自然科学基金项目(30672608)；高校长江学者及创新团队计划(985—2—063一¨2)
作者简介：谢光波(1976一)，男，四川省成都人，北京大学药学院在站博士后，研究方向为生物活性天然产物及新药研究。
E—mail：guangboxie@yahoo．com．ca
*通讯作者屠鹏飞Tel：(010)82802750E—mail：pengfeitu@vip．163．tom
万方数据
五倍子化学成分研究
作者： 李春远， 丁唯嘉， 渠桂荣
作者单位： 李春远,丁唯嘉(华南农业大学理学院应用化学系,广东广州,510642)， 渠桂荣(河南师范大
学化学与环境科学学院,河南新乡,453002)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(8)
被引用次数： 1次

参考文献(13条)
1.李秀萍;李春远;渠桂荣 五倍子的研究概况[期刊论文]-中医药学报 2002(03)
2.李春远;郑纪勇;李秀萍 五倍子提取物对海洋污损菌的抑制作用[期刊论文]-中药材 2003(02)
3.杨瑞云;李春远;林永成 Lasiodiplodin溴代衍生物的制备及抗尖孢镰刀菌活性[期刊论文]-中山大学学报(自然科
学版) 2006(04)
4.Anjana B;Mahendra S;Antl B R Phenolic constituents of Rhus seraialata leaves 1985(05)
5.王杰;余碧玉;刘向龙 银杏外种皮化学成分的分离和鉴定 1995(06)
6.卢立明;宋少江;武勇 哈士蟆卵油化学成分研究(Ⅱ)[期刊论文]-沈阳药科大学学报 2002(01)
7.崔益泠;穆青;胡昌奇 红花锦鸡儿化学成分的研究[期刊论文]-中国药学杂志 2004(03)
8.Sadtler Research Laboratories Nuclear Magnetic Resonance Spectra 1973
9.Yukihiro G;Masaaki S;Ushio S Inhibitors of prostaglandin biosynthesis from Mucuna birdwoodiana
1987(07)
10.黄帅;周先礼;王洪燕 万寿菊花的化学成分[期刊论文]-华西药学杂志 2007(04)
11.王政逸;李德葆 尖孢镰刀菌的遗传多态性[期刊论文]-植物病理学报 2000(03)
12.林兰稳;奚伟鹏;黄赛 香蕉镰刀菌枯萎病防治药剂的筛选[期刊论文]-生态环境 2003(02)
13.宫霞;姚淑敏;卢元芳 银杏叶提取物抑菌作用的研究 1999(09)

本文读者也读过(5条)
1. 郑曙明.黄建军.吴青.沙莎.ZHENG Shu-Ming.HUANG Jian-Jun.WU Qing.SHA Sha 复方五倍子有效成分的分离鉴
定及抑菌活性研究[期刊论文]-水生生物学报2010,34(1)
2. 李秀萍.李春远.渠桂荣.李彩丽 五倍子的研究概况[期刊论文]-中医药学报2002,30(3)
3. 李志国.杨文云.夏定久 中国五倍子研究现状[期刊论文]-林业科学研究2003,16(6)
4. 韩瑞.李建科.曹立强.邓红.HAN Rui.LI Jian-ke.CAO Li-qiang.DENG Hong 五倍子油脂肪酸组成分析[期刊论文
]-粮食与油脂2008(11)
5. 律光明.胡丽娜.李娜.林喆 动物药整理研究——五倍子[期刊论文]-吉林中医药2009,29(12)

引证文献(1条)
1.张莉.吴润.刘磊.王雄 不同提取方法对中草药抑菌效果的影响[期刊论文]-甘肃农业大学学报 2012(2)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200808004.aspx