全 文 ：和水的比例 ,包合时间对实验结果有显著性影响。
最佳因素水平为 A2B1 C2 ,即大蒜油、β2环糊精和水
比例为 1 ∶8 ∶80 ,包合时间 1 h ,包合温度 35 ℃。
213 　验证试验 :按最佳工艺条件精密称取β2环糊精
80 g ,加 800 mL 蒸馏水 ,水浴加热使溶解 ,再降至
35 ℃,不断搅拌 ,在搅拌条件下 ,将 10 mL 蒜油慢慢
加入β2环糊精水溶液中 ,继续搅拌包合 1 h ,冷却 ,置
冰箱中冷藏 24 h ,滤过 ,包合物于低温干燥。结果包
合物的平均收得率为 94178 % ,大蒜素的利用率为
80162 %。两项指标均优于正交设计中的最大值。
3 　讨论
　　实验过程中分别用饱和水溶液法[3 ] 、研磨法、超
声法[ 4 ]进行蒜油β2环糊精包合物的制备 ,结果表明
本实验所用的制备方法最佳。
　　在传统的颗粒制剂工艺中 ,常将提取的挥发油溶
于少量乙醇等溶剂稀释后喷洒到干颗粒中 ,密闭一定
时间后分装 ,生产过程中挥发油极易挥发造成损失。
　　该工艺通过对蒜油的β2环糊精的包合 ,蒜油被
包合后化学成分没有变化 ,制成包合物后溶解度明
显增加 ,可以提高蒜油的生物利用度 ,降低挥发油的
刺激性和副作用 ,大大提高了蒜油的稳定性 ,降低了
挥发油在生产、储存过程中的挥散或氧化变质。
　　该工艺提高了该产品的质量 ,并使挥发油液体药
物固体粉末化 ,便于制成多种剂型 ,该工艺流程短 ,收
得率、包合率、大蒜素的量均较高 ,便于工业化生产 ,
为蒜油制剂的进一步研究提供了一定实验依据。
参考文献 :
[ 1 ] 　金　燕 ,刘桂洁1 大蒜药理作用的研究进展 [J ]1中医药信息 ,
2000 ,17 (6) :332351
[ 2 ] 　徐　巍 ,苏乐群 ,李宏建1 大蒜素的研究进展[J ]1 中国医院药
学杂志 ,2007 ,27 (6) :8051
[ 3 ] 　王　靖 ,张铁军 ,王文燕1 羟丙基2β2环糊精对降香挥发油包合
作用的研究[J ]1中草药 ,2006 ,37 (5) :70027031
[ 4 ] 　赵慧萍 ,王　浩1 正交设计法研究通脉颗粒中β2环糊精包合物
的制备工艺[J ]1中草药 ,2005 ,36 (12) :1821218221
正交试验优选乌药的提取工艺
陈方亮 ,余翠琴 ,徐仙娥 3
(台州市中心医院 ,浙江 台州 　318000)
摘 　要 :目的 　研究乌药的提取工艺。方法 　采用正交试验设计 ,以干浸膏得率和乌药醚内酯提取率为指标 ,选用
L 9 (34 )正交表进行试验。考察乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间对干浸膏得率和乌药醚内酯提取率的影响。结
果 　确定最佳方案为加生药材 10 倍量的 75 %乙醇 ,回流提取 90 min。结论 　优选得到的乌药提取工艺合理、操作
可行、质量可控。
关键词 :乌药 ;乌药醚内酯 ;提取工艺 ;正交设计
中图分类号 :R28412 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721079203
　　乌药为樟科山胡椒属植物乌药 L i n dera ag2
g regat a (Sims) Kosterm1 的干燥块根 ,具散寒、补
中、顺气、开郁之功效 ,能上理脾胃元气 ,下通少阴肾
经。乌药主产浙江、江西、湖南等地 ,历代医家都评
价“以浙江天台所产者品质最佳”。被誉为“长生不
老药”的天台乌药 ,历史悠久 ,品质超群 ,享誉中外 ,
是我国名贵地道药材之一。乌药中主要含有挥发
油、异喹啉类生物碱、黄酮类及倍半萜类成分[ 1 ] ,其
中最能体现乌药特征的成分是呋喃倍半萜及其内酯
类成分。《中国药典》2005 年版一部中以乌药醚内
酯为指标性成分对乌药进行定性鉴别和定量测定。
本实验以干浸膏得率、乌药醚内酯提取率为考察指
标 ,优化了乌药的提取工艺参数。
1 　仪器和试剂
　　Waters2695 高效液相色谱仪 (包括 2695 四元
梯度泵 ,在线脱气机 ,自动进样器 ,柱温箱 ,2487 紫
外检测器 , Empower 色谱工作站) ; Met tler A E200
电子分析天平 ;D GG - 9123A 型电热恒温鼓风干燥
箱 ;XW —80A 型旋涡混合器 ; 0412 —1 型台式离心
机 ; HS2060 型超声波清洗器。
·9701·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008212220　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :台州市科技计划项目基金资助 (061ky25)
作者简介 :徐方亮 (1975 —) ,男 ,浙江台州人 ,副主任药师 ,学士 ,主要从事医院药学与临床药学研究工作。
Tel : (0576) 88526053 　E2mail :cfl1975 @126. com
　　乌药由天台山乌药生物工程有限公司提供 ,经
本院中药房黄瑞平副主任药师鉴定为樟科山胡椒属
植物乌药 L1 ag g reg at a ( Sims) Kosterm1 的干燥
块根 ;乌药醚内酯对照品 (中国药品生物制品检定
所 ,批号 15682200201) ;甲醇、乙腈为色谱纯 ;水为
双重蒸馏水 ;其他试剂为分析纯。
2 　方法与结果
211 　因素与水平的确定 :乌药中的活性成分以脂溶
性成分为主 ,因此 ,乙醇提取工艺比水提工艺合理。
为了对影响提取效果的乙醇体积分数 (A) 、乙醇用
量 (B) 、提取时间 (C)进行优选 ,以干浸膏得率、乌药
醚内酯提取率为评价指标 ,选用 L 9 (34 ) 正交表进行
试验。因素水平见表 1。
表 1 　因素与水平
Table 1 　Factors and levels
水平
因　素
A/ % B/ 倍 C/ min
1 55 5 60
2 75 10 90
3 95 15 120
212 　乌药醚内酯的测定[2 ]
21211 　色谱条件 : Symmet ry C18柱 (250 mm ×416
mm ,510μm) ;流动相 :乙腈2水 (57 ∶43) ;体积流
量 :1 mL/ min ;检测波长 :235 nm ;柱温 :28 ℃;进样
量为 5μL 。
21212 　对照品溶液的配制 :精密称取乌药醚内酯对
照品 2515 mg 置于 50 mL 量瓶中 ,用甲醇溶解并稀
释至刻度 ,即得含乌药醚内酯 01510 mg/ mL 对照品
溶液。
21213 　线性关系考察 :精密吸取 01510 mg/ mL 乌
药醚内酯对照品溶液 015、110、210、510、1010 mL
分别置于 25 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,进样
测定。以质量浓度为横坐标 ,峰面积为纵坐标绘制
标准曲线 ,求得回归方程为 A = 10 300 C - 18 900 ,
r = 01999 9 ,线性范围为 1012～510μg/ mL 。
21214 　精密度试验 :取 01510 mg/ mL 乌药醚内酯
对照品溶液 ,按上述色谱条件连续重复进样 5 次 ,测
定峰面积 , 结果乌药醚内酯峰面积的 RSD 为
0162 %。
21215 　重现性试验 :取同一批乌药药材 ,制备 5 份
供试液 ,进行测定 ,测得乌药醚内酯的平均质量分数
为 01114 5 % ,RSD 为 1164 %。
21216 　稳定性试验 :取乌药药材 ,制备供试液每 8
h 测定 1 次 ,测定 6 次 ,得乌药醚内酯的质量分数的
RSD 为 2143 %。
21217 　加样回收率试验 :取乌药药材浸膏 5 份 ,精
密称定 ,分别加入 01102 mg/ mL 乌药醚内酯对照品
溶液 5 mL ,制备供试品溶液 ,进样 ,计算 ,结果乌药
醚内酯的加样回收率为 98183 % ,RSD 为 2157 %。
21218 　乌药药材中的乌药醚内酯测定 :参照《中国
药典》2005 年版一部乌药项下方法。取药材细粉
110 g ,加乙醚 50 mL ,回流提取 4 h ,滤过 ,取提取液
挥干 ,残渣用甲醇分次溶解 ,转移至 50 mL 量瓶中 ,
加甲醇至刻度 ,摇匀 ,滤过 ,取滤液进样测定 ,根据标
准曲线计算 ,结果乌药醚内酯的平均质量分数为
01184 2 % ,RSD 为 3166 %( n = 5) 。
21219 　各试验产物中乌药醚内酯测定 :精密称取各
试验所得浸膏约 1 g ,置 10 mL 锥形瓶中 ,精密加入
甲醇 10 mL ,称定质量 ,超声提取 30 min ,放冷 ,补充
质量 ,摇匀 ,滤过。精密量取续滤液 2 mL ,置 10 mL
量瓶中加甲醇至刻度 ,摇匀 ,即得。取供试品溶液适
量置于自动进样瓶中 ,按上述色谱条件进样 10μL ,
连续重复进样 3 次 ,测定峰面积 ,取平均值 ,根据回
归方程计算乌药醚内酯的质量分数。
213 　干浸膏得率的测定 :取各试验所得的浸膏约
1 g ,精密称定 ,水浴蒸干后 ,于 105 ℃干燥 5 h ,置干
燥器中冷却 30 min ,迅速精密称定质量 ,再于 105
℃干燥 1 h ,冷却称定质量 ,至两次质量的差异不超
过 5 mg 为止记录干膏质量 ,计算干膏得率。
214 　正交试验设计与结果 :取乌药药材约 20 g ,精
密称定 ,按正交试验表中确定的实验条件回流提取 ,
将各试验组制得的醇提液滤过 ,合并滤液 ,回收乙醇
至无醇味 ,记录浸膏量。依次测得每组干浸膏得率
及每组浸膏中乌药醚内酯提取率 ,按指标主次进行
综合评分 ,规定乌药醚内酯提取率占 65 % ,干浸膏
得率占 35 % ,综合评分 = 35/ 最大浸膏得率 ×浸膏
得率 ×100 % + 65/ 最大乌药醚内酯提取率 ×乌药
醚内酯提取率 ×100 %。对结果进行计算得到评分
值 ,结果见表 2。
　　根据极差大小得知 ,影响提取工艺的主次因素 ,
依次为乙醇体积分数、乙醇用量、提取时间 ,而最佳
提取工艺则为 A2B2 C2 ,即以 10 倍生药体积的 75 %
乙醇 ,回流提取 90 min。
　　把空白作为误差列进行方差分析 ,见表 3。
215 　验证试验 :取乌药药材 200 g ,共 5 批 ,按最佳
工艺进行放大试验 ,各批次的乌药醚内酯提取率分
别 为 63198 %、 62117 %、 64136 %、 65164 %、
64177 % , 浸 膏 得 率 分 别 为 10115 %、11169 %、
9198 %、9185 %、10112 %。
·0801· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
表 2 　正交试验设计与结果
Table 2 　Design and results of orthogonal test
试验
号
A B C D
乌药醚内酯
提取率/ %
浸膏得
率/ %
综合评
分/ %
1 1 1 1 1 41144 71 02 65116
2 1 2 2 2 57144 71 95 84129
3 1 3 3 3 37134 61 31 58167
4 2 1 2 3 64114 91 63 96167
5 2 2 3 1 65113 101 32 100100
6 2 3 1 2 58137 91 31 89183
7 3 1 3 2 61190 71 86 88144
8 3 2 1 3 62159 81 83 92141
9 3 3 2 1 61153 81 12 88195
K1 2081 11 250127 247140 2541 11
K2 2861 50 276169 269190 2621 55
K3 2691 79 237144 247110 2471 74
R 261 13 13108 7160 41 94
表 3 　方差分析
Table 3 　Analysis of variance
方差来源 离差平方和 自由度 方差 F值 显著性
A 1 1361 38 2 5681 19 301 89 P < 01 05
B 2671 07 2 1331 54 71 26
C 1141 05 2 571 03 31 10
D(误差) 361 78 2 181 39
　　F0105 (2 ,2) = 191 00
3 　讨论
　　乌药醚内酯测定方法探索时 ,进行了确定流动
相的试验 ,发现甲醇与水组合基线波动大于乙腈与
水的组合 ,随着乙腈比例的增加 ,乌药醚内酯的出峰
时间逐渐提前 ,但与其他成分分离度不理想 ,最后
确定以乙腈2水 (57 ∶43) 为流动相可使出峰时间与
分离度达到比较理想的状况。
　　在提取工艺的试验中曾比较过回流提取法与超
声提取法 ,发现超声提取法得到的浸膏量较少 ,不利
于进一步试验 ,于是选用回流提取。本实验按最佳
提取工艺放大试验后得到的药材中平均乌药醚内酯
总提取量为 118123 mg/ 100 g ,与梁汉明等[ 3 ] 报道
的 CO2 超临界提取工艺中最大总萃取量 128135
mg/ 100 g 相差不大 ,但本实验的浸膏得率远大于其
萃取的油状物得率 ,这估计与提取溶剂有很大关系。
参考文献 :
[ 1 ] 　王军伟 ,阮　冰1 乌药的植化及药理研究概况 [J ]1 浙江中医
杂志 ,2006 ,41 (11) :6751
[ 2 ] 　余翠琴 ,陈方亮1 高效液相色谱法测定乌药中乌药醚内酯[J ]1
中草药 ,2009 ,40 (6) : 98329841
[ 3 ] 　梁汉明 ,郭晓玲 ,冯毅凡 ,等1 乌药超临界二氧化碳萃取工艺的
研究[J ]1 时珍国医国药 ,2007 ,18 (3) :64326441
共振瑞利散射法测定粉防己中粉防己碱
孙 　艳 ,王 　驰 3
(重庆医科大学药学院 ,重庆 400016)
摘　要 :目的 　研究刚果红和粉防己碱的结合反应 ,建立测定粉防己碱的新方法。方法 　p H 410 BR 缓冲液中 ,刚
果红与粉防己碱通过分子间作用力形成离子缔合物 ,使λex =λem = 380 nm 波长的共振瑞利散射信号加强。结果
该方法在 0106～011 mg/ mL 呈线性关系 ,检测限为 013μg/ mL 。对 6 批粉防己中粉防己碱测定的结果与高效液
相色谱法基本一致。平均回收率为 9819 % ,RSD 为 1171 %( n = 6) 。结论 　此方法灵敏度高 ,稳定性好 ,可用于防
己中粉防己碱的测定。
关键词 :粉防己 ;粉防己碱 ;共振瑞利散射
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721081203
　　粉防己碱又名汉防己甲素 ,是千金藤属防己科
植物粉防己 S tep hani a tet rand ra S1 Moore 根中主
要生物活性成分 ,化学结构属双苄基异喹啉化合物 ,
有抗心肌、肾缺血、抗高血压、抗肝纤维化、抗肿瘤多
药耐药性、抗缺氧性肺动脉高压等多种药理作用 ,特
别是作为一种天然的肿瘤细胞多药耐药逆转剂在肿
瘤防治方面有其良好的应用前景。目前分析粉防己
碱的方法主要是高效液相色谱法[1 ] ,薄层扫描法[2 ]
和紫外分光光度法[ 3 ] ,但这些方法操作烦琐 ,且灵敏
度较低。弹性光散射是指辐射光波长与入射光波长
·1801·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008209228　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :孙　艳 (1980 —) ,女 ,陕西丹凤人 ,重庆医科大学药学院硕士研究生 ,2003 年毕业于重庆医科大学药学专业 ,2003 —2005 年工
作于丽珠集团苏州新宝制药厂技术部 ,研究课题 :靶向 L H2R H 多肽复合物的制备及效果评价。
Tel : (023) 68485578 　E2mail :yanziyanzi710 @1261com