全 文 ：金叶子叶化学成分的研究
宋丽华1 ,2 ,杨胜祥1 ,2 3 ,李跃中1 ,姜 　坤1
(11 淮南联合大学 ,安徽 淮南 　232038 ; 21 西北农林科技大学 ,陕西 杨凌 　712100)
摘 　要 :目的 　研究金叶子叶的化学成分。方法 　利用柱色谱 (正相硅胶、RP218、大孔吸附树脂和 Sephadex L H2
20) 、制备 HPLC 和光谱方法分离鉴定化学成分。结果 　从金叶子的叶中分离得到 10 个化合物 ,分别鉴定为 2α,
3β,232t rihydroxyurs25 ,122dien2282oic acid ( Ⅰ) 、2α,3β,232t rihydroxyurs2122en2282oic acid ( Ⅱ) 、12O2(β2D2glucopyr2
anosyl)2(2 S ,3 S ,4 R ,8 Z)222[ (2′R)22′2hydroxydocosanoilamino ]28 ( Z)2octadecene21 ,3 ,42t riol ( Ⅲ) 、槲皮素232O2β2半
乳吡喃糖苷 ( Ⅳ) 、槲皮素232O2β2D2吡喃葡萄糖苷 ( Ⅴ) 、槲皮素232O2α2阿拉伯呋喃糖苷 ( Ⅵ) 、山柰酚232α2鼠李吡喃糖
苷 ( Ⅶ) 、金叶子毒素2Ⅶ(craibiotoxin Ⅶ, Ⅷ) 、金叶子毒素2Ⅷ( Ⅸ) 、proanthocyanidin A22 ( Ⅹ) 。结论 　化合物 Ⅲ和 Ⅴ
为首次从该植物叶中获得。
关键词 :金叶子 ;黄酮苷 ;化学成分
中图分类号 :R28411 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0921377204
　　杜鹃花科植物金叶子 Craibiodend ron y un2
nanese Smit h 为常绿小乔木。除滇东北外 ,云南全
省均有分布 ,常生于海拔1 600～3 200 m 的干燥向
阳处。金叶子味涩 ,微辛 ,性温 ,有剧毒 ;常以叶入
药 ,有发表温经、活络止疼之功效 ,用于治疗跌打损
伤 ,风湿麻木 ,外感风寒 ,也可用于治疗骨折、瘫痪和
胃疼。金叶子有大毒 ,人食叶七片 ,即发生呕吐 ,头
晕 ,嘴舌发麻 ,重者可昏迷数天才恢复正常 ,有“半天
昏”之称[1 ] 。我国学者对金叶子叶的化学成分进行
了研究 ,从中分离出多种二萜、三萜、黄酮和多酚类
化合物等[2 ,3 ] 。为了进一步了解金叶子的化学成分
及生物活性 ,为其作为治疗风湿关节痛和跌打损伤
的药物提供科学的物质基础 ,对金叶子叶的化学成
分进行了研究 ,从金叶子叶的甲醇提取液的正丁醇
部分分离得到 10 个化合物 ,分别鉴定为 2α,3β,232
t rihydroxyurs25 ,122dien2282oic acid ( Ⅰ) 、2α,3β,232
t rihydroxyurs2122en2282oic acid ( Ⅱ) 、12O2(β2D2glu2
copyranosyl )2( 2 S , 3 S , 4 R , 8 Z )222[ ( 2′R )22′2
hydroxydocosanoilamino ]28 ( Z)2octadecene21 , 3 , 42
t riol ( Ⅲ) 、槲皮素232O2β2半乳吡喃糖苷 ( Ⅳ) 、槲皮
素232O2β2D2吡喃葡萄糖苷 ( Ⅴ) 、槲皮素232O2α2阿拉
伯呋喃糖苷 ( Ⅵ) 、山柰酚232α2鼠李吡喃糖苷 ( Ⅶ) 、金
叶子毒素2Ⅶ( Ⅷ) 、金叶子毒素2Ⅷ( Ⅸ) 、proant hocy2
anidin A22 ( Ⅹ) 。其中化合物 Ⅲ和 Ⅴ为首次从该植
物中分离得到。
1 　仪器和试药
熔点仪为 XRC —1 型显微熔点仪 ,四川大学科
仪厂出品。NMR 用 Bruker AM —400 和 Bruker
DRX —500 型核磁共振仪测定 (500 M Hz , TMS 为
内标) ;质谱用 V G AU TO Spec —3000 质谱仪测定 ;
制备 HPL C 用 ODS22 MA G 柱。柱色谱用硅胶
(300～400 目)和薄层色谱用硅胶 G均由青岛海洋
化工厂生产。反相用材料 RP218 为 Merck 公司产
品。大孔吸附树脂为天津化工厂生产的 D2101 聚苯
乙烯型大孔吸附树脂。显色为 254、365 nm 荧光 ,
10 %硫酸2乙醇溶液加热显色。其余试剂均为分析
纯。样品金叶子采自昆明植物园 ,由云南省药物研
究所生药室鉴定为 C1 y unnanese Smith。
2 　提取分离
样品 115 kg ,粉碎 ,工业甲醇加热回流提取 3
次 ,合并提取液减压浓缩得总浸膏 ,加水悬浮后分别
用醋酸乙酯和正丁醇萃取 ,得正丁醇浸膏 30 g。正
丁醇浸膏溶解后用大孔树脂粗分 ( MeO H2H2 O ,
30 ∶1 ,60 ∶1 ,90 ∶1 ,100 ∶0) 。90 ∶1 部分经反复
的硅胶柱色谱、RP218、制备 HPL C、Sep hadex L H2
20 处理后得到化合物 Ⅰ～ Ⅹ。
3 　结构鉴定
化合物 Ⅰ:白色粉末 ; C30 H46 O4 ; FAB + - MS
m/ z :471 [ M + H ] + ( 30) , 437 ( 32) , 409 ( 65) , 248
(100) , 203 ( 70) , 133 ( 65) ; 1 H2NMR ( C5 D5 N , 400
M Hz) δ: 3161 ( 1 H , s , H22β) , 3139 ( 1 H , d , J =
914 Hz , H23α) ,4107 (1 H ,t ,J = 917 Hz , H25) ,5147
·7731·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 9 期 2009 年 9 月
3 收稿日期 :2009203216　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :宋丽华 ,副教授 ,从事天然产物化学的教学和研究工作。3 通讯作者　杨胜祥　Tel : (029) 87092515 　E2mail :ysx19821028 @yahoo1com1cn
(1 H ,br s , H212) ,2163 (1 H ,d ,J = 1113 Hz , H218) ,
1122 ,1121 ,1119 , 1100 , 0198 , 0196 ( 6 ×3 H , s , 6 ×
CH3 ) ,1106 (3 H ,d , J = 814 Hz ,292CH3 ) ;13 C2NMR
(C5 D5 N ,125 M Hz)δ: 4812 ( t , C21) ,6817 ( d , C22) ,
8319 (d , C23) ,3919 ( s , C24) ,13914 ( s , C25) ,12516
(d ,C26) ,3316 (t ,C27) ,3915 ( s ,C28) ,4812 (d ,C29) ,
3916 ( s , C210 ) , 2510 ( t , C211 ) , 12215 ( d , C212 ) ,
14419 (s ,C213) ,4410 ( s ,C214) ,2817 (t ,C215) ,2612
(t ,C216) ,4811 (s ,C217) ,5610 (d ,C218) ,4011 (d ,C2
19) ,3919 ( d , C220) ,3111 ( t , C221) ,3715 ( t , C222) ,
2914 (q ,C223) ,1716 (q ,C224) ,171 5 (q ,C225) ,1819
(q ,C226) ,2318 (q ,C227) ,18012 ( s ,C228) ,1710 ( q ,
C229) ,2114 ( q , C230) 。以上数据与文献报道[4 ] 一
致 ,确定化合物 Ⅰ为 2α,3β,232t rihydroxyurs25 ,122
dien2282oic acid。
化合物 Ⅱ: 白色粉末 ; C30 H48 O5 ; FAB + - MS
m/ z :489[ M + H ] + (25) ,543 (4) ,488 (5) ,419 (7) ,
356 (6) ,299 (14) ,282 (12) ,264 (17) ,207 (100) ,172
(43) ,115 (50) ;1 H2NMR (C5 D5 N ,400 M Hz)δ:4124
(1 H ,m , H22β) , 4128 (1 H , m , H23α) , 5145 (1 H , s ,
H212) ,2160 (1 H ,d ,J = 1114 Hz , H218) ,3171 (1 H ,
d ,J = 1015 Hz , H223α) ,4123 (1 H ,d , J = 1015 Hz ,
H223β) , 1105 , 1111 , 1118 , 1112 ( 4 ×3 H , s , 4 ×
CH3 ) ,0189 (3 H ,d ,J = 519 Hz , H229) ,0184 (3 H ,br
s , H230) ;13 C2NMR (C5 D5 N ,125 M Hz)δ:4810 (t ,C2
1) ,6819 (d ,C22) ,7812 ( d ,C23) ,4317 ( s ,C24) ,4810
(d ,C25) ,1815 (t ,C26) ,3312 ( t ,C27) ,4011 ( s ,C28) ,
4719 (d ,C29) ,3813 ( s ,C210) ,2318 ( t , C211) ,12516
(d ,C212) ,13913 ( s , C213) ,4216 ( s , C214) ,2817 ( t ,
C215) ,2419 ( t , C216) , 4811 ( s , C217) , 5315 ( d , C2
18) ,3914 (d ,C219) ,3913 ( d ,C220) ,3110 ( t ,C221) ,
3715 ( t , C222) ,6614 ( t , C223) ,1415 ( q , C224) ,1715
(q ,C225) ,2319 (q ,C227) ,18010 ( s ,C228) ,1715 ( q ,
C229) ,2114 ( q , C230) 。以上数据与文献报道[5 ] 一
致 ,确定化合物 Ⅱ为 2α,3β,232t rihydroxyurs2122en2
282oic acid。
化合物 Ⅲ:白色粉末 ; C46 H89 NO10 ; FAB - - MS
m/ z :814[ M - H ] - (100) ,652[ M - H - C6 H11 O5 ] -
(23) , 339 ( 20) , 311 ( 32) , 183 ( 28) , 159 ( 12) , 119
(21) ,99 (44) ,80 (22) ;1 H2NMR (C5 D5 N ,400 M Hz)
δ:8159 (1 H ,d , J = 718 Hz ,2N H) ,4172 (1 H ,dd , H2
1α) ,4151 (1 H , m , H21β) ,4121 (1 H ,dd , H23) ,4120
(1 H ,m , H24) ,5149 (1 H ,m , H28) ,5149 (1 H ,m , H2
9 ) , 4157 ( 1 H , dd , H22′) , 4195 ( 1 H , d , H21″) ;
13 C2NMR (C5 D5 N ,125 M Hz)δ: 7015 ( t , C21) ,5117
(d ,C22) ,7519 (d ,C23) ,7214 (d ,C24) ,3410 (t ,C25) ,
2618 (t , C26) , 2810 ( t , C27) , 13019 ( d , C28) , 13012
(d ,C29) ,2716 (t ,C210) ,2310～3210 (t ,C211～17) ,
1413 ( q , C218 , C222′) , 17517 ( s , C21′) , 7215 ( d , C2
2′) ,3516 ( t , C23′) , 2310～ 3212 ( t , C24′～ C221′) ,
10516 (d ,C21″) ,7512 ( d ,C22″) ,7815 ( d ,C23″) ,7114
(d ,C24″) ,7816 (d ,C25″) ,6216 (t ,C26″) 。以上数据
与文献报道[6 ] 一致 ,确定化合物 Ⅲ为 12O2(β2D2glu2
copyranosyl)2( 2 S , 3 S , 4 R , 8 Z)222[ ( 2′R )22′2hydr2
oxydocosanoilamino ]28 ( Z)2octadecene21 ,3 ,42t riol。
化合物 Ⅳ:黄色粉末 ; C21 H20 O12 ; FAB - - MS
m/ z : 463 [ M - H ] + ( 100 ) , 300 ( 25 ) ; 1 H2NMR
(C5 D5 N ,400 M Hz)δ: 6163 (1 H , d , J = 116 Hz , H2
6) ,6168 (1 H ,d ,J = 116 Hz , H28) ,8144 (1 H ,d , J =
119 Hz , H22′) , 7125 ( 1 H , d , J = 814 Hz , H25′) ,
8109 (1 H ,dd , J = 119 ,814 Hz , H26′) ,6102 (1 H ,d ,
J = 717 Hz , H21″) ,4179～4113 (5 H ,m , H22″～6″) ;
13 C2NMR ( C5 D5 N , 125 M Hz ) δ: 15810 ( s , C22 ) ,
13516 (s ,C23) ,17819 ( s , C24) ,16218 ( s , C25) ,9919
(d ,C26) ,16610 ( s ,C27) ,9416 (d ,C28) ,15717 ( s ,C2
9) ,10513 (s ,C210) ,12214 (s ,C21′) ,11613 (d ,C22′) ,
14618 ( s , C23′) , 15018 ( s , C24′) , 11810 ( d , C25′) ,
12218 (d ,C26′) ,10516 (d ,C21″) ,7315 (d ,C22″) ,7515
(d ,C23″) ,6919 (d ,C24″) ,7717 (d ,C25″) ,6210 ( t ,C2
6″) 。以上数据与文献报道[7 ] 一致 ,确定化合物 Ⅳ为
槲皮素232O2β2半乳吡喃糖苷。
化合物 Ⅴ:黄色粉末 ; C21 H20 O12 ; FAB - - MS
m/ z :463 [ M - H ] + ( 100) , 447 ( 5) , 300 ( 22) , 171
(17) ,97 (24) ; 1 H2NMR (C5 D5 N ,400 M Hz)δ: 8142
(1 H , d , J = 211 Hz , H22′) ,8110 (1 H , dd , J = 814 ,
210 Hz , H26′) , 7122 ( 1 H , d , J = 814 Hz , H25′) ,
6167 (1 H ,d ,J = 210 Hz , H28) ,6161 (1 H ,d , J = 210
Hz , H26) ,6104 (1 H , d , J = 718 Hz , H21″) , 4179～
4115 ( 5 H , m , H22″～ 6″) ; 13 C2NMR ( C5 D5 N , 125
M Hz)δ: 17819 ( C24 ) , 16610 ( C27 ) , 16217 ( C25 ) ,
15718 ( C29) , 15716 ( C22) , 15018 ( C24′) , 14618 ( C2
3′) ,13518 ( C23) ,12218 ( C21′) ,12213 ( C26′) ,11718
(C25′) , 11613 ( C22′) , 10515 ( C210) , 10512 ( C21″) ,
9918 ( C26) , 9416 ( C28) , 7715 ( C25″) , 7515 ( C23″) ,
7314 (C22″) ,6918 ( C24″) ,6119 ( C26″) 。以上数据与
文献报道[8 ]一致 ,确定化合物 Ⅴ为槲皮素232O2β2D2
吡喃葡萄糖苷。
化合物 Ⅵ:黄色粉末 ; C20 H18 O11 ; FAB - - MS
·8731· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 9 期 2009 年 9 月
m/ z : 433 [ M - H ] + ( 100 ) , 301 ( 40 ) ; 1 H2NMR
(C5 D5 N ,400 M Hz)δ: 6147 (1 H , d , J = 210 Hz , H2
6) ,6169 (1 H ,d ,J = 210 Hz , H28) ,8126 (1 H ,d , J =
210 Hz , H22′) , 7132 ( 1 H , d , J = 814 Hz , H25′) ,
7195 (1 H ,dd , J = 210 ,814 Hz , H26′) ,5119 (1 H ,d ,
J = 218 Hz , H21″) ,3188～41 86 (4 H ,m , H22″～5″) ;
13 C2NMR ( C5 D5 N , 125 M Hz ) δ: 15718 ( s , C22 ) ,
13418 (s ,C23) ,17913 ( s , C24) ,16219 ( s , C25) ,9918
(d ,C26) ,16610 ( s ,C27) ,9416 (d ,C28) ,15811 ( s ,C2
9) ,10513 (s ,C210) ,12215 (s ,C21′) ,11712 (d ,C22′) ,
14712 ( s , C23′) , 15017 ( s , C24′) , 11617 ( d , C25′) ,
12214 (d ,C26′) ,10919 (d ,C21″) ,8315 (d ,C22″) ,7910
(d ,C23″) ,8817 (d ,C24″) ,6216 (t ,C25″) 。以上数据
与文献报道[7 ]一致 ,确定化合物 Ⅵ为槲皮素232O2α2
阿拉伯呋喃糖苷。
化合物 Ⅶ;黄色粉末 ; C21 H20 O10 ; FAB - - MS
m/ z : 431 [ M - H ] + ( 100 ) , 382 ( 12 ) ; 1 H2NMR
(CD3 OD ,500 M Hz)δ: 6127 (1 H ,d , J = 211 Hz , H2
6) ,6148 (1 H ,d ,J = 211 Hz , H28) ,7103 (2 H ,d , J =
818 Hz , H23′,5′) ,7186 (2 H , d , J = 818 Hz , H22′,
6′) ,5156 (1 H ,s , H21″) ,4107～2106 (3 H ,m , H22″～
5″) , 0191 ( 3 H , d , J = 518 Hz , H26″) ; 13 C2NMR
(CD3 OD ,125 M Hz)δ: 15719 ( s , C22) ,13517 ( s , C2
3) , 17912 ( s , C24) , 16311 ( s , C25) , 9915 ( d , C26) ,
16419 (s ,C27) ,9415 ( d , C28) ,1601 8 ( s , C29) ,10517
(s ,C210) ,12214 (s ,C21′) ,13116 (d ,C22′,6′) ,11612
(d ,C23′,5′) ,15814 ( s , C24′) ,10517 ( d , C21″) ,7114
(d ,C22″) ,7211 ( d ,C23″) ,7219 ( d ,C24″) ,7113 ( d ,C2
5″) ,1717 ( q , C26″) 。以上数据与文献报道[8 ] 一致 ,
确定化合物 Ⅶ为山柰酚232α2鼠李吡喃糖苷。
化合物 Ⅷ:白色粉末 ; C20 H34 O6 ; ESI2MS m/ z :
393[ M + Na ] + ,369 [ M - H ] + ; 1 H2NMR ( C5 D5 N ,
400 M Hz)δ: 2183 (1 H , d , J = 911 Hz , H21) , 4188
(1 H , dd , J = 410 , 911 Hz , H22) , 3193 (1 H , d , J =
410 Hz , H23) ,4104 (1 H ,d ,J = 1114 Hz , H26) ,1196
(1 H ,d ,J = 615 Hz , H29) ,1165 (3 H ,s , H217) ,1120
(3 H ,s , H218) ,1175 (3 H ,s , H219) ,1151 (3 H ,s , H2
20) ;13 C2NMR (C5 D5 N ,125 M Hz)δ: 7018 ( d ,C21) ,
7418 (d ,C22) ,8313 ( d ,C23) ,4810 ( s ,C24) ,8515 ( s ,
C25) ,7016 ( d , C26) , 4918 ( t , C27) , 4613 ( s , C28) ,
5911 ( d , C29) , 7812 ( s , C210) , 1917 ( t , C211) , 2714
(t ,C212) ,4916 (d ,C213) ,3718 (t ,C214) ,6015 (t ,C2
15) ,7816 ( s ,C216) ,241 9 (q ,C217) ,2119 (q ,C218) ,
2116 (q ,C219) ,2515 (q ,C220) 。以上数据与文献报
道[3 ]一致 ,确定化合物 Ⅷ为金叶子毒素2Ⅶ。
化合物 Ⅸ: 无色油状物 ; C20 H32 O5 ; ESI2MS
m/ z : 375 [ M + Na ] + , 351 [ M - H ] + ; 1 H2NMR
(C5 D5 N ,400 M Hz)δ: 3121 (1 H , d , J = 716 Hz , H2
1) ,5102 (1 H ,dd ,J = 717 ,310 Hz , H22) ,4100 (1 H ,
d ,J = 918 Hz , H26) , 2133 (1 H , d , J = 611 Hz , H2
9) ,1155 ( 3 H , s , H217) , 1135 ( 3 H , s , H218) , 1184
(3 H ,s , H219) ,5165 ,5140 (各 s , H220) ,2123 (1 H ,
brs , H213) ;13 C2NMR (C5 D5 N ,125 M Hz)δ:6810 (d ,
C21) ,7413 ( d , C22) , 8416 ( d , C23) , 4817 ( s , C24) ,
8616 (s ,C25) ,7113 ( d ,C26) ,4818 ( t ,C27) ,4519 ( s ,
C28) ,5516 (d ,C29) ,15310 ( s ,C210) ,261 9 ( t ,C211) ,
2618 (t ,C212) ,491 9 ( d , C213) ,3517 ( t , C214) ,5715
(t ,C215) ,7817 (s ,C216) ,2419 (q ,C217) ,2213 (q ,C2
18) ,2113 (q ,C219) ,11010 (t ,C220) 。以上数据与文
献报道[ 3 ]一致 ,确定化合物Ⅸ为金叶子毒素2Ⅷ。
化合物 Ⅹ:浅棕色粉末 ; C30 H24 O2 ; FAB + - MS
m/ z :577 [ M + H ] + (100) ; 1 H2NMR ( CD3 OD , 500
M Hz)δ: 7113 ( 1 H , d , J = 215 Hz , H210′) , 7107
(1 H ,dd , J = 815 ,215 Hz , H214) ,7103 (1 H ,d , J =
215 Hz , H210) ,6199 (1 H , dd , J = 815 ,215 Hz , H2
14′) ,6186 (1 H ,d ,J = 815 Hz , H213′) ,6182 (1 H ,d ,
J = 815 Hz , H213) ,6113 (1 H , s , H26′) , 5197 (1 H ,
d ,J = 215 Hz , H28) , 5192 (1 H , d , J = 215 Hz , H2
6) ,4197 (1 H , brs , H22′) ,4139 (1 H , d , J = 315 Hz ,
H24) ,4123 (1 H ,m , H23′) ,4100 (1 H ,d ,J = 315 Hz ,
H23) ,2197 (1 H ,dd ,J = 1715 ,210 Hz , H24′β) ,2182
(1 H , dd , J = 1715 , 210 Hz , H24′α) ; 13 C2NMR
(CD3 OD ,125 M Hz)δ:9913 ( s ,C22) ,6619 ( d ,C23) ,
2811 (d ,C24) ,10314 ( s ,C24a) ,15613 ( s , C25) ,9715
(d ,C26) ,15713 ( s ,C27) ,9518 (d ,C28) ,15313 ( s ,C2
8a) ,13117 ( s , C29) , 11515 ( d , C210) , 14514 ( s , C2
11) ,14414 ( s , C212) , 11510 ( d , C213) ,11911 ( d , C2
14) ,8110 ( d , C22′) , 6513 ( d , C23′) , 2817 ( t , C24′) ,
10117 ( s , C24′a) , 15514 ( s , C25′) , 9518 ( d , C26′) ,
15112 ( s , C27′) , 10612 ( s , C28′) , 15110 ( s , C28′a) ,
13012 (s ,C29′) ,11416 ( d ,C210′) ,14514 ( d , C211′) ,
14510 (s ,C212′) ,11417 ( s ,C213′) ,12011 ( t ,C214′) 。
以上数据与文献报道[9 ] 一致 ,确定化合物 Ⅹ为 p ro2
ant hocyanidin A22。
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块菌多糖的相对分子质量测定和单糖组成分析
刘 　娟 ,屈效源 3
(佳木斯大学化学与药学院 ,黑龙江 佳木斯 　154007)
摘 　要 :目的 　测定从块菌菌丝体中分离得到的均一多糖 KJB21 的平均相对分子质量 ,并分析其单糖组成。方法
块菌菌丝体通过水提醇沉 ,再以 Sevage 法去除蛋白质 ,得到粗多糖 KJB。经 Sepharose CL6B 柱色谱分离纯化得到
均一多糖 KJB21。利用高效液相色谱法测定 KJB21 的平均相对分子质量 ;三氟乙酸完全酸水解后进行糖醇衍生化 ,
之后运用气相色谱法 ,与标准品对照后分析其单糖组成。结果 　KJB21 在高效液相下呈单一对称峰 ,其平均相对
分子质量大于 2 ×106 ,单糖组成分析该多糖是由单一组分葡萄糖组成。结论 　KJB21 为分子质量大于 2 ×106 的葡
聚糖。
关键词 :块菌 ;多糖 ;气相色谱 ;单糖组成
中图分类号 :R28411 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0921380202
　　块菌属子囊菌亚门盘菌纲块菌目块菌科 ,是生
长在森林地下的最为珍贵的一类药食两用真菌 ,又
称“松露”。其中一些种类如黑块菌、白块菌在欧美
被誉为“厨房里的钻石”、“地下黄金”,具有极大的经
济价值 ,故有“真菌王子”之称。块菌是一种典型的
共生菌 ,其主要活性成分有 a2雄烷醇、神经酰胺、块
菌多糖等成分[1 ] ,块菌多糖具有抗肿瘤并参与免疫
调节等功能。为了寻找块菌多糖的活性部位 ,本实
验对块菌的水热提多糖进行了分离并纯化 ,得到
KJB21 ,测定其平均相对分子质量 ,并分析其单糖组
成 ,旨在为后续的结构和功能的进一步研究提供科
学依据。
1 　材料与仪器
111 　材料与试剂 :块菌菌丝体 (购于云南誉成隆经
贸有限公司) ,由北京大学医学部韩晓强博士鉴定。
标准单糖对照品 (鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、
半乳糖、葡萄糖、葡萄糖醛酸和半乳糖醛酸) 均为分
析纯 ,购于 Merck 公司。多糖相对分子质量测定用
标准品 Dext ran T 系列 ,均为 Pharamacia 公司产
品。肌醇为国产生化试剂 ,三氟乙酸 ( TFA) 、醋酸
酐、氯仿、四氢硼钠、甲醇均为分析纯。
112 　仪器 : Agilent HP6890N 型气相色谱仪 ,氢火
焰离子检测器 ( FID) , HP25 毛细管色谱柱 (30 m ×
0132 nm) ;Agilent 1100 series 高效液相色谱系统 ,
蒸发光散射检测器 ( EL SD) ,Shodex KS2805 凝胶色
谱柱。
2 　实验方法
211 　块菌多糖的分离纯化 :块菌经乙醇脱脂后沸水
浸提 ,减压浓缩后醇沉 ,再经 Sevage 法去蛋白[2 ] 得
到粗多糖。再经 CL6B 凝胶细分后得 KJB21 , HPL C
示单一对称峰。
212 　相对分子质量测定[3 ,4 ] :先采用标准葡聚糖
Dext ran T 系列制作标准曲线 ,然后根据多糖样品
在相同色谱条件下的洗脱体积或保留时间 ,用标准
·0831· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 9 期 2009 年 9 月
3 收稿日期 :2009202218　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :刘　娟　Tel : (0454) 8610828 　E2mail :liujuan1949 @1631com3 本院 2006 级硕士研究生