全 文 ：傣药芽鲁哈咪卖的化学成分研究
叶婕颖,张庆芝,饶高雄*
(云南中医学院中药学院, 云南 昆明 650200)
摘 要:目的 研究傣药芽鲁哈咪卖 Rhinacanthus nasutus 的化学成分。方法 用色谱方法分离成分, 根据理化性
质和光谱分析鉴定结构。结果 分离得到 9 个化合物和 2 个混合物,鉴定为 C26~ C32烷混合物( Ñ )、A-软脂酸单甘
油酯( Ò )、软脂酸 ( Ó )、硬脂酸( Ô )、木焦油酸( Õ )、B-谷甾醇( Ö )、羽扇豆醇( ×)、对羟基苯甲酸( Ø )、胡萝卜苷
( Ù )、A-乙基-D-吡喃艾杜糖苷( Ú )、硝酸钾与硝酸钠混合物( Û )。结论 化合物 Ú 是分离过程产生的人工新化合
物,化合物Ñ ~ Õ、Ø ~ Û是首次从傣药芽鲁哈咪卖中分得。
关键词:傣药; 芽鲁哈咪卖;A-乙基-D-吡喃艾杜糖苷
中图分类号: R2841 1 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2009) 06 0850 03
Chemical constituents of Dai ethno-medicine Rhinacanthus nasutus
YE Jie- ying , ZH ANG Qing-zhi, RAO Gao-xiong
( Schoo l of Pharmacy, Yunnan Colleg e o f T r aditional Chinese Medicine, Kunming 650200, China)
Abstract: Objective To study the chem ical const ituents of the Dai ethno-medicine Rhinacanthus nasu-
tus1 Methods The chemical const ituents had been spearated w ith chr omatogr aphy and their st ructur es
w ere determined by spectral analyses1 Results Nine compounds and tw o m ix tur e w ere iso lated and ident-i
f ied as C26 ) C32 alkyl mixture ( Ñ ) , A-monopalmit in ( Ò ) , palmit ic acid ( Ó ) , stearic acid ( Ô ) , lignoceric
acid ( Õ) , B-sitosterol ( Ö ) , lupeol ( ×) , p-hydroxy benzoic acid ( Ø ) , daucostero l ( Ù) , A-ethy-l D-idos-
opy ranoside ( Ú ) , and mix ture of KNO 3 and N aNO 3 ( Û )1 Conclusion Compound Ú is a new ar tif icial
compound during iso lation and compounds Ñ ) Õ, Ø ) Û are isolated fr om R1 nasutus for the first t ime1
Key words: Dai ethno-medicine; Rhinacanthus nasutus ( L1 ) Kurz; A-ethy-l D-ido sopyranoside
白鹤灵芝 Rhinacanthus nasutus ( L1 ) Kurz 为
爵床科多年生小灌木,在云南傣族医药中,其枝及叶
供药用,称为/芽鲁哈咪卖0(意为接骨续筋药) , 入
风、火、水、土四塔,用于治疗/阻伤、路哈0(即跌打损
伤、骨折) , 可煎汤内服或鲜品捣烂外敷患处 [ 1, 2]。
中国台湾及印度学者对其化学成分进行过一些研
究,主要含萘醌、黄酮、木脂素及三萜等[ 3~ 6] 。但作
为云南傣族传统药物, 滇产/芽鲁哈咪卖0的化学成
分尚不清楚,为增加对其化学成分的认识,并为其药
材质量标准制定提供化学基础, 本实验研究了西双
版纳产傣药/芽鲁哈咪卖0的化学成分。
采用溶剂提取、色谱分离方法分得 9个化合物
和 2个混合物, 根据理化性质和光谱分析鉴定为
C26 ~ C32烷混合物 ( C26 ~ C32 alky l mix tur e, Ñ )、A-
软脂酸单甘油酯(A-monopalmit in, Ò )、软脂酸( pa-l
m itic acid, Ó )、硬脂酸( stearic acid, Ô )、木焦油酸
( lig noceric acid, Õ)、B-谷甾醇( B-sitostero l, Ö )、羽
扇豆醇( lupeol, ×)、对羟基苯甲酸( p-hydroxy ben-
zoic acid, Ø )、胡萝卜苷 ( daucoster ol, Ù )、A-乙基-
D-吡喃艾杜糖苷( A-ethy-l D-idosopy ranoside, Ú )、
硝酸钾与硝酸钠混合物( KNO 3 and NaNO 3 , Û )。
除化合物Ö、×外,其余化合物均是首次从傣药芽鲁
哈咪卖中得到,其中化合物 Ú 是在分离过程中产生
的新的人工新化合物。
1 仪器与材料
YANACO显微熔点仪, 温度未校正; Shimadzu
IR Prest ige ) 21 红外光谱仪, KBr 压片; Shimadzu
UV ) 2450紫外光谱仪; JASCO J) 810数字旋光仪;
EI及 ES-I MS 用 Finnigan MAT ) 95 质谱仪测定;
NMR( 1D及2D)用AM ) 400或DRX ) 500型核磁共
振波谱仪测定, TMS为内标。柱色谱硅胶、薄层色谱
硅胶 G板均为青岛海洋化工厂产品; 烷基键合硅胶
#850# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
* 收稿日期: 2008- 11-24 基金项目:云南省教育厅科学研究基金项目( 5E0463C)作者简介:叶婕颖( 1983 ) ) ,女,浙江人, 2008届硕士研究生,从事天然药物研究工作。
* 通讯作者 饶高雄 T el: ( 0871) 6212194 E- mail: rao13987124569@ qq1 com
Rp-18为日本富士硅化工产品;葡聚糖凝胶 LH-20为
Pharmacia公司产品。提取分离等所用溶剂为工业或
化学纯级溶剂; 显色剂用 10%硫酸-乙醇溶液。芽鲁
哈咪卖药材采于云南省西双版纳州( 2007年 3月) ,植
物标本经云南中医学院张庆芝副教授鉴定为爵床科
植物白鹤灵芝R1 nasutus ( L1 ) Kurz。
2 提取与分离
晾干的芽鲁哈咪卖药材 8 kg, 粉碎, 80% 乙醇
回流提取 2次(每次用 50 L) , 合并提取液减压回收
溶剂得到深绿色提取物1 375 g。稀醇提取物用
95%乙醇 5 L 溶解,滤过, 减压回收溶剂后得到浸膏
329 g。浸膏用适量水搅散悬浮, 依次用醋酸乙酯、
正丁醇萃取, 分别回收溶剂后得到醋酸乙酯部分
43 g( Fr-A)、正丁醇部分 461 8 g( Fr-B)。
Fr-A以硅胶柱色谱分离, 用石油醚-醋酸乙酯
( 100 B0~ 30B 70)洗脱, 各流份经 T LC检查后适当
合并,再综合运用硅胶柱色谱(环己烷-醋酸乙酯系
统洗脱)、葡聚糖凝胶 LH-20柱色谱(氯仿-甲醇系
统洗脱)分离纯化,得到化合物 Ñ ( 21 52 g )、Ò ( 833
mg)、Ó ( 80 mg )、Ô ( 29 mg )、Õ ( 27 mg )、Ö ( 107
mg)、×( 628 mg )、Ø ( 31 mg )、Ù ( 148 mg )。Fr-B
以硅胶柱色谱分离, 用氯仿-甲醇( 100 B5~ 50B 50)
洗脱,各流份经 TLC 检查后合并主要斑点, 再用硅
胶柱色谱(氯仿-甲醇系统梯度洗脱)、反相硅胶 Rp-
18(水-甲醇系统梯度洗脱)、葡聚糖凝胶 LH-20 色
谱(甲醇洗脱)分离纯化, 得到化合物 Ú ( 51 53 g )和
Û( 81 15 g)。
3 结构鉴定
31 1 新化合物的结构鉴定
化合物 Ú : 白色方晶 ( 甲醇) , 易溶于水, mp
130~ 132 e , M olish 反应阳性。 [A] 26D + 136b ( c
01 32, H 2O)。其 UV仅有末端吸收( 201 nm ) ,而 IR
显示了很强的羟基( 3 340~ 3 217 cm ) 1 )和碳-氧吸
收( 1 080~ 1 022 cm ) 1 ) , 表明该化合物属糖类成
分。其 ESI-MS 出现了m/ z 248[ M+ K+ 1] + (准分
子离子峰)及 191、173、163、155、132、87、73 的碎片
离子峰, 结合 13C-NMR( DEPT )信号确定其分子式
为C8H16O6。其 NMR 谱有-OCH 2 CH 3 片段典型吸
收[ DH 11 23( 3H , t, J = 71 0 Hz) , DH 31 50、31 75(各
1H , dq, J= 10, 71 0 Hz) , DC 151 3( q) , 641 5( t ) ]。根
据 DH 31 48 ~ 31 87 6 个质子的复杂信号, 结合
1 3C-NMR在 DC 1001 2( d) , 721 3( d) , 711 6( d) , 711 1
( d) , 701 2( d) , 621 8( t )的信号, 可以明确是单糖乙基
苷衍生物。从旋光及 NMR数据分析可能是 D-葡
萄糖或 D-艾杜糖[ 7] , 并根据端基 H 信号 DH 41 87
( 1H , d, J= 31 3 Hz)确定苷键为 A构型。
为确证结构并归属光谱数据, 进一步测试了
2D-NMR( COSY、HSQC、HMBC、ROESY) , 主要相
关关系见表 1 及图 1。通过糖的端基和氧乙基信
号,利用 COSY、HSQC、HMBC 相关关系归属了
碳、氢信号, 但不能确定糖基部分是葡萄糖还是艾杜
糖。在 ROESY谱上 H-1、H-2、H-3、H-4 之间互不
相关,说明均处于相对反式;由苷键A构型确定 H-1
处于平伏键位置, 据此推证 H-2、H-3、H-4 的构型
而确定糖基部分是艾杜糖。为进一步确证结构, 化
合物 Ú 用 31 6%的盐酸水解后用 TLC 检查, 水解的
单糖产物和 D-艾杜糖的在不同展开条件下 Rf 值和
显色现象一致。由此, 化合物 Ú 的结构鉴定为 A-乙
基-D-吡喃艾杜糖苷 (A- ethy-l D-ido sopyranoside) ,
是尚未见报道的新化合物。
表 1 化合物 Ú 的 NMR 数据
Table 1 NMR Data of compound Ú
碳位 1H-NM R 13 C-NMR HMBC ROESY
1 41 87 ( 1H, d, J = 31 3 Hz) 1001 2 ( CH) C-2, C-1c H-1c
2 31 73 ( 1H, br1 d, J= 31 3 Hz) 711 6 ( CH) C-1, C-3
3 31 75 ( 1H, br1 d, J= 3 Hz) 701 2 ( CH) C-2, C-4
4 31 87 ( 1H, dd, J= 31 6, 3Hz) 711 1 ( CH) C-3, C-5
5 31 80 ( 1H, dd, J= 31 6, 2Hz) 721 3 ( CH) C-4, C-6, C-1
6 31 70 ( 1H, dd, J= 9, 2Hz) 621 8 ( CH2 ) C-5
31 68 ( 1H, dd, J= 9, 2Hz)
1c 31 78 ( 1H, br1 dd, J= 10, 7 Hz) 641 5 ( CH2 ) C-1, C-2c H-1, H-2c
31 51 ( 1H, br1 dd, J= 10, 7 Hz)
2c 11 23 ( 3H, t, J= 7 Hz) 151 3 ( CH3 ) C-1c H-1c
图 1 化合物 Ú 的结构及 2D-NMR 主要相关关系
Fig1 1 Chemical structrure and 2D-NMR
key correlations of compound Ú
由于在提取时用乙醇为溶剂, 推测该新化合物
有可能是在提取过程中形成的人工产物。为此, 实
验用水、甲醇提取芽鲁哈咪卖药材留样进行 TLC对
照,证明该化合物在水、甲醇提取液中未能检出。因
此,A-乙基-D-吡喃艾杜糖苷( Ú )不是天然产物, 而
是提取过程中和乙醇缩合的人工产物, 且是该化合
物的第一次报道。
31 2 已知化合物的结构鉴定
根据 IR、MS及部分化合物的 NMR等谱学数
#851#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
据,与相应的文献报道数据对照,或与相应的标准品
薄层色谱对照, 鉴定化合物Ñ为 C26 ~ C32烷混合物、
Ò 为 A-软脂酸单甘油酯、Ó 为软脂酸、Ô 为硬脂酸、
Õ为木焦油酸、Ö为 B-谷甾醇、Ø为对羟基苯甲酸、
Ù为胡萝卜苷、Û为硝酸钾与硝酸钠的混合物。
化合物×: 白色粉末(丙酮) , mp 198~ 199 e 。
IRMKBrmax ( cm- 1 ) : 3 435、2 934、1 643、1 458、1 383、
1 039、879。1H-NMR( CDCl3 )D: 41 71, 41 56(各 1H ,
d, J = 01 8 Hz, H 2-30) , 31 23( 1H , dd, J= 111 5, 51 0
Hz, H-3A) , 21 41 ( 1H , ddd, J = 17, 11, 51 5 Hz, H-
19) , 11 67, 11 02, 01 96, 01 94, 01 82, 01 78, 01 75 ( 各
3H , s, 7个甲基单峰信号)。其 IR、MS、NMR 数据
与文献报道 [ 8] 的羽扇豆醇基本一致, 故鉴定为羽扇
豆醇。
4 结果与讨论
从西双版纳产芽鲁哈咪卖药材中共分离得到 9
个化合物和2个混合物,除 B-谷甾醇( Ö )、羽扇豆醇
( ×)外,其余化合物均是首次从傣药芽鲁哈咪卖中
得到,本研究工作增加了对于傣药芽鲁哈咪卖化学
成分的了解。从研究样品分离得到新化合物 A-乙
基-D-吡喃艾杜糖苷( Ú ) ,但该化合物是在提取过程
中和乙醇缩合的人工产物。
与以前对台湾、泰国、印度等产地白鹤灵芝 R1
nasutus ( L1 ) Kurz化学成分研究的结果对比, 不同
产地样品在次生代谢产物上有较大的区别,药材质
量标准如何制定合理的理化检测指标存在一定的困
难。但从目前研究情况看,羽扇豆醇是各地产品均
含有的,且量相对较多, 在薄层色谱上斑点清晰可
见,在目前没有更适合标示性成分作为鉴别指标的
情况下,可考虑将其作为芽鲁哈咪卖药材标准理化
鉴别的对照物质使用。
参考文献:
[ 1] 中国科学院昆明植物研究所1 云南植物志(第三卷) [ M ]1 北
京: 科学出版社, 20061
[ 2] 林艳芳, 依 专, 赵应红1 中国傣医药彩色图谱 [ M ]1 昆明:
云南民族出版社, 20031
[ 3] Wu T S, H su H C, Wu P L, et al1 Naphth oquin on e ester
f rom the root of Rhing canth us nasutus [ J]1 Chem Phar m
B ul l , 1998, 46( 3) : 413-4181
[ 4] Wu T S, H su H C, Wu P L, et al1 Rh inacanthin-Q, a n aph-
thoquinone f rom Rhingcanthu s nasutus and its biological
act ivity [ J]1 Phytoch emist ry , 1998, 49( 7) : 2001-20031
[ 5] Kern an M R, Sendl A, Chen J L, et al1 Tw o new lign ans
w ith activity agains t Inf luenza vi rus f rom th e medicinal plant
Rhinacanthus nasutus [ J]1 J N at P rod , 1997, 60: 635- 6371
[ 6] Pongpun S P, Yahuafai J, S himizu K, et al1 Ant itum or ac-
t ivity of liposomal naphth oquin one esters is olated f rom T hai
medicinal plant : Rh inacanthus nasu tus Kurz1 [ J]1 B iol
P harm Bu ll , 2006, 29( 11) : 2279-22831
[ 7] 龚运淮, 丁立生1 天然产物核磁共振碳谱分析 [ M ]1 昆明:
云南科技出版社, 20061
[ 8] 姚佳琪, 孟 娜, 宋少江, 等1 马齿苋的化学成分 [ J]1 沈阳
药科大学学报, 2007, 24( 12) : 751-7531
毛排钱草的化学成分分析及其抗肿瘤活性研究
干 宁1 , 李天华1 ,杨 欣1 ,何 平2*
( 11 宁波大学材料化学学院 化学系, 浙江 宁波 315211; 21 浙江中医药大学药学院,浙江 杭州 310000)
摘 要:目的 对毛排钱草地上部分的化学成分及其抗肿瘤活性进行研究。方法 对干燥的毛排钱草地上部分以
甲醇于 50 e 下萃取浓缩,以水溶解滤过得水溶及水不溶性两部分,水可溶部分用正丁醇提取化合物。通过波谱解
析、对照品比较及与文献报道对比鉴定其化学结构。并对得到的化合物进行了细胞毒活性研究。结果 正丁醇提
取物分离纯化后得到 8个化合物。经鉴定为N , N-二甲基色胺( Ñ )、5-甲氧基-N , N-二甲基色胺( Ò )、柠檬酚( Ó )、
异柠檬酚( Ô )、( Z)- 1- ( 4-羟基-2, 3-二甲氧苯基)- 3- ( 4-羟基苯)丙烯( Õ )、( Z)- 1- ( 3-羟基-2, 4-二甲氧苯基)- 3- ( 4-羟
基-3-甲氧基苯基)丙烯( Ö )、原儿茶酸甲酯( ×)、香橙素 [ ( 2R , 3R)- 2, 3-二氢-3, 5, 7-三羟基-2- ( 4-羟基苯基 )- 4H-1-
苯并吡喃-4-酮, Ø ]。结论 8 个化合物均为首次从该植物中分得, 在 MT T 抗肿瘤实验中, 化合物Ñ 、Ó ~ Ö 均具
有一定的细胞毒活性。
关键词:毛排钱草; 豆科;细胞毒活性
中图分类号: R2841 1 文献标识码: A 文章编号: 0253 2670( 2009) 06 0852 05
#852# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 6 期 2009 年 6 月
* 收稿日期: 2008- 09-11 基金项目:浙江省自然科学基金项目 ( Y106725, Y4080023) ; 宁波市自然科学基金项目 ( 2008A610048, 2008A610072, 2008A610043 和
2008C50014)作者简介:干 宁,男( 1974 ) ) ,浙江平湖人,宁波大学副教授,博士。研究方向为药物分析。
T el : 13486485114 ( 0574) 86271866 E- mail : gann ing@ nbu1 edu1 cn