全 文 ：中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1335·
质量分数不同，其杂质或多或少会干扰测定的准确
性，而通过HPLC法将竹叶黄酮中的主要成分分离
出来并测定，为更准确判定竹叶提取物质量提供了
依据。
参考文献：
[13张英．天然功能性竹叶提取物一竹叶黄酮EJ3．中国食品添加
剂，2002(3)：54-66．
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温经丸质量标准研究
曲 佳1’2，车景超3，李艳玉‘，吕曙华2
(1．天津大学药物科学与技术学院，天津300072；2．天津市药品检验所，天津300070；3．广西中医学院研究生部，
广西南宁570001；4．天津中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂，天津300457)
摘要：目的建立温经丸的质量标准。方法采用薄层色谱法鉴别制剂中党参、吴茱萸、白术，制定处方附子中乌
头碱的限量检查方法，采用高效液相色谱法测定处方肉桂中桂皮醛。结果采用薄层色谱法均能检出党参、吴茱萸
及吴茱萸碱、白术；桂皮醛0．1392～0．6960pg线性关系良好，r=0．9999，平均回收率为97．3％，RSD为
0．91％。结论建立的质量标准方法简便、准确，重现性好，可用于温经丸的质量控制。
关键词：温经丸；党参；吴茱萸；白术；薄层色谱}桂皮醛；高效液相色谱
中图分类号：R286．1 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1335一04
温经丸为《中华人民共和国卫生部药品标准》中
药成方制剂第1册收载品种，由党参、白术、茯苓、肉
桂、干姜、厚朴、黄芪、郁金、沉香、吴茱萸、附子1l味
中药组成，具有养血温经，散寒止痛的功效，用于妇
女血寒，经期腹痛，腰膝无力，湿寒白带，血色暗淡，
子宫虚冷等症。为了提高质量标准，有效地控制药品
质量，本实验采用TLC法对处方中党参、吴茱萸、白
术进行定性鉴别；建立附子中乌头碱的限量检查方
法；鉴于肉桂具有散寒止痛，活血通经的功效，故采
用HPLC法，以桂皮醛为定量指标，建立处方中肉
桂的测定方法。修订后的质量标准方法简便、准确，
重现性好，可用于温经丸的质量控制。
1仪器与材料
日本ShimadzuLC一2010AHT高效液相色谱
仪，LCSolution工作站。MettlerAE260万分之一
电子天平，MettlerToledoAG135十万分之一电子
天平，CAMAGLinomat5半自动点样仪，CAMAG
Reprostar3薄层色谱成像仪。
党参对照药材(批号：121057—200504)、吴茱萸
碱对照品(批号：110802—200504)、吴茱萸对照药材
(批号：120909—200508)、白术对照药材(批号：
120925—200407)、乌头碱对照品(批号：110720—
200410)、桂皮醛对照品(批号：110710—200212)均购
自中国药品生物制品检定所；温经丸由天津中新药
业集团股份有限公司达仁堂制药厂提供，9g／丸；缺
党参、吴茱萸、白术和附子的阴性对照样品均由天津
中新药业集团股份有限公司达仁堂制药厂提供，高
效液相用乙腈为色谱纯，其他试剂均为分析纯，水为
去离子水。
2方法与结果
2．1薄层色谱鉴别
2．1．1 党参：取本品lOg，剪碎，加硅藻土5g，研
匀，加甲醇100mL，超声处理45min，滤过，滤液蒸
干，残渣加水6mL使溶解，置C。。固相萃取小柱
(500mg，用甲醇、20％甲醇各10mL预洗)中，依次
用20％甲醇、甲醇各5mL洗脱，收集甲醇洗脱液，
浓缩至1mL，作为供试品溶液；同法制成缺党参阴
性对照样品溶液。另取党参对照药材1g，加甲醇25
mL，按供试品溶液的制备方法自“超声处理45
min”起依法制备，制成对照药材溶液。吸取上述3
种溶液各6pL，分别点于同一硅胶G薄层板上，以
正丁醇一冰醋酸一水(7t 1 t 0．5)为展开剂，展开，取
收稿日期：2007—11-08
作者简介：曲 佳(1981一)，女，天津人，药师，2004年毕业于天津中医学院中药系，现为天津大学在读硕士研究生，研究方向为药物分
析与质量控制。TelI(022)23374076E—mail：面4599@sina．com
万方数据
·1336· 中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105℃加热至斑
点显色清晰，结果见图1。在供试品色谱中，在与党
参对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点，
置紫外光灯(365nm)下检视，显相同颜色的荧光斑
点，缺党参阴性对照样品均无相应的斑点。
1一党参对照药材2～4一供试品5一缺党参阴性对照
1一RadixCodonopsisreferencedrug2--4·samples
5-negativesamplewithoutRadix．Codonopsis
图1 温经丸中党参日光检视(A)和紫外光灯(365nm)
检视(B)的薄层色谱图
Fig．1TLCChromatogramsfRadixCodonopsis
inWenjingPillsinsunlight(A)andUV
light(365rim)
2．1．2吴茱萸：取本品10g，剪碎，加硅藻土5g，研
匀，加醋酸乙酯50mL，超声处理45min，滤过，滤液
浓缩至2mL，作为供试品溶液；同法制成缺吴茱萸
阴性对照样品溶液。另取吴茱萸对照药材0．4g，加
醋酸乙酯10mL，超声处理45min，滤过，滤液浓缩
至2mL，作为对照药材溶液。再取吴茱萸碱对照品，
加甲醇制成0．2mg／mL的溶液，作为对照品溶液。
吸取上述4种溶液各4弘L，分别点于同一硅胶G薄
层板上，以环己烷一醋酸乙酯一甲醇一三乙胺(19t 5。
1：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙
醇试液，晾干，置紫外光灯(365nm)下检视。结果见
图2。在供试品色谱中，在与吴茱萸对照药材和吴茱
萸碱对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光
斑点，缺吴茱萸阴性对照样品无相应的斑点。
2．1．3 白术：取本品10g，剪碎，加硅藻土5g，研
匀，加乙醚100mL浸泡过夜，滤过，滤液挥干，残渣
加醋酸乙酯2mL使溶解，作为供试品溶液；同法制
成缺白术阴性对照样品溶液。另取自术对照药材
0．5g，加乙醚2rnL浸泡过夜，滤过，滤液作为对照
药材溶液。吸取上述3种溶液各6ttL，分别点于同
一硅胶G薄层板上，以石油醚(60～90℃)一醋酸乙
酯(50：1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以5％香草
醛硫酸溶液，105℃加热至斑点显色清晰。见图3。在
供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显
相同颜色的斑点，白术阴性对照样品无相应的斑点。
l～3一供试品 4一吴茱萸碱对照品 5一吴茱萸对照药材
6一缺吴茱萸阴性对照
1—3一samples4-evodiaminerefer ncesubstance
5-FructwEvodiaereferencesubstance
6-negativereferencesamplewithoutFructusEvodiae
图2温经丸中吴茱萸的薄层色谱图
Fig．2TLCChromatogramsofF uctusEvodiae
inWenjingPills
1一自术对照药材 2一缺白术阴性对照 3～5一供试品
1-RhizomaAtractylodisMacrocephalaereferencesubstance
2-negativereferencesamplewithoutRhizomaAtractylodis
Macrocephalae3--5一samples
图3温经丸中自术的薄层色谱图
Fig．3TLCChromatogramsofRhizomaAtr ctylodis
MaerocephalaeinWenjingPills
2．2乌头碱限量检查：取本品18g，剪碎，加硅藻土
10g，研细，加浓氨试液15mL使浸润，放置2h，加
乙醚50mL，超声处理5rain，浸泡过夜，分取醚层，
用少量乙醚分次洗涤容器和残渣，合并乙醚层与洗
液，蒸干，加无水乙醇0．5mL使溶解，作为供试品
溶液；同法制成缺附子阴性对照样品溶液。另取乌头
碱对照品适量，精密称定，加无水乙醇制成0．2、
0．4、1mg／mL溶液，作为对照品溶液。精密吸取供
试品溶液、阴性对照样品溶液各lOpL，对照品溶液
1 pL(0．2mg／mL)、1pL(0．4mg／mL)、1、5、10
弘L(1mg／mL)分别点于同一硅胶G薄层板上，以
正己烷一醋酸乙酯一乙醇(6．4：3．6t 1)为展开剂[1]，
置氨蒸气饱和的展开缸内，展开，取出，晾干，喷以稀
碘化铋钾试液，结果见图4。在供试品色谱中，在与
对照品色谱相应的位置上，无相同颜色的斑点，阴性
对照样品无相应的斑点。
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1337·
1～3一供试品 4一缺附子阴性对照 5～9一乌头碱对照品
1--3一samples4-negativereferencesamplewithoutRadixAconiti
LateralisPraeparata5——9-aconitinereferencesubstance
圈4温经丸中乌头碱限■检查的TLC图谱
Fig．4TLCChromatogramsflimitte t
ofaeonitineinWenjingPills
2．3桂皮醛的HPLC法测定
2．3．1色谱条件：色谱柱为DamonsilC18(250mmX
4．60mm，5／am)；流动相：乙腈一0．01％磷酸溶液
(30t 70)；检测波长：290nm；柱温：40℃；体积流
量：1．0mL／min。理论板数按桂皮醛峰计算不低于
3000。
2．3．2对照品溶液的制备：取桂皮醛对照品适量，
精密称定，加甲醇制成30／ug／mL的溶液，即得。
2．3．3供试品溶液的制备：取本品适量，剪碎，取2
g，精密称定，精密加入75％甲醇25mL，称定质量，
超声处理45min，放冷，再称定质量，用75％甲醇补
足减失的质量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2．3．4阴性对照样品溶液的制备：按处方配比，取
除肉桂外的其他药味，按供试品溶液的制备项下方
法制备，即得。
2．3．5专属性试验：取对照品溶液、供试品溶液和
阴性对照样品溶液进样分析，结果见图5。阴性对照
样品在与桂皮醛相对应保留时间处未见色谱峰，结
果表明阴性样品对检测无干扰。
2．3．6线性关系考察：取桂皮醛对照品适量，精密
0 10 203040 0 10 203040
t／min
*一桂皮醛
·一cinnamylaldehyde
圈5桂皮醛对照品(A)、温经丸(B)和阴性对照(C)的
HPLC图谱
Fig．5HPLCChromatogramsofcinnamylaldehyde
referencesubstance(A)，WenjinPills(B)，
andnegativereferencesample(C)
称定，加甲醇制成0．3480mg／mL的溶液，作为储
备液。分别精密量取1、2、3、4、5mL，置25mL量瓶
中，用甲醇稀释至刻度，摇匀。分别精密吸取lOlL，
注入液相色谱中，以进样量对峰面积进行线性回归，
得回归方程Y=1．1571×107X一1．3404×10‘，r=
0．999，结果表明桂皮醛进样量在0．1392～
0．6960Pg与峰面积线性关系良好。
2．3．7 精密度试验：精密吸取供试品(批号：
200601)溶液，重复进样6次，测定桂皮醛峰面积，计
算得其RSD为0．20％。
2．3．8 稳定性试验：精密吸取供试品(批号：
200601)溶液，分别于0、1、2、4、8、12h测定样品中
桂皮醛峰面积，计算得其RSD为0．51％，表明供试
品溶液中在12h内稳定。
2．3．9重现性试验：取同一批号(批号：200601)样
品6份，分别制备供试品溶液，进样测定，结果桂皮
醛的平均质量分数为0．3046 mg／g，RSD为
0．95％。
2．3．10加样回收率试验：精密称取同一批样品(批
号：200601)1g，共6份，分别精密加入13．92
#g／mL桂皮醛对照品溶液25mL，制备供试品溶
液，进样测定，计算回收率，结果桂皮醛平均回收率
为97．32％，RSD为0．91oA。
2．3．11样品测定：取3个批号的样品，每批取2
份，分别制备供试品溶液，进样测定，依法测定峰面
积积分值，按外标法计算样品中桂皮醛的质量分数，
结果见表1。
裹1温经丸中桂皮醛的测定结果饧一2)
Table1 Determinationofcinnamylaldehyde
inWenjingPills佃一2)
批号 桂皮醛／(mg·丸。1)
200601
200602
200603
2．74
2．88
2．79
3讨论
《中国药典12005年版一部附子项下乌头碱限
量中，供试品／乌头碱对照品为6mg／#g：1mg／／-g，
18g本品(含附子为0．29g)为与药典中供试品／乌
头碱对照品比例相当，供试品溶液质量浓度与对照
品溶液的点样量均进行了调整，使供试品／乌头碱对
照品为5．8mg／／zg：1mg／／比g，结果1弘g乌头碱对
照品斑点清晰，可作为乌头碱对照斑点。此外，对乌
头碱限量检查中展开剂选择进行了摸索，曾以甲苯一
醋酸乙酯一二乙胺(14：4：1)为展开剂，薄层色谱结
A赢
万方数据
·1338· 中革蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9,El
果显示，阴性样品有干扰，干扰的斑点来自吴茱萸药
材。经改用正己烷一醋酸乙酯一乙醇(6．4t 3．6：1)作
为展开剂后，上述现象消失。
共选择50％甲醇、75％甲醇和甲醇3种提取溶
剂提取，结果发现，用含有一定水的甲醇结果均高于
甲醇的提取。由于本品为大蜜丸，用含有一定水的甲
醇采用超声处理方式，易使本品溶散，使被测成分易
于提出，故采用75％甲醇作为提取溶剂。实验中对
桂皮醛提取时间进行了考察，分别超声处理30、45、
60min，结果超声45min与60min测得的结果基
本相同，因此将超声处理时间定为45min。另实验
中对桂皮醛提取溶剂用量(20、25、50mL)亦进行了
考察，溶剂用量为25mL时样品中桂皮醛提取完
全，故提取溶剂用量定为25mL。
报道选择乙腈一水(35：75)乜]，实验发现，桂皮
醛色谱峰有拖尾现象，经加入一定磷酸后，色谱峰拖
尾现象消失。
参考文献：
[1]刘训红．王玉玺，房克慧，等．中药材薄层色谱鉴别[M]．天
津：天津科学技术出版社．1990．
12-1中国药典ES-I．一部．2005．
正交试验优选桂枝茯苓丸处方药材的提取工艺
朱燕飞，楼英，钱建明
(诸暨市人民医院，浙江诸暨311800)
摘要：目的筛选并优化桂枝茯苓丸的提取工艺。方法以正交设计多指标优化提取工艺条件，HPLC法测定各
味药材有效成分，确定最佳提取工艺。结果桂枝和牡丹皮以加6倍量的90％乙醇提取2次，每次2h，A，B。Ca为
最佳提取工艺路线，赤芍、桃仁和茯苓以水提取，桃仁捣碎沸下，加6倍量水提取2次，每次1h为最佳提取工艺路
线。结论优化得到的提取工艺合理、稳定、可行，工艺设计科学合理，提取效率高，适用于工业化生产。
关键词：桂枝茯苓丸；桂枝；牡丹皮I正交试验；高效液相色谱
中图分类号：R286．2 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1338—04
桂枝茯苓丸方出自汉代医圣张仲景《金匮要略·
妇人妊娠病脉证并治》，由桂枝、茯苓、赤芍、牡丹皮、
桃仁组成，具有活血，化瘀，消瘕的作用，用于妇人宿
有瘸块，或血瘀经闭，行经腹痛，产后恶露不尽。原方
制法工艺为生药材粉碎成细粉，加炼蜜制成蜜丸后
入药，生产工艺落后，服用量大，服用不方便。为了去
除原方中的无效成分，富集浓缩有效成分，本实验对
桂枝茯苓丸处方药材的提取工艺进行了改进研究，
使之符合现代生产工艺的要求，为进一步合理开发
桂枝茯苓丸提供参考。
1仪器与试药
LC一10AT高效液相色谱仪(配置为双泵、紫
外检测器，日本岛津)，UV一1700型紫外分光光度
计(日本岛津)，N2000色谱工作站(浙江大学信息工
程研究所)，TG328A型电光分析天平(上海分析天
平厂)。
处方中药材均由本院中药房提供，经鉴定合格。
桂皮醛(批号060110)、丹皮酚(批号060301)对照品
均由中国药品生物制品检定所提供。甲醇、乙腈为色
谱纯，水为亚沸水，冰醋酸等其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1提取工艺路线的选择：桂枝茯苓丸原采用生药
打粉入药，炼蜜制丸，服用剂量大，且生药材难以消
化和吸收。工艺改进依据各药材有效成分的溶解性
质，选择适宜溶媒。桂枝和牡丹皮含有挥发性成分较
多，宜醇提；赤芍、桃仁含苷类成分，宜水提；茯苓按
传统工艺宜采取水提。所以在设计时将5味药分为
两步，一是以乙醇为溶媒提取桂枝和牡丹皮；另一是
以水为提取溶媒提取赤芍、桃仁和茯苓。
2．2桂枝、牡丹皮的提取工艺研究
2．2．1桂皮醛、丹皮酚的HPLC法测定[1’副：色谱
条件为Shim—PackVP—ODS色谱柱(150mmX
4．6ram)(日本岛津)，以乙腈一水一冰醋酸(42。58t
0．8)为流动相，检测波长为280nm(桂皮醛k=
285nm，丹皮酚k=274rim)。
标准曲线的制备：取桂皮醛、丹皮酚对照品适
收稿日期：2008—02—25
作者简介：朱燕飞Tel：(0575)87173054E—mail：zhuyanfei7709@126．corn
万方数据
温经丸质量标准研究
作者： 曲佳， 车景超， 李艳玉， 吕曙华
作者单位： 曲佳(天津大学药物科学与技术学院,天津,300072;天津市药品检验所,天津,300070)， 车景
超(广西中医学院,研究生部,广西,南宁,570001)， 李艳玉(天津中新药业集团股份有限公司
达仁堂制药厂,天津,300457)， 吕曙华(天津市药品检验所,天津,300070)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(9)

参考文献(2条)
1.刘训红;王玉玺;房克慧 中药材薄层色谱鉴别 1990
2.中华人民共和国药典(一部) 2005

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