全 文 ：重复试验 3次 ,得率为 1.435 8%,试验结果见表 3 。
表 3　验证试验结果
Table 3　Results of verif ication
序号 得率/ % 序号 得率/ %
1 1.423 3 1.501
2 1.384 均值 1.436
3　讨论
　　将罐组逆流提取技术应用于荷叶提取工程 ,可
以克服提取时原料与溶剂中有效成分在接近平衡时
浓度差小的不足 ,有效提高提取效率 。
　　通过正交试验结果得出本装置的最佳工艺条
件:提取时间 25 min ,提取温度 80 ℃,固液比 1∶
50 ,乙醇体积分数为 70%。
参考文献:
[ 1] 　陶　波 ,陈慕英.荷叶药用研究概况[ J].中医药信息 , 2001 ,
18(2):4.
[ 2] 　纪丽莲.荷叶中抑菌成分的提取及其抑菌活性的研究[ J].食
品科学 , 1998(8):64-66.
[ 3] 　谢秀琼.现代中药制剂新技术[ M].北京:化学工业出版社 ,
2004.
[ 4] 　王　伟 ,谭晓梅.荷叶总生物碱含量测定方法的研究[ J].中
药材 , 2004 , 27(1):50-51.
毛细管气相色谱法测定辛夷挥发油软胶囊中的α-蒎烯 、β-蒎烯 、
柠檬烯和 1 , 8-桉叶素
曾蔚欣1 , 2 ,王　弘1 ,孙路路2 ,赵冠勋1 ,陈世忠1＊
(1.北京大学医学部药学院 , 北京　100191;2.北京世纪坛医院 药剂科 , 北京　100038)
摘　要:目的　建立测定辛夷挥发油软胶囊中α-蒎烯 、β-蒎烯 、柠檬烯和 1 , 8-桉叶素的测定方法。方法　采用毛细
管气相色谱法测定。 BP-5 毛细管柱(30 m×0.25 mm , 0.22 μm );进样器温度180 ℃;FID检测器温度 200 ℃;柱温
采用程序升温;分流比 1∶30;苯乙酮为内标。结果　α-蒎烯在 0.054～ 2.505 μg线性关系良好 ,平均加样回收率为
98.6%, RSD 为 0.72%(n=9);β-蒎烯在 0.070 ～ 3.204 μg 线性关系良好 , 平均加样回收率为 99.0%, RSD 为
0.65%(n=9);柠檬烯在 0.068 ～ 3.190 μg 线性关系良好 , 平均加样回收率为 101.1%, RSD为 0.56%(n=9);1 , 8-
桉叶素在 0.301 ～ 10.205 μg 线性关系良好 , 平均加样回收率为 99.6%, RSD 为 1.24%(n=9)。 结论　该方法简
便 、准确 、重现性好 , 可作为辛夷挥发油软胶囊的质量控制方法。
关键词:辛夷挥发油软胶囊;α-蒎烯;β-蒎烯;柠檬烯;1 , 8-桉叶素;毛细管气相色谱法
中图分类号:R284.1　　　文献标识码:A　　　文章编号:0253-2670(2009)08-1232-04
Determination ofα-pinene , β-pinene , limonen , and 1 , 8-cineole in FlosMagnoliae
volatile oil soft capsula by capillary gas chromatography
ZENG Wei-xin1 , 2 , WANG Hong1 , SUN Lu-lu2 , ZHAO Guan-xun1 , CHEN Shi-zhong1
(1.Schoo l o f Pharmaceutical Science , Peking Univer sity H ealth Science Cente r , Beijing 100191 , China;
2.Department of Pha rmacy , Peking M illennium Monument Hospital , Beijing 100038 , China)
Abstract:Objective　To develop a method fo r dete rm ination o fα-pinene , β-pinene , limonen , and 1 , 8-
cineole in F losMagnol iae volati le oil sof t capsula.Methods　The contents ofα-pinene , β-pinene , limonen ,
and 1 , 8-cineole w ere de termined at the same time by capil lary gas chromatog raphy wi th sequential increase
of temperature prog ramming.Capillary column BP-5 (30 m × 0.25 mm , 0.22 μm)was used , injector
temperature 180 ℃, f lame ionization detecto r (FID)temperature 200 ℃, spli t ratio 1∶30 , acetophenone
as internal standard.Results　A good linear relationship of α-pinene w as at a range of 0.054—2.505 μg ,
the average recovery w as 98.6 %, and RSD was 0.72 %(n=9);A good linear relat ionship of β-pinene
w as at a range of 0.070 —3.204 μg , the ave rage recovery w as 99.0 %, and RSD was 0.65%(n=9);A
·1232· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 40 卷第 8 期 2009年 8月
＊ 收稿日期:2008-11-04　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　基金项目:国家“ 973”项目(2006CB504707)作者简介:曾蔚欣(1972—),女 ,湖南省益阳市人 ,主管药师 ,硕士 ,北京世纪坛医院药剂科工作 ,主要从事药品检验及中药与天然药物研发工作。 Tel:(010)63926353　E-mail:cindy zw x@sina.com＊通讯作者　陈世忠　Tel:(010)82802723　E-mail:chen shizh ong66@163.com
good linear rela tionship of limonen w as at a range of 0.068 —3.190μg , the average recovery w as 101.1 %,
and RSD was 0.56%(n=9);A good linear relationship o f 1 , 8-cineole w as at a range of 0.301—10.205
μg , the average recovery w as 99.6%, and RSD was 1.24%(n=9).Conclusion　The method is simple
and accurate one wi th good reproducibility and could be used fo r the quality contro l of Flos Magnol iae vol-
atile oil sof t capsula.
Key words:F los Magnol iae volatile oi l sof t capsula;α-pinene;β-pinene;limonene;1 , 8-cineo le;
capillary gas chromato graphy
　　辛夷挥发油是常用中药材辛夷治疗急慢性鼻
炎 、过敏性鼻炎及鼻窦炎的主要有效成分 ,可缓解大
鼠 、豚鼠实验性过敏性鼻炎模型局部症状 ,减轻鼻
痒 、喷嚏 、清涕等症状;改善局部黏膜充血 、水肿状
况;减少嗜酸性粒细胞及肥大细胞在炎症局部的浸
润;减少模型动物鼻部症状分值等[ 1] 。还具有明显
抑制实验性哮喘豚鼠气道浸润 Eos 细胞数 ,减轻哮
喘气道的炎症反应的作用 ,表现出对气道炎症的抑
制与改善[ 2] 。辛夷挥发油软胶囊以辛夷为原料 ,经
水蒸气蒸馏得到挥发油 ,再精馏后制备而成 。制剂
中α-蒎烯 、β-蒎烯 、柠檬烯 、1 , 8-桉叶素 4 个主要成
分的量约占挥发油的 70%以上 。为更好地控制该
制剂质量 ,本实验建立了毛细管气相色谱测定法测
定辛夷挥发油软胶囊中 4种主要有效成分 ,以达到
有效成分组成稳定 、疗效明确 、质量可控的目的 。
1　仪器与试药
　　SP—2100型气相色谱仪(北京北分瑞利分析仪
器(集团)有限责任公司),SPB—3型全自动空气源
(北京中惠普分析技术研究所), GCN1300型全自动
氮气发生器(北京中惠普分析技术研究所),GCD—
300B型全自动氢气发生器(北京中惠普分析技术研
究所), DM —624型毛细管柱(美国 Dikma 公司),
BP5型毛细管柱(澳大利亚 SGE公司),BP3100P 型
电子天平(德国 Sarto rius 公司), BT25S 型电子天
平(德国 Sar to rius公司)
　　α-蒎烯(质量分数为 99.7%)、β-蒎烯(质量分数
为 99.0%)、柠檬烯(质量分数为 99.0%)、1 ,8-桉叶
素(质量分数为 99.0%)对照品均来自德国 Sigma-
Aldrich公司 ,辛夷挥发油软胶囊由北京大学药学院
中药研究室自制 , 500 mg/粒 ,批号 080613 、080623 、
080626 、080630。
2　方法与结果
2.1　溶液的制备
2.1.1　内标溶液的制备:精密称取苯乙酮 1 021.70
mg ,置 50 mL量瓶中 ,加醋酸乙酯至刻度 ,摇匀 ,即得。
2.1.2　对照品溶液的制备:精密称取 α-蒎烯对照
品 1.07 、5.07 、10.46 、20.16 、50.10 mg ,分别置 10
mL 量瓶中 ,精密加入内标溶液 1 mL ,再加醋酸乙
酯至刻度 ,摇匀 ,作为 α-蒎烯对照品溶液。精密称
取 β-蒎烯对照品 1.40 、6.45 、12.46 、25.17 、64.09
mg ,同法制成 β-蒎烯对照品溶液 。精密称取柠檬烯
对照品 1.35 、6.83 、12.61 、25.60 、63.80 mg ,同法制
成柠檬烯对照品溶液 。精密称取 1 , 8-桉叶素对照
品 6.02 、25.11 、50.20 、101.63 、204.10 mg ,同法制
成 1 ,8-桉叶素对照品溶液 。
2.1.3　供试品溶液的制备:精密称取辛夷挥发油软
胶囊(批号 080630)内容物 1.00 g ,置挥发油提取器
圆底烧瓶中 ,加入去离子水 50 mL ,装上挥发油提取
器 ,从挥发油提取器上部加入去离子水至溢出 ,然后
加入醋酸乙酯 2 mL ,装上冷凝器 ,按照挥发油提取
法甲法(《中国药典》2005 年版一部附录 Ⅹ D)提取
2.5 h ,分取醋酸乙酯部分 ,转移至 10 mL 量瓶中 ,精
密加入内标溶液 1 mL ,再加醋酸乙酯至刻度 ,摇匀 ,
作为供试品溶液 。
2.2　色谱条件与系统适用性试验:BP5型毛细管柱
(5% Pheny ldimethy l poly silox ane)(30 m ×0.25
mm , 0.22 μm);进样器温度 180 ℃;FID 检测器温
度200 ℃;柱温采用程序升温 ,起始温度 80 ℃,保持
5 min ,以 4 ℃/min升至 120 ℃,再以 20 ℃/min 升
至 180 ℃,保持 2 min;氮气流量:20 mL/min;分流
比:30∶1;进样量 0.5 μL 。各峰理论塔板数均不少
于 1×106 ,与相邻峰的分离度大于 1.5 ,各测定峰及
内标的拖尾因子分别为 1.02 、1.00 、1.03 、1.07。结
果见图 1。
2.3　标准曲线的制备:精密吸取上述各对照品溶液
注入气相色谱仪 ,测定其峰面积 ,记录α-蒎烯 、β-蒎
烯 、柠檬烯 、1 , 8-桉叶素与内标的峰面积。以 4个主
要成分与内标物的峰面积比值(Y)为纵坐标 ,质量
浓度(X)为横坐标 ,计算回归方程。α-蒎烯:Y =
0.445 3 X +0.001 5 , r=1;β-蒎烯:Y =0.568 3 X -
0.002 4 , r =0.999 9;柠檬烯:Y =0.567 9 X -
0.013 5 , r=0.999 9;1 , 8-桉叶素:Y =0.467 9 X +
·1233·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 40 卷第 8 期 2009年 8月
t/min
1-α-蒎烯　2-β-蒎烯　3-柠檬烯　4-1 , 8-桉叶素　5-苯乙酮
1-α-pinene　2-β-pinene　3-limonen
4-1 , 8-cineole　5-acetophenone
图 1　对照品(A)、苯乙酮(内标)(B)和辛夷挥发油
软胶囊(加内标)(C)的气相色谱图
Fig.1　Capillary GC chromatograms of reference substances
(A), acetophenone (internal standard, B), and
Flos Magnoliae volatile oil soft capsula(with inter-
nal standard, C)
0.001 2 , r=1。结果表明α-蒎烯在0.054 ～ 2.505μg ,
β-蒎烯在 0.070 ～ 3.204 μg , 柠檬烯在 0.068 ～
3.190 μg ,1 ,8-桉叶素在 0.301 ～ 10.205 μg 呈良好
的线性关系。
2.4　精密度试验:取辛夷挥发油软胶囊(批号
080630)供试品溶液 ,连续进样 5次 ,计算得α-蒎烯 、
β-蒎烯 、柠檬烯 、1 , 8-桉叶素对内标的相对峰面积
RSD分别为 1.69% 、0.97%、0.64%、0.55%。
2.5　稳定性试验:取辛夷挥发油软胶囊(批号
080630)供试品溶液 , 于 0 、1 、2 、3 、4 、5 、6 、7 、8 h 测
定 ,计算得α-蒎烯 、β-蒎烯 、柠檬烯 、1 , 8-桉叶素对内
标的相对峰面积 RSD 分别为 1.60% 、0.84%、
0.78%、0.87%。结果表明 ,供试品溶液在 8 h 内稳
定性较好。
　　取辛夷挥发油软胶囊(批号 080630)供试品溶
液 ,在 5 d内每日进样 3次 ,测定 ,计算得α-蒎烯 、β-
蒎烯 、柠檬烯 、1 ,8-桉叶素对内标的相对峰面积 RSD
分别为 1.64% 、0.87%、0.56%、0.89%。结果表
明 ,供试品溶液在 5 d内稳定性较好 。
2.6　重现性试验:取辛夷挥发油软胶囊(批号
080630)内容物 5份 ,分别制备供试品溶液 ,各进样
3次 ,测定 ,计算得α-蒎烯 、β-蒎烯 、柠檬烯 、1 , 8-桉叶
素对内标的相对峰面积 ,并计算质量分数 ,结果其
RSD值分别为 2.02% 、1.22%、0.85%、1.72%。
2.7　加样回收率试验:精密称取α-蒎烯 、β-蒎烯 、柠
檬烯 、1 , 8-桉叶素对照品 69.09 、103.68 、69.90 、
281.01 mg ,置 25 mL 量瓶中 ,加醋酸乙酯至刻度 ,
摇匀 ,作为对照品溶液 。取辛夷挥发油软胶囊(批号
080630)内容物 1 g ,精密称定 ,共称取 9份 ,分成 3
组 ,每组分别加入上述对照品溶液 1 、2 、3 mL ,制备
供试品溶液 ,分别进样 ,测定 ,计算回收率。结果α-
蒎烯平均加样回收率为 98.6%, RSD 为 0.72%
(n=9);β-蒎烯平均加样回收率为 99.0%, RSD 为
0.65%(n=9);柠檬烯平均加样回收率为 101.1%,
RSD为 0.56%(n=9);1 , 8-桉叶素平均加样回收率
为 99.6%, RSD为 1.24%(n=9)。
2.8　样品测定:取 3 批辛夷挥发油软胶囊样品 ,制
备供试品溶液 ,测定 ,并计算样品中α-蒎烯 、β-蒎烯 、
柠檬烯 、1 , 8-桉叶素的质量分数 ,结果见表 1 。可
知 ,3批样品中 ,每粒辛夷挥发油软胶囊中α-蒎烯的
量为 2.19 ～ 2.28 mg 、β-蒎烯的量为 3.64 ～ 3.69 mg 、
柠檬烯的量为 2.48 ～ 2.60 mg 、1 , 8-桉叶素的量为
10.35 ～ 11.57 mg 。
表 1　辛夷挥发油软胶囊中α-蒎烯 、β-蒎烯 、柠檬烯和 1 , 8-
桉叶素的测定结果
Table 1　Determination ofα-pinene, β-pinene,
limonen, and 1 , 8- cineole in Flos
Magnoliae volatile oil soft capsula
批号 α-蒎烯/(mg·粒-1)
β-蒎烯/
(m g·粒-1)
柠檬烯/
(mg·粒-1)
1 , 8-桉叶素/
(mg·粒-1)
080613 2.28 3.64 2.48 10.91
080623 2.19 3.66 2.60 11.57
080626 2.22 3.69 2.52 10.35
3　讨论
　　有关辛夷药材及含辛夷的制剂质量标准研究 ,
文献中多为对辛夷中木兰脂素的薄层鉴别或 HPLC
法测定[ 3 , 4] ,或对辛夷挥发油中的单一成分(如桉油
精)进行测定[ 5] ,或对辛夷总黄酮进行测定[ 6] 。本实
验采用毛细管气相色谱法对辛夷挥发油软胶囊中 4
种主要有效成分进行测定 ,结果表明该方法具有简
便 、快速 、准确和重现性好等优点 ,适合对于辛夷及
其制剂的质量控制。
　　本研究分别选用了 DM-624型毛细管色谱柱和
BP5型毛细管色谱柱以考察对制剂中 4种成分的分
离效果。结果显示 DM-624型毛细管色谱柱分离效
果不佳 ,溶剂峰与 α-蒎烯峰分离度低(1.31), 个别
峰峰形不正 ,有拖尾现象 , 或不能达到基线分离 。
BP5型毛细管色谱柱分离效果好 ,能达到基线分离 ,
峰形好 ,无拖尾现象 ,故本实验采用 BP5型毛细管
色谱柱。
　　曾选择了多个化合物作为内标物 ,包括甲苯 、十
六醇 、肉桂醇 、薄荷醇 、异戊醇 、异冰片 、丁香酚 、水杨
酸甲酯 、苯甲酸乙酯 、异辛烷 、环己酮 、苯乙酮 、萘 。
·1234· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 40 卷第 8 期 2009年 8月
根据试验结果 ,确定苯乙酮为本实验的内标物。
参考文献:
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红车轴草提取物中多环芳烃脱除工艺的研究
许　龙1 , 2 ,陈应庄1 ,曾建国1 , 2＊ ,罗　琪1
(1.湖南省中药提取工程研究中心 ,湖南 长沙　410331;2.湖南中医药大学 ,湖南 长沙　410007)
摘　要:目的　优选红车轴草提取物中多环芳烃(PAH s)脱除工艺。方法　以 PAH s 脱除率为指标 ,考察提取物粒
度 、脱除溶剂 、脱除方法对 PAH s脱除工艺的影响 。结果　最佳工艺为:红车轴草提取物超微粉碎至 300 目以上 ,
用六号溶剂超声提取 , 对 PAH s 的脱除率达到 98.0%以上 , PAHs 的残留量为 10.0 ng/g 以下。结论　超微粉碎-
六号溶剂-超声提取法脱除红车轴草提取物中 PAH s 脱除率高 ,工艺稳定 、可行。
关键词:红车轴草;多环芳烃;超微粉碎;超声提取
中图分类号:R284.2;R286.02　　　文献标识码:A　　　文章编号:0253-2670(2009)08-1235-04
Technique of removing polycyclic aromatic hydrocarbons from Tri f olium pratense extract
XU Long
1 , 2 , CHEN Ying-zhuang 1 , ZENG Jian-guo1 , 2 , LUO Qi1
(1.Hunan Eng ineering Research Center o f Chinese Materia Medica Ex trac t , Chang sha 410331 , China;
2. Hunan Univer sity o f T r aditional Chinese Medicine , Changsha 410007 , China)
Abstract:Objective　To optim ize the removal technique for ex t racting poly cyclic aromatic hydro car-
bons(PAHs)f rom Tri f ol ium pratense.Methods　The inf luence o f various factors , including the size ,
solvent , ex traction methods , and their ef fects on the removal efficiency , were investig ated.Results　The
best process fo r ex traction:the g round ex t ract of PA Hs w as over 300 meshes by ul tra-fine g rinding fi rst ly
and then the removal rate of PAHs w as above 98.0% and the to tal removal of PA Hs w as below 10.0 ng/
g by ul trasonic ex traction w ith solvent No.6.Conclusion　The removal rate o f PA Hs in T.pretense ex-
t ract by ult ra-fine grinding-ult rasonic e xt ract ion wi th solvent No.6 is much higher.The tit le pro cess is
stable and available.
Key words:Tri f olium pratense L.;polycyclic aromat ic hydrocarbons;ul t ramicro-pulverization;ul tra-
sonic ex traction
　　红车轴草 Tri folium pratense L.为豆科多年
生草本植物 ,主要含有鹰嘴豆芽素 A 、刺芒柄花素等
多种异黄酮类成分 ,刘晗等[ 1] 研究发现红车轴草在
鲜活状态下的异黄酮的量最高 ,并确定最佳采收期
为花蕾期至初花期 。红车轴草中异黄酮成分具有抗
肿瘤 、治疗骨质疏松和更年期综合症等作用[ 2 , 3] ,因
此被广泛用于保健食品中。近年来发现红车轴草提
取物中有微量多环芳烃(PAHs)存在 ,其来源可能
与红车轴草植物生长过程中的富集作用或在生产过
程中受到污染有关[ 4] 。PAHs具有强致癌性[ 5 , 6] ,严
重影响红车轴草提取物的质量 ,因此开展 PAHs脱
除工艺研究非常重要 。本实验考察了提取物粒度 、
提取溶剂和提取方法对 PAHs脱除的影响 ,并对其
中最优的超声提取法进行了研究 ,为 PAHs脱除工
·1235·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 40 卷第 8 期 2009年 8月
＊ 收稿日期:2009-03-09　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　基金项目:湖南省科技厅重大专项(2007FJ1005);湖南省科技计划重点项目(2008SK2009)作者简介:许　龙(1982—),男 ,湖南耒阳人 ,在读硕士 ,主要从事天然产物开发利用研究。
Tel:13808475843　E-mail:longxu23@yahoo.com.cn＊通讯作者　曾建国　Tel:(0731)84686478　E-mail:gink go@w orld-w ay.net