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Chemical constituents of Epimedium sutchuenense

四川淫羊藿中两个新的黄酮醇苷



全 文 :·化学成分·
四川淫羊藿中两个新的黄酮醇苷
宋丽娜 ,陈  光 ,喻长远 3
(北京化工大学生命科学与技术学院 ,北京  100029)
摘  要 :目的  对四川淫羊藿 Epimedi um sutchuenense 的化学成分进行研究。方法  利用硅胶、聚酰胺、Sephadex
L H220、ODS 等柱色谱进行分离和纯化 ,根据化合物的光谱学数据和理化方法鉴定其结构。结果  从四川淫羊藿
70 %乙醇提取物中分离得到了 10 个化合物 ,鉴定其结构为川藿苷 A (sutchuenoside A ,Ⅰ) 、川藿苷 B ( sutchuenoside
B ,Ⅱ) 、大豆苷元 (daidzein ,Ⅲ) 、宝藿苷2Ⅰ(baohuoside2Ⅰ, Ⅳ) 、kaempferide 32rhamnoside ( Ⅴ) 、淫羊藿苷 (icariin , Ⅵ) 、an2
hydroicaritin232O2α2L2rhamnopyranosyl (1 →2)2α2L2rhamnopyranoside ( Ⅶ) 、对羟基苯甲酸 ( p2hydroxybenzoic acid ,
Ⅷ) 、胡萝卜苷 (daucosterol , Ⅸ) 、β2谷甾醇 (β2sitosterol , Ⅹ) 。结论  化合物Ⅰ和Ⅱ为新化合物 ,分别命名为 sutchue2
noside A 和 B ,俗名为川藿苷 A 和 B ,化合物Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅷ~Ⅹ系首次从该植物中分离得到。
关键词 :四川淫羊藿 ;黄酮 ;川黄酮醇藿苷 A ;川藿苷 B
中图分类号 :R28411    文献标识码 :A    文章编号 :025322670 (2009) 1021525204
Chemical constituents of Epimedium sutchuenense
SON G Li2na , CH EN Guang , YU Chang2yuan
(College of Life Science and Technology , Beijing University of Chemical Technology , Beijing 100029 , China)
Abstract : Objective  To st udy t he chemical constit uent s of Epi medi um sutchuenense1 Methods  The
compounds were repeatedly separated and p urified on column chromatograp hy of silica gel , polyamide ,
Sep hadex L H220 , and ODS1 The st ruct ures were identified on t he basis of spect ral methods1 Results  Ten
compounds were isolated f rom 70 % et hanol ext ract of E1 sutchuenense and were identified as sutchueno side
A ( Ⅰ) , sutchueno side B ( Ⅱ) , daidzein ( Ⅲ) , baohuoside2Ⅰ ( Ⅳ) , kaempferide 32rhamno side ( Ⅴ) ,
icariin ( Ⅵ) , anhydroicaritin232O2α2L2rhamnopyranosyl (1 →2)2α2L2rhamnopyranoside ( Ⅶ) , p2hydroxy2
benzoic acid ( Ⅷ) , daucosterol ( Ⅸ) , andβ2sito sterol ( Ⅹ) , respectively1 Conclusion  Compounds Ⅰand
Ⅱare novel ones named as sutchuentins A and B respectively1 Compounds Ⅲ, Ⅴ, Ⅶ, and Ⅷ- Ⅹ are
isolated f rom this plant for t he first time1
Key words : Epi medi um sutchuenense Franch1 ; flavonoids ; sutchuenoside A ; sutchuenoside B
  淫羊藿为小檗科淫羊藿属植物 ,具有补肾阳 ,强
筋骨 ,祛风湿之功效。我国有 20 多种淫羊藿属植
物 ,资源丰富 ,占全球总量一半以上 ,主要分布在四
川、贵州、湖北和东北等地。现代药理实验研究表
明 ,淫羊藿能增加心脑血管血流量 ,促进造血功能、
免疫功能及骨代谢 ,具有抗衰老、抗肿瘤等药理活
性[ 1~4 ] 。研究表明 ,淫羊藿主要含有异戊烯基取代
的黄酮类化合物 ,此外还含有生物碱、多糖等。前人
对四川淫羊藿 Epi medi um sutchuenense Franch1 研
究报道比较少 ,因此本实验就其化学成分进行了初
步研究 ,从乙醇提取物的醋酸乙酯部分中分得了 10
种化合物。其中化合物 Ⅰ和 Ⅱ为新化合物 ,分别命
名为川藿苷 A ( sutchueno side A ) 和川藿苷 B
(sutchuenoside B) 。
1  药品与仪器
111  药品 :工业酒精 ,分析纯 ,北京华伟业食品添加
剂有限公司 ;三氯甲烷、醋酸乙酯、甲醇、无水乙醇、
正丁醇、硫酸 ,分析纯 ,北京化工厂 ;无水三氯化铝 ,
分析纯 ,北京恒边达化工厂 ;羧甲基纤维素钠盐 ,分
析纯 ,中国医药 (集团) 上海化学试剂公司 ;zcx2Ⅱ型
柱色谱硅胶 ,青岛海洋化工有限公司 ; GF254 型薄层
色谱硅胶 ,青岛海洋化工有限公司 ;聚酰胺薄膜和柱
·5251·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
3 收稿日期 :2009203224                      
作者简介 :宋丽娜 ,女 ,天津人 ,硕士研究生 ,主要从事天然产物生物活性的研究。 Tel : (010) 64448589  E2mail :sln1023 @1631com3 通讯作者 喻长远 E2mail :yucy @mail1 buct1 edu1cn
色谱聚酰胺均为浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂
产品。
四川淫羊藿于 2007 年 11 月购于河北省 ,由北
京化工大学生命科学与技术学院喻长远教授鉴定为
四川淫羊藿 E1 sutchuenense Franch1 。
112  仪器 :AV600 型超导核磁共振仪 ,德国 Bruker
公司 ; Waters Quat t ro Premier XE 质谱仪 , 美国
Waters 公司。
2  提取与分离
干燥淫羊藿药材 715 kg ,用 70 %乙醇加热回流
2 次 ,每次 115 h ,回收乙醇得浸膏 ,将浸膏溶于适量
水中 ,依次用石油醚、三氯甲烷、醋酸乙酯、正丁醇进
行萃取 ,分别回收溶剂 ,得氯仿萃取物 5812 g、醋酸
乙酯萃取物 2710 g、正丁醇萃取物 48612 g。取醋酸
乙酯萃取物 2710 g ,经硅胶柱色谱 ,三氯甲烷2甲醇
(50 ∶1~1 ∶1) 梯度洗脱 ,得到极性递增的 7 个部
分。各部分再经硅胶、聚酰胺、Sep hadex L H220、
ODS 反复柱色谱分离 ,得到化合物 Ⅰ~ Ⅹ。
3  鉴定
化合物 Ⅰ:黄色粉末 , Molish 反应和 Mg2HCl
反应为阳性 ,紫外灯下呈棕色荧光 ,紫外光谱有黄酮
类化合物吸收特征。将化合物 Ⅰ酸水解 ,检出 L2鼠
李糖 ,示化合物 Ⅰ为黄酮苷类化合物。( + ) ESI2MS
m/ z :681[ M + Na ] + ,659 [ M + H ] + ,给出分子式为
C33 H38 O14 。1 H2NMR (表 1)中 ,δH 12171 (1 H ,s)处有
5 位酚羟基质子信号。1 H2NMR和13 C2NMR谱 (表
1)表明有两个α2L2鼠李糖基信号 ,分别为δH 5140
(1 H , br s ) 和δC 10114 , 761 0 , 7112 , 7214 , 7016 ,
1811 ;δH 4188 (1 H , br s) 和δC 10211 , 7017 , 7110 ,
7118 ,6911 ,1810。1 H2NMR (表 1) 谱 ,δH 1143 (3 H ,
s) ,1145 (3 H , s) , 5178 (1 H , d , J = 1012 Hz) , 6173
(1 H , d , J = 1012 Hz) 和 13 C2NMR (表 1) 谱中 ,δC
2812 ,7818 ,11415 ,12816 处的信号表明可能存在γ2
二甲基2色烯。另 HMBC 实验表明 (图 1) , H24″,5″
(δH 1143 ,1145) 与 C23″(δC 7818) 存在远程相关 , H2
4″,5″(δH 1143 ,1145) 与 C22″(δC 12816) 存在远程相
关 , H22″(δH 5178) 与 C23″(δC 7818) 存在远程相关
H21″(δH 6173)与 C23″(δC 7818)存在远程相关 ,进一
步证明了γ2二甲基2色烯的存在。1 H2NMR (表 1)
谱中 ,在δH 7112 (2 H ,d , J = 9 Hz) 和 7192 (2 H ,d ,
J = 9 Hz)处有一个 AA′XX′耦合系统 ,表明对位取
代 B 环的存在。HMBC 实验表明 ,δH 3186 与δC
16210 存在远程相关 ,同时 H22′,6′(δH 7192) 和 H2
3′,5′(δH 71 12) 与δC 1621 0也存在远程相关 ,因此甲
表 1  化合物 Ⅰ和 Ⅱ的1 H2NMR和13 C2NMR波谱数据
( DMSO2d6 , TMS, J Hz )
Table 1  1 H2NMR and 13 C2NMR Data of compounds
Ⅰand Ⅱ( DMSO2d6 , TMS, J Hz )
编号

δH δC

δH δC
2 15713 1571 5
3 13512 1361 0
4 17815 1791 2
5 15913 1581 8
6 6126 (1 H ,s) 9917 1101 2
7 16112 1581 5
8 10515 7104 (1 H ,s) 951 0
9 15110 1481 9
10 10112 1071 7
1′ 12214 1221 2
2′,6′ 7192 (2 H ,d ,9) 13110 8101 (2 H ,d ,9) 1311 3
4′ 16210 1621 1
3′,5′ 7112 (2 H ,d ,9) 11416 7115 (2 H ,d ,9) 1141 6
4′2OCH3 3186 (3 H ,s) 5610 3187 (3 H ,s) 561 0
1″ 6173 (1 H ,d ,1012) 11415 7126 (1 H ,s) 1001 9
2″ 5178 (1 H ,d ,1012) 12816 1561 4
3″ 7818 1321 5
4″ 1145 (3 H ,s) 2812 5125 (1 H ,br s) ; 1131 8
5168 (1 H ,br s)
5″ 1143 (3 H ,s) 2812 2112 (3 H ,s) 191 3
Rha
1Ê 5140 (1 H ,br s) 10114 5145 (1 H ,br s) 1011 4
2Ê 4112 (1 H ,br s) 7610 4117 (1 H ,br s) 761 0
3Ê 7112 711 3
4Ê 7214 721 4
5Ê 7016 701 6
6Ê 1109 (3 H ,d ,6) 1811 1112 (3 H ,d ,6) 181 1
Rha
1″ 4188 (1 H ,br s) 10211 4190 (1 H ,br s) 1021 1
2″ 7017 701 7
3″ 7110 711 0
4″ 7118 711 8
5″ 6911 691 3
6″ 0183 (3 H ,d ,6) 1810 0184 (3 H ,d ,6) 181 0
氧基连接在 C24′位置。H26 (δH 6126) 与 C28 (δC
10515) , C210 (δC 10112) 存在远程相关 , H21″(δH
6173) 与 C29 (δC 15110) 存在远程相关 ,表明γ2二甲
基2色烯在 C27 和 C28 位成环。H21Ê(δH 5140)与 C2
3 (δC 13512) 存在远程相关 , H21″(δH 4188) 与 C22Ê
存在远程相关 ,可以确定低聚糖的位置和连接顺序。
根据以上推断 ,确定了化合物 Ⅰ的结构 (图 1) ,命名
为 sutchuenoside A ,又称川藿苷 A。
  化合物 Ⅱ:黄色粉末 , Molish 反应和 Mg2HCl
反应为阳性 ,紫外灯下呈棕色荧光 ,紫外光谱有黄酮
·6251· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
图 1  化合物 Ⅰ和 Ⅱ的结构式和重要的 HMBC相关
Fig11  Structures and key HMBC correlations
of compounds Ⅰand Ⅱ
类化合物吸收特征。将化合物 Ⅱ酸水解 ,检出 L2鼠
李糖 ,示化合物 Ⅱ为黄酮苷类化合物。( + ) ESI2MS
m/ z :679 [ M + Na ] + , 给出分子式为 C33 H36 O14 。
1 H2NMR (表 1) 谱中 ,δH 12174 (1 H , s) 处有 5 位酚
羟基质子信号 ;δH 2112 ( 3 H , s) , 5125 ( 1 H , br s) ,
5168 (1 H ,br s) ,7126 (3 H , s) 处的信号表明可能存
在异丙烯基呋喃基团。HMBC (图 1) 实验表明 , H2
5″(δH 2112)与 C23″(δC 13215) ,C22″(δC 15614) 存在
远程相关 , H24″(δH 5125 ,5128)与 C22″(δC 15614)存
在远程相关 , H21″(δH 7126) 与 C22″(δC 15614) 存在
远程相关 ,进一步证实了异丙烯基呋喃基团的存在 ;
同时亦观察到 ,化合物 Ⅰ的 C26 信号δC 9917 在化合
物 Ⅱ中消失 ,而观察到δC 11012 ;δH 6126 在化合物
Ⅱ中消失 ,而观察到δH 7104 ;并且 H21″(δH 7126)与
C26 (δC 11012) , C27 (δC 15815) 存在远程相关 , H28
(δH 7104)与 C26 (δC 11012) ,C27 (δC 15815) ,C210 (δC
10717)存在远程相关 ,表明异丙烯基呋喃基团在C26
和 C27 位成环。在 1 H2NMR (表 1) 谱中观察到δH
7112 (2 H ,d ,J = 9 Hz) 和δH 7192 (2 H ,d , J = 9 Hz)
处有一个 AA′XX′耦合系统 ,综合考虑 HMBC 实验
中低聚糖糖链一些相关峰的信息 ,可以推断化合物
Ⅱ的结构 (图 1) ,命名为 sutchuenoside B ,又称川藿
苷 B。
化合物 Ⅲ: 白色粉末 , Mg2HCl 反应为阳性。
1 H2NMR ( DMSO2d6 )δ: 8127 ( 1 H , s , H22 ) , 7195
(1 H ,d ,J = 814 Hz , H25) ,7138 (2 H ,d , J = 718 Hz ,
H22′,6′) ,6194 (1 H ,d ,J = 814 Hz , H26) ,6186 (1 H ,
s , H28 ) , 6181 ( 2 H , d , J = 718 Hz , H23′, 5′) ;
13 C2NMR ( DMSO2d6 )δ: 153121 ( C22) , 123194 ( C2
3) , 175116 ( C24) , 127169 ( C25) , 115142 ( C26 , 3′,
5′) , 163125 ( C27 ) , 102156 ( C28 ) , 157193 ( C29 ) ,
116198 ( C210 ) , 123103 ( C21′) , 157165 ( C24′) ,
130151 ( C22′, 6′) 。1 H2NMR和 13 C2NMR数据与文
献报道[5 ]基本一致 ,故鉴定该化合物为大豆苷元。
化合物 Ⅳ: 黄色粉末 , mp 202~ 203 ℃, Mg2
HCl 反应为阳性。1 H2NMR ( DMSO2d6 )δ: 12152
(1 H ,s ,C52O H) ,10184 (1 H , s ,C72O H) ,7185 (2 H ,
d ,J = 712 Hz , H22′,6′) ,7112 (2 H , d , J = 712 Hz ,
H23′,5′) , 6132 (1 H , s , H26) , 5127 (1 H , s , Rha2H2
1) ,3185 (3 H , s ,OMe24′) ,1167 (3 H , s , H24″) ,1162
(3 H , s , H25″) ; 13 C2NMR (DMSO2d6 )δ: 157118 ( C2
2) ,134192 (C23) ,178146 (C24) ,159133 (C25) ,98183
(C26) , 162116 ( C27) , 106142 ( C28) , 154126 ( C29) ,
104164 ( C210 ) , 122176 ( C21′) , 130186 ( C22′) ,
114152 (C23′) ,161175 (C24′) ,114152 (C25′) ,130186
(C26′) ,21163 (C21″) ,122189 ( C22″) ,131146 (C23″) ,
25187 (C24″) ,18123 (C25″) ,55195 (C2OMe) ,102145
( C2Rha21 ) , 70181 ( C2Rha22 ) , 71110 ( C2Rha23 ) ,
71162 ( C2Rha24) , 70155 ( C2Rha25) , 17192 ( C2Rha2
6) 。1 H2NMR和13 C2NMR数据与文献报道[6 ]基本一
致 ,故鉴定该化合物为宝藿苷 Ⅰ。
化合物 Ⅴ: 黄色粉末 , Mg2HCl 反应为阳性。
1 H2NMR (DMSO2d6 )δ:121 59 (1 H ,s ,C52O H) ,8102
(2 H ,d ,J = 9 Hz , H22′,6′) ,7116 (2 H ,d , J = 9 Hz ,
H23′,5′) , 7105 ( 1 H , s , H28) , 6196 ( 1 H , s , H26) ,
3185 ( 3 H , s , OMe24′) , 0182 ( 3 H , d , J = 514 Hz ,
Rha2H26) ; 13 C2NMR ( DMSO2d6 )δ: 157161 ( C22) ,
135192 (C23) ,179137 (C24) ,158156 (C25) ,97162 (C2
6) ,164181 (C27) ,95111 (C28) ,157141 (C29) ,102153
(C210) , 122142 ( C21′) , 131121 ( C22′) , 114164 ( C2
3′) ,162101 ( C24′) , 114164 ( C25′) , 131121 ( C26′) ,
55199 ( C2OMe) , 102153 ( C2Rha21) , 71124 ( C2Rha2
2) , 70182 ( C2Rha23) , 71161 ( C2Rha24) , 70155 ( C2
Rha25) ,17193 ( C2Rha26) 。1 H2NMR和13 C2NMR数
据与文献报道[ 7 ] 基本一致 , 故鉴定该化合物为
kaempferide 32rhamnoside。
化合物 Ⅵ: 黄色粉末 , mp 231~ 233 ℃, Mg2
HCl 反应呈阳性。1 H2NMR ( DMSO2d6 )δ: 12156
(1 H ,s ,O H25) ,7189 (2 H ,d , J = 814 Hz , H22′,6′) ,
7112 (2 H ,d , J = 910 Hz , H23′,5′) ,6164 (1 H , s , H2
6) ,3186 (3 H ,s ,OCH324′) ,11 69 (3 H ,s , H24″) ,1160
(3 H , s , H25″) , 0179 ( 3 H , d , J = 514 Hz , R2H26) ;
13 C2NMR ( DMSO2d6 )δ: 157177 ( C22) , 135113 ( C2
3) ,178177 (C24) ,159156 (C25) ,98162 (C26) ,160199
(C27) ,108180 ( C28) ,153149 ( C29) ,106108 ( C210) ,
122161 (C21′) ,131102 (C22′) ,114155 (C23′) ,161189
·7251·中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
(C24′) ,114155 (C25′) ,131102 (C26′) ,21188 (C21″) ,
122174 ( C22″) , 131155 ( C23″) , 25191 ( C24″) , 18131
(C25″) ,55198 ( C2OMe) , 102148 ( C2Rha21) , 70181
( C2Rha22 ) , 71115 ( C2Rha23 ) , 71160 ( C2Rha24 ) ,
70154 ( C2Rha25) ,17191 ( C2Rha26) , 101105 ( C2Glc2
1) ,73184 (C2Glc22) ,77109 ( C2Glc23) ,70116 ( C2Glc2
4) ,77167 ( C2Glc25) ,61112 ( C2Glc26) 。1 H2NMR和
13 C2NMR数据与文献报道[6 ] 基本一致 ,故鉴定该化
合物为淫羊藿苷。
化合物 Ⅶ: 黄色粉末 , mp 159~ 161 ℃, Mg2
HCl 反应为阳性。1 H2NMR ( DMSO2d6 )δ: 12152
(1 H ,s , C52O H) , 6132 ( 1 H , s , H26) , 7186 ( 2 H , d ,
J = 814 Hz , H22′,6′) ,7112 (2 H , d , J = 814 Hz , H2
3′,5′) ,1167 (3 H ,s , H24″) ,1162 (3 H ,s , H25″) ,3185
(3 H ,s ,OMe24′) ,5137 (1 H ,s ,Rha2H21) ,4188 (1 H ,
s , Rha′2H21) ; 13 C2NMR ( DMSO2d6 )δ: 157111 ( C2
2) ,134185 (C23) ,178135 (C24) ,159135 (C25) ,98188
(C26) , 161179 ( C27) ,106147 ( C28) , 154125 ( C29) ,
104154 ( C210 ) , 122178 ( C21′) , 130187 ( C22′) ,
114153 (C23′) ,162138 (C24′) ,114153 (C25′) ,130187
(C26′) ,21164 (C21″) ,122178 ( C22″) ,131145 (C23″) ,
25187 (C24″) ,18123 (C25″) ,55195 (C2OMe) ,101119
( C2Rha21 ) , 76102 ( C2Rha22 ) , 70197 ( C2Rha23 ) ,
72142 ( C2Rha24) , 70160 ( C2Rha25) , 18107 ( C2Rha2
6) ,1021 07 (C2Rha′21) ,70172 ( C2Rha′22) ,71111 (C2
Rha′23 ) , 71186 ( C2Rha′24 ) , 69127 ( C2Rha′25 ) ,
17196 ( C2Rha′26) 。1 H2NMR和 13 C2NMR数据与文
献报道[8 ] 基本一致 ,故鉴定该化合物为 anhydroi2
caritin232O2α2L2rhamnopyrano syl ( 1 →2 )2α2L2rh2
amnopyranoside。
结合理化常数和波谱数据 ,化合物 Ⅷ~ Ⅹ分别
鉴定为对羟基苯甲酸[9 ] 、胡萝卜苷[ 10 ] 、β2谷甾醇[11 ] 。
参考文献 :
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细柱五加叶的化学成分
安士影1 ,2 ,钱士辉2 3 ,蒋建勤1 3 ,王康才3
(11 中国药科大学 ,江苏 南京  210009 ; 21 江苏省中医药研究院 ,江苏 南京  210028 ;
31 南京农业大学 ,江苏 南京  210095)
摘  要 :目的  研究细柱五加 A canthopanax g raci l ist y l us 叶的化学成分。方法  采用硅胶柱色谱、重结晶等方法 ,
根据理化性质和光谱数据鉴定化合物的结构。结果  从细柱五加叶中得到 17 个化合物 ,分别鉴定为异贝壳杉烷
酸[ ( - )2kaur2162en2192oic acid , Ⅰ]、槲皮素 (quercetin , Ⅱ) 、山柰酚 (kaempferol , Ⅲ) 、原儿茶酸 (protocatechuic acid ,
Ⅳ) 、acankoreoside A ( Ⅴ) 、acantrifoside A ( Ⅵ) 、3α,11α2dihydroxy220 (29)2lupene223 ,282dioic acid ( Ⅶ) 、β2谷甾醇 (β2
sitosterol , Ⅷ) 、胡萝卜苷 (daucosterol , Ⅸ) 、棕榈酸 (palmitic acid , Ⅹ) 、芦丁 ( rutin , Ⅺ) 、stigmast25 ,222dien232O2α2D2
·8251· 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs  第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
3 收稿日期 :2009203205                      
基金项目 :江苏省公益研究项目 (BM2006104)
作者简介 :安士影 (1983 —) ,女 ,黑龙江省绥化市人 ,硕士 ,从事天然产物及其活性研究。 
Tel :13770564963  E2mail :anshiying @1261com3 通讯作者 钱士辉 Tel : (025) 85639644  E2mail :njqsh2005 @1261com
蒋建勤 Tel :13913982651  E2mail :cpujq @yahoo1com1cn