全 文 ：苷符合一级动力学过程 ,当水温超过 80 ℃时 ,黄芩
的内源酶已被灭活 ,黄芩苷的含量不再降低。实验
所用的药材为黄芩的生品 ,文献中所选择的药材可
能是炮制品 ,因此 ,笔者将继续对黄芩的生品和各种
炮制品的酶活性进行系统研究 ,为黄芩的炮制工艺
研究提供参考。
在实际生产中 ,药材投料量大 ,以水为溶媒提取
药材时 ,升温缓慢 ,缓慢的升温过程容易造成黄芩苷
的降解 ,因而黄芩药材宜在 80 ℃以上投料 ,或者将
黄芩药材预先进行炮制 ,使黄芩的内源酶灭活后再
进行煎煮 ,从而保证黄芩苷的提取率。
黄芩苷是葡萄糖醛酸苷类 ,由于空间位阻效应 ,
H + 不易进攻糖苷键 ,使其比较难于酸水解 ,即使在
剧烈酸水解条件下也只能使部分苷水解。本实验发
现通过黄芩的内源酶催化水解作用 ,可将药材中的
黄芩苷全部降解 ,产生大量的黄芩素。因此 ,黄芩的
内源酶催化降解黄芩苷为生产黄芩素提供一种可选
择的途径。
参考文献 :
[ 1 ] 　中国药典[ S] . 一部. 2005.
[ 2 ] 　肖崇厚. 中药化学[ M ] . 北京 :人民卫生出版社 ,1984.
[ 3 ] 　李晓芳 ,傅　军 ,金描真 ,等. 黄芩水提取工艺中黄芩苷降解动
力学研究[J ] . 现代食品和药品研究杂志 ,2006 ,16 (4) :27229.
固相萃取2高效液相色谱法测定青银注射液中蒿酮
何 　兵 ,田 　吉 ,李春红 ,冯文宇 3　
(泸州医学院药学院 药物研究所 ,四川 泸州 　646000)
摘 　要 :目的 　建立固相萃取2高效液相色谱法测定青银注射液中蒿酮的分析方法。方法 　采用高效液相色谱法
测定。色谱柱为 Dikma Kromasil C18 (250 mm ×416 mm ,5μm) ;流动相 :乙腈2水 (75 ∶25) ;检测波长 :242 nm ;柱
温 :30 ℃;体积流量 :018 mL/ min ;进样量 :10μL 。供试品溶液的制备采用 C18固相萃取小柱 (甲醇 10 mL 活化 ,水
10 mL 平衡) ,用 50 %甲醇洗脱 ,弃去洗脱液 ,再用甲醇洗脱。结果 　蒿酮在 01220 5～31527 2μg 具有良好的线性
关系 ( r = 01999 9) ,平均回收率为 98128 % ,RSD 为 0135 %。结论 　该方法简便、快速、准确 ,具有良好的重复性和
回收率 ,可作为青银注射液中蒿酮的定量分析方法。
关键词 :青银注射液 ;蒿酮 ;高效液相色谱 ;固相萃取
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0320400203
　　青银注射液是我所研究的中药新药 ,是由青蒿
油和金银花提取物组成的中药注射剂 ,具有宣肺透
邪 ,清热解毒之功效 ,临床用于外感高热证所致的高
热、微恶风寒、汗泄不畅、头痛、咳嗽、痰粘、咽燥或咽
喉红肿疼痛及上呼吸道感染、急性肺部感染等。青
蒿油中主要有效成分为蒿酮 ( 45 %) 和樟脑
(12 %) [1 ] 。原质量标准是采用气相色谱法测定樟
脑[2 ] 。本实验尝试采用高效液相色谱法测定其中的
蒿酮 ,结果该方法简单快速 ,重现性好 ,可作为该制
剂中蒿酮的定量分析方法。
1 　仪器与试药
戴安高效液相色谱仪 ( P680A 四元低压梯度
泵 ,PDA - 100 二极管阵列检测器 , TCC - 100 柱温
箱 , Chromeleon 色谱工作站 ) ; 瑞士 Precisa XR
205SM - DR 电子天平。HSE - 12 固相萃取装置
(天津恒奥科技发展有限公司) ;Besep SPE C18固相
萃取小柱 (500 mg/ 6 mL) 。
青银注射液 (自制 ,规格 :10 mL/ 支) ;蒿酮对照
品 ( Sigma2Aldrich 公司提供 ,批号 : 053989/ 1 ,质量
分数大于 9810 %) ;乙腈为色谱纯 ,其余试剂均为分
析纯 ,水为重蒸馏水。
2 　方法与结果
211 　色谱条件 :色谱柱为 Dikma Kromasil C18 (250
mm ×41 6 mm ,5μm) ;流动相 :乙腈2水 (75 ∶25) ;检
测波长 : 242 nm ; 柱温 : 30 ℃; 体积流量 : 018
mL/ min ;进样量 :10μL 。
212 　溶液的制备
21211 　对照品溶液的制备 :精密吸取蒿酮对照品
015 mL ,精密称定为 01440 9 g ,加甲醇稀释 5 000
倍制成质量浓度为 88118μg/ mL 的溶液 ,作为蒿酮
·004· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
3 收稿日期 :2008206228　　　
基金项目 :“九五”国家科技攻关项目 (962901205220)
作者简介 :何　兵 (1978 - ) ,男 ,四川泸州人 ,助理研究员 ,理学学士 ,主要从事新药质量标准研究工作。
Tel :13982770721 　E2mail :lyhb2008 @126. com
对照品溶液。
21212 　供试品溶液的制备 :精密吸取本品 1 mL ,过
预处理好的 C18固相萃取小柱 (甲醇 10 mL 活化 ,水
10 mL 平衡) ,用 50 %甲醇 5 mL 洗脱 ,弃去洗脱液 ,
再用甲醇 4 mL 洗脱 ,收集洗脱液 ,定容到 5 mL ,摇
匀 ,即得。
21213 　阴性对照溶液的制备 :取按处方比例及制备
工艺制得不含青蒿油的阴性对照样品 ,按供试品溶
液的制备项下方法制成阴性对照溶液。
213 　系统适应性及阴性对照试验 :分别精密吸取对
照品溶液、供试品溶液和缺青蒿油的阴性对照溶液
各 10μL ,注入高效液相色谱仪 ,记录色谱图 ,结果
见图 1。可见 ,蒿酮的保留时间约为 915 min ,与相
邻色谱峰的分离度大于 115 ,拖尾因子为 1105 ,理论
塔板数以蒿酮峰计为 17 699 ,蒿酮峰质量分数因子
为 1 000 ,阴性对照在蒿酮峰处无干扰 ,即本试验条
件下蒿酮与其他组分分离完全。
t/ min3 2蒿酮3 2artemisia ketone
图 1 　蒿酮对照品( A) 、青银注射液( B)和阴性对照( C)的
HPLC色谱图
Fig. 1 　HPLC Chromatograms of artemisia ketone
reference substance ( A) , Qingyin Injection
( B) , and negative sample ( C)
214 　线性关系考察 :分别精密吸取 88118μg/ mL
蒿酮对照品溶液 215、5、10、15、20、40μL 注入液相
色谱仪 ,按上述色谱条件测定峰面积。以峰面积
( Y) 对进样量 ( X) 进行线性回归 ,得标准曲线方程
Y = 1081439 5 X - 01735 0 , r = 01999 9。结果表
明 ,蒿酮在 01220 5～31527 2μg 时 ,峰面积与进样
量有良好的线性关系。
215 　精密度试验 : 取本品供试品溶液 (批号 :
070912) ,重复进样 6 次 ,测定蒿酮峰面积 ,计算得其
RSD 为 0136 %。
216 　稳定性试验 : 取本品供试品溶液 (批号 :
070912) ,室温下放置 ,分别于制备后 0、4、8、12、24、
36 h 进样测定 ,测定蒿酮峰面积 ,计算得其 RSD 为
0158 %( n = 6) ,表明供试品溶液在 36 h 内稳定。
217 　重现性试验 :取同一批样品 (批号 : 070912) 6
份 ,平行制备供试品溶液 ,分别进样测定峰面积 ,计
算蒿酮质量浓度 , 结果蒿酮的平均质量浓度为
01528 6 mg/ mL ,RSD 为 0145 %( n = 6) 。
218 　回 收率试验 : 精密量取含蒿酮 01528 6
mg/ mL 的本品 (批号 : 070912) 9 份 ,每份 1 mL ,分
成 3 组 ,每组 3 份 ,分别精密添加 01176 4 mg/ mL
蒿酮对照品溶液 2、3、4 mL ,制备供试品溶液 ,进样
测定 ,并计算回收率 ,结果平均回收率为 98128 % ,
RSD 为 0135 %。
219 　样品的测定 :取不同批次青银注射液制备供试
品溶液。分别精密吸取蒿酮对照品溶液和供试品溶
液各 10μL ,进样测定 ,记录蒿酮的峰面积 ,采用外
标法计算蒿酮的质量浓度 ,结果见表 1。
表 1 　青银注射液中蒿酮的测定结果( n = 3)
Table 1 　Determination of artemisia ketone
in Qingyin Injection ( n = 3)
批 号 蒿酮/ (mg ·支 - 1) RSD/ %
070912 5. 29 0. 21
070918 5. 68 0. 35
070926 4. 91 0. 27
3 　讨论
采用二极管阵列检测器在 190～380 nm 分别
扫描蒿酮对照品溶液和青银注射液中的蒿酮峰 ,结
果二者均在 24117 nm 有最大吸收 ,故检测波长选
择 242 nm。
青银注射液是由青蒿油和金银花提取物组成的
复方制剂 ,其主要有效成分为青蒿油、绿原酸、异绿
原酸及其异构体 ,由于绿原酸类在 242 nm 处仍有
较强吸收 ,且量较高 ,若不分离掉这部分有机酸 ,将
在 215～5 min 出一超出量程的色谱杂峰 ,并导致基
线严重漂移。故采用 H PL C 测定青银注射液中蒿
酮时需先除去绿原酸类 ,由于绿原酸类和蒿酮极性
相差较大 ,故考虑用 SPE 分离除去绿原酸类 ,结果
样品经过 SPE 处理后 ,绿原酸类基本除尽 ,回收率
也较高。
实验中曾考察洗脱溶液的甲醇体积分数。经实
验得知 ,采用 5 mL 50 %甲醇溶液能将绝大部分绿
原酸类洗脱下来 ,而未能将蒿酮洗脱下来 ,再加以 5
mL 60 %甲醇溶液能将部分的蒿酮洗脱下来 ,而 5
mL 80 %甲醇溶液则可将剩余的蒿酮完全洗脱下
来 ,再加 5 mL 90 %的甲醇 ,洗脱液中已无蒿酮。但
为保证完全洗脱 ,避免对下一样品干扰 ,实验采用 5
mL 纯甲醇洗脱。
SPE C18小柱有 100 mg/ 1 mL 、200 mg/ 3 mL 、
500 mg/ 6 mL 规格。实验考察了 200 mg/ 3 mL 、
·104·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
500 mg/ 6 mL 对蒿酮测定的影响 ,结果采用 200
mg/ 3 mL 小柱时 ,供试品的回收率只有 93186 % ,而
采用 500 mg/ 6 mL 小柱时 ,回收率达到 98128 %。
可见 ,SPE 小柱的吸附容量会影响蒿酮测定结果的
准确性。可能是由于样品中绿原酸类和杂质的竞争
性吸附导致蒿酮在 200 mg/ 3 mL 小柱上吸附不完
全 ,而 500 mg/ 6 mL 小柱由于吸附容量增大 ,能够
完全吸附蒿酮 ,所以后者的回收率要明显高于前者。
实验采用 HPL C 测定青银注射液中蒿酮 ,该法
准确可靠 ,精密度好 ,具有良好的重现性和回收率 ,
可用于该制剂中蒿酮的质量控制。
参考文献 :
[ 1 ] 　田　吉 ,冯文宇 ,何 　兵. 青蒿及其制剂的挥发性成分分析
[J ] . 时珍国医国药 ,2007 ,18 (8) : 184021842.
[ 2 ] 　邱华荣 ,田　吉 ,冯文宇 ,等. 青银注射液中绿原酸与樟脑的含
量测定[J ] . 中成药 ,2004 ,26 (8) : 6212623.
复方丹参缓释胶囊在犬体内的药动学研究
李 　丹1 ,2 ,宋洪涛1 3 ,初 　阳3 ,陈大为4 ,何仲贵4
(1. 南京军区福州总医院 药学科 ,福建 福州 　350025 ;2. 沈阳医学院奉天医院 药剂科 ,辽宁 沈阳 　110024 ;
3.中国医科大学附属第一医院 药剂科 ,辽宁 沈阳 　110001 ;4. 沈阳药科大学药学院 ,辽宁 沈阳 　110016)
摘　要 :目的 　考察复方丹参缓释胶囊在犬体内的药效动力学。方法 　采用多元定时释药技术制备复方丹参缓释
胶囊 ,以血小板聚集抑制率为评价指标 ,以市售复方丹参片为参比制剂 ,对自制复方丹参缓释胶囊进行犬体内药效
动力学研究。结果 　犬单剂量口服给药后 ,复方丹参缓释胶囊的效应峰值 ( Emax ) 为 18162 % ,效应达峰时间 ( tmax )
为 8 h ,效应半衰期 ( t1/ 2 )为 2140 h ,平均效应滞留时间 (MRT)为 8111 h ;而市售复方丹参片的 Emax为 44134 % , tmax
为 315 h , t1/ 2为 1154 h ,MRT 为 4157 h。结论 　与复方丹参片相比 ,复方丹参缓释胶囊的药效更加温和而持久 ,达
到了预期的缓释效果。
关键词 :复方丹参缓释胶囊 ;药动学 ;血小板聚集抑制率
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0320402203
　　复方丹参片由丹参、三七和冰片组成 ,具有活血
化瘀、理气止痛之功效 ,临床广泛用于冠心病等心血
管疾病的防治 ,疗效确切[1 ] 。将复方丹参片的处方
药材提取精制后采用多元定时释药技术制备成的复
方丹参缓释胶囊可使制剂中理化性质不同的各成分
在缓释的同时达到同步释放 ,遵循了中药制剂复方
配伍的整体观和用药思想。为考察复方丹参缓释胶
囊的体内情况 ,本实验以血小板聚集率为评价指标 ,
以市售复方丹参片为参比制剂 ,对复方丹参缓释胶
囊进行了家犬体内药动学研究。
1 　仪器与试药
SC - 2000 型血小板聚集测试仪 (北京赛科希德
科技发展有限公司) ,D T5 - 5 型离心机 (北京医用
离心机厂) ,ST 型一次性使用真空采血管 (北京积水
创格医疗科技有限公司) ,一次性使用静脉血样采血
针 (苏州林华医疗器械有限公司) ,ZRD6 - A 型药物
溶出度仪 (上海黄海药检仪器厂) ,L C - 10A 型高效
液相色谱仪 (日本岛津公司) ,UV - 9100 型紫外可
见分光光度计 (北京瑞利分析仪器公司) , GC - 9A
型气相色谱仪 (日本岛津株式会社) 。
复方丹参缓释胶囊 (自制) ,复方丹参片 (批号
C7A006 ,广州白云山制药有限公司) ,二磷酸腺苷试
剂 (ADP ,北京赛科希德科技发展有限公司) ,甲醇、
乙睛为色谱纯 ,其他试剂为分析纯。
家犬 ,6 只 ,雌雄各半 ,体质量 (15 ±115) kg ,由
沈阳军区总医院动物实验科提供。
2 　方法与结果
211 　复方丹参缓释胶囊中丹酚酸 B、三七总皂苷和
冰片的体外释放曲线 :在模拟人体胃肠道 p H 值变
化条件下 ,分别采用高效液相色谱法、紫外分光光度
法和气相色谱法测定复方丹参缓释胶囊中丹酚酸
B、三七总皂苷和冰片的体外释放度[ 2 ] ,结果见图 1。
·204· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
3 收稿日期 :2008208215　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30200363) ;福建省自然科学基金资助项目 (2006J0116)
作者简介 :李　丹 (1976 —) ,女 ,辽宁省抚顺市人 ,硕士 ,主管药师 ,跟从导师主要从事药剂学方面的研究。
Tel : (024) 81309455 　E2mail :lidanjerry @126. com3 通讯作者　宋洪涛　Tel : (0591) 22859459 　Fax : (0591) 83712298 　E2mail :sohoto @vip . sohu. com