全 文 ：·1254· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
HPLC法同时测定野马追中金丝桃苷、槲皮素和山奈素
靳晓秋1，陈黎2‘
(1．江苏大学药学院，江苏镇江212001；2．江苏省镇江药品检验所，江苏镇江212003)
摘 要：目的 建立江苏道地药材野马追中金丝桃苷、槲皮素和山柰素的定量测定方法。方法 采用Aligent
EclipseXDB—C18色谱柱(250mm×4．6mm，5pm)，乙腈一甲醇(10—1)-0．5％磷酸溶液为流动相，进行梯度洗脱
分离，检测波长为370am。结果金丝桃苷、槲皮紊和山柰素在选定质量浓度范围内，线性关系良好，平均回收率
分别为97．01％，96．56％，96．84％，RSD分别为1．2％，1．1％，1．2％。结论该方法快速简便，重现性好，可以作为
野马追中黄酮成分的测定方法，更全面地控制野马追药材的质量。
关键词：野马追；黄酮类成分；高效液相色谱法；质量评价
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1254—02
野马追为菊科泽兰属植物轮叶泽兰
EupatoriumlindleyanumDC．的干燥地上部分，味
苦，性平，有清肺止咳，化痰平喘，降血压之功效。野
马追含有黄酮、生物碱、挥发油和香豆素等活性成
分，为综合评价野马追药材的质量，本实验建立了高
效液相色谱法同时检测野马追中3种主要黄酮类成
分金丝桃苷、槲皮素和山柰素的定量分析方法，从而
达到更全面地对药材质量控制[1’2]。
1仪器、试剂和材料
1．1仪器：SartoriusBP211D型电子天平，Agilent
1100高效液相色谱仪，KQ--250DB超声波清洗器。
1．2试剂：槲皮素、山柰素、金丝桃苷对照品(中国
药品生物制品检定所100081—200406，0861-
200304，1521—200303)，甲醇和乙腈(色谱纯)，纯化
水，其他试剂均为分析纯。
1．3材料：野马追药材产地分别为盱眙、镇江、安
徽，经江苏省镇江药品检验所陈黎主任药师鉴定为
菊科植物轮叶泽兰EupatoriumlindleyanumDC．
的干燥地上部分。
2方法和结果
2．1 色谱条件：色谱柱为AligentEclipseXDB—
C18(250mmX4．6mm，5pm)；0．5％磷酸溶液为
流动相A，乙腈一甲醇(10：1)为流动相B，洗脱程序
为0～20rain，A由75％一72％；20～25rain，A
72％一65％；25～30rain，A65％一50％；30～35
rain，A50％一75％；体积流量：1mL／min；柱温：
30℃；检测波长：370nm；理论塔板数按槲皮素计算
应不低于3000，色谱图见图1。
山奈素
0 2 4 6 8 10121416182022242628303234
0 2 4 6 S lO121416182022242628303234
f／rain
图1对照品(A)和野马追药材(B)图谱
Fig．1HPLCChromatogramofreferencesubstances(A)
andHerbaEupatoriiLindleyani(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称取金丝桃苷、槲皮
素和山柰素对照品适量，加甲醇制成质量浓度分别
为0．1090、0．1089、0．1092mg／mL的混合对照品
溶液。
2．3供试品溶液的制备：取野马追药材粉末(过3
号筛)约1．0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入
80％甲醇50mL，水浴回流1h，取出放冷，滤过，滤
液蒸干，残渣加甲醇溶液并转移至50mL量瓶中定
容，摇匀，即得。
2．4线性关系考察：精密吸取2．2项下的对照品
溶液0．5、l、2、2．5、3mL于25mL量瓶中，加甲醇
稀释到刻度，摇匀，各进样30pL，测定。以质量浓度
为横坐标，以峰面积为纵坐标，进行线性回归处理，
得回归方程：金丝桃苷A=5．16×104．C+2．06×
104，，．=0．9993；槲皮素A=1．12×105C一3．61×
收稿日期：2007—12—24
作者简介：靳晓秋(1982一)，女，江苏大学药学院2005级生药学研究生，研究方向为中药质量控制。
Tel：13952925910 E—mail：zjjxq@yahoo．com．cll
-通讯作者陈黎Tel：13511699128
万方数据
中草葛ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1255-
105，r=0．9989}山柰素A=1．19×105C一3．52×
10‘，r=0．9991；金丝桃苷、槲皮素和山柰素的线性
范围分别为0．0654～0．3924 pg，0．06534～
0．39204肛g，0．06552～O·39312pg。
2．5 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液30
pL，连续进样5次，测定峰面积，计算得金丝桃苷、槲
皮素和山柰素峰面积的RSD分别为1．4％、0．8％、
1．3％，表明精密度良好。
2．6稳定性试验：精密吸取供试品溶液30pL，分
别于0、1、2、4、8、12h进样，测定峰面积，计算得3
种成分的RSD分别为1．3％、0．9％、1．5％，表明样
品在12h内稳定。
2．7重现性试验：取同一产地药材粉末(盱眙)样
品5份，按2．3项下方法制成供试品溶液，测定，金丝
桃苷、槲皮素和山柰素平均质量分数分别为0．662、
0．191、0．259mg／g，RSD分别为1．2％、1．4％、
1．1％。
2．8加样回收试验：取药材粉末约0．5g，精密称
定6份，分别精密加入金丝桃苷、槲皮素和山柰素对
照品高、中、低3个质量浓度，按2．3项下方法制成供
试品溶液，进样测定，计算回收率，结果金丝桃苷平
均回收率97．01％，RSD为1．2％(，l=6)；槲皮素
平均回收率96．61％，RSD为1．1％(，l=6)；山柰
素平均回收率96．77％，RSD为0．8％(挖=6)。
2．9样品测定：取不同产地的野马追药材，按2．3项
下方法制备供试品溶液，依法测定，计算药材中金丝
桃苷、槲皮素和山柰素的平均质量分数，结果见表1。
3讨论
3．1 流动相的选择：本实验曾经选用甲醇一0．5％
磷酸水溶液、甲醇一1％冰醋酸溶液、乙腈一甲醇一
0．5％磷酸水溶液等体系进行等度和梯度洗脱，结
表1样品测定结果(撑一3)
Table1 DeterminationofflavonoidsinHerba
EupatoriiLindleyaniQ=3)
果表明采用等度洗脱，色谱峰分离度达不到要求，选
择乙腈一甲醇一0．5％磷酸水溶液梯度洗脱，得到的
色谱峰形较好，且较稳定。为确保下次分析时色谱峰
的峰形及分离度，每次运行梯度后，柱平衡至少需要
5minE纠。
3．2检测波长的选择：经二极管阵列检测器检测，在
上述色谱条件下于波长200～400nm绘出三维图
谱。从三维图谱中可以看出在370nm波长检测时，
其HPLC色谱响应较大，同时各色谱峰分离度较好，
且基线平稳，故确定波长370rim为检测波长。
3．3研究过程中曾采用盐酸水解法测定了野马追
中的槲皮素和山柰素的量，方法较繁琐；本实验所建
立的HPLC—DAD法，简便快速、分离度好、测定结
果可靠，能同时测定黄酮类化合物中金丝桃苷、槲皮
素和山柰素的量，为野马追药材的品质鉴别以及黄
酮类化合物产品的质量控制等提供依据。野马追为
江苏省道地药材，为提高野马追及其制剂质量，在本
研究工作之上将通过对野马追药材的指纹图谱研究
进一步达到全面控制药材质量的目的，实施地道野
马追药材的规范化管理种植。
参考文献：
E1]中国药典Es3．二部．2005．
[z]钱士辉，杨念云，段金廒．野马追中黄酮类成分的研究[J]．
中国中药杂志，2004，29(I)l50—52．
[33许乾丽，熊慧林，茅向军．黔产3种金丝桃属植物药中金丝
桃苷的含量测定[J]．药物分析杂志，2003，23(6)：414—
416．
RP—HPLC法测定东北地区不同产地满山红中齐墩果酸与熊果酸
粱泰刚，梁塘，赵承孝，李青山。
(山西医科大学药学院，山西太原030001)
摘 要：目的建立同时测定满山红中齐墩果酸和熊果酸的高效液相色谱方法。方法 采用HyporsilC。s色谱柱
(250mm×4．6mm，5pm)，以0．03mol／L磷酸盐缓冲液(pH=3．0，含6mmol／L的p环糊精)一甲醇(13：87)
为流动相，体积流量1．0mL／min；检测波长210nm。结果齐墩果酸和熊果酸分别在0．026o～o．130mg／mL和
收稿日期：2007—12-10
基金项目：山西省科技攻关项目(No．2006031201．01)、山西医科大学校青年基金资助项目(No．2006011)
作者简介：粱泰刚，男，在读博士。E—mail；liangt978@sohu．com
-通讯作者李青山Tel：(0351)4690322E—mail：qingshanl@yahoo．tom
万方数据
HPLC法同时测定野马追中金丝桃苷、槲皮素和山柰素
作者： 靳晓秋， 陈黎
作者单位： 靳晓秋(江苏大学药学院,江苏镇江,212001)， 陈黎(江苏省镇江药品检验所,江苏镇江
,212003)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(8)
被引用次数： 1次

参考文献(3条)
1.中华人民共和国药典（二部） 2005
2.钱士辉;杨念云;段金廒 野马追中黄酮类成分的研究[期刊论文]-中国中药杂志 2004(01)
3.许乾丽;熊慧林;茅向军 黔产3种金丝桃属植物药中金丝桃苷的含量测定[期刊论文]-药物分析杂志 2003(06)

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