全 文 ：·1324· 中草秀ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
大孔吸附树脂法分离纯化当归中阿魏酸的工艺研究
金汝城1，李贵文2，马素丽3
(1．兰州理工大学生命科学与工程学院，甘肃兰州730050t2．兰州理工大学石油化工学院，
甘肃兰州 730050，3．兰州理工大学理学院，甘肃兰州730050)
摘要：目的选择较合适的大孔吸附树脂，对当归中阿魏酸进行富集纯化，提高产品质量。方法采用大孔吸附
树脂对阿魏酸进行吸附及洗脱性能试验，同时采用HPLC法进行分析检测。结果筛选出较合适的吸附树脂
DA201，得到了最佳的工艺参数，使阿魏酸的质量分数由原材料中的0．15％富集提高到25．1％。结论该工艺成
本低，效果好，树脂可重复使用，对于当归中阿魏酸的纯化有很好的应用前景。
关键词：当归；阿魏酸；大孔吸附树脂；高效液相色谱
中图分类号：R296．02；R286．2文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)09—1324—04
Separationandpurificationtech ologyofferulicacidinAngelicasinensis
bymacroporousadsorptionresi
JINRu—chen91，LIGui—wen2，MASu—li3
(1．SchoolofLifeScienceandTechnology，LanzhouUniversityofTechnology，Lanzhou730050，China；2．School
ofPetrochemicalTechnology，LanzhouUniversityofTechnology，Lanzhou730050，China，
3．SchoolfScience，LanzhouUniversityofTechnology，Lanzhou730050，China)
Abstract：ObjectiveToselectthesuitablemacroporousadsorptionresi sforenrichmentandpurifi—
cationferulicacidfromAngelicasinensisSOa toimprovetheproductquality．MethodsMacroporousad—
sorptionresinswereusedtOstudytheadsorptionandesorptioncharacteristicsofferulicacid．Atthesame
timeHPLCwasusedindetection．ResultsThebestresinDA201waschosenandtheoptimumparameters
wereobtained．Thecont ntofferulicacidwasincreasedfrom0．15％intherawmaterialto25．1％．Con—
clusion-1‘hematerialh salowcOStandtheoperationiSeasy．Theadsorptionresi scanbeusedagain，
whichhasagoodappliedforeground．
Keywords：Angelicasinensis(Oliv．)Diels；ferulicacid macroporousadsorptionresin；HPLC
当归是伞形科植物当归Angelicasinensis
(Oliv．)Diels的干燥根，有补血、和血、调经止痛、润
肠通便之功效，为医家所常用。其主要活性成分阿魏
酸是公认的天然抗氧化剂，有很好的抗氧化活性，能
够清除自由基、调节免疫、调血脂和改善动脉粥样硬
化、抗血栓、抗心肌缺血及抗肝损伤[1]。传统醇提法
得到的当归提取液中阿魏酸的量较低，不能很好的
发挥阿魏酸的药用价值。大孔吸附树脂具有吸附性
强，解吸附容易，机械强度好，可反复使用和流体阻
力小等优点。近年来大孔吸附树脂在天然药物化学
成分的提取、分离纯化、制剂工艺改革、制剂质量分
析等方面有了较广泛的应用研究[z]。因此本实验采
用不同型号的大孔吸附树脂研究当归中阿魏酸的吸
附和解吸性能，筛选出最佳的树脂，并对影响阿魏酸
吸附和解吸的工艺参数进行了研究。
1仪器与试药
日本分光公司JASCOLC一2000高效液相色谱
仪，UV一2075紫外检测器；玻璃色谱柱(300mm×
10mm)美国AmershamBiosciences公司；D一101、
AB一8、NKA一9、S一8和DA一201大孔吸附树脂(天津
市海光化工有限公司)；ME235S电子分析天平(德
国Sartorius公司)；PHS一4CT型精密酸度计(上
海大普仪器有限公司)。当归产地为岷县梅川，购于
甘肃岷县岷海药材有限公司，经西北师范大学生命
科学院孙坤教授鉴定为伞形科植物当归A．sinensis
(0liv．)Diels的干燥根；阿魏酸对照品(中国药品生
物制品检定所，批号0773—9910)。色谱纯甲醇，三蒸
水，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1阿魏酸的HPLC法测定[31
收稿日期：2007—12—01
作者简介：金汝城．男，甘肃人，博士后，1982年毕业于兰州大学化学系，先后工作于美国加州大学伯克利学校、加拿大卑斯省大学、香港
浸会大学，研究方向为天然产物药物与生物药物，非处方药物及相关生物材料。
Tel：(0931)2973706E—mail：jinruchen8@lut．cn
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1325·
2．1．1色谱条件：色谱柱HiQsilC。8W(150mm×
4．6mm)；流动相为甲醇一1％冰醋酸(35t 65)；体
积流量：1mL／min；检测波长：315am；柱温20℃。
2．1．2标准曲线的制备：精密称取阿魏酸对照品
1．87mg，置于250mL量瓶中，加人流动相溶解并
稀释至刻度，摇匀即得含阿魏酸7．48／xg／mL的对
照品溶液。阿魏酸对照品溶液经微孔滤膜滤过，分别
精密吸取5、7．5、10、12．5、15弘L注入高效液相色谱
仪，测定阿魏酸峰面积积分值。以峰面积积分值为纵
坐标，阿魏酸进样量为横坐标进行线性回归，得回归
方程Y=4×106X一14117，r=0．9998，表明阿魏
酸在0．0374～0．1122肛g具有良好的线性关系。色
谱图见图1。
10 15 0 5 lO 15
t／min
*一刚魏酸
*一ferulicacid
图1 阿魏酸对照品(A)和当归样品(B)的HPLC色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsfferulicacidreference
substance(A)andA．sine sis(B)
2．1．3测定：精密吸取一定量的样品溶液于量瓶
中，流动相定容，0．45弘m微孔滤膜滤过，取继滤液
作为供试品溶液，进样10pL，测定阿魏酸峰面积积
分值，代人回归方程计算阿魏酸的质量浓度。
2．2样品中阿魏酸的测定：称取约5g的当归粉，
加入一定量的1％醋酸甲醇溶液，浸泡8h后超声提
取30min，滤过，滤渣继续多次提取，直至最后检测
不到阿魏酸为止。滤液合并浓缩定容至250mL，测
定。平行进行3组试验，结果阿魏酸的质量分数分别
为0．155％、0．149％、0．163％，均值为0．156％。
2．3上柱溶液的制备：将当归粉碎过50目筛，加入
8倍量的95％乙醇溶液，浸泡12h，水浴回流提取。
提取液滤过，滤渣按上述操作继续提取1次。合并提
取液，减压回收乙醇后加入少许蒸馏水，离心除去不
溶物等杂质(防止树脂中毒)。测定阿魏酸后加入一
定量的蒸馏水稀释，得到上柱液。
2．4树脂预处理：在玻璃柱内加入高于树脂层10～
20cm的乙醇浸泡3---4h，放净洗涤液。同样方法反
复洗至出口洗涤液在试管中加3倍量水不出现浑浊
为止，再用清水充分淋洗至无醇味，即可使用。
2．5静态吸附解吸试验
2．5．1吸附量的测定：将湿树脂低温烘干，分别称
取1g，处理后加入具塞锥形瓶中。精密加入含阿魏
酸293．2mg／L的上柱液100mL，室温下震荡吸附
24h，取样分析，计算吸附量(Q)。
Q=(C。一(乙)×V／Ⅳ
co-起始上样液中阿魏酸的质量浓度，C。一平衡吸附后溶液中
阿魏酸的质量浓度，y一吸附液体积，Ⅳ一树脂质量
2．5．2洗脱率的测定：选择适当的洗脱剂对树脂进
行洗脱，计算洗脱率(D)。
D=CDVD／((Co—C，)×y)×100％
C。一洗脱液中阿魏酸的质量浓度，y。一洗脱液体积，Co一起始
上样液中阿魏酸的质量浓度，C。-平衡吸附后溶液中阿魏酸
的质量浓度，y一吸附液体积
2．5．3树脂的筛选：5种树脂在相同条件下对当归
提取液中阿魏酸的吸附量和解吸率见表1。可知
DA一201树脂的吸附量高于其他树脂，这与树脂的
性质和阿魏酸的性质密切相关，DA一201树脂是苯
乙烯型极性共聚体，对具有一定极性的酚类物质有
很强的吸附能力，而阿魏酸本身就带有酚羟基，因而
很适于树脂的吸附。且其解吸率也明显高于其他树
脂，故选择DA一201树脂进行进一步的试验。
2．6 DA一201树脂对阿魏酸的动态吸附性能
2．6．1静态吸附动力学过程：将一定量树脂放入上
柱液中，使其充分吸附达到饱和。以吸附时间为横坐
标，吸附量为纵坐标，作出阿魏酸在DA一201树脂上
的吸附动力学曲线，见图2。可见初始阶段吸附速率
较快，100rain后吸附量增加缓慢，160min后已基
本达最大吸附量。
裹1树脂的主要特征及静态吸附解吸结果
Table1 Charactersofmacroporousadsorptionresi sandtheirstateadsorptionandesorption
万方数据
·1326· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月
0 40 80 120 160 200
tlmin
图2阿魏酸吸附■随时间的变化
Fig．2Changeofferulicacidonadsorption
quantityatdifferenttimes
2．6．2上柱液浓度对吸附性能的影响：取相同量的
树脂，分别放入含阿魏酸不同质量浓度的上柱液中
使吸附达饱和，见图3。可见阿魏酸质量浓度过低、
过高都不利于吸附的进行，过低时的树脂处理量大，
但需时较长，效率低；过高时不利于吸附的进行，阿
魏酸质量浓度在250～300mg／L吸附量达最大值。
22
18
∞
点14
删
蓝
螫10
6
150 250 350 450
阿魏酸／(mg．L-‘)
图3阿魏酸吸附■随上柱征质■浓度的变化
Fig．3Changeofferulicacidonadsorptionquantity
atdifferentco centration
2．6．3上柱液pH值对吸附性能的影响：称取相同
量的树脂，分别放入不同pH值的上柱液中使吸附
达到饱和，结果见图4。可知在pH4．0左右吸附量
最大，pH值过低可能会引起阿魏酸的水解，不利于
其吸附，过高则其水溶性增强也不利于吸附的进行，
20
16
逞12
棚
莲8
昏
4
O
l 2 3 4 5 6
pH值
图4阿魏酸吸附量随上柱液pH值的变化
Fig．4Changeofferulicacidonadsorption
quantitybyvariouspHvalues
故选择pH4．0作为最佳pH值。
2．6．4上柱液流速对吸附的影响：在最佳上柱液质
量浓度和pH值条件下分别以1、2、3BV／h的流速
进行动态吸附，定时取样测定流出液中阿魏酸的质
量浓度，结果见图5。表明流速越慢越有利于吸附的
进行，树脂的处理量越大，但流速过慢需时较长，效
率低。在上柱液中含阿魏酸质量浓度293．2mg／L
下，1BV／h的上柱流速可处理的上柱液是18BV，2
BV／h可处理16BV，而3BV／h只能处理11BV，1
BV／h和2BV／h处理的量相差不是太大，考虑到经
济性，选择2BV／h作为最佳上柱流速。
彳、200
一
土
键100
露
宜
0 4 5 12 16 2U Z4
床体积／By
a．1BV／hb一2BV／hc一3BV／h
图5流出液中阿魏酸质量浓度随床体积的变化
Fig．5Changeofferulicacidoncontenti solution
withdifferentb dvolumes
2．7 DA一201树脂对阿魏酸的动态解吸性能
2．7．1洗脱液质量浓度对解吸性能的影响：配制含
阿魏酸不同质量浓度的洗脱液，先水洗已吸附达饱
和的树脂至还原糖反应为阴性，再用15％乙醇将极
性杂质洗下，然后以相同洗脱流速对树脂进行动态
洗脱，测定洗脱液中阿魏酸的质量浓度，计算洗脱
率，见图6。表明在乙醇体积分数为35％时洗脱率
已接近最大值，体积分数过低不利于洗脱的进行，过
高则会将色素等杂质一并洗下，影响产品质量，故选
择最佳乙醇体积分数为35％。
20 25 30 35 40 45 50
乙醇体积分数，％
图6阿魏酸解吸率随乙醇体积分数的变化
Fig．6Changeofferulicacidondesorptionrate
withdifferentethanolc ntents
加
M
坨
8
4
o
∞E、嘲莲薛
∞
舳
∞
加
加
0
辞、哥督驻
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第9期2008年9月·1327·
2．7．2 洗脱流速对解吸性能的影响：分别采用
0．5、1、2BV／h的洗脱流速对已吸附达饱和的树脂
进行洗脱，定量取样，测定流出液中阿魏酸的质量浓
度，见图7。结果表明，流速越慢洗脱效果越好，这主
要是因为流速越慢越有利于阿魏酸在树脂和洗脱液
间进行相扩散和膜扩散，从而达到溶解平衡。在0．5
BV／h的流速下，洗脱峰比较集中，4．5BV的洗脱
液就可达到洗脱完全，而1、2BV／h流速的则分别
为5BV和8BV，因而选择0．5BV／h作为最佳洗
脱流速。
l 200
毛800
i
链
藿400
0
U j O 9
床体积／By
a．0．5BV／hb一1BV／hc一2BV／h
图7洗脱液中阿魏酸质量浓度随床体积的变化
Fig．7Changeofferulicacidoncontentsineluent
withdifferentb dvolumes
2．8产品的制备：在最佳的吸附和解吸条件下(含
阿魏酸质量浓度为293．2mg／L，pH4．0，吸附流速
2BV／h下，可处理样品溶液16BV。在洗脱剂乙醇
体积分数35％，洗脱流速0．5BV／h的流速下，4．5
BV就可将阿魏酸充分洗脱下，过柱得率达到
89．2％)对阿魏酸进行吸附和解吸，解吸液浓缩，真
空低温干燥后取样测定阿魏酸的量。平行进行3次
试验，结果产品中阿魏酸的平均质量分数为
25．1％，而原料中仅为0．156％，见图8。可见所得产
品与当归药材相比杂质峰明显减少，说明采用大孔
树脂吸附法显著富集，纯化产品的效果良好。
一
nJl¨II．I L
O 5 lO 15
t／rain
图8纯化后产品的HPLC色谱图
Fig．8HPLCChromatogramofpu ifiedproduct
3讨论
虽然大孔树脂吸附作用的根本因素是吸附剂与
树脂间的范德华力作用，但是具有酚羟基结构的阿
魏酸易形成氢键，更有利于与极性树脂吸附[4]。此外
大孑L树脂在实际应用中还有许多的问题需要解决，
如大孔吸附树脂中残留物的去除、实际应用中树脂
吸附能力下降或降解的问题、废弃树脂的处理等均
需要更多的改进与研究。
实验中发现阿魏酸溶液在加入少量醋酸后能够
抑制其分解，在乙醇或水溶液中不稳定，此外低温可
使其稳定性增加，因此其提取液及纯化后产品要低
温保存。
当归化学成分复杂，吸附阿魏酸后的流出液中
还有许多药效成分，选择其他适宜型号的树脂对其
他药效成分进行吸附纯化，以充分利用药材资源应
该作为今后研究工作的重点。
参考文献：
[1]王芳．李东．当归的化学及药理研究进展EJ]．中国药房，
2003，14(10)：630—631．
[23 李作平，霍长虹．大孔吸附树脂在水溶性天然药物化学成分
提取分离中的应用EJ]．河北医科大学学报，2002，23(2)：121—
123．
E33于森，于治国，李昕吴．等．高效液相色谱法测定当归中阿魏
酸的含量[J]．中国冶金工业医学杂志．2004，21(2)：96—97．
[43李家政，孙江晓，史作清．氢键吸附及其展望EJ]．离子交换与
吸附．2001，17(6)：561—566．
大孔吸附树脂富集刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷的研究
杨书良，杨 渡，田 凤，孙婷
(哈尔滨商业大学药学院，黑龙江哈尔滨 150076)
摘要：目的富集刺五加中紫丁香苷和刺五加总苷。方法 以紫丁香苷和刺五加总苷为指标，考察D一101大孔吸
附树脂分离纯化紫丁香苷和刺五加总苷的最佳吸附及洗脱条件。结果 富集紫丁香苷和刺五加总苷的工艺为样品
溶液(o．2g药材／mL)以1mL／min的上柱速度上柱，最大上样量为1g药材／g树脂，弃去水洗脱液，收集5BV
75％乙醇洗脱液，回收乙醇，浓缩干燥，即得。经D一101大孔吸附树脂处理后紫丁香苷和刺五加总苷提取率可达
收稿日期：2007—12-10
万方数据
大孔吸附树脂法分离纯化当归中阿魏酸的工艺研究
作者： 金汝城， 李贵文， 马素丽， JIN Ru-cheng， LI Gui-wen， MA Su-li
作者单位： 金汝城,JIN Ru-cheng(兰州理工大学生命科学与工程学院,甘肃兰州,730050)， 李贵文,LI
Gui-wen(兰州理工大学石油化工学院,甘肃,兰州,730050)， 马素丽,MA Su-li(兰州理工大
学理学院,甘肃,兰州,730050)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(9)
被引用次数： 7次
参考文献(4条)
1.王芳;李东 当归的化学及药理研究进展[期刊论文]-中国药房 2003(10)
2.李作平;霍长虹 大孔吸附树脂在水溶性天然药物化学成分提取分离中的应用[期刊论文]-河北医科大学学报
2002(02)
3.于森;于治国;李昕吴 高效液相色谱法测定当归中阿魏酸的含量[期刊论文]-中国冶金工业医学杂志 2004(02)
4.李家政;孙江晓;史作清 氢键吸附及其展望[期刊论文]-离子交换与吸附 2001(06)
本文读者也读过(3条)
1. 王健.沈红平 大孔吸附树脂纯化当归酚酸类成分的工艺研究[期刊论文]-科技资讯2010(8)
2. 刘敬.李文建.王春明.颉红梅.LIU Jing.LI Wen-jian.WANG Chun-ming.XIE Hong-mei 当归中有效成分阿魏酸的
生物合成及调控[期刊论文]-中草药2008,39(12)
3. 李文兰.范玉奇.季宇彬.王艳萍.赵瑛.LI Wen-lan.FAN Yu-qi.JI Yu-bin.WANG Yan-ping.ZHAO Ying 大孔吸附
树脂对川芎中阿魏酸及总酚酸的分离纯化[期刊论文]-中国新药杂志2007,16(9)
引证文献(7条)
1.刘树兴.王蓓.朱莉莉 大孔吸附树脂分离纯化麦麸中阿魏酸的研究[期刊论文]-食品工程 2011(3)
2.刘树兴.王蓓 大孔吸附树脂分离纯化小麦麸皮阿魏酸研究[期刊论文]-粮食与油脂 2011(9)
3.邢建国.翟科峰.何承辉.魏改芹 大孔吸附树脂纯化天山雪莲中有效成分的研究[期刊论文]-中草药 2009(7)
4.王梓.李伟.李月茹.刘文丛.郑毅男.张晶 大孔吸附树脂纯化桔梗皂苷的研究[期刊论文]-中草药 2011(9)
5.张志清.姚艳艳.白冰.杨雪.顾容.杨雪飞 响应面法优化大孔树脂纯化阿魏酸粗提液工艺研究[期刊论文]-粮食与
油脂 2011(2)
6.刘雪平 当归有效成分分离纯化工艺的研究进展[期刊论文]-内蒙古中医药 2011(13)
7.杨雪.姚艳艳.张志清 麦麸中阿魏酸提取纯化工艺的研究进展[期刊论文]-农产品加工·创新版 2010(7)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200809015.aspx