全 文 ：·制剂与质量·
去甲斑蝥素 N2 乳糖酰壳聚糖纳米粒的制备及其特性研究
王 　钦 ,胡 　玮 ,张学农
①
,张 　玮
(苏州大学药学院 药剂学教研室 ,江苏 苏州 　215123)
摘　要 :目的 　合成 N2乳糖酰壳聚糖作为肝靶向载体 ,制备去甲斑蝥素纳米粒。方法 　通过碳二亚胺缩合法制备
N2乳糖酰壳聚糖 ,并以之为载体 ,采用离子诱导法制备去甲斑蝥素 N2乳糖酰壳聚糖纳米粒。以粒径分布、包封率、
载药量为综合指标 ,正交试验设计优化载药纳米粒的制备工艺 ,并考察其体外释放特性。结果 　合成的 N2乳糖酰
壳聚糖的取代度为 8192 %。优化工艺制备的 N2乳糖酰壳聚糖载药纳米外观圆整 ,平均粒径 (11817 ±8184) nm ,包
封率 (57192 ±0140) % ,载药量 (10138 ±0106) % ,其体外释药遵循 Higuchi 方程。结论 　半乳糖修饰壳聚糖载药纳
米粒具有良好的缓释特性。
关键词 :去甲斑蝥素 ; N2乳糖酰壳聚糖 ;肝靶向 ;纳米粒
中图分类号 :R28412 ;286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0120040206
Preparation of norcantharidin N2galactosylated chitosan nanoparticles and its characteristics
WAN G Qin , HU Wei , ZHAN G Xue2nong , ZHAN G Wei
(Department of Pharmaceutics , School of Pharmacy , Soochow University , Suzhou 215123 , China)
Abstract : Objective 　To synt hesize N2galactosylated chitosan as hepatocyte2targeting carrier and pre2
pare loading norcant haridin nanoparticles. Methods 　N2Galactosylated chito san was prepared by carbodi2
imide condensation reaction ; loading norcant haridin nanoparticles were achieved by ionic cross2linkage
process wit h N2galactosylated chitosan as carrier . Taking dist ribution of particle size , ent rap ment efficien2
cy , and drug2loading capacity as comprehensive indexes , t he ort hogonal test design was used to optimize
t he preparation process and t he i n vi t ro release was investigated. Results 　Substit ution degree of N2galac2
to sylated chito san reached to 8192 %. Novel nanoparticles were sp herical , average in particle size (11817 ±
8184) nm , ent rament efficiency (57192 ±0140) % , drug2loading capacity (10138 ±0106) % , and t he i n
vi t ro release followed Hi g uchi equation. Conclusion 　Effect of drug sustained release of galactosylated
chitosan nanoparticles is significant .
Key words : norcantharidin ; N2galactosylated chitosan ; hepatocyte2targeting ; nanoparticles
　　去甲斑蝥素 ( norcantharidin) 为斑蝥素的合成
衍生物 ,是由我国首先开发的治疗肝癌的新药 ,主要
用于原发性肝癌的治疗[1 ] 。去甲斑蝥素主要以片剂
和注射剂应用于临床 ,静脉注射在体内消除较快 ,
6 h 后药物浓度明显降低 , 24 h 后大部分被消除。
由于临床应用时去甲斑蝥素的泌尿系统毒性较大 ,
因而对其临床最大用药剂量有严格限制[ 2 ] 。主动靶
向系利用配体与受体识别的特异性结合的专一性 ,
从而设计出针对其受体为靶点的靶向药物载体系
统。壳聚糖 (chito san) 具有无毒、可生物降解和良
好的生物相容性 ,是一种具有广阔前景的新型药物
辅料[3 ] 。由于壳聚糖的分子为带有氨基的葡萄糖 ,
可进行 N 位交联等多种化学反应对其进行修饰。
利用β2D2半乳糖可以被肝细胞中的去唾液酸糖蛋
白受体特异性识别 ,因此可以将其与壳聚糖交联 ,作
为肝特异性主动靶向载体[4 ] 。本研究采用低相对分
子质量壳聚糖作为原料 ,采用碳二亚胺缩合法制备
半乳糖修饰的 N2乳糖酰壳聚糖 ,并作为主动肝靶向
载体制备去甲斑蝥素半乳糖修饰壳聚糖纳米粒 ,以
期在体内被肝细胞的去唾液酸糖蛋白受体特异性识
别 ,从被动靶向和主动靶向两个方面达到药物在体
内的双重肝靶向识别和作用 ,减少去甲斑蝥素的不
·04· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
①收稿日期 :2008206203　　　
基金项目 :国家科技支撑计划资助课题 (2006BAI09B00) ;国家科技部科技型中小企业技术创新基金资助项目 (07C26223201333) ;江苏省“六
大人才高峰”资助项目 ;江苏省卫生厅招标项目 ( H200630)
作者简介 :王　钦 (1985 —) ,男 ,江苏省东台市人 ,硕士研究生 ,主要研究方向为药物新剂型与新技术。
Tel : (0512) 65881981 E2mail : wangqin @live. com3 通讯作者　张学农　Tel : (0512) 66998348 　Fax : (0512) 65880030 　E2mail : zhangxuenong @163. com
良反应 ,增加抗肝癌疗效。
1 　材料
日本岛津 L C —10A 高效液相色谱系统 ( SPD —
M10A 紫外检测器 ,SCL —10A 系统控制器 ,CTO —
10AS 恒温箱 , CR —10A 数据处理机 ) , Pro Star
L C240 红外分光光度计、Unity Inova 400 超导核磁
共振谱仪 (美国瓦里安公司) , H PP 5001 激光粒度
分析仪 (英国 Malvern 公司) , H —600 透射电子显
微镜 (日本日立公司 ) , M E2155 分析天平 (德国
Starorious 公司) ,Optima max 超速冷冻离心机 (美
国贝克曼公司) ,Vivaflow50 超滤仪 (相对分子质量
为 110 ×104 聚砜醚滤膜 ,德国 Starorious 公司) ,
L G—5 真空冷冻干燥冻干机 (上海机械工艺研究
所) ,J Y92 —Ⅱ超声波细胞粉碎机 (宁波新芝生物科
技公司) , SHZ—82 恒温震荡箱 (江苏富华仪器公
司) ,透析袋 (滤过最大相对分子质量为 3 500 ,进口
分装) 。
去甲斑蝥素 (苏州苏瑞医药化工有限公司 ,批号
20060508) ,壳聚糖 (江苏南通兴成生物制品厂 ,相对
分子质量 8 ×103 ～1 ×104 ,实验室自行脱乙酰化 ,
脱乙酰度 : 9311 % ,黏度 : 2195 mPa ·s) ,乳糖酸钠
(南 通 华 峰 化 工 有 限 公 司 ) , 四 甲 基 乙 二 胺
( TEM ED) ( Aldrich) ,12(32二甲氨基丙基)232乙基
碳二亚胺盐酸盐 ( EDC ·HCl) (上海延长生化科技
发展有限公司) , N2羟基丁二酰亚胺 (N HS) (上海共
价化学科技有限公司) ,三聚磷酸钠 ( TPP) (分析纯 ,
国药集团化学试剂有限公司) ,乙腈 (色谱纯 ,德国
Merck 公司) ,其他试剂均为分析纯。
2 　方法与结果
211 　N2乳糖酰壳聚糖的合成 :将乳糖酸钠水溶液
经 732 型阳离子交换树脂处理 ,干燥得到乳糖酸。
壳聚糖 (6 g , 6141 mmol) 溶解于 1 % HCl 200 mL
中 ,搅拌形成溶液。将乳糖酸 (213 g , 6141 mmol) 、
EDC ·HCl (1147 g , 7169 mmol) 和 N HS (0174 g ,
6141 mmol)分别投入上述反应液中 ,再用 TEM ED
调 p H 值至 415。反应液磁力搅拌 ,室温反应 72 h
后 ,置透析袋 (滤过最大相对分子质量为 3 500) 中 ,
用蒸馏水透析 4 d ,滤过 ,滤液中加入过量丙酮 ,析出
产物 ,抽滤 ,滤饼用无水乙醇洗涤脱水 ,干燥 ,得淡黄
色粉末 ,约 418 g。合成反应见图 1。
N2乳糖酰壳聚糖的乳糖酰基取代度 (DSGC ) 采
用1 H2NMR 法测定和计算[5 ] 。N2乳糖酰壳聚糖的
乳糖酰基取代度按下式计算 ,为 8192 %。
DSGC = [ ( H GC(δ3137～4116) - HChitosan(δ3132～3189) / 12 ] ×100 %
图 1 　N2乳糖酰壳聚糖的合成反应
Fig. 1 　Synthesis of N2galactosylated chitosan
H GC(δ3137～4116) 、HChitosan(δ3132～3189) 分别为 N2乳糖酰壳聚糖和壳
聚糖1 H2NMR 谱中δ3137～4116、3132～3189 的氢质子数
212 　N2乳糖酰壳聚糖的表征
21211 　红外图谱 :见图 2。壳聚糖的 3 42912 cm21
的宽峰是 O2H 的伸缩振动吸收峰与 N2H 伸缩振动
吸收峰的重叠峰 ,1 59218 cm21 为2N H2 的面内弯曲
振动峰。N2乳糖酰壳聚糖的红外图谱与壳聚糖相
比 ,3 41012 cm21的峰变得更宽 ,是因为产物较壳聚
糖羟基数目增加 ;位于 1 65819 cm21 处出现了较明
显的酰胺峰 ,1 59316 cm21的2N H2 峰较壳聚糖减弱 ,
说明在壳聚糖的氨基上发生了酰化反应。
波数/ cm - 1
图 2 　壳聚糖( A)和 N2乳糖酰壳聚糖( B)红外图谱
Fig. 2 　Infrared spectrum of chitosan ( A)
and N2galactosylated chitosan ( B)
21212 　1 H2NMR 谱 :将壳聚糖和 N2乳糖酰壳聚糖
溶于 D2 O/ F3 CCOOD ,在 400 M Hz 核磁共振仪上测
定两者的1 H2NMR 谱 ,见图 3。壳聚糖的1 H2NMR
δ: 4159 ( H1 ) 、2191 ( H2 ) 、3132～3189 ( H3～6 ) 、1192
(N HCOCH3 ) ; N2乳糖酰壳聚糖的1 H2NMRδ:4172
·14·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
( H1 ) 、4143 ( H1′、Hc ) 、3137～ 4116 ( H3～6 、H2′～6′、
Ha 、Hb 、Hd 、He ) 、3102 ( H2 ) 、1192 (N HCOCH3 ) 。
δ
图 3 　壳聚糖( A)和 N2乳糖酰壳聚糖( B)的1 H2NMR图谱
Fig. 3 　1 H2NMR Spectra of chitosan ( A)
and N2galactosylated chitosan ( B)
213 　N2乳糖酰壳聚糖特性黏度的测定[ 6 ] :将壳聚
糖干燥至恒重 ,精密称取 1～112 g ,用 011 mol/ L 醋
酸2012 mol/ L NaCl 溶剂配成 50 mL 样品溶液 ,样
品溶液的浓度定为 C1 ,滤过 ,精密量取滤液 8 mL ,
移入乌氏黏度计粗管 ,25 ℃保温 10 min 以上。另
外 2 根支管口各接 1 根乳胶管 ,并用夹子夹住 ,用吸
球自中间乳胶管口吸气 ,使溶液渐渐上升 ,直至刻度
线 a 以上 ,移走吸球 ,使溶液在毛细管内自然下落 ,
用秒表准确记录溶液下降时通过刻度线 a 和 b 的时
间 t1 。先按上法测定溶剂的黏度 ,需用的溶剂为 8
mL ,测得的时间为 t0 。然后精确量取 4 mL 溶剂加
入黏度计中 ,此时浓度为 C2 ,用同法测定其流经 a
和 b 的时间 t2 。再依次精确量取溶剂 4 mL 和 4
mL ,分次加入到黏度计中稀释 ,浓度分别为 C3 、C4 ,
并分别测定 t3 、t4 。稀释后的浓度分别为 : C2 =
2/ 3 C1 、C3 = 1/ 2 C1 、C4 = 1/ 3 C1 ;对应于各浓度的相
对黏度 (ηr ) 为 :ηr1 = t1 / t0 、ηr2 = t2 / t0 、ηr3 = t3 / t0 、
ηr4 = t4 / t0 ;增比黏度 =ηr21 ,比浓黏度为ηsp/ c 。依次
计算 ,得 4 个比浓黏度 ,并对浓度作回归直线 ,截距
即为特性黏度 (η) 。结果壳聚糖的特性黏度曲线方
程 Y = 01508 8 X + 01955 8 , r2 = 01998 9。半乳糖酰
修饰壳聚糖的特性黏度曲线方程 Y = 01694 7 X +
01780 9 , r2 = 01998 0。N2乳糖酰壳聚糖的特性黏
度为 01 780 9 ,比壳聚糖原料 01955 8 有所下降。这
是由于脱乙酰和 N2乳糖酰化反应时 ,壳聚糖的主链
和支链有所断裂造成特性黏度下降 ;另外 , N 位乳
糖酰化也可能造成特性黏度下降。
214 　去甲斑蝥素 N2乳糖酰壳聚糖纳米粒的制备 :
将 N2乳糖酰壳聚糖溶解于 012 %醋酸水溶液中 ,制
得 N2乳糖酰壳聚糖澄明溶液 ,再将适量去甲斑蝥素
加入该溶液中溶解 ,在 500 r/ min 磁力搅拌下将适
量 112 mg/ mL TPP 溶液逐滴缓慢滴入其中 ,直至
溶液刚刚产生乳光为止。用 0145μm 微孔滤膜滤
过 ,即得去甲斑蝥素 N2乳糖酰壳聚糖纳米粒胶体。
若不加去甲斑蝥素 ,同法可制得空白纳米粒。
215 　去甲斑蝥素的测定[ 7 ]
21511 　标准曲线方程 :取 100 mg 去甲斑蝥素 ,置
100 mL 量瓶中 ,另水超声溶解 ,定容至刻度 ,使成 1
mg/ mL 贮备液。精密吸取储备液配制成 20、25、
50、100、200、400、800μg/ mL 对照品溶液 ,进样 20
μL ,以峰面积 ( Y ) 对质量浓度 ( X ) 回归得 Y =
9251374 X - 1 77818 , r = 01999 9 ( Y :峰面积 ; X :质
量浓度) ,线性范围 :20～800μg/ mL 。
21512 　精密度试验 :配制 25、200、600μg/ mL 去甲
斑蝥素 012 % 醋酸溶液 , 得日内精密度数据 :
11880 %、01172 %、01945 % ( n = 5) 和日间精密度数
据 :11420 %、11126 %、11468 % ( n = 5) 。
21513 回收率试验 :精密称取 10 mg 空白纳米粒冻
干粉 ,分别加入 3、9、12 mg 去甲斑蝥素 ,用 012 %醋
酸溶液充分分散 ,并加入甲酸 6 mL ,用 012 %醋酸
溶液定容至 25 mL ,置于超声波细胞粉碎机中超声
消解 ,过 0145μm 微孔滤膜 ,进样 20μL ,测定去甲
斑蝥素的质量浓度 ,代入标准曲线方程 ,计算得低、
中、高 质 量 浓 度 的 回 收 率 分 别 为 97179 %、
99106 %、10018 %。
216 　去甲斑蝥素 N2乳糖酰壳聚糖纳米粒质量评价
21611 　粒径分布和多分散指数 :取适量去甲斑蝥素
N2乳糖酰壳聚糖纳米粒胶体 ,用激光粒度分析仪测
定纳米粒粒径和多分散指数 ( PDI) , 得到粒径
分布图。
21612 　包封率的测定 :取纳米粒胶体 , 4 ℃、30 000
r/ min 离心 45 min ,将上清液 20μL 注入液相色谱
仪 ,测定游离药物质量浓度 ,计算包封率 (包封率 =
纳米粒中包封的药量/ 纳米粒中包封与未包封的总
药量 ×100 %) 。
21613 　载药量的测定 :按照处方中 N2乳糖酰壳聚
糖的加入量以及加药量 ,结合上述包封率的测定结
果以及下述回收率的测定 ,计算载药量 (载药量 = 纳
·24· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
米粒中所含药物质量/ 纳米粒的总质量 ×100 %) 。
217 　纳米粒处方优化 :综合单因素考察的数据 ,选
择 N2乳糖酰壳聚糖质量浓度 (A) 、药物与载体的质
量比例 (B )和温度 (C) 3 种因素 ,每个因素选择 3 个
水平 ;并以平均粒径、PDI、包封率、载药量为指标 ,
由于平均粒径、PDI 越小越优 ,分别给 4 个指标
- 013、- 011、013、013 的权重 ,采用综合加权评分
法[8 ,9 ]使用 L9 (34 ) 正交表 (表 1) 进行正交设计。综
合评分公式 : - 013 ×平均粒径/ 21715 - 011 × PDI/ 1 + 013 ×包封率/ 58137 + 013 ×载药量/ 9194。结果及方差分析见表 2 和 3。表 1 　因素水平Table 1 　Factors and levels水平 因　素A/ % B/ % C/ ℃1 11 0 10 302 11 5 15 353 21 0 20 40
表 2 　正交设计与结果
Table 2 　Design and results of orthogonal test
编号 A B C 平均粒径/ nm PDI 包封率/ % 载药量/ % 综合评分
1 1 　　 10 　　 30 　　 1551 1 01117 281 49 21 77 　01004
2 1 　　 15 　　 35 　　 1951 5 01315 371 96 51 39 　01057
3 1 　　 20 　　 40 　　 2091 9 01367 281 70 51 43 - 01015
4 115 　 10 　　 35 　　 1871 0 01299 431 11 41 13 　01058
5 115 　 15 　　 40 　　 1921 2 01233 461 90 61 57 　01151
6 115 　 20 　　 30 　　 1361 7 01218 441 63 81 20 　01266
7 2 　　 10 　　 40 　　 2171 5 11000 581 27 51 51 　01066
8 2 　　 15 　　 30 　　 1251 1 01420 581 37 81 05 　01328
9 2 　　 20 　　 35 　　 1831 2 01142 551 21 91 94 　01317
K1 01015 01 043 01 199
K2 01159 01 179 01 144
K3 01237 01 190 01 067
R 01222 01 147 01 132
表 3 　方差分析
Table 3 　Analysis of variance
方差来源 离均差平方和 自由度 均方 F值 显著性
A 　　　 01076 2 01 038 381 0 P < 0105
B 　　　 01040 2 01 020 201 0 P < 0105
C 　　　 01020 2 01 010 131 5
D(误差) 01002 2 01 001 11 0
　　F0105 (2 ,2) = 191 0 　F0101 (2 ,2) = 991 0
通过直观分析 ,因素对指标的影响大小 : A >
B > C ,最佳工艺为 A3B3 C1 ,即为 N2乳糖酰壳聚糖
质量浓度 2 % ,药物与载体的质量比例 20 % ,温度
30 ℃。方差分析表明 :A、B 因素的差异有显著性意
义 ( P < 0105) 。
218 　优化处方的验证 :将 100 mg N2乳糖酰壳聚糖
溶解于 012 %醋酸水溶液中 ,制得 2 % N2乳糖酰壳
聚糖澄明溶液 ,再将 20 mg 去甲斑蝥素加入该溶液
中溶解 ,在恒温 30 ℃水浴、500 r/ min 磁力搅拌下 ,
将适量 112 mg/ mL TPP 水溶液逐滴缓慢滴入其
中 ,直至溶液刚刚产生乳光为止。用 0145μm 微孔
滤膜滤过 ,即得去甲斑蝥素 N2乳糖酰壳聚糖纳米粒 胶体。按上述最优工艺制备 5 批去甲斑蝥素 N2乳糖酰壳聚糖纳米粒。纳米粒的粒径分布见图 4。纳米粒形态圆整 ,粒径分布均匀 ,平均粒径 ( 11817 ±8184) nm , PDI (01180 ±01051) ,包封率 (57192 ±0140) % ,载药量 (10138 ±0106) %。　 　10 　　　　　　　　　100 　　　　　　　 　1 000粒径/ nm图 4 　纳米粒粒径分布Fig. 4 　Distribution of particle size for nanoparticles219 　纳米粒的形态观察 :取少量纳米粒胶体滴至铺有碳膜的铜网上 ,静置 5 min ,用滤纸吸干 ,再滴加2 %磷钨酸负染 1 min ,用滤纸吸干 ,于透射电子显微镜下观察纳米粒的形态。纳米粒的透射电镜照片见图 5 ,可见纳米粒形态圆整 ,粒径分布均匀 ,且与激光粒度分析仪的结果相近。2110 　纳米粒的体外释放特性 :取纳米粒胶体 10
·34·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
mL 置透析袋中 ,用透析袋夹夹紧 ,投入装有 60 mL
释放介质的三角瓶中。将其放入恒温震荡箱中于
(37 ±015) ℃恒温震荡 ,分别于不同时间取透析液
015 mL ,过 0145μm 微孔滤膜 ,并补充同温释放介
质 015 mL 。将各个时间点的样品 20μL 注入色谱
仪 , HPL C 法测定去甲斑蝥素的质量浓度 ,并计算
累积药物释放率。采用 011 mol/ L HCl、生理盐水
(019 % NaCl) 、PBS (p H 513) 、PBS (p H 618) 、PBS
(p H 714) 作为释放介质 ,并用原料药的释放作
为对照。
图 5 　纳米粒的透射电镜照片
Fig. 5 　TEM Photograph of nanoparticles
图 6 可以看出 ,纳米粒与原料药释放的对比 ,前
者具有明显的缓释作用。纳米粒在 011 mol/ L HCl
中可以完全释放 ,在生理盐水和 PBS(p H 513) 中可
在 85 %附近达到平衡。而纳米粒在 PBS(p H 618) 、
PBS(p H 714) 两种释放介质中释放较缓慢 ,且在
60 %附近达到平衡。因而推断 p H 值对纳米粒的释
放有影响 ,p H 值越低越有利于纳米粒的释放。将
纳米粒在各个释放介质中的释放行为用 Higuchi 方
程拟合 (表 4) ,结果表明纳米粒在不同 p H 介质中
的释放均符合 Higuchi 方程。
图 6 　纳米粒的体外释放
Fig. 6 　I n vit ro release of nanoparticles
表 4 　纳米粒释放遵循的 Higuchi 方程
Table 4 　Higuchi equation i n vit ro release
of nanoparticles followed
释放介质 Higuchi 方程 r
生理盐水 Q = 01 072 9 t1/ 2 - 01 045 6 01990 4
011 mol/ L HCl Q = 01 082 0 t1/ 2 - 01 065 5 01994 7
PBS (p H 51 3) Q = 01 085 4 t1/ 2 - 01 115 4 01992 7
PBS (p H 61 8) Q = 01 041 0 t1/ 2 + 01 042 5 01991 6
PBS (p H 71 4) Q = 01 045 6 t1/ 2 - 01 039 4 01993 8
3 　讨论
壳聚糖的酰化反应一般在氨基上进行 ,早期的
酰化反应是在酸酐或酰氯中进行的 ,存在着聚合物
降解严重的缺点。乳糖酸无法直接与壳聚糖反应 ,
只能借助于活化剂生成活性中间体再与壳聚糖反
应。本法为碳二亚胺缩合法 ,已广泛用于多肽合成
领域[10 ] 。常用的碳二亚胺为 DCC ,由于 DCC 水溶
性不佳 ,而壳聚糖和乳糖酸皆为水溶性 ,故采用水溶
性缩合剂 EDC ·HCl。N HS 又简称 HOSu ,它的作
用在于保护活性中间体 O2酰基异脲 ,抑制其向副产
物 N2酰基脲的转化 ;同时抑制最终产物的消旋化。
TEM ED 作用主要在于调节缓冲反应体系的 p H
值 ,以及与稀盐酸形成混合溶剂 ,有利于反应体系中
各物质的结合和反应。
壳聚糖 ( CS) 只溶于酸性水中 ,形成 CS2N H +3 ,
但其乳糖酰化反应是壳聚糖原型 CS2N H2 与活性
中间体 O2酰基异脲反应 ,而壳聚糖原型物在偏中性
环境下才大量存在。但在碱性环境下中间体 O2酰
基异脲容易转化为副产物 N2酰基脲 ,文献报道此反
应在弱酸性环境 p H 417 合适[11 ,12 ] 。故将反应体系
的 p H 值定为弱酸性的 5 左右。
文献报道 p H 值对壳聚糖纳米粒包封率影响较
大 ,p H 值越大有利于提高纳米粒的包封率 ,p H 值
为 5 时包封率最大[ 13 ] 。本研究尝试在 012 %醋酸溶
液 (p H 4)的基础上用 NaO H 调 p H 值为 5 时 ,包封
率却略有下降。故仍然采用 012 %醋酸溶液作为制
备液。提高制备液 p H 值 ,可以提高去甲斑蝥酸根
阴离子的数目。但由于 p H 值增大后 , N2乳糖酰壳
聚糖中 N H +3 数目降低 ,更多以 N H2 原型存在。因
而 ,这种由 N2乳糖酰壳聚糖和去甲斑蝥素本身的性
质造成的 p H 值矛盾制约了纳米粒包封率的进一步
提高 ,致使以通过改变 p H 值达到提高包封率的期
望受到限制。
本实验通过条件优化所制备的去甲斑蝥素 N2
·44· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
乳糖酰壳聚糖纳米粒形态圆整 ,粒径较小 ,分布均
匀 ,包封率稳定 ,载药量较高。有关半乳糖修饰纳米
粒的主动靶向特性尚需进一步考察。
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均匀设计优选舒胸片处方药材的微波辅助提取工艺的研究
张 　萍 ,廖正根
①
,梁新丽 ,赵国巍
(江西中医学院 现代中药制剂教育部重点实验室 ,江西 南昌 　330004)
摘 　要 :目的 　研究微波辅助提取舒胸片中阿魏酸和羟基红花黄色素 A 的优化工艺 ,并与传统工艺进行比较 ,确定
微波用于舒胸片中川芎、红花辅助提取工艺的可行性。方法 　以阿魏酸、羟基红花黄色素 A 的提取率为指标 ,采用
均匀设计优选微波辅助提取工艺 ,比较微波辅助与传统提取工艺的提取效果。结果 　微波功率、微波辐射时间、溶
剂用量对阿魏酸和羟基红花黄色素 A 的提取有交互作用 ,优选出的川芎提取工艺为微波功率 790 W ,提取时间 30
min ,料液比为 1 ∶24 ;红花提取工艺为微波功率 790 W ,提取时间 24 min ,料液比为 1 ∶22。结论 　微波辅助提取时
间短、有效成分提取率高 ,可用于舒胸片的提取工艺。
关键词 :舒胸片 ;均匀设计 ;微波辅助提取
中图分类号 :R28411 ; R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0120045205
Microwave2assisted extraction of Shuxiong Tablets prescription by uniform design
ZHAN G Ping , L IAO Zheng2gen , L IAN G Xin2li , ZHAO Guo2wei
( Key Laboratory of Modern Preparation of Traditional Chinese Medicine , Minist ry of Education ,
J iangxi University of Traditional Chinese Medicine , Nanchang 330004 , China)
Abstract : Objective 　To optimize t he feasible technique on ext racting ferulic acid and hydrosafflower
yellow A f rom Shuxiong Tablet s by microwave2assisted ext raction and compare t he ext ract yield wit h t he
conventional ext raction. Methods 　Taking t he ext ract yield of ferulic acid and hydrosafflower yellow A as
indexes , microwave2assisted ext raction of Shuxiong Tablet s was investigated by uniform design. Results
Some parameters , such as t he microwave power , radiation time , and solvent consumption had t he interac2
tions on t he ext raction of ferulic acid and hydrosafflower yellow A , the optimal technique parameters of ex2
t racting chuanxiong and safflower were 790 W as the microwave power , 30 and 24 min as t he ext racting
time , 1 ∶24 and 1 ∶22 as t he ratio s of raw material to solvent , respectively. Conclusion 　The microwave
·54·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 1 期 2009 年 1 月
①收稿日期 :2008204225　　　
基金项目 :国家“十一五”科技支撑计划资助项目 (2006BAIO9B07205)
作者简介 :张　萍 (1983 —) ,女 ,江西省人 ,在读硕士研究生 ,主要从事中药新剂型与新技术。
Tel : (0791) 7119190 　E2mail : dolphin_717 @sohu. com3 通讯作者　廖正根　Tel : (0791) 7119011 　E2mail : lyzlyg @163. com