全 文 ：观量子效率也均高于对照组 ,表明它对弱光的利用
能力较强。上述表明南五味子是一种荫生植物 ,这
与其一般生长于林木的下层的自然条件相吻合。
光合色素是叶片光合作用的物质基础 ,叶绿素
总量的高低很大程度反映了植物的生长状况和叶片
的光合能力 ,且与叶片光合速率密切相关[10 ] 。本实
验结果表明 ,随着遮光度的增加 ,南五味子的叶绿素
总量呈现先升高后降低趋势 ,而叶绿素 a/ b 值则表
现为先降低后升高 ,这说明南五味子更适合 70 %的
遮光环境 ,过度遮光加速了叶绿素的分解或缓解叶
绿素的合成。
南五味子经遮光处理后 ,叶片具有较高的 Pn
以及 q P、E T R 等参数 ,说明适度遮光可以促进南五
味子的生长 ,在这种情况下 ,既保证了南五味子具有
较高的光合作用 ,又防止了过度遮光对其生长造成
的不良影响 ,当遮光度达 90 %时 ,南五味子 Pn
下降。
叶片叶绿素荧光与光合作用中各种反应过程密
切相关 ,任何环境因子对光合作用的影响都可通过
叶片叶绿素荧光动力学反映出来。过度遮光可能导
致叶绿体光合机构的破坏 , PS Ⅱ放氧复合物的损
伤 ,PS Ⅱ捕光色素蛋白复合物 (L HC Ⅱa、L HC Ⅱ
b、L HC Ⅱc) 各组成成分的变化 ,引起光合 CO2 同
化效率的降低[10 ] 。本研究结果表明 ,遮光处理 (0～
90 %) 并没有引起 Fv/ Fm 明显改变。但遮光处理
后 , q P、qN 和 E T R 等参数均有一些影响 ,说明适度
遮荫有利于提高 PS Ⅱ反应中心开放部分的比例 ,
将较多的光能用于 CO2 同化 ,阻止了过量的激发能
在 PS Ⅱ反应中心的积累 ,从而提高光合电子传递能
力 ,而且非光化学能量耗散的提高 ,有助于耗散过剩
的激发能 ,有效地保护光合机构 ,防止遮光对光合机
构的影响。说明在 70 %的遮光条件下栽培南五味
子不仅没有使光合结构破坏 ,反而可以适当提高光
合作用 ,促进南五味子的生长发育。
致谢 :本试验得到了吴家森、马丹丹、叶喜阳、谢
文远等的帮助 !
参考文献 :
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处理方法对虎杖不同部位白藜芦醇和虎杖苷量的影响
李世学 ,刘建利 3 ,张 　楠 ,崔 　哲
(西北大学生命科学学院 ,西部资源生物与现代生物技术省部共建教育部重点实验室 ,陕西 西安 　710069)
摘 　要 :目的 　比较烘干、晾干和甲醇新鲜提取对虎杖不同部位中白藜芦醇和虎杖苷量的影响。方法 　白藜芦醇
和虎杖苷定量测定采用 HPLC 法 ,岛津 LC - 10A T 高效液相色谱仪 ,shim2pack C18柱为色谱柱 ,甲醇2水溶液 (40 ∶
60)为流动相 ,柱温 30 ℃,体积流量 018 mL/ min ,检测波长 304 nm。结果 　通过晾干和烘干处理后 ,虎杖根皮、叶、
根髓部中的虎杖苷和白藜芦醇的量发生明显变化。结论 　该结果对于综合开发利用虎杖资源具有参考价值。
关键词 :虎杖 ;白藜芦醇 ;虎杖苷 ; HPLC
中图分类号 :R28216 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0320469203
·964·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
3 收稿日期 :2008207214　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30070905) ;陕西省重点实验室基金资助项目 (03J S008 ,04J S06 ,05J S53)
作者简介 :李世学 (1984 —) ,男 ,西北大学在读硕士研究生 ,研究方向为天然产物提取分离与结构修饰。
Tel : 13991364461 　E2mail : lsx5313 @163. com3 通讯作者　刘建利　Tel : (029) 88302411 　E2mail : jlliu @nwu. edu. cn
　　虎杖为蓼科植物虎杖 Pol y gonum cus pi dat um
Sieb. et Zucc. 的干燥根茎及根 ,始载于《名医别
录》,列为中品[ 1 ] 。虎杖中化学成分非常丰富 ,主要
有黄酮类、蒽醌类、二苯乙烯类等 ,其中二苯乙烯类
化合物白藜芦醇 ( resverat rol) 及其糖苷 ———虎杖苷
(polydatin) 在虎杖中的量丰富。现代药理研究表
明 ,二者在抑制血小板凝集、调血脂、抗病毒、治疗癌
症和增强机体免疫力等方面有显著的疗效[2 ,3 ] 。为
了充分利用虎杖资源 ,提高经济效益 ,本实验利用
RP2H PL C 同时测定虎杖不同部位白藜芦醇和虎杖
苷的量 ,并研究烘干、晾干及鲜品用甲醇直接浸取的
影响 ,为更好地利用虎杖资源提供科学依据。
1 　仪器、试剂与试药
高效液相色谱仪 :岛津 L C —10A 双泵 , SPD —
10AM 二级管阵列检测器 ; 甲醇为色谱纯 (美国
Fisher 公司) ,超纯水 ;白藜芦醇、虎杖苷对照品由中
国药品生物制品检定所提供。虎杖实验材料采自西北
大学植物园内的栽培植株 ,经西北大学刘文哲教授
鉴定为虎杖 Pol y gonum cus pi dat um Sieb. et Zucc. 。
2 　实验部分
211 　色谱条件 : 色谱柱为 Shim2packC18 ( 15010
mm ×410 mm , 5μm) ,流动相为甲醇2水溶液 (40 ∶
60) ,柱温 30 ℃,体积流量 018 mL/ min ,检测波长
304 nm。
212 　处理方法 :分别取虎杖的根皮、叶、根髓部 ,采
取烘干、晾干、直接用甲醇浸取等方法进行处理。晾
干的操作方法为 :分别称取 11000 g 新鲜虎杖根皮、
叶、根髓部样品 ,置于培养皿内 ,直接放置于室温条
件下避光处晾干。烘干处理为 :分别称取 11000 g
新鲜虎杖根皮、叶、根髓部样品 ,放置于培养皿内 ,置
于烘箱内 100 ℃烘干 30 min ,然后放置于室温条件
下避光处 ,3 d 后取样进行分析。甲醇浸取样品 :取
11000 g 新鲜的根皮、叶和根髓部直接用甲醇浸泡。
分析上述样品中白藜芦醇和虎杖苷的量 ,每处理 3
次重复。
213 　对照品溶液的制备 :精确称取白藜芦醇对照品
10 mg ,用色谱甲醇溶解 ,10 mL 定容 ,配成 110 mg/
mL 的白藜芦醇储备液 ,稀释至 25、20 μg/ mL ,备
用。精确称取虎杖苷对照品 10 mg ,用色谱甲醇溶
解 ,定容至 10 mL ,配成 110 mg/ mL 的虎杖苷储备
液 ,稀释至 200μg/ mL ,备用。
214 　供试品溶液的制备 :分别精密称取实验材料
11000 g ,经上述处理后加入甲醇 20 mL ,于室温条
件下放置 ,密闭 ,避光 ,浸取 48 h 后将提取液减压浓
缩 ,将浓缩液转移至 10 mL 量瓶中 ,加甲醇至刻度 ,
摇匀 ,过 0145μm 微孔滤膜 ,续滤液为供试品溶液。
215 　标准曲线的制作 :将白藜芦醇对照品溶液 25
μg/ mL 的吸取 20μL ,20μg/ mL 的对照品溶液分
别吸取 20、15、10、5、3、1μL 注入高效液相色谱仪 ,
按上述色谱条件测定 ,记录峰面积。以峰面积积分
值为纵坐标 ,以进样量 (μg) 为横坐标 ,绘制标准曲
线 ,得回归方程 Y = 5 000 000 X - 135 966 ( r =
01998 7) ,表明白藜芦醇在进样量为 0102～015μg
具有良好的线性关系。将 200μg/ mL 虎杖苷对照
品溶液分别吸取 20、15、10、5、2、1μL 注入高效液相
色谱仪 ,按上述色谱条件测定 ,记录峰面积。以峰面
积积分值为纵坐标 ,以进样量 (μg) 为横坐标 ,绘制
标准曲线 ,得回归方程 : Y = 3 000 000 X - 207 200
( r = 01999 4) ,表明虎杖苷在进样量为 012～410μg
具有良好的线性关系。
216 　精密度试验 :精密吸取白藜芦醇对照品溶液
10μL ,重复进样 6 次 ,测定其峰面积积分值 ,测得白
藜芦醇平均峰面积为 319 312 , RSD 为 211 % ,表明
仪器精密度符合要求。
217 　重现性试验 :精密称定同一份样品 ,按照供试
品制备方法分别制备 6 份供试品溶液 ,分别测定。
结果白藜芦醇的 RSD = 2104 % ,虎杖苷的 RSD =
1154 %。
218 　稳定性试验 :分别精密称取白藜芦醇和虎杖苷
对照品溶液适量至棕色量瓶内 ,于室温避光条件下
放置 0、2、4、6、8、10、12、24、48 h 后 ,在上述的色谱
条件下进行测定。结果表明白藜芦醇和虎杖苷在室
温、避光的条件下 48 h 内稳定性良好 ,RSD 分别为
118 %和 211 %。
219 　加样回收率试验 :精密称取已测定的虎杖样品
6 份 ,按 213 项下的方法制成甲醇浸泡供试品溶液
进行测定 ,分别精密加入 25μg/ mL 白藜芦醇对照
品、200μg/ mL 虎杖苷对照品各 1、115、2 mL ,定容
至 10 mL 量瓶中。按拟定色谱条件测定 ,白藜芦醇
平均回收率为 97157 % ,RSD 为 017 % ;虎杖苷平均
回收率为 9818 % ,RSD 为 114 %。
2110 　样品测定 :精密吸取供试品溶液各 20μL 注
入液相色谱仪 ,按上述色谱条件测定 ,色谱图见图
1 ,定量测定结果见表 1。
·074· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
t/ min
12虎杖苷　22白藜芦醇
12polydatin 　22resverat rol
图 1 　白藜芦醇对照品( A) 、虎杖苷对照品( B)和虎杖样品( C) HPLC色谱图
Fig. 1 　HPLC Chromatogram of resveratrol reference substance ( A) , polydatin reference substance ( B) , and sample ( C)
表 1 　不同方法处理后虎杖中白藜芦醇和虎杖苷的量( n = 3)
Table 1 　Determination of resveratrol and polydatin 　　　
in P. cus pidatum after different treatments ( n = 3)
不同处理 白藜芦醇/ (μg ·g - 1) 虎杖苷/ (μg ·g - 1)
新鲜根皮　 158. 43 18 985. 74
新鲜根髓部 41. 49 12 672. 52
新鲜叶　　 22. 38 275. 65
晾干根皮　 86. 72 13 234. 27
晾干根髓部 122. 46 7 464. 37
晾干叶　　 44. 76 269. 37
烘干根皮　 79. 76 10 917. 5
烘干根髓部 47. 76 11 946. 54
烘干叶　　 54. 83 522. 58
3 　讨论
从上述结果可以看出白藜芦醇在新鲜根皮、根
髓部及叶中量都不高。晾干后叶和根髓部中白藜芦
醇量有所提高 ,而根皮中的量减少。烘干后除叶中
的量有所提高外 ,根皮、根髓部中的量降低。
虎杖根皮中虎杖苷的量很高 ,晾干后下降了
60 % ,烘干后则进一步降低。根髓部虎杖苷的量约
为根皮的三分之二 ,晾干后也大幅降低 ,烘干后又有
升高。这一结果显示虎杖苷以新鲜提取为宜 ,自然
放置条件下有效成分会不断降解 ,不宜存放过长
时间。
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HPLC2ELSD 法测定黄芪药材中黄芪皂苷Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ
覃红萍1 ,鲁 　静2 ,林瑞超2 3　
(1. 广西食品药品检验所 ,广西 南宁 　530021 ; 2. 中国药品生物制品检定所 ,北京 　100050)
摘 　要 :目的 　研究以 HPLC2EL SD 法测定不同产地的黄芪、红芪及梭果黄芪药材中黄芪皂苷 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ(黄芪
甲苷)的量。方法 　色谱柱为 Alltima C18柱 (250 mm ×416 mm , 5μm) ,流动相为乙腈和 013 %甲酸溶液 ,梯度洗
脱 ,体积流量 :018 mL/ min ,柱温 :25 ℃,蒸发光散射检测器 ,EL SD 参数 :漂移管温度 110 ℃,氮气流速 310 L/ min。
结果 　黄芪皂苷 Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ的平均回收率分别为 10212 %、9915 %、10114 %、9917 % ,RSD 分别为 118 %、211 %、
118 %、119 %。结论 　本法简单易行 ,方法学验证符合要求 ,可作为黄芪药材中皂苷类成分定量的方法 ,也可作为
区别黄芪与红芪、梭果黄芪的依据。
关键词 : HPLC2EL SD ;黄芪 ;黄芪皂苷
中图分类号 :R28216 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0320471203
·174·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 3 期 2009 年 3 月
3 收稿日期 :2008205205　　　
作者简介 :覃红萍 (1979 —) ,女 ,广西横县人 ,药师 ,硕士 ,药物分析专业。
Tel : 1397874072 　E2mail : afqhp @sina. com