全 文 ：中草蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6,El·889·
distinctionofphosphaticlyl—cholinesynthsesisbetweenthe
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蕨麻石油醚部位的抗氧化活性研究
张 丽，李灵芝，龚海英，王鲁君，佟巍
(武警医学院药物化学教研室，天津 300162)
蕨麻为蔷薇科植物鹅绒委陵菜Potentilla
anserinaL．的干燥块根，又名人参果、长寿果，藏医
称“卓老沙僧”。始载于《西藏常用中药材》，《中药大
辞典》、《青海植物志》、《中国高等植物图鉴》等均有
记载。《中华藏本草》中记载其块根中含有碳水化合
物、蛋白质、脂肪、鞣质、黄酮、甾醇、胆碱、甜菜碱、组
氨酸等成分。蕨麻性平，味甘，健脾益胃，生津止渴，
益气补血，止咳利痰，利湿，亦有滋补之效。研究表明
蕨麻多糖具有抗氧化、抗疲劳作用，并能提高机体的
免疫力与应激能力。前期研究发现，蕨麻石油醚部位
[petroleumfractionofP．anserina(PFPA)]具有
明显的抗缺氧作用[1]。本实验系统研究蕨麻石油醚
部位体外抗自由基作用，以进一步深入探讨其抗缺
氧作用机制。
1材料
蕨麻购自青海，粉碎后60％乙醇回流提取，减
压除净乙醇，加水悬浮后，用石油醚(60～90℃)萃
取，减压回收石油醚，得浓缩物(相当生药250g／
g)，测得其中含棕榈酸0．35mg／g。
邻苯三酚、苯甲酸、硫酸亚铁胺、依地酸钠、甘露
醇、30％双氧水均为分析纯，实验用水为双重蒸馏水。
UV一1601型紫外分光光度计(日本岛津)；
RF一2401型荧光分光光度计(日本岛津)。
2方法
2．1蕨麻石油醚部位体外清除氧自由基(O。7)的
作用
2。1．1邻苯三酚白氧化法[2]：反应温度为25℃，样
品组取o．1mol／LPBS缓冲液(pH8．34)2．5mL，
分别加入4．0mL样品和2．5mL邻苯三酚溶液
(0．5mmol／L)，总体积为9．0mL；样品对照组加
0．1mol／LPBS缓冲液5．0mL及样品4．0mL。空
白组加PBS2．5mL、蒸馏水4．0mL及邻苯三酚
2．5mL；空白对照组加PBS5．0mL及蒸馏水4．0
mL。样品质量浓度分别为10、15、20g／L。于325
nm处测定各体系在反应开始后10min时的吸光
度(A)值，按照以下公式，计算样品对体系中o。7
的清除率。
清除率一∞空--A,t)／A空x100％
其中，A空一A空白一A空白对照；Am=Am品一A样品对照
2．1．2抗O：7对红细胞的氧化作用：红细胞取自正
常人静脉血，用生理盐水洗3次，再用等渗磷酸缓冲
液配成10mL／L红细胞悬浮液。配制不同反应体
系，C体系为0．50mL红细胞悬液、2．30mLPBS、
样品(15g／L)0．10mL及0．10mL邻苯三酚溶液
(50mmol／L)；b体系以PBS代替样品；a体系不加
邻苯三酚。加入邻苯三酚启动反应后，立即用紫外分
光光度计测定各反应体系A值(A一439nm)随时
间变化曲线，并测定反应10rain后的吸收光谱[3]，
并绘制各反应体系在反应10min后的吸收光谱及
A值随时间变化曲线。
2．2 蕨麻石油醚提取物体外清除羟自由基
(·OH)的作用：根据Fenton反应原理[4]，实验时
反应液中分别加入质量浓度为5、0．5、0．01、0．005
g／L的样品。反应体系含1．5mLPBS(150mmol／
L、pH7．4)，1．0mL苯甲酸溶液(6mmol／L)，0．25
mLFe2+一EDTA溶液(0．189mmol／L)，0．25mL
收稿日期：2007一01—22
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30672774)
作者简介：张丽(1973一)，女，天津人，讲师，硕士，主要从事药物分离及药物分析工作。
Tel：(022)60578189E—mail：langshuo@sina．corn
万方数据
3％H。o。及o．5mL样品。用PBs作耋皇’骨
嘉．oH有特异清除作用的甘露醇作对照。加入
矗，o。启动反应5h后测定荧光强度(F)(Ex5300
rim,Era=408nm)。按下式计算清除率：
清除率：(F空一F样)／F空×loo％
加入H。0。启动反应后，测定不同时刻(o～120
s)的荧光强度(F)，将测得的F值与对应时1日j，‘?’
兰?船搬V瞒oA锱戮搿‰若．OH的生成速度 、，说明共州_币!J仟广H疆¨叩Ⅲ。
率计算公式如下：
抑静I率一(vo空--V。样)／v。空×100％
3
1结曩苯=酚自氧化法：蕨麻石油醚部位抗“·实3 U2。1邻苯三酚自氧化法：蕨麻石油醚鄙但饥 ，．芝
验结果如表1所示，其清除Oz7作用随J页重楸厦瑁
加?增鬈：石油醚部位对02。的清除作用油旷5)1表一蕨麻石油醚部位对027的淆际作用u士¨““
TableScavengingeffect
ofPFPAon027
了磊焉20面葫O．602士0用．01．邻2苯三酚自36．08磊3．2抗o。7对红细胞的氧化作用：邻举二削旱：～
蛾訾黑1慧竺搬糯蒹A。霉q牛n：n鼍竺吸收明显减弱(图1一c曲线)。开且’删⋯旧41-
：39nm处的A值随时间变化的相对较慢，10rain、飘篇篇箍嚣嚣】o min后的吸收光谱及A值|疆H可I甘j燮’m曲瓴灿
字31絮养对．OH的清除作用．由表2可知，与甘3． 体外对· 的清除作用：田表么ⅡJ刘’叫口
0．8
O．4
理0．2
气
0．0
-0．2
^／姗
。～红细胞+蕨麻石油醚部位b一红细胞+邻苯三酚
c一红细胞+邻苯三酚+蕨麻石油醚部位
(图2中8、b、。l司)
a—RBC+PFPAb—RB{c十py‘。98Ilo【
c—RBC+pyrogall。I+PFPA(a，b，and
ci“Fig．28。。88眦j
图1 O。一与红细胞作用的吸收光谱
Fi2．1Abs。rptionspeetrum。f
02·ac恤gwithRBc
ij◆
m：卜———弋一图2 05=与红细胞作用时间曲线(入5439nm)
Fi2．2TimeCl：ITve。f02下acting
withRBc(入一439nm)
。表2蕨麻石油醚部位对·OH的体外清除作用
Table2 Scavengingeffect。f
PFPAOll’oH拥诳加
蕨窆三!!：·0。· ：，5。9，2，J士=O。．．0。8，：9。0。．．3。：15。．．。53：士，=0。．．0。9。：；7。．．8，i
醚部位：’5 翟：凳圭皇茎i薹：薹 羔薹至!；薹 ；；：；!一
曩翼墨翌尝黛梨嚣；=0誓1)盟篇的清除率及抑制率明显提高(P
4奠黧=酪存弱碱性(PBS，pH一8一．3—4．)环境中自肿掌=酷靠鹩磕幛 ， ． J川、况下目
纯篡淼怠02篡鬈豁警峰。随着反应的进行， 7在体糸甲芸小聊优示’?
囊篆蒸黧￡箍嚣芸’鬈鬣苌荔2譬譬雾蔫篙嚣嚣劂焉荔翟黧鬈收峰瓣制嚣辫差姜蓑翁荔茹325 Anm处值随时间的变化翠，刚及畎傲删例州
翼黑嚣。描淼嚣磊位体外具有清除027的能力，且隐原亘佩熳帽八⋯1
增强曹n。与红细胞作用的吸收光谱可以看出，。由 ·妄纤 光谐ⅡJ以召田一
燃黧萎爹嚣篓徽潍柔由言罂麓霎裟莩嚣鬈蒹蒹篆荐；磊a相比均增大，这是由于邻举二断仕戳比水‘．’：：巍嚣裳巍裟二蒹禚子中不饱和键被氧化，导致吸收增强。b利∥降尔三
黧淼篇昙翟慧镰善麓薏詈璺篙景罢霎妻嚣筹：：霈赫器票霎鬻淼菩篇黧茹i嘉体系，且随着时间的延长有逐渐趋亍十瑷州艏万¨Ⅲ
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第6期2007年6月·891·
b体系在测定时间内无平缓的迹象。说明蕨麻石油
醚部位能够对抗O：7对红细胞膜的氧化作用。
根据Fenton反应原理，H。O：在Fe2+存在的情
况下可生成·OH，用过量的苯甲酸捕捉生成
的·OH，可形成有荧光的羟苯甲酸。体系荧光强度
的变化可反映样品对·OH清除及抑制能力。本实
验结果显示，蕨麻石油醚部位质量浓度为0．005g／
L时即能显著抑制·OH的产生，有效地清除已经
产生的·OH，其作用随质量浓度增高而增强。当质
量浓度为0．5g／L时，抑制率达到99％以上，清除
率达到90％以上，表明蕨麻石油醚部位具有特异
的抗·OH作用。
综上所述，蕨麻石油醚部位在体外可清除O。7
和·OH，推测与其含有苷元类化学成分有关。该部
位是否含有其他抗氧化的特殊化学成分，尚有待进
一步研究证实。
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鼻咽灵颗粒和片剂与5一氟尿嘧啶合用对人鼻咽癌裸鼠CNE一2
治疗增效作用的对比研究
赖晓明1，张谨2，梁海清1，王永泉2
(1．广州中一药业有限公司，广东广州 510140；2．中国医学科学院肿瘤医院临床前药理中心，北京100021)
鼻咽灵由山豆根、麦冬、半枝莲、玄参、石上柏、
党参、白花蛇舌草等10昧药组成，具有清热解毒、软
坚散结、益气养阴作用。用于胸膈风热、痰火郁结、热
毒上攻、耗气伤津之证。其症状常见口干、咽痛、咽喉
干燥灼热、声嘶头痛、鼻塞、流脓涕或涕中带血。也用
于治疗急慢性咽喉炎、口腔炎、鼻咽炎及鼻咽癌放
疗、化疗辅助治疗。鼻咽灵原为片剂，在临床应用中
存在部分患者特别是鼻咽癌放疗、化疗患者服用困
难的问题。本课题组对鼻咽灵片进行了二次开发，将
本品的制剂工艺、质量标准等重新进行研究，将其制
成服用量较小、方便患者服用的颗粒剂剂型。为了考
察鼻咽灵颗粒的药效作用，本实验将鼻咽灵片和鼻
咽灵颗粒两个制剂进行了与化疗药5一氟尿嘧啶(5一
Fu)合并用药对人鼻咽癌裸鼠CNE一2的治疗增效
作用的研究。
1实验材料
1．1 实验动物：BALB／c裸鼠，三级，14～16g，雄
性，由军事医学科学院实验动物中心提供，合格证
号：SCXK一(军)一2002—0001。
收稿日期：2007—01—18
1．2 瘤株：人鼻咽癌裸鼠CNE一2瘤株，由中国医
学科学院肿瘤研究所提供。
1．3受试物：鼻咽灵颗粒(浸膏)：采用新工艺生产
的深棕色膏状物，由广州中一药业有限公司提供，批
号030008，浸膏相当于生药量4．49g／g。鼻咽灵片
剂(药粉)：采用原工艺生产的棕褐色粉末，由广州
中一药业有限公司提供，批号G00009，药粉相当于
生药3．12g／g。人临床日用量为28．35g生药。
1．4 阳性对照药：5-Fu注射液为上海旭东海普药业
有限公司生产，批号040909，规格250rag／10mL。
2实验方法
取裸鼠64只，同一性别，14～16g，常规瘤组织
块腋下接种人鼻咽癌裸鼠CNE一2后随机分组，每
组8只，共8组。其中3个对照组分别为蒸馏水对照
组，阳性药5-Fu20、10mg／kg对照组；鼻咽灵浸膏
分高、中、低3个剂量组，分别为3．28g／kg+5一Fu
10mg／kg、1．64g／kg+5一Fu10mg／kg、0．82g／
kg+5一Fu10mg／kg(浸膏剂量分别相当于临床等
效剂量的4、2、1倍)；鼻咽灵药粉分中、低2个剂量
万方数据
蕨麻石油醚部位的抗氧化活性研究
作者： 张丽， 李灵芝， 龚海英， 王鲁君， 佟巍
作者单位： 武警医学院,药物化学教研室,天津,300162
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(6)
被引用次数： 4次
参考文献(4条)
1.Li L Z;Zhang L;Gong H Y Anti-hypoxia and antioxidation effect of Potentilla anserina L.petroleum
fraction and its mechanism[期刊论文]-中国药学杂志 2006(19)
2.Li G R Study oil isolation of Lycium barbarum polysaccharide and its effects on anti-active oxygen
free radicals[期刊论文]-中国现代应用药学 2002(02)
3.Wang Q;Zeng Z H;Chen Y Antiactive oxygen effect of Zingiber officinale petroleum extracts with a
four oxygen free radicals system 1997(06)
4.Zhong F;Wang X C;Lin L An experimental study on the effects of pueraria on oxygen free radicals[期
刊论文]-湖南中医学院学报 2004(02)
引证文献(4条)
1.陈修红.胡锦蓉.苑蘅.王军 蕨麻提取物体外抑菌与抗癌细胞活性研究[期刊论文]-安徽农业科学 2012(24)
2.叶立.陈洋.李灵芝.张永亮 蕨麻提取物对小鼠缺血再灌注心肌损伤的保护作用[期刊论文]-中草药 2009(5)
3.魏永生 气相色谱/质谱法分析蕨麻中的脂肪酸成分[期刊论文]-西北农业学报 2008(4)
4.王建军.周斌 藏药蕨麻的研究进展[期刊论文]-西南国防医药 2010(2)
本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200706038.aspx